飼料氨態(tài)氮、鈣磷測定方法

飼料中氨態(tài)氮的測定飼料中氨態(tài)氮的測定一、目的與原理：；1、了解掌握單指示劑與雙指示劑甲醛滴定法測氨態(tài)氮；二、單指示劑甲醛滴定法：；(一)原理：氨基酸具有酸、堿兩重性質(zhì)，因為氨基酸；（二）試劑；(1)40％中性甲醛溶液，以麝香草酚酞為指示劑，；(2)0.1％麝香草酚酞乙醇溶液；(3)0.100N氫氧化鈉標準溶液；(三)操作步驟：；稱取一定量樣品(約含20毫克左右的氨基酸)于燒杯。飼料中氨態(tài)氮的測定一、目的與原理：1、了解掌握單指示劑與雙指示劑甲醛滴定法測氨態(tài)氮總量的方法與原理：二、單指示劑甲醛滴定法：(一)原理：氨基酸具有酸、堿兩重性質(zhì)，因為氨基酸含有-COOH基顯示酸性，又含有-NH2基顯示堿性。由于這二個基的相互作用，使氨基酸成為中性的內(nèi)鹽。當(dāng)加入甲醛溶液時，-NH2與甲醛結(jié)合，其堿性消失，破壞內(nèi)鹽的存在，就可用堿來滴定-COOH基，以間接方法測定氨基酸的量，反應(yīng)式可能以下面三種形式存在。（二）試劑(1)40％中性甲醛溶液，以麝香草酚酞為指示劑，用1NNaOH溶液中和。(2)0.1％麝香草酚酞乙醇溶液。(3)0.100N氫氧化鈉標準溶液。(三)操作步驟：稱取一定量樣品(約含20毫克左右的氨基酸)于燒杯中(如為固體加水50毫升)，加2-3滴指示劑，用0.1OONNaOH溶液滴定至淡藍色。加入中性甲醛20毫升，搖勻，靜置1分鐘，此時藍色應(yīng)消失。再用0.1OONNaOH溶液滴定至淡藍色。記錄兩次滴定所消耗的堿液毫升數(shù)，用下述公式計算計算：氨基酸態(tài)氮(％)=(NV×0.014×100)/W式中：N：NaOH標準溶液當(dāng)量濃渡。V：NaOH標準溶液消耗的總量(m1)W：樣品溶液相當(dāng)樣品重量(克)。0.014：氮的毫克當(dāng)量。三、雙指示劑甲醛滴定法：(一)原理：與單色法相同，只是在此法中使用了兩種指示劑。從分析結(jié)果看，雙指示劑甲醛滴定法與亞硝酸氮氣容量法(此法操作復(fù)雜，不作介紹)相近單色滴定法稍偏低，主要因為單指示劑甲醛滴定法是以氨基酸溶液PH值作為麝香草酚酞的終點。PH值在9.2，而雙指示劑是以氨基酸溶液的PH值作為中性紅的終點，PH值為7.0，從理論計算看，雙色滴定法較為準確。(二)試劑：(1)三種試劑同單指示劑法(2)0.1％中性紅(50％乙醇溶液)(三)操作步驟：取相同的兩份樣品，分別注入100毫升三角燒瓶中，一份加入中性紅指示劑2-3滴，用0.100NNaOH溶液滴定終點(由紅變琥珀色)，記錄用量，另一份加入麝香草酚酞3滴和中性甲醛20毫升，搖勻，以0.100NNaOH準溶液滴定至淡藍色。按下述公式計算。計算：氨基酸態(tài)氮(％)=(N(V2-V1)×0.014)/W×100式中：V2：用麝香草酚酞為指示劑時標準堿液消耗量(毫升)V1：用中性紅作指示劑時堿液的消耗量(m1)。N：標準堿液當(dāng)量濃度。W：樣品的重量(克)。．0.014：氮的毫克當(dāng)量。注意事項：測定時樣品的顏色較深，應(yīng)加活性炭脫色之后再滴定．飼料中鈣的測定方法【標準名稱】飼料中鈣的測定方法【標準號】GB/T6436-92【標準文件】GB／T6436—92飼料中鈣的測定方法（畜禽飼料與添加劑）1主題內(nèi)容與適用范圍本準規(guī)定了飼料中鈣的測定方法。本標準適用于配合飼料、單一飼料和濃縮飼料。2方法原理將試樣中有機物破壞，鈣變成溶于水的離子，用草酸銨定量沉淀，用高錳酸鉀法間接測定鈣含量。3試劑3.1鹽酸1＋3（V1＋V2）。3.2硫酸1＋3（V1＋V2）。3.3氨水1＋1（V1＋V2）。3.4草酸銨水溶液42g／L。3.5高錳酸鉀標準溶液c（1/5KMnO4）＝0.05mol／L3.5.1配制稱取高錳酸鉀（GB643）約1.6g，溶于1000mL蒸餾水中煮沸10min，冷卻且靜置1～2d，用燒結(jié)玻璃濾器過濾，保存于棕色瓶中。3.5.2標定3.5.2.1測定方法稱取草酸鈉（GB1289基準物，105℃干燥2h，存于干燥器中）0.1g，準確至0.0002g，溶于50mL水中，再加硫酸溶液（3.2）10mL，將此溶液加熱至75～85℃，用配制好的高錳酸鉀（3.5）滴定,溶液呈現(xiàn)粉紅色且1min不褪色為終點,滴定結(jié)束時,溶液溫度在60℃以上,同時作空白試驗。3.5.2.2計算高錳酸鉀標準溶液濃度按式（1）計算：……（1）式中:c（1/5KMnO4）──高錳酸鉀標準溶液之物質(zhì)的量濃度，mol／L；m──草酸鈉之質(zhì)量，g；V1──高錳酸鉀之用量，mL；V2──空白試驗高錳酸鉀溶液之用量，mL；0.06700──與1.00mL高錳酸鉀標準溶液〔c（1／5KMnO4）＝1.000mol／L〕相當(dāng)?shù)囊钥吮硎镜牟菟徕c質(zhì)量。3.6甲基紅指示劑0.1g甲基紅溶于100mL95％乙醇中。4儀器和設(shè)備4.1實驗室用樣品粉碎機或研缽。4.2分樣篩孔徑0.45mm（40目）。4.3分析天平感量0.0001g。4.4高溫爐電加熱，可控溫度在550±20℃。4.5坩堝瓷質(zhì)。4.6容量瓶100mL。4.7滴定管酸式，25或50mL。4.8玻璃漏斗6cm直徑。4.9定量濾紙中速，7～9cm。4.10移液管10，20mL。4.11燒杯200mL。4.12凱氏燒瓶250或500mL。5試樣制備取具有代表性試樣，粉碎至40目，用四分法縮分至200g，裝于密封容器，防止試樣成分變化或變質(zhì)。6測定步驟6.1試樣的分解6.1.1干法稱取試樣2～5g于坩堝（4.5）中，精確至0.0002g，在電爐上小心炭化，再放入高溫爐（4.4）于550℃下灼燒3h（或測定粗灰分后連續(xù)進行），在盛灰坩堝中加入鹽酸溶液（3.1）10mL和濃硝酸數(shù)滴,小心煮沸,將此溶液轉(zhuǎn)入容量瓶（4.6）,冷卻至室溫,用蒸餾水稀釋至刻度,搖勻,為試樣分解液。6.1.2濕法（用于無機物或液體飼料）稱取試樣2～5g于凱氏燒瓶（4.12）中，精確至0.0002g，加入硝酸（GB623分析純）10mL，加熱煮沸，至二氧化氮黃煙逸盡，冷卻后加入70％～72％高氯酸（GB623分析純）10mL,小心煮消沸至溶液無色,不得蒸干（危險1）,冷卻后加蒸餾水50mL,且煮沸騰驅(qū)逐二氧化氮,冷卻后轉(zhuǎn)入容量瓶（4.6）,用蒸餾水稀釋至刻度,搖勻,為試樣分解液。6.2試樣的測定準確移取試樣液10～20mL（含鈣量20mg左右）于燒杯（4.11）中，加蒸餾水100mL，甲基紅指示劑（3.6）2滴，滴加氨水溶液（3.3）至溶液呈橙色，再加鹽酸溶液（3.1）使溶液洽變紅色（pH2.5～3.0）,小心煮沸,慢慢滴加草酸銨溶液（3.4）10mL,且不斷攪拌,如溶液變橙色,應(yīng)補滴鹽酸滴溶液至紅色,煮沸數(shù)分鐘,放置過夜使沉淀陳化（或在水浴上加熱2h）。將沉淀和濾紙轉(zhuǎn)入原燒杯，加硫酸溶液（3.2）10mL，蒸餾水50mL，加熱至75～80℃，用0.05mol／L高錳酸鉀溶液滴定，溶液呈粉紅色且半分鐘不褪色為終點。同時進行空白溶液的測定。7測定結(jié)果的計算7.1計算見式（2）：……（2）式中：V──0.05mol／L高錳酸鉀溶液之用量，mL；V0──測空白時0.05mol／L高錳酸鉀溶液之用量，mL；c（15KMnO4）──高錳酸鉀溶液之物質(zhì)的量濃度，mol／L；V′──滴定時移取試樣分解液體積，mL；m──試樣質(zhì)量，g；0.02──與1.00mL高錳酸鉀標準溶液〔c（1/5KMnO4）＝1.000mol／L〕相當(dāng)?shù)囊钥吮硎镜拟}的質(zhì)量。7.2重復(fù)性每個試樣取兩個平行樣進行測定，以其算術(shù)平均值為結(jié)果。含鈣量在5％以上，允許相對偏差3％；含鈣量5％～1％時，允許相對偏差5％；含鈣量1％以下，允許相對偏差10％。附錄A注意事項（補充件）A1高酸鉀溶液濃度不穩(wěn)定，至少每月標定一次。A2每種濾紙的空白值不同，消耗高錳酸鉀溶液體積也不同，因此至少每盒濾紙作一次空白溶液測定。飼料中總磷量的測定方法光度法GB/T6437-2002代替GB/T6437-1992A.46范圍本標準規(guī)定了用鉬黃顯色光度法測定飼料中總磷量的方法。本標準適用于飼料原料（除磷酸鹽外）及飼料產(chǎn)品中磷的測定。A.47引用標準下列標準所包含的條文，通過在本標準中引用而構(gòu)成為本標準的條文。本標準出版時，所示版本均為有效。所有標準都會被修訂，使用本標準的各方應(yīng)探討使用下列標準最新版本的可能性。GB/T6682－1992分析實驗室用水規(guī)格和實驗方法（neqISO3696:1987）A.48方法原理將試樣中的有機物破壞，使磷元素游離出來，在酸性溶液中，用釩鉬酸銨處理，生成黃色［(NH4)3PO4NH4VO3?16MoO3］絡(luò)合物，在波長420nm下進行比色測定。A.49試劑實驗室用水應(yīng)符合GB/T6682中三級水的規(guī)格，本標準中所用試劑，除特殊說明外，均為分析純。A.49.1鹽酸：1+1水溶液。A.49.2硝酸。A.49.3高氯酸。A.49.4釩鉬酸銨顯色劑：稱取偏釩酸銨1.25g，加水200mL加熱溶解，冷卻后再加入250mL硝酸，另稱取鉬酸銨25g，加水400mL加熱溶解，在冷卻的條件下，將兩種溶液混合，用水定容1000mL。避光保存，若生成沉淀，則不能繼續(xù)使用。g/mL的磷標準液。?A.49.5磷標準液：將磷酸二氫鉀在105℃干燥1h，在干燥器中冷卻后稱取0.2195g溶解于水，定量轉(zhuǎn)入1000mL容量瓶中，加硝酸3mL，用水稀釋至刻度，搖勻，即為50A.50儀器和設(shè)備A.50.1實驗室用樣品粉碎機或研缽。A.50.2分樣篩：孔徑0.42mm(40目)。A.50.3分析天平：感量0.0001g。A.50.4分光光度計：可在420nm下測定吸光度。A.50.5比色皿：1.0cm。A.50.6高溫爐：可控溫度在（550±20）℃。A.50.7瓷坩堝：50mL。A.50.8容量瓶：50、100、1000mL。A.50.9移液管：1.0、2.0、3.0、5.0、10.0ml。A.50.10三角瓶：250mL。A.50.11凱氏燒瓶：125、250mL。A.51試樣制備取有代表性試樣2kg，用四分法將試樣縮分至200g，粉碎過0.42mm孔篩，裝入樣品瓶中，密封保存?zhèn)溆?。A.52測定步驟A.52.1試樣的分解A.52.1.1干法（不適用于含磷酸氫鈣［Ca（H2PO4）2］的飼料）稱取試樣2g～5g（精確至0.002g）于坩堝中，在電爐上小心炭化，再放入高溫爐，在550℃灼燒3h（或測粗灰分后繼續(xù)進行），取出冷卻，加入10mL鹽酸溶液和硝酸數(shù)滴，小心煮沸約10min，冷卻后轉(zhuǎn)入100mL容量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，為試樣分解液。A.52.1.2濕法稱取試樣0.5g～5g（精確至0.0002g）于凱氏燒瓶中，加入硝酸30mL，小心加熱煮沸至黃煙逸盡，稍冷，加入高氯酸10mL，繼續(xù)加熱至高氯酸冒白煙（不得蒸干），溶液基本無色，冷卻，加水30mL，加熱煮沸，冷卻后，用水轉(zhuǎn)移至100mL容量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻，為試樣分解液。A.52.1.3鹽酸溶解法（適用于微量元素預(yù)混料）稱取試樣0.2g～1g（精確至0.0002g）于100mL燒杯中。緩緩加入鹽酸10ｍL，使其全部溶解，冷卻后轉(zhuǎn)入100mL容量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，為試樣分解液。A.52.2工作曲線繪制。準確移取磷標準溶液0.0、1.0、2.0、4.0、8.0、16.0mL于50mL容量瓶中，各加釩鉬酸銨顯色劑10mL，用水稀釋至刻度，搖勻，常溫下放置10min以上，以0.0mL溶液為參比，用1cm比色皿，在420nm波長下，用分光光度計測定各溶液的吸光度。以磷含量為橫坐標，吸光度為縱坐標，繪制工作曲線。A.52.3試樣的測定g）于50mL容量瓶中，加入釩鉬酸銨顯色劑10mL，用水稀釋至刻度，搖勻，常溫下放置10min以上，用1cm比色皿在420nm波長下測定試