超高壓水射流對葛根中葛根素含量的影響

1、超高壓水射流對葛根中葛根素含量的影響【摘要】目的研究超高壓水射流對葛根有效成分葛根素的影響。方法通過150350Pa不同壓力的水射流處理葛根醇提液，采用薄層色譜法和高效液相色譜法定性鑒別和測定葛根的化學成分種類及含量變化。結果不同壓力水射流處理葛根提取液后，葛根的薄層圖譜中斑點個數、大小及Rf值無明顯差異；葛根的液相圖譜中峰個數及形狀亦無明顯差異，但經150350Pa壓力的水射流處理后，葛根素的含量依次增加，尤其在350Pa時葛根素的含量增加率到達5.68%。結論該研究可為超高壓水射流對中藥有效成分的影響提供根底實驗數據，對科學加工處理和合理利用葛根藥材有著重要的意義。【關鍵詞】超高壓水射流；

2、高效液相色譜法；薄層色譜法；葛根；葛根素Abstrat:bjetiveTinvestigatetheeffetfultrahighpressureaterjetntheeffetivepnentspuerarinfRadixpuerariae.ethdsTheextratinfRadixpuerariaeastreatedbyvariuspressurefr150Pat350Pa,pnentsandntentsasidentifiedanddeterinedbyTLandHPL.ResultsThereerenbviusdifferenesinthenuber,sizeandRfvaluefs

3、ptsnTLhratgraphy,andbasiallythesaenthenuberandshapefpeaksnHPLhratgrasbeteentheslutintreatedundervariuspressure,butthententfpuerarinintheslutinstreatedby150Pat300Paasinreased,partiularlyinthe350Pa,theinreasingratefpuerarinntentreahed5.68perent.nlusinThisinvestigatinayprvideseusefulexperientalinfratin

4、frtheultrahighpressureaterjetntheipatftheativeingredientsfthehineseediine.ItisveryiprtantfrpressingtreatentandutilizatinfRadixpuerariae.Keyrds:Ultrahighpressureaterjet；HPL；TL；RadixPuerariae；Puerarin超高壓水射流技術是近幾十年開展起來的一項新技術，它是指普通水經過超高壓加壓器，將水加壓至100400Pa，根據加工需要，可參加金剛砂磨料，然后通過一個直徑約為0.2的細小寶石噴嘴，產生一道6001000/

5、s的水箭，可用來切割各種材料，也可對各種物體外表進展清洗，甚至用來食品滅菌，以到達食品保鮮的目的1。葛根具有解肌退熱、生津、透疹、升陽止瀉成效，用于治療外感發(fā)熱頭痛、項背強痛、口渴、消渴、麻疹不透、熱立泄瀉、高血壓頸項強痛等2，素有“亞洲人參的美譽，是我國衛(wèi)生部認定的藥食同源植物3?，F代研究證實，葛根中的主要有效成分為葛根素等異黃酮類化合物，具有抗炎解熱、擴張冠狀動脈血管、增加冠狀動脈血流量的作用，同時也有降低血壓的作用4。葛根素含量的上下，成為評價葛根藥材及其制劑質量的重要指標。本文利用超高壓水射流技術的瞬時卸壓、高速撞擊和高剪切等綜合作用產生膨化的原理，研究該技術對葛根藥材主要化學成分的影

6、響，并討論其主要有效成分發(fā)生變化的可能機理，為超高壓水射流對中藥有效成分的影響提供根底實驗數據，為探究新的中藥加工處理方法提供參考。1儀器與材料L-20AT高效液相色譜儀，包括L-20AT泵、SPD-20A紫外檢測器、AT-330柱溫箱、lass-VP數據處理系統(tǒng)、7725i進樣閥日本島津公司；DPSB-3040型超高壓水射流系統(tǒng)南京大地水刀股份。葛根為市售，經本院王盛民教授鑒定為豆科植物野葛Puerarialbatahi的枯燥根；葛根素對照品購自中國藥品生物制品檢定所，批號：110752-202211；甲醇為HPL級美國Fisher公司；所用水為超純水；其余試劑均為分析純。2方法與結果2.1

7、供試品溶液的制備稱取葛根藥材粗粉約500g，精細稱定，10倍量80%的乙醇回流提取3次，2h/次，合并提取液，過濾，減壓濃縮，回收乙醇至無醇味，溶液定容至2000l。量取葛根提取液200l，用超純水稀釋至20L，分別在150，200，250，300和350Pa壓力條件下，經超高壓水射流處理，將各溶液搖勻、靜置，分別取未經處理和各處理液的上清液過0.45微孔濾膜，標號為0，1，2，3，4，5號，作為供試品溶液。2.2對照品溶液的制備精細稱取葛根素對照品12.0g，置25l容量瓶中，加甲醇溶解，稀釋至刻度，搖勻；精細量取2l，置10l量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得每毫升含葛根素96g。2.3葛根

8、的薄層色譜鑒別照薄層色譜法實驗2，吸勸2.1和“2.2項制備的供試品溶液和對照品溶液各10l，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為粘合劑的硅膠G薄層板上，使成條狀，以三氯甲烷-甲醇-水72.50.25為展開劑，展開，取出晾干，置日光燈下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯一樣顏色斑點。斑點較為圓整，別離效果好，各供試品斑點大小及Rf值無顯著差異。2.5線性關系考察分別精細吸勸2.2項下制備的葛根素對照品溶液2，4，6，8，10l進樣測定，記錄各峰面積。以葛根素進樣量g為橫坐標X，峰面積為縱坐標Y，得回歸方程Y=704877.60X-653.88，r=0.9999。結果說明葛根素在0.1

9、920.960g濃度范圍內與峰面積有良好的線性關系。轉貼于論文聯(lián)盟.ll.2.6精細度實驗精細汲取葛根素對照品溶液10l，重復進樣5次，測定峰面積，得RSD為1.65%。結果見表1。表1精細度實驗結果次序峰面積略2.7穩(wěn)定性實驗勸2.1項未經超高壓水射流處理的供試品溶液，同法分別于2，4，6，8，24h測定，進樣10l/次，結果RSD為1.37%，說明樣品在24h內穩(wěn)定。結果見表2。表2穩(wěn)定性實驗結果略2.8重復性實驗取同一批樣品粉末，按樣品含量測定法同法測定5次，RSD為2.38%，說明該測定方法重復性比擬好。結果見表3。表3重復性實驗結果略2.9加樣回收實驗采用加樣回收法，稱取含量的葛根藥

10、材5份，精細稱定，再分別精細參加葛根素對照品溶液0.20gl-120l，按“2.1項下方法制備供試品溶液，在上述色譜條件下進樣10l，記錄色譜圖，結果葛根素平均回收率為96.1%，RSD為1.14%n=5。結果見表4。表4葛根素回收率實驗結果略2.10樣品的測定精細吸勸2.1項和“2.2項下制備的供試品溶液和對照品溶液各10l分別進樣5次，按上述色譜條件測定葛根素含量。結果見表5。表5樣品測定結果樣品號葛根素含量略3討論本文研究結果說明，不同壓力的水射流處理葛根醇提液后，處理液的溫度由進樣溫度19.8隨壓力的升高上升至51.8；葛根的薄層圖譜中斑點的個數、大小及Rf值無明顯差異；葛根的液相圖譜中峰的個數及形狀亦無明顯差異，作為葛根藥材的指標性成分葛根素，其含量均符合藥典規(guī)定。經過150，200，250，300和350Pa不同壓力水射流處理液中葛根素的含量都較原液升高，尤其以經350Pa壓力水射流處理液中葛根素含量最高，其原因可能是，由于葛根素本來就存在于葛根最外部的木栓層下的外部薄壁組織中，經過超高壓水射流技術的瞬時卸壓、高速撞擊、高剪切和熱協(xié)同作用產生膨化效應，破壞了藥材中微生物的細胞壁及細胞膜，同時引發(fā)對壓力敏感的非共價鍵氫鍵、離子鍵、疏水鍵等的破壞5，使得葛根素更容易浸出。另外250Pa以上的壓力處理葛