《DNA的粗提取與鑒定》導(dǎo)學(xué)案

1、PAGE7課題1DNA的粗提取與鑒定【學(xué)習(xí)目標(biāo)】1通過閱讀教材，能準(zhǔn)確說出DNA的理化特性及提取和鑒定的原理；2通過觀看實(shí)驗(yàn)視頻，初步學(xué)會(huì)DNA粗提取和鑒定方法，知道相關(guān)溶液的作用機(jī)理?！緦W(xué)習(xí)重點(diǎn)與難點(diǎn)】DNA的粗提取和鑒定方法【導(dǎo)學(xué)誘思】一、基礎(chǔ)知識(shí)的方法提取生物大分子的基本思路是。對(duì)于DNA的粗提取而言，就是要利用DNA與、和等在物理和化學(xué)性質(zhì)方面的差異，提取DNA，去除其他成分。1）DNA的溶解性DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的中溶解度不同，利用這一特點(diǎn)，選擇適當(dāng)?shù)柠}濃度就能使充分溶解，而使雜質(zhì)沉淀，或者相反，以達(dá)到分離目的。【思考】課本圖51是DNA在NaCl溶液中的溶解度曲線，請(qǐng)

2、根據(jù)曲線圖思考：在什么濃度下，DNA的溶解度最小DNA在NaCl溶液中的溶解度是如何變化的？如何通過控制NaCl溶液的濃度使DNA在鹽溶液中溶解或析出？此外，DNA不溶于溶液，但是細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)則溶于酒精。利用這一原理，可以將DNA與蛋白質(zhì)進(jìn)一步的分離。2）DNA對(duì)酶、高溫和洗滌劑的耐受性蛋白酶能水解，但是對(duì)沒有影響。大多數(shù)蛋白質(zhì)不能忍受6080的高溫，而DNA在以上才會(huì)變性。洗滌劑能夠瓦解，但對(duì)DNA沒有影響。3）DNA的鑒定在條件下，DNA遇會(huì)被染成色，因此二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑。2實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)1）實(shí)驗(yàn)材料的選取凡是含有的生物材料都可以考慮，但是選用的生物組織，成功的可能性更大。在

3、下面的生物材料中選取適合的實(shí)驗(yàn)材料：魚卵、豬肝、菜花（花椰菜）、香蕉、雞血、哺乳動(dòng)物的紅細(xì)胞、獼猴桃、洋蔥、豌豆、菠菜、在液體培養(yǎng)基的大腸桿菌?！舅伎肌坎溉閯?dòng)物的紅細(xì)胞的特點(diǎn)？2）破碎細(xì)胞，獲取含DNA的濾液動(dòng)物細(xì)胞的破碎比較容易，以雞血細(xì)胞為例，在雞血細(xì)胞液中加入一定量的，同時(shí)用攪拌，過濾后收集濾液即可。如果實(shí)驗(yàn)材料是植物細(xì)胞，需要先用溶解細(xì)胞膜。例如，提取洋蔥的DNA時(shí)，在切碎的洋蔥中加入一定的和，進(jìn)行充分的攪拌和研磨，過濾后收集研磨液?！舅伎肌繛槭裁醇尤胝麴s水能使雞血細(xì)胞破裂？加入洗滌劑和食鹽的作用分別是什么？如果研磨不充分，會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生怎樣的影響？此步驟獲得的濾液中可能含有哪些細(xì)胞

4、成分？3）去除濾液中的雜質(zhì)閱讀課本的三個(gè)方案，【思考】為什么反復(fù)地溶解與析出DNA，能夠去除雜質(zhì)？方案二與方案三的原理有什么不同？4）DNA的析出與鑒定將處理后的溶液過濾，加入與濾液體積、冷卻的，靜置，溶液中會(huì)出現(xiàn)，這就是粗提取的DNA。用玻璃棒攪拌，卷起絲狀物，并用濾紙吸取上面的水分。取兩支20ml的試管，各加入物質(zhì)的量濃度為的NaCl溶液5ml，將絲狀物放入其中一支試管中，用玻璃棒攪拌，使絲狀物溶解。然后，向兩支試管中各加入4ml的?；旌暇鶆蚝螅瑢⒃嚬苤糜谥屑訜?min，待試管冷卻后，比較兩支試管溶液顏色的變化，看看溶解有DNA的溶液是否變。3操作提示以血液為實(shí)驗(yàn)材料時(shí)，每100ml血液中

5、需要加入3g，防止。加入洗滌劑后，動(dòng)作要、，否則容易產(chǎn)生大量的泡沫，不利于后續(xù)步驟地操作。加入酒精和用玻璃棒攪拌時(shí)，動(dòng)作要，以免，導(dǎo)致DNA分子不能形成絮狀沉淀。二苯胺試劑要，否則會(huì)影響鑒定的效果。4結(jié)果分析與評(píng)價(jià)【隨堂練習(xí)】一、選擇題的基因樣本前，采集來的血樣需要蛋白水解酶處理，然后用有機(jī)溶劑除去蛋白質(zhì)。用蛋白水解酶處理血樣的目的是（）A除去血漿中的蛋白質(zhì)B除去染色體上的蛋白質(zhì)C除去血細(xì)胞表面的蛋白質(zhì)D除去血細(xì)胞中的所有的蛋白質(zhì)，使DNA釋放，便于進(jìn)一步提純粘稠物有關(guān)的敘述，不正確的是（）A操作時(shí)緩緩滴加蒸餾水，降低DNA的溶解度時(shí)，用玻璃棒輕緩攪拌，以保證DNA分子完整和蛋白質(zhì)的溶解度，兩

6、者均可析出D當(dāng)絲狀粘稠物不再增加時(shí)，此時(shí)NaCl的濃度相當(dāng)于L3洗滌劑能夠瓦解（），但對(duì)DNA沒有影響。細(xì)胞質(zhì)4在沸水浴的條件下，DNA遇（）會(huì)被染成藍(lán)色。蘇丹二苯胺提取過程中，最好使用塑料試管和燒杯，目的是（）的損失容易洗刷6下列操作中，對(duì)DNA的提取量影響最小的是（）A使雞血細(xì)胞在蒸餾水中充分破裂，放出DNA等核物質(zhì)B攪拌時(shí)，要使用玻璃棒沿一個(gè)方向輕緩攪拌C在“析出DNA粘稠物”時(shí)，要緩緩加蒸餾水，直至溶液中粘稠物不再增加時(shí)，要使用冷酒精，甚至再將混合液放入冰箱中冷卻E在DNA的溶解和再溶解時(shí)，要充分?jǐn)嚢璧拇痔崛≈?，將與濾液體積相等的、冷卻的（），靜置23min，溶液中會(huì)出現(xiàn)白色絲狀物。的

7、的NaCl溶液C質(zhì)量分?jǐn)?shù)15%的HClD體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精溶液8以血液為實(shí)驗(yàn)材料時(shí)，需要向血液中加入（），防止血液凝固。醋酸洋紅溶液中，不斷加入蒸餾水的目的是（）的速度B加快溶解雜質(zhì)的速度的溶解度，加快DNA析出D減小雜質(zhì)的溶解度，加快雜質(zhì)的析出10去除濾液中的雜質(zhì)時(shí)，直接在濾液中加入嫩肉粉，利用嫩肉粉中的（）分解蛋白質(zhì)。腸肽酶二、非選擇題時(shí)，要除去血液中的上清液，這是因?yàn)槭裁矗?填寫本實(shí)驗(yàn)完成下列實(shí)驗(yàn)操作時(shí)所用試劑。（1）提取雞血細(xì)胞中核物質(zhì)（2）溶解核內(nèi)DNA：（3）析出2mol/LNaCl溶液中的DNA（4）DNA粘稠物的再溶解（5）提取雜質(zhì)較少的DNA白色乳狀絲狀物（6）DNA的鑒定粗提取的實(shí)驗(yàn)材料的選擇，也經(jīng)過了多次實(shí)驗(yàn)效果的比較，最終選擇雞血做實(shí)驗(yàn)材料的原因是什么請(qǐng)回答下列問題：（1）雞血細(xì)胞中紅細(xì)胞，家雞屬于鳥類，新陳代謝旺盛，因而血液中細(xì)胞數(shù)目較多，可以提供豐富的。（2）實(shí)驗(yàn)前由老師制備血細(xì)胞液供同學(xué)們做實(shí)驗(yàn)材料，而不用雞全血，主要原因是。（3）生活在牧區(qū)的人們，采集