分解纖維素細(xì)菌

1、關(guān)于分解纖維素的細(xì)菌第1頁，共41頁，2022年，5月20日，11點(diǎn)27分，星期四在微生物學(xué)中，將允許特定種類的微生物生長，同時(shí)抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基。選擇培養(yǎng)基第2頁，共41頁，2022年，5月20日，11點(diǎn)27分，星期四1直接計(jì)數(shù)法：最常用顯微鏡直接計(jì)數(shù)法。測定微生物數(shù)量的方法：第3頁，共41頁，2022年，5月20日，11點(diǎn)27分，星期四2間接計(jì)數(shù)法：最常用稀釋平板計(jì)數(shù)法。第4頁，共41頁，2022年，5月20日，11點(diǎn)27分，星期四第5頁，共41頁，2022年，5月20日，11點(diǎn)27分，星期四第6頁，共41頁，2022年，5月20日，11點(diǎn)27分，星期四閱讀27頁基礎(chǔ)知識(shí)

2、部分第一、二段，回答下列問題：1. 纖維素在生物圈的分布狀況？纖維素是地球上含量最豐富的多糖類物質(zhì)。植物的根、莖、葉等器官都含有大量的纖維素。其中棉花是自然界中纖維素含量最高的天然產(chǎn)物。一、纖維素和纖維素酶2.纖維素酶的組成及作用？纖維素酶是一種復(fù)合酶，一般認(rèn)為它至少包括三種組分，即C1酶、 CX酶和葡萄糖苷酶，前兩種酶使纖維素分解成纖維二糖，第三種酶將纖維二糖分解成葡萄糖。第7頁，共41頁，2022年，5月20日，11點(diǎn)27分，星期四3、纖維素的分解 能分解纖維素的微生物有各種細(xì)菌、真菌和少數(shù)放線菌。方法：濾紙崩潰法4、纖維素酶活性的測定實(shí)驗(yàn)：第8頁，共41頁，2022年，5月20日，11點(diǎn)

3、27分，星期四下列生物能分解纖維素的是（ ） 人 兔 牛 蘑菇 纖維桿菌A、 B、 C、 D、C第9頁，共41頁，2022年，5月20日，11點(diǎn)27分，星期四二、纖維素分解菌的篩選1.纖維素分解菌的篩選方法剛果紅染色法：這種方法能夠通過顏色反應(yīng)直接對(duì)微生物進(jìn)行篩選 閱讀課本第28頁的相關(guān)部分，回答下列問題：第10頁，共41頁，2022年，5月20日，11點(diǎn)27分，星期四2.纖維素分解菌的篩選方法的原理 剛果紅是一種染料，它可以與纖維素形成紅色復(fù)合物，但并不和纖維二糖、葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng)。當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后剛果紅纖維素的復(fù)合物就無法形成，培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解為中心的透明圈。這樣我們可

4、以通過是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌。第11頁，共41頁，2022年，5月20日，11點(diǎn)27分，星期四練一練：1.下列關(guān)于纖維素酶的說法，錯(cuò)誤的是A. 纖維素酶是一種復(fù)合酶，至少包括三種B. 纖維素酶可把纖維素分解成葡萄糖C. 纖維素酶可用于去掉植物的細(xì)胞壁D. 葡萄糖苷酶可把纖維素分解成葡萄糖第12頁，共41頁，2022年，5月20日，11點(diǎn)27分，星期四練一練：1.下列關(guān)于纖維素酶的說法，錯(cuò)誤的是A. 纖維素酶是一種復(fù)合酶，至少包括三種B. 纖維素酶可把纖維素分解成葡萄糖C. 纖維素酶可用于去掉植物的細(xì)胞壁D. 葡萄糖苷酶可把纖維素分解成葡萄糖第13頁，共41頁，2022年，5月20日，

5、11點(diǎn)27分，星期四2.利用剛果紅法可以篩選出纖維素分解菌，下列說法錯(cuò)誤的是A. 剛果紅能與纖維素形成紅色復(fù)合物 B. 剛果紅能與纖維二糖形成紅色復(fù)合物 C. 剛果紅不能與葡萄糖形成紅色復(fù)合物D. 若培養(yǎng)基上產(chǎn)生了透明圈，則說明已篩選出了纖維素分解菌第14頁，共41頁，2022年，5月20日，11點(diǎn)27分，星期四三、實(shí)驗(yàn)操作土壤取樣選擇培養(yǎng)梯度稀釋將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上挑選產(chǎn)生透明圈的菌落第15頁，共41頁，2022年，5月20日，11點(diǎn)27分，星期四土壤取樣取樣環(huán)境富含纖維素的環(huán)境中 由于生物與環(huán)境的相互依存關(guān)系，在富含纖維素的環(huán)境中，纖維素分解菌的含量相對(duì)提高，因此從這種土

6、樣中獲得目的微生物的幾率要高于普通環(huán)境。原因第16頁，共41頁，2022年，5月20日，11點(diǎn)27分，星期四土壤取樣 實(shí)例：樹林中多年落葉形成的腐殖土，多年積累的枯枝敗葉等。 討論:如果找不到合適的環(huán)境，可將濾紙埋在土壤中，將濾紙埋在土壤中有什么作用？你認(rèn)為濾紙應(yīng)埋進(jìn)土壤中多深？ 將濾紙埋在土壤中能使纖維素分解菌相對(duì)集中，實(shí)際上是人工設(shè)置纖維素分解菌生存的適宜環(huán)境。一般應(yīng)將濾紙埋于深約10cm左右的土壤中。第17頁，共41頁，2022年，5月20日，11點(diǎn)27分，星期四1.選擇培養(yǎng)的目的：增加纖維素分解菌的濃度，以確保能夠從樣品中分離到所需要的微生物選擇培養(yǎng)第18頁，共41頁，2022年，5月

7、20日，11點(diǎn)27分，星期四參照課本29頁旁欄中的比例配置，回答下列問題a.旁欄中的配方是液體培養(yǎng)基還是固體培養(yǎng)基？為什么？b.這個(gè)培養(yǎng)基對(duì)微生物是否具有選擇作用？如果具有，是如何進(jìn)行選擇的？是液體培養(yǎng)基，原因是配方中無凝固劑有選擇作用，本配方中的碳源是纖維素，所以能分解纖維素的微生物可以大量繁殖2.制備選擇培養(yǎng)基第19頁，共41頁，2022年，5月20日，11點(diǎn)27分，星期四3.操作方法：將土樣加入裝有30ml選擇培養(yǎng)基的錐形瓶中，將錐形瓶固定在搖床上，在一定溫度下振蕩培養(yǎng)12天，直至培養(yǎng)液變渾濁。也可重復(fù)選擇培養(yǎng)第20頁，共41頁，2022年，5月20日，11點(diǎn)27分，星期四思考：為什么選

8、擇培養(yǎng)能夠“濃縮”所需的微生物？在選擇培養(yǎng)的條件下，可以使那些能夠適應(yīng)這種營養(yǎng)條件的微生物得到迅速繁殖，而那些不適應(yīng)這種營養(yǎng)條件的微生物的繁殖被抑制，因此可以起到“濃縮”的作用第21頁，共41頁，2022年，5月20日，11點(diǎn)27分，星期四梯度稀釋按照課題1的稀釋操作方法，將選擇培養(yǎng)后的培養(yǎng)基進(jìn)行等比稀釋，稀釋最大倍數(shù)到106第22頁，共41頁，2022年，5月20日，11點(diǎn)27分，星期四將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上1. 制備培養(yǎng)基:參照旁欄中的比例2. 涂布平板：將稀釋度為104106的菌懸液各取0.1ml涂布在培養(yǎng)基上，30倒置培養(yǎng)第23頁，共41頁，2022年，5月20日，11

9、點(diǎn)27分，星期四挑選產(chǎn)生透明圈的菌落 挑取產(chǎn)生明顯的透明圈的菌落，一般即為分解纖維素的菌落。 接種到纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基上，在300C 370C培養(yǎng)，可獲得純培養(yǎng)。第24頁，共41頁，2022年，5月20日，11點(diǎn)27分，星期四剛果紅染色法方法一：先培養(yǎng)微生物，再加入剛果紅進(jìn)行顏色反應(yīng)方法二：在倒平板時(shí)就加入剛果紅思考：這兩種方法各有哪些優(yōu)點(diǎn)與不足？第25頁，共41頁，2022年，5月20日，11點(diǎn)27分，星期四 方法一缺點(diǎn)是操作繁瑣，加入剛果紅溶液會(huì)使菌落之間發(fā)生混雜；優(yōu)點(diǎn)是這樣顯示出的顏色反應(yīng)基本上是纖維素分解菌的作用 方法二優(yōu)點(diǎn)是操作簡便，不存在菌落混雜問題缺點(diǎn)一是由于培養(yǎng)基中還含有

10、淀粉類物質(zhì)，可以使能產(chǎn)生淀粉酶的微生物出現(xiàn)假陽性反應(yīng)；缺點(diǎn)二有些微生物具有降解色素的能力，它們在長時(shí)間培養(yǎng)過程中會(huì)降解剛果紅，形成明顯的透明圈，與纖維素分解菌不易區(qū)分第26頁，共41頁，2022年，5月20日，11點(diǎn)27分，星期四實(shí)驗(yàn)錄像第27頁，共41頁，2022年，5月20日，11點(diǎn)27分，星期四1.在富含纖維素的環(huán)境中尋找纖維素分解菌，符合下列哪一生物學(xué)觀點(diǎn)？A.生物結(jié)構(gòu)與功能相適應(yīng)的觀點(diǎn)B.生物結(jié)構(gòu)與功能整體性觀點(diǎn)C.生物與環(huán)境相適應(yīng)的觀點(diǎn)D.生物發(fā)展進(jìn)化的觀點(diǎn)練一練：第28頁，共41頁，2022年，5月20日，11點(diǎn)27分，星期四2.從土壤中分離獲得某種微生物的步驟是土壤取樣梯度稀釋

11、選擇培養(yǎng) 菌懸液涂布平板挑選出單個(gè)菌落A. B.C. D.第29頁，共41頁，2022年，5月20日，11點(diǎn)27分，星期四3. 有關(guān)選擇培養(yǎng)正確的敘述是A. 可以增加纖維素分解菌的濃度B. 可以減少纖維素分解菌的濃度C. 所用培養(yǎng)基是固體培養(yǎng)基D. 所用培養(yǎng)基是平板培養(yǎng)基第30頁，共41頁，2022年，5月20日，11點(diǎn)27分，星期四四、課題延伸 本課題對(duì)分解纖維素的微生物進(jìn)行了初步的篩選，但是這只是分離純化的第一步。為確定得到的是纖維素分解菌，還需要進(jìn)行發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶的實(shí)驗(yàn)，纖維素酶的測定方法一般是對(duì)纖維素酶分解濾紙等纖維素后所產(chǎn)生的葡萄糖進(jìn)行定量的測定。第31頁，共41頁，2022年，5月

12、20日，11點(diǎn)27分，星期四4鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基中碳源為（ ）A、CMC-Na B、木聚糖 C、纖維素 D、裂解酶A第32頁，共41頁，2022年，5月20日，11點(diǎn)27分，星期四5剛果紅染色時(shí)，加入剛果紅應(yīng)在（ ）（1）制備培養(yǎng)基時(shí)（2）梯度稀釋時(shí) （3）倒平板時(shí)（4）涂布時(shí) （5）長出菌落時(shí)A、（1）（3） B、（2）（5） C、（3）（5） D、（4）（5）C第33頁，共41頁，2022年，5月20日，11點(diǎn)27分，星期四6為以纖維素為唯一碳源篩選出真菌和細(xì)菌，試分析此類微生物在生態(tài)系統(tǒng)中的作用與下列哪種生物類似？（ ）A 硝化細(xì)菌 B、 藍(lán)藻 C、蚯蚓 D、兔子C第34頁，共41

13、頁，2022年，5月20日，11點(diǎn)27分，星期四7.有關(guān)平板劃線操作正確的是（ ）A.使用已滅菌的接種環(huán)、培養(yǎng)皿，操作過程中不再滅菌B.打開含菌種的試管需要通過火焰滅菌，取出菌種后需要馬上塞上棉塞C.將沾有菌種的接種環(huán)迅速伸入平板內(nèi)，劃三至五條平行線即可D.最后將平板倒置，放入恒溫箱中培養(yǎng)D第35頁，共41頁，2022年，5月20日，11點(diǎn)27分，星期四練一練：1、下列關(guān)于纖維素酶的說法，錯(cuò)誤的是A、纖維素酶是一種復(fù)合酶，至少包括三種B、纖維素酶可把纖維素分解成葡萄糖C、纖維素酶可用于去掉植物的細(xì)胞壁D、葡萄糖苷酶可把纖維素分解成葡萄糖2、利用剛果紅法可以篩選出纖維素分解菌，下列說法錯(cuò)誤的是A

14、、剛果紅能與纖維素形成紅色復(fù)合物 B、剛果紅能與纖維二糖形成紅色復(fù)合物 C、剛果紅不能與葡萄糖形成紅色復(fù)合物D、若培養(yǎng)基上產(chǎn)生了透明圈，則說明已篩選出了纖維素分解菌第36頁，共41頁，2022年，5月20日，11點(diǎn)27分，星期四1、在富含纖維素的環(huán)境中尋找纖維素分解菌，符合下列哪一生物學(xué)觀點(diǎn)？（ ）A、生物結(jié)構(gòu)與功能相適應(yīng)的觀點(diǎn) B、生物結(jié)構(gòu)與功能整體性觀點(diǎn)C、生物與環(huán)境相適應(yīng)的觀點(diǎn) D、生物發(fā)展進(jìn)化的觀點(diǎn)C第37頁，共41頁，2022年，5月20日，11點(diǎn)27分，星期四A、可以增加纖維素分解菌的濃度B、可以減少纖維素分解菌的濃度C、所用培養(yǎng)基是固體培養(yǎng)基D、所用培養(yǎng)基是平板培養(yǎng)基3、有關(guān)選擇培養(yǎng)正確的敘述是（ ）A第38頁，共