基因表達載體構(gòu)建_第1頁
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文檔簡介

1、關(guān)于基因表達載體的構(gòu)建第1頁,共14頁,2022年,5月20日,6點5分,星期四先用同一種限制酶分別切割目的基因和質(zhì)粒,再用DNA連接酶將二者連接,形成重組DNA分子。第2頁,共14頁,2022年,5月20日,6點5分,星期四三、將目的基因?qū)胧荏w細胞(轉(zhuǎn)化)常用的受體細胞:有大腸桿菌、枯草桿菌、酵母菌和動植物細胞等。第3頁,共14頁,2022年,5月20日,6點5分,星期四1、受體細胞是植物細胞農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法:主要侵染雙子葉植物(傷口分泌酚類化合物吸引農(nóng)桿菌)基因槍法花粉管通道法第4頁,共14頁,2022年,5月20日,6點5分,星期四1)土壤農(nóng)桿菌法第5頁,共14頁,2022年,5月20日,

2、6點5分,星期四2)基因槍法第6頁,共14頁,2022年,5月20日,6點5分,星期四3)花粉管通道法第7頁,共14頁,2022年,5月20日,6點5分,星期四2、受體細胞是動物細胞顯微注射法注入動物受精卵第8頁,共14頁,2022年,5月20日,6點5分,星期四1982年,世界上第一例體型比普通小鼠大1.8倍的轉(zhuǎn)基因超級小鼠誕生第9頁,共14頁,2022年,5月20日,6點5分,星期四3、受體細胞是微生物將目的基因?qū)朐松锏暮锰幨鞘裁矗糠敝晨?、多為單細胞、遺傳物質(zhì)相對較少要想使重組DNA順利進入細菌細胞內(nèi),最大的難題是什么?一般用CaCl2處理,改變細胞膜的通透性,使得重組DNA能夠進入細胞。第10頁,共14頁,2022年,5月20日,6點5分,星期四四、目的基因的檢測與鑒定檢測轉(zhuǎn)基因生物的DNA是否插入目的基因檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)檢測性狀分子水平個體水平第11頁,共14頁,2022年,5月20日,6點5分,星期四1、檢測目的基因DNA分子雜交技術(shù)提取轉(zhuǎn)基因生物的DNA制作分子探針(目的基因的一段單鏈序列)進行分子雜交第12頁,共14頁,2022年,5月20日,6點5分,星期四2、檢測mRNA分子雜交技術(shù)第13頁,共14頁,2022年,5月20日,

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