坐骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本制備

1、資料收集于網(wǎng)絡(luò)如有侵權(quán)請聯(lián)系網(wǎng)站刪除感謝坐骨神經(jīng) -腓腸肌標(biāo)本制備一、試驗?zāi)康囊?、學(xué)習(xí)蛙類動物單毀髓與雙毀髓的方法；2、學(xué)習(xí)并把握坐骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本及腓腸肌標(biāo)本的制備方法；3、明白電刺激的極性法就；二、試驗原理1、蛙或蟾蜍等兩棲類動物的一些基本生命活動和生理功能與溫血動物相像,而其離體組織生活條件易于把握,在任氏液的浸潤下,神經(jīng)肌肉標(biāo)本可較長時間保持生理活性；因此,在生理學(xué)試驗中常用蛙或蟾蜍坐骨神經(jīng)腓腸肌離體標(biāo)原來觀看神經(jīng)肌肉的興奮性、興奮過程以及骨骼肌收縮特點等；2、細胞的靜息膜電位為外正內(nèi)負,電刺激可轉(zhuǎn)變可興奮細胞的膜電位差；膜電位減小時,細胞去極化,細胞興奮；膜電位增大時,細胞超極

2、化,細胞興奮性被抑制；蘸有任氏液的鋅銅弓接觸活組織時,可產(chǎn)生沿鋅片活組織銅片流向的電流對細胞產(chǎn)生刺激效應(yīng)；三、試驗材料和儀器1、試驗材料：牛蛙2、試驗器材：手術(shù)剪、手術(shù)鑷、手術(shù)刀、眼科剪、眼科鑷、毀髓針、蛙板、固定針、滴管、培育皿、玻璃分針鋅銅弓、污物缸、粗棉線、任氏液四、試驗步驟1、 洗凈試驗動物 毀髓 剝制后肢 分別坐骨神經(jīng) 游離腓腸肌 游離股骨頭 標(biāo)本檢驗 電刺激極性法就的驗證2、雙毀髓一只手握住牛蛙,使其背部向上；用拇指壓住牛蛙背部,食指按壓其頭部前端,另一只手持毀髓針, 由兩眼之間沿中線向下觸劃,觸及凹陷處即為枕骨大孔；將毀髓針垂直刺入枕骨大孔；將針尖向前刺入顱腔內(nèi)攪動,此時為單毀髓

3、；將毀髓針退回枕骨大孔,針尖轉(zhuǎn)向后方,與脊椎平行刺入椎管內(nèi)搗毀脊髓,完成雙毀髓；3、坐骨神經(jīng) -腓腸肌標(biāo)本制備（1）剝制后肢標(biāo)本 :輕提雙毀髓蛙,自背面恥骨聯(lián)合上方約 1 公分處橫向剪斷脊柱；輕輕托起后肢, 看清坐骨神經(jīng)位置,沿脊柱兩側(cè)橫向切口剪斷體壁,去除斷口以上肢體和內(nèi)臟放入污物缸；剝?nèi)ズ笾つw后放入任氏液中備用；（2）分別兩后肢： 用粗剪刀縱向剪開脊柱,并剪斷兩后肢相連的肌肉,一只用于剝制標(biāo)本,一只放入任氏液中儲存；（3）分別坐骨神經(jīng)： 將后肢標(biāo)本脊柱端腹面對上,趾端向外側(cè)用蛙釘將標(biāo)本固定在蛙板上；先在腹腔面用玻璃分針沿脊柱游離坐骨神經(jīng) ,然后在標(biāo)本的背側(cè)于股二頭肌與半膜肌的肌肉縫內(nèi)將坐

4、骨神經(jīng)與周邊的結(jié)締組織分別直到腘窩,剪斷肌肉；但不要傷及神經(jīng), 其分支待以后用手術(shù)剪（4）游離腓腸?。和瑯佑貌ＡХ轴槍㈦枘c肌與其下的結(jié)締組織分別并在其跟腱處穿線、結(jié)扎；（5）分別股骨頭：捏住股骨,剪去并刮凈四周肌肉,保留股骨的后2/3,剪斷股骨 ; （6）檢驗標(biāo)本：用手術(shù)鑷輕提標(biāo)本的脊椎片,再用經(jīng)任氏液蘸濕的鋅銅弓接觸坐骨神經(jīng),如腓腸肌發(fā)生收縮,就表示標(biāo)本機能正常；輕提腓腸肌上的結(jié)扎線,將標(biāo)本放入任氏液中保存 15-20 分鐘后進行試驗；（7）電刺激的極性法就驗證：用棉線在神經(jīng)干中間部位進行結(jié)扎,以阻斷神經(jīng)傳導(dǎo)興奮的才能； 用鋅銅弓跨過結(jié)扎線刺激坐骨神經(jīng)干；使鋅極在腓腸肌一端刺激,觀看腓腸肌收

5、縮發(fā)生在通電（接觸神經(jīng)干）時仍是斷電（離開神經(jīng)干）時；調(diào)轉(zhuǎn)鋅銅弓的極性,使銅極在腓腸精品文檔資料收集于網(wǎng)絡(luò)如有侵權(quán)請聯(lián)系網(wǎng)站刪除感謝肌一端刺激, 觀看腓腸肌收縮實在通電時仍是斷電時；縮強度是否一樣,那個收縮強度比較大？五、留意事項比較不同極性電極刺激時腓腸肌的收1、防止血液污染標(biāo)本,壓擠、損耗和用力牽拉標(biāo)本,不行用金屬器械觸碰神經(jīng)干；2、在操作過程中,應(yīng)給神經(jīng)和肌肉滴加任氏液,防止表面干燥,以免影響標(biāo)本的興奮性；3、標(biāo)本制成后須放在任氏液中浸泡數(shù)分鐘,使標(biāo)本興奮性穩(wěn)固,再開頭試驗成效會較好；六、試驗結(jié)果通過任氏液浸泡,刺激后, 看到肌肉有收縮的反應(yīng),調(diào)換電極進行刺激后也同樣有收縮反應(yīng)；通過銅鋅

6、與鋅銅的兩種刺激比較后,銅鋅更強；七、總結(jié)通過本次試驗更加深刻的熟識了肌細胞收縮的機制,熟識了單毀髓與雙毀髓的方法和操作,把握 l 坐骨神經(jīng) -腓腸肌標(biāo)本及腓腸 肌標(biāo)本的制備方法的基本操作；由于試驗過程中提取腓腸肌時候,肌肉過度興奮,進行電極刺激時現(xiàn)象不是特別明顯；綜上所述試驗時需當(dāng)心操作,盡量防止肌肉失活；八、摸索題1、剝?nèi)テつw的后肢,能用自來水沖洗嗎？為什么？答：不能； 由于自來水中仍有例如氯離子、鈣離子等很多離子,它們會影響細胞膜的點位分布, 最終就會影響到刺激反應(yīng)現(xiàn)象的觀看；誓言材料上,也會影響試驗成效的；另外自來水里有很多微生物假如它們附著與2、金屬器械碰壓、觸及或損耗神經(jīng)及腓腸肌,

7、可能引起哪些不良后果？答：金屬器械碰壓、 觸及或損耗神經(jīng)及腓腸肌會損耗腓腸肌細胞膜,使肌肉中的神經(jīng)收到過度刺激,而過度興奮最終失活,刺激時候就沒有現(xiàn)象；3、如何保持標(biāo)本的機能正常？答：第一在制備腓腸肌的過程時,金屬器械不要碰及、損耗神經(jīng)或腓腸肌,以及試驗者不要觸遇到肌肉；其次,過程中要保持腓腸肌的潮濕,常加任氏液,最好先泡一會；另外,在第一次電刺激后,需要讓肌肉休息一段時間,在進行下一次刺激；試驗一 蟾蜍坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本制備一、試驗?zāi)康陌盐罩苽渚哂姓Ｅd奮收縮功能的蛙類坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本基本操作技術(shù),把握蛙類手術(shù)器械的使用方法；二、材料和方法1、材料蟾蜍；任氏液；探針、剪刀、培育皿、瓷盆、玻

8、璃分針、蛙板、玻璃板、大頭針、鑷子、線、鋅銅弓；2、試驗方法2.1 毀腦脊髓 取蟾蜍一只,用左手握住,以食指壓其頭部前端使其盡量前俯,右手持探針自枕骨大孔處垂直刺入,到達椎管,即將探針轉(zhuǎn)變方向刺入顱腔,向各側(cè)不斷攪動,完全搗毀腦組織；再將探針原路退出,刺向尾側(cè),捻動探針使逐步刺入整個椎管內(nèi),搗毀脊髓；此時蟾蜍下頜呼吸運動應(yīng)消逝,四肢松軟,即成為一毀腦脊髓的蟾蜍；否就須按上法再精品文檔資料收集于網(wǎng)絡(luò)如有侵權(quán)請聯(lián)系網(wǎng)站刪除感謝行搗毀；2.2 剪除軀干上部及內(nèi)臟用粗剪刀在顱骨后方剪斷脊柱；左手握住蟾蜍脊柱,右手將粗剪刀沿兩側(cè)（躲開坐骨神經(jīng)）上部及內(nèi)臟組織,棄于瓷盆內(nèi)；剪開腹壁；此時軀干上部及內(nèi)臟即全

9、部下垂；剪除全部軀干2.3 剝皮躲開神經(jīng), 用右手拇指和食指夾住脊柱,左手捏住皮膚邊緣,逐步向下牽拉剝離皮膚；拉至大腿時,如阻力較大,可先剝下一側(cè),再剝另一側(cè)；將全部皮膚剝除后,將標(biāo)本置于盛有任氏液的培育皿中；2.4 洗凈雙手和用過的全部手術(shù)器械,再進行以下步驟；2.5 分別雙腿 躲開坐骨神經(jīng), 用粗剪刀從背側(cè)剪去骶骨,然后沿中線將脊柱剪成左右兩半,再從恥骨聯(lián)合中心剪開（為保證兩側(cè)坐骨神經(jīng)完整,應(yīng)防止剪時偏向一側(cè)）；將已分離的標(biāo)本浸入盛有任氏液的培育皿中；2.6 游離坐骨神經(jīng) 取腿一條, 先用剝離分針沿脊柱側(cè)游離坐骨神經(jīng)腹腔部,然后用大頭針將標(biāo)本背位固定于潔凈蛙板上；用玻璃分針循股二頭肌和半膜

10、肌之間的坐骨神經(jīng)溝,縱向分別暴露坐骨神經(jīng)之大腿部分,直至分別至腘窩頸神經(jīng)分叉處；然后剪斷股二頭肌腱、半膜肌和半膜肌肌腱,并繞至前方剪斷股四頭肌腱；自上向下剪斷所以坐骨神經(jīng)分支；將連著3-4 節(jié)椎骨的坐骨神經(jīng)分別出來；2.7 完成坐骨神經(jīng)小腿標(biāo)本將已游離的坐骨神經(jīng)搭在腓腸肌上；用粗剪刀自膝關(guān)節(jié)周圍向上剪除并刮凈所以大腿肌肉,在距膝關(guān)節(jié)省 分即為坐骨神經(jīng)小腿標(biāo)本；1cm 處剪斷股骨；棄去上段股骨,保留部2.8 完成坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本 用尖子鑷子在上述坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本的跟腱下方穿 孔,穿線結(jié)扎之；提起結(jié)扎線,在結(jié)扎線下方剪斷跟腱,并逐步游離腓腸肌至膝關(guān)節(jié)處,左 手握住標(biāo)本的股骨部分,使已游離的坐骨

11、神經(jīng)和腓腸肌下垂,右手持粗剪刀水平方向伸進腓 左手保留部分即為附著于股骨之 腸肌與小腿之間, 在膝關(guān)節(jié)處剪斷,與小腿其余部分分別；上的、具有坐骨神經(jīng)支配的腓腸肌標(biāo)本；將標(biāo)本浸入盛有新奇任氏液的培育皿中待用；2.9 試驗觀看 2.9.1 蟾蜍毀腦脊髓前后四肢肌張力的變化；2.9.2 用鋅銅弓分別刺激坐骨神經(jīng)和腓腸肌,觀看肌肉的反應(yīng)；三、試驗結(jié)果 用鋅銅弓刺激坐骨神經(jīng)時腓腸肌發(fā)生收縮；四、分析 鋅銅弓用金屬鋅和銅鉚接而成,鋅銅弓在極性溶液中形成回路時,鋅與銅兩極產(chǎn)生約0.5-0.7V 的直流電壓,電流的刺激作用于神經(jīng)肌肉標(biāo)本,由于產(chǎn)生生物電流,因而引起肌肉 的收縮；制備標(biāo)本的過程中,要不斷滴加任氏液,以防標(biāo)本干燥, 丟失正常生理活性；操作過程中應(yīng)防止強力牽拉和手捏神經(jīng)或夾傷神經(jīng)肌肉；入操作者眼內(nèi)或污染試驗標(biāo)本；五、結(jié)論毀腦脊髓時防止蟾蜍皮膚分泌的蟾蜍毒液射蛙類的某些基本生命活動和生理功能與哺乳類動