高中生物選修動物細胞融合和單克隆抗體ppt參考課件

(1)(1)(2)(3)(4)(5)植物體細胞雜交過程A植物細胞B植物細胞原生質(zhì)體A原生質(zhì)體B融合體雜種細胞愈傷組織雜種小植株(6)雜種植株溫故知新:

回憶已學(xué)知識，你是否已經(jīng)見到過動物細胞融合的實例？人-鼠(想像圖)2.2.2動物細胞融合與單克隆抗體鼠細胞人細胞人工誘導(dǎo)一、動物細胞融合雜交細胞動物細胞融合（技術(shù)）：是指（在一定的條件下）兩個或多個細胞融合形成一個細胞的過程。1、概念：2、誘導(dǎo)融合的因素化學(xué)法：聚乙二醇(PEG)誘導(dǎo)融合.物理法：電激融合生物法：滅活的病毒誘導(dǎo)融合.病毒顆粒黏附細胞表面細胞膜連接細胞膜被病毒顆粒穿通細胞融合、形成雜種細胞

為什么滅活的病毒能作誘導(dǎo)劑？滅活喪失感染性但保留融合活性獲得雜種植株物理、化學(xué)方法（同左）滅活的病毒

物理（離心、振蕩、電激）化學(xué)（聚乙二醇）直接誘導(dǎo)細胞融合去壁—原生質(zhì)體融合—誘導(dǎo)新壁—雜種植株細胞膜的流動性細胞膜的流動性結(jié)果誘導(dǎo)方法步驟融合的原理動物細胞融合植物體細胞雜交比較項目植物、動物細胞融合的比較獲得雜交細胞小結(jié)3、動物細胞融合技術(shù)的意義和應(yīng)用問題：抗體由什么細胞產(chǎn)生？其化學(xué)本質(zhì)是什么？與抗原作用的特點？主要分布在哪里？二、單克隆抗體的制備抗體的傳統(tǒng)生產(chǎn)方法：從血清中分離抗體

該法制備抗體的特點：

產(chǎn)量低、純度低，且抗體的特異性差。多種漿細胞動物體內(nèi)多種抗體抗原提示：每一個效應(yīng)B淋巴細胞只分泌一種化學(xué)性質(zhì)單一，特異性強的抗體。如果利用單個效應(yīng)B淋巴細胞進行無性繁殖（克?。?，形成細胞群，這樣的細胞群就有可能產(chǎn)生出化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強的抗體——單克隆抗體。問題：怎樣獲得化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強的抗體呢？材料：效應(yīng)B細胞在體內(nèi)只能由B淋巴細胞增殖、分化而來,不再進行分裂,在體外培養(yǎng)的條件下，也很難分裂。思考：用什么方法才能讓B淋巴細胞在體外培養(yǎng)時既能產(chǎn)生抗體又能無限增殖?雜交瘤細胞動物細胞培養(yǎng)技術(shù)動物細胞融合技術(shù)單克隆抗體

既能產(chǎn)生特異性抗體，又能大量繁殖的細胞骨髓瘤細胞能無限增殖+一個漿細胞只分泌一種特異性抗體設(shè)計方案：米爾斯坦科勒讀下面一段文字資料，找出單克隆抗體的概念

人們發(fā)現(xiàn)，在動物發(fā)生免疫反應(yīng)的過程中，體內(nèi)的B細胞可以產(chǎn)生多達百萬種以上的特異性抗體，但是每個B細胞只分泌一種化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強的抗體。要想獲得大量的單一抗體，必須用單個B細胞進行無性繁殖，即克隆。單克隆抗體的概念單:單個細胞克隆:無性繁殖單克隆抗體:單個細胞克隆產(chǎn)生的化學(xué)性質(zhì)單一特異性強的抗體單克隆抗體的制備問題思考Q1Q2細胞兩兩融合后，有哪些類型？B-B;B-瘤;瘤-瘤哪種是需要的類型，要篩選嗎？①細胞合成DNA有D和S兩條途徑，其中D途徑能被氨基嘌呤阻斷。②人淋巴細胞中有這兩種DNA的合成途徑，但一般不分裂增殖。

③鼠骨髓瘤細胞中只有D途徑，沒有S途徑，可是能不斷分裂增殖。你想到篩選雜交瘤細胞的方案了么？

小資料：單克隆抗體的制備問題思考Question經(jīng)過選擇培養(yǎng)基篩選的雜交瘤細胞群進行克隆是否就得到產(chǎn)生純度高的抗體？還需怎么辦？有限稀釋法稀釋多次稀釋對能產(chǎn)生特異性抗體的單個雜交瘤細胞進行克隆，即單細胞克隆。由它產(chǎn)生的抗體，即單克隆抗體。將培養(yǎng)皿孔內(nèi)的上清液取出，檢測抗體。多孔細胞培養(yǎng)板單克隆抗體雜交細胞滅活的病毒等手段小鼠骨髓瘤細胞B淋巴細胞經(jīng)免疫的小鼠提取雜交瘤細胞第一次篩選用特定的選擇培養(yǎng)基第二次篩選能產(chǎn)生專一抗體的雜交瘤細胞體外培養(yǎng)注射到小鼠腹腔提取單克隆抗體4.單抗制備過程中應(yīng)用了那些技術(shù)？動物細胞融合、動物細胞培養(yǎng)1.此過程中至少進行了幾次篩選？目的相同嗎？3.單克隆抗體的優(yōu)點？特異性強，靈敏度高，可大量制備。2.最終從哪兒提取單克隆抗體？（1）作為診斷試劑——最廣泛應(yīng)用準(zhǔn)確、高效、簡易、快速（如同位素標(biāo)記單克隆抗體，可診斷腫瘤、心血管畸形等）三、單克隆抗體的應(yīng)用（2）治療疾病和運載藥物生物導(dǎo)彈=單克隆抗體+藥物（治療腫瘤）(“生物導(dǎo)彈”—單抗導(dǎo)向，藥物為彈頭)單克隆抗體的應(yīng)用療效高、副作用小1、科學(xué)家用小鼠骨髓瘤細胞與某種細胞融合，得到雜交細胞，經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生大量的單克隆抗體，與骨髓瘤細胞融合的是（）A.經(jīng)過免疫的B淋巴細胞B.沒經(jīng)過免疫的T淋巴細胞

C.經(jīng)過免疫的T淋巴細胞D.沒經(jīng)過免疫的Ｂ淋巴細胞A鞏固練習(xí)2.動物細胞融合與植物體細胞雜交的比較中，正確的是（）誘導(dǎo)融合的方法完全相同B.所用的技術(shù)手段基本相同C.操作步驟基本相同D.都能形成雜種細胞D3.單克隆抗體制備過程中培育的雜交細胞是（）A.由小鼠能產(chǎn)生抗體的B淋巴細胞與肝細胞融合B.由小鼠一個B淋巴細胞誘導(dǎo)融合而成C.由小鼠一個B淋巴細胞與肌瘤細胞誘導(dǎo)融合而成D.由小鼠一個B淋巴細胞與骨髓瘤細胞誘導(dǎo)融合而成D4.只能使動物細胞融合的常用誘導(dǎo)方法是（）

A．PEG

B．滅活的病毒C．電刺激D．離心B5.單克隆抗體制備過程中，骨髓瘤細胞和B淋巴細胞誘導(dǎo)融合后，要用特定培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞，在這種培養(yǎng)基上不能存活增殖的細胞是（）①淋巴細胞②小鼠骨髓瘤細胞③B淋巴細胞自身融合細胞④小鼠骨髓瘤細胞自身融合細胞⑤雜交瘤細胞A.②④B.①③⑤

C.①②③④

D.②③C6.“生物導(dǎo)彈”是指 （）A.單克隆抗體B.雜交瘤細胞C.產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細胞D.在單克隆抗體上連接抗癌藥物

D單克隆抗體的制備有夢想，才會有創(chuàng)