免疫標(biāo)記應(yīng)用與評(píng)價(jià)課件

1、免疫標(biāo)記的應(yīng)用與評(píng)價(jià)上海交通大學(xué)瑞金臨床醫(yī)學(xué)院免疫標(biāo)記的應(yīng)用與評(píng)價(jià)上海交通大學(xué)免疫標(biāo)記的應(yīng)用干細(xì)胞的確定定量分析.移植治療的日益普及.移植門檻的降低.干細(xì)胞采集的確定.有效干細(xì)胞的確定要求(、等)免疫標(biāo)記的應(yīng)用干細(xì)胞的確定的分析： 未動(dòng)員前外周血中細(xì)胞，細(xì)胞，細(xì)胞。 各家單抗不同、操作不一，結(jié)果難以比較。 內(nèi)毒素、單純化療（骨髓抑制）、細(xì)胞因子、化療聯(lián)合細(xì)胞因子 等的動(dòng)員。的分析： 淋巴細(xì)胞和細(xì)胞確定和定量分析淋巴細(xì)胞分化增殖異常的信號(hào)淋巴細(xì)胞與髓系細(xì)胞的鑒別混合性白血病和未確定性(型)白血病的診斷造血干細(xì)胞病變的信號(hào)疾病的預(yù)后判斷 淋巴細(xì)胞和細(xì)胞確定和定量分析 細(xì)胞標(biāo)記 細(xì)胞及其亞群 祖細(xì)胞

2、（）的表型為、未成熟細(xì)胞標(biāo)志、和。在細(xì)胞發(fā)育過程中，是最早出現(xiàn)的細(xì)胞標(biāo)志，且貫穿表達(dá)在整個(gè)細(xì)胞分化發(fā)育過程中。胸腺細(xì)胞要分化發(fā)育為有功能的成熟細(xì)胞，細(xì)胞表面標(biāo)志需經(jīng)歷一定的變化過程。 細(xì)胞標(biāo)從、（即、雙陰性）、（即、雙陽性），最后發(fā)育成、和、單陽性的兩群成熟胸腺細(xì)胞，然后進(jìn)入外周淋巴器官和血液，執(zhí)行免疫功能。從、（即、雙陰性）、（即、雙但在正常外周血中通常存在、（），、（）， 和 四種表型不同的細(xì)胞，它們分別占細(xì)胞總數(shù)的，。前三種表型細(xì)胞的主要為，而 細(xì)胞主要表達(dá)，他們都執(zhí)行細(xì)胞免疫功能。但在正常外周血中通常存在、（），、（）， 和 四種表 是綿羊紅細(xì)胞受體和淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原（），表達(dá)于人

3、細(xì)胞、胸腺細(xì)胞和大顆粒淋巴細(xì)胞（）的表面。是細(xì)胞表面抗原，表達(dá)于成熟胸腺細(xì)胞、靜息和激活的的外周血細(xì)胞，是鑒定細(xì)胞的重要標(biāo)志，其胞漿和膜是早期和普通型細(xì)胞白血病的主要分型標(biāo)記。 是綿羊紅細(xì)胞受體和淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原（），表達(dá)于人 、是細(xì)胞白血病較特異的標(biāo)記，也是髓系白血病時(shí)最常見的伴隨標(biāo)記。、則是白細(xì)胞的共同標(biāo)記抗體，在淋巴瘤的診斷中有一定的價(jià)值。而和主要分布于活化淋巴細(xì)胞表面，為活化淋巴細(xì)胞標(biāo)志。胸腺細(xì)胞、靜止細(xì)胞、靜止細(xì)胞以及細(xì)胞表面無表達(dá)。主要用于淋巴細(xì)胞疾病的免疫分型。外周血淋巴細(xì)胞、占 、是細(xì)胞白血病較特異的標(biāo)記，也是髓系白血病時(shí)最常見 末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶（）和類人類白細(xì)胞抗原（

4、）的陽性表達(dá)對(duì)早期細(xì)胞白血病的診斷有重要價(jià)值。、的基因重排檢測(cè)有利于惡性細(xì)胞疾病細(xì)胞異?？寺〈嬖诘拇_定。 另外，和以上的細(xì)胞表達(dá)和。用可定義細(xì)胞。 末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶（）和類人類白細(xì)胞抗原（）細(xì)胞標(biāo)記 細(xì)胞 細(xì)胞的分化主要分為祖細(xì)胞、前細(xì)胞、未成熟細(xì)胞、成熟細(xì)胞、活化細(xì)胞和漿細(xì)胞個(gè)階段。 （）祖細(xì)胞（）：此期最早識(shí)別的細(xì)胞特異性抗原是，同時(shí)表達(dá)、細(xì)胞核、。 （）前細(xì)胞（）：和消失，出現(xiàn)、，（胞漿重鏈）。細(xì)胞標(biāo)記 細(xì)胞 細(xì)胞的分化主要分為祖細(xì)胞、前細(xì)胞、未 （）未成熟（早期）細(xì)胞（ ）：、消失，出現(xiàn) 、。、表達(dá)增加。其他新的抗原、相繼出現(xiàn)。 （）成熟細(xì)胞（ ）：和同時(shí)表達(dá)，并出現(xiàn)、和絲裂原受體

5、，上述細(xì)胞抗原繼續(xù)存在。 （）未成熟（早期）細(xì)胞（ ）：、消失，出現(xiàn) 、。、 （）活化細(xì)胞（ ）：成熟細(xì)胞被抗原或絲裂原刺激后，成為活化細(xì)胞，繼之增生和分化。在此過程伴隨表達(dá)細(xì)胞激活抗原、和其他激活相關(guān)抗原如、等。膜結(jié)合型逐漸減少，分泌型逐漸增加，并可發(fā)現(xiàn)基因重鏈類型轉(zhuǎn)換。 （）漿細(xì)胞（ ）：激活細(xì)胞進(jìn)一步分化成為產(chǎn)生抗體的漿細(xì)胞，這時(shí)獲得、和漿細(xì)胞特異抗原，表達(dá)增加，抗原再出現(xiàn)。而和上述抗原消失。仍可存在于胞質(zhì)中。 （）活化細(xì)胞（ ）：成熟細(xì)胞被抗原或絲裂原刺激后，成細(xì)胞上的抗原分為：細(xì)胞限制性（特異性）抗原： 、 、 和， 它們的表達(dá)只限于細(xì)胞上，在鑒別細(xì)胞系上是十分重要的標(biāo)志。細(xì)胞相關(guān)性

6、抗原： 、和。而細(xì)胞表面的受體，是細(xì)胞特異性識(shí)別抗原的受體，也是細(xì)胞重要的特征標(biāo)志。細(xì)胞上的抗原分為：細(xì)胞限制性（特異性）抗原： 、 、 、和都是細(xì)胞白血病和淋巴瘤最常用的標(biāo)記抗體。對(duì)中國人而言，是特異性和敏感性最高的。是一種早期的、譜系特異的泛細(xì)胞表面抗原，從最早期細(xì)胞前體細(xì)胞階段即表達(dá)，持續(xù)存在直至細(xì)胞終末階段，分化為漿細(xì)胞時(shí)丟失。存在于外周血、脾臟、淋巴結(jié)或扁桃體中的細(xì)胞和近的骨髓細(xì)胞。在造血系統(tǒng)只表達(dá)于正常和惡性細(xì)胞。外周血細(xì)胞、單核細(xì)胞、粒細(xì)胞和血小板表面不表達(dá)。對(duì)細(xì)胞白血病細(xì)胞表達(dá)的敏感性接近，且有較高的特異性。和與和有相同的特異性，但敏感性不夠，的表達(dá)往往伴隨性的陽性而出現(xiàn)。 、

7、和都是細(xì)胞白血病和淋巴瘤最常用的標(biāo)記抗 、都是早期細(xì)胞的標(biāo)記，其中的表達(dá)可出現(xiàn)在的系統(tǒng)的原始細(xì)胞上。一般來說，這類白血病患者有超過一半，甚至三分之二以上，在免疫表型中出現(xiàn)淋巴細(xì)胞分化的明顯不協(xié)調(diào)，如，陽性與表達(dá)同時(shí)出現(xiàn)在白血病細(xì)胞上。而免疫球蛋白重鏈（）的基因重排更是細(xì)胞異常克隆性增生的標(biāo)記。異常增生克隆性細(xì)胞也有呈現(xiàn)的基因重排。 、都是早期細(xì)胞的標(biāo)記，其中的表達(dá)可出現(xiàn)在的系統(tǒng)的髓系細(xì)胞標(biāo)記 這類抗體包括、和等。這些免疫標(biāo)記種類繁雜，缺乏特異性和敏感性（與淋巴細(xì)胞標(biāo)記抗體相比）。很多情形下，上述標(biāo)記也出現(xiàn)在正常的髓細(xì)胞表達(dá)上。 髓系細(xì)胞標(biāo)記 這類抗體包括、和.髓系標(biāo)記 從髓系祖細(xì)胞終末分化的成

8、熟細(xì)胞（粒細(xì)胞、單核細(xì)胞、血小板和紅細(xì)胞）間各階段細(xì)胞特征性標(biāo)志還不十分清楚。根據(jù)粒細(xì)胞和單核細(xì)胞上的髓系抗原表達(dá)試將其大致分為七種類型 :（）粒細(xì)胞和單核細(xì)胞上都有較強(qiáng)表達(dá)的抗原有：、。其中在原粒細(xì)胞質(zhì)中表達(dá)比膜上早，在診斷上十分重要。（）以粒細(xì)胞為主，但也存在于單核細(xì)胞的抗原有：和。是特異性髓系抗原，強(qiáng)表達(dá)在成熟粒細(xì)胞，弱表達(dá)在單核細(xì)胞上。 （）基本表達(dá)在粒細(xì)胞上的抗原有：和。 .髓系標(biāo)記 從髓系祖細(xì)胞終末分化的成熟細(xì)胞（粒細(xì)胞、單核（）以單核細(xì)胞為主，但也表達(dá)在粒細(xì)胞的抗原有：和。主要強(qiáng)表達(dá)在單核巨噬細(xì)胞，弱表達(dá)在粒細(xì)胞上?？乖植贾幌抻谠煅到y(tǒng)內(nèi)，表達(dá)在髓系祖細(xì)胞、以及相應(yīng)的白血病細(xì)胞

9、上。約原粒細(xì)胞表達(dá)抗原，而終末分化的粒細(xì)胞抗原弱表達(dá)。先于表達(dá)，故在診斷上加十分有用。 （）基本只表達(dá)在單核細(xì)胞上的抗原有：、和。是目前發(fā)現(xiàn)可靠的檢測(cè)造血系統(tǒng)內(nèi)單核巨噬細(xì)胞系統(tǒng)的特異標(biāo)志，用單抗可將與及區(qū)別開來。 （）以單核細(xì)胞為主，但也表達(dá)在粒細(xì)胞的抗原有：和。主要強(qiáng)表達(dá)（）造血干、祖細(xì)胞抗原有：和。和雖列在髓系抗原中，但都屬于造血干、祖細(xì)胞抗原 。除表達(dá)在早期造血干、祖細(xì)胞外，還表達(dá)在約的和的上，這些的白血病細(xì)胞可能來自具有多系性分化能力的分化不良的前身細(xì)胞。 （）其他髓系相關(guān)抗原：這些抗原主要存在于其他系細(xì)胞上，但在某些髓系細(xì)胞上也有表達(dá)，如：、等。 （）造血干、祖細(xì)胞抗原有：和。和雖列

10、在髓系抗原中，但都屬于造巨核細(xì)胞系 在巨核細(xì)胞系發(fā)育過程中依次出現(xiàn)、（）、（）和（）、（）。還可表達(dá)（強(qiáng)）。血小板具有豐富的胞內(nèi)顆粒，正常情況下血小板處于靜止?fàn)顟B(tài)。目前研制出的抗血小板單抗如、 、，主要都針對(duì)靜止的血小板。當(dāng)血小板被激活時(shí)，血小板中顆粒內(nèi)容物釋放，整合到活化的血小板質(zhì)膜內(nèi)，成為一些激活抗原，如 （選擇素）、及和。 紅細(xì)胞系 血小板 （強(qiáng)）、血型糖蛋白、。 巨核細(xì)胞系 在巨核細(xì)胞系發(fā)育過程中依次出現(xiàn)、（）、（.干祖細(xì)胞系 抗原選擇性地表達(dá)在不成熟的造血干細(xì)胞、祖細(xì)胞上，是一個(gè)階段特異而非系特異的抗原。多能造血干細(xì)胞（）和定向造血干細(xì)胞（，、）、祖細(xì)胞（）、祖細(xì)胞（）都在群內(nèi)?？乖?/p>

11、在早期造血祖細(xì)胞內(nèi)呈高水平表達(dá)，隨著細(xì)胞成熟其表達(dá)呈進(jìn)化性下降，繼而消失。目前已作為能識(shí)別人類最早造血干、祖細(xì)胞的重要標(biāo)志。現(xiàn)知更早期的干細(xì)胞為。 .干祖細(xì)胞系 抗原選擇性地表達(dá)在不成熟的造血干細(xì)胞、祖、細(xì)胞在形態(tài)上缺乏分化特點(diǎn)，是更幼稚、能維持長期造血的啟動(dòng)細(xì)胞（）。細(xì)胞以、為主，多處于和期。、細(xì)胞則大多處于造血祖細(xì)胞階段，可形成各系造血集落，但不能維持長期造血。故抗原是造血干細(xì)胞向多系定向分化的標(biāo)志之一，并隨一定的分化過程表達(dá)上調(diào)。鑒于抗原可以識(shí)別出造血干、祖細(xì)胞，結(jié)合其它相關(guān)分化抗原的表達(dá)可以作為造血細(xì)胞不同發(fā)育階段的標(biāo)志。如、細(xì)胞群為多能干細(xì)胞向髓系定向的標(biāo)志。、多為多能干細(xì)胞向系定向

12、的祖細(xì)胞。而、則被認(rèn)為是向系定向的祖細(xì)胞。 、細(xì)胞在形態(tài)上缺乏分化特點(diǎn)，是更幼稚、能維持長期造血的啟動(dòng)細(xì)最近發(fā)現(xiàn)（）是比更早的干、祖細(xì)胞標(biāo)志，故現(xiàn)人們多把、，細(xì)胞視為造血干細(xì)胞的重要標(biāo)志。最近發(fā)現(xiàn)（）是比更早的干、祖細(xì)胞標(biāo)志，故現(xiàn)人們多把、，細(xì)胞視 則在分化較好的中表達(dá)；血型糖蛋白表達(dá)在除紅系祖細(xì)胞外的紅系細(xì)胞上，占 患者的左右，可彌補(bǔ)血型糖蛋白的不足，在爆式紅系細(xì)胞集落形成單位（）和紅系細(xì)胞集落形成單位（）階段的祖細(xì)胞亦可表達(dá)陽性；、和是常用的原始巨核細(xì)胞標(biāo)記，但往往隨、的陽性而表達(dá)。另外，作為神經(jīng)細(xì)胞粘附分子（）通常在細(xì)胞和細(xì)胞上表達(dá)。在的中，表達(dá)陽性；在分化的單核細(xì)胞和（）、等核型改變時(shí)

13、，也呈陽性表達(dá)。 則在分化較好的中表達(dá)；血型糖蛋白表達(dá)在除紅系祖細(xì) 、和溶菌酶抗體在髓系細(xì)胞上也應(yīng)用極廣。其中，除原始單核細(xì)胞白血病、巨核細(xì)胞白血病和紅系白血病外，其他髓系白血病細(xì)胞都有可能陽性；除早幼粒細(xì)胞白血病外，其他髓系白血病均可呈陽性；僅表達(dá)在極微分化的早期髓系細(xì)胞上；溶菌酶可部分彌補(bǔ)、對(duì)原始單核細(xì)胞的不敏感。 、和溶菌酶抗體在髓系細(xì)胞上也應(yīng)用極廣。其中，除原特殊檢驗(yàn)的應(yīng)用慢淋問題(活化的淋巴細(xì)胞標(biāo)記)惡組問題(附帶的細(xì)胞標(biāo)記)慢性白血病的標(biāo)記要慎重特殊檢驗(yàn)的應(yīng)用慢淋問題(活化的淋巴細(xì)胞標(biāo)記) , () () () () : : : : : : 免疫標(biāo)記應(yīng)用與評(píng)價(jià)課件 : ( ) , , : : : : , , , : , , , : , , , : , , , : , : , , , ()(); ()() ()(); ( ()(); () ()(); ()(); () ( ) ()(); () ()(); , ()(); ()(); ()(); ()(); ()(); ()(); ()(); ()(); . ()(); ()() ()(); ( ) ()() ()();