微生物學藥學專業(yè)免疫學應用課件

微生物學藥學專業(yè)免疫學應用微生物學藥學專業(yè)免疫學應用第一節(jié)免疫學預防第一節(jié)免疫學預防免疫天然獲得性被動主動人工天然人工天然自然感染（隱性、顯性）抗毒素免疫球蛋白疫苗類毒素來自母親的抗體（IgG，sIgA）區(qū)別免疫天然獲得性被動主動人工天然人工天然自然感染抗毒素疫苗來自天然被動免疫:

母親通過胎盤將IgG、通過初乳將IgA傳給嬰兒。天然被動免疫:母親通過胎盤將IgG、通過初乳一、人工主動免疫概念：給機體輸入抗原物質，使免疫系統(tǒng)因抗原的刺激，產生類似感染時所發(fā)生的免疫過程，從而產生特異性免疫力。疫苗的概念：1.將細菌制作的人工主動免疫的生物制劑稱為菌苗。2.將病毒、立克次體、螺旋體等制成的人工主動免疫的生物制劑稱為疫苗。3.國際上將細菌制劑、病毒制劑以及類毒素統(tǒng)稱為疫苗。一、人工主動免疫概念：給機體輸入抗原物質，使免疫系統(tǒng)因抗原的抗原(Ag)與T細胞結合，激活T細胞記憶T細胞活化的T殺傷細胞與B細胞結合，誘導B細胞釋放抗體記憶B細胞活化的B細胞抗體抗原(Ag)與T細胞結合，激活T細胞記憶T細胞活化的T殺免疫記憶AB白喉疫苗DE抗白喉抗體白喉Bmcell抗白喉抗體白喉Bmcell免疫記憶A抗白喉抗體白喉Bmcell抗白喉抗體白喉Bm活疫苗死疫苗類毒素

用于主動免疫的疫苗活疫苗用于主動免疫的疫苗活疫苗：由

減毒或無毒力的活病原微生物制成。常見種類：卡介苗、麻疹活疫苗、脊髓灰質炎活疫苗。

死疫苗：病原微生物經(jīng)理化方法滅活制成。常見種類：傷寒、百日咳、霍亂、鉤端螺旋體病、流感、狂犬病、乙型腦炎疫苗活疫苗：由減毒或無毒力的活病原微生物制成。常見種類：卡介活疫苗與死疫苗的比較特點制劑特點

接種劑量及次數(shù)恢復傾向無毒或減毒的活微生物量較小，一般僅需要一次相對穩(wěn)定性不穩(wěn)定可以回復為毒株強毒死微生物量較大，需要多次接種較穩(wěn)定不回復為毒株免疫效果較好，維持3-5年甚至更長較差，維持半年至一年活疫苗死疫苗誘導的免疫類型體液免疫和細胞免疫體液免疫為主活疫苗與死疫苗的比較特點制劑特點接種劑量及次數(shù)恢復傾向無毒活疫苗病毒疫苗脊髓灰質炎,麻疹,腮腺炎,風疹,雞水痘,甲肝,黃熱病。結核(BCG).活菌疫苗（唯一）死病毒疫苗(加熱,化學或紫外光照射)流感,狂犬病

傷寒,霍亂,百日咳etc.死疫苗死菌疫苗（大多數(shù)細菌）常見的疫苗活疫苗病毒疫苗脊髓灰質炎,麻疹,腮腺炎,風疹,雞水類毒素概念：種類：類毒素概念：新型疫苗1.亞單位疫苗：腦膜炎球菌2.合成肽疫苗3.基因工程疫苗重組乙型肝炎病毒表面抗原

新型疫苗1.亞單位疫苗：二、人工被動免疫將一個免疫了的供體的血清或免疫球蛋白轉入到一個未免疫的個體.

沒有抗原刺激免疫系統(tǒng)免疫細胞？二、人工被動免疫將一個免疫了的供體的血清或免疫球蛋白轉入到一免疫血清概念：是指用免疫動物后獲得的免疫血清或從機體組織中提取制成的免疫球蛋白，主要成分為抗體。常用的種類有：（一）抗毒素血清（二）胎盤丙種球蛋白和人血清丙種球蛋白（三）抗菌免疫血清（四）抗病毒免疫血清（五）抗淋巴細胞丙種球蛋白免疫血清概念：是指用免疫動物后獲得的免疫血清或從機體組織中提破傷風抗毒素(馬血清)異源?同源人工注射人的球蛋白或免疫動物的球蛋白。破傷風抗毒素異源?馬血清抗毒素的兩重性：2、異種抗原，可刺激機體產生抗馬血清抗體，或超敏反應（I，III）。1、特異性抗體----中和毒素馬血清抗毒素的兩重性：2、異種抗原，可刺激機體產生抗馬血清抗人工主動免疫與人工被動免疫區(qū)別點人工主動免疫人工被動免疫接種物抗原抗體免疫力出現(xiàn)時間慢，要經(jīng)過1-4周誘導期快，即刻產生免疫力維持時間長（數(shù)月-數(shù)年）較短（2周-數(shù)周）用途預防治療或緊急預防人工主動免疫與人工被動免疫區(qū)別點人工主動免疫人工被動免疫接種免疫學治療第二節(jié)免疫學治療第二節(jié)（一）免疫增強劑概念：是增強、促進和調節(jié)機體免疫功能的生物制劑或非生物制劑。常見種類：免疫因子微生物制劑化學藥物中藥制劑常用來治療免疫缺陷、病毒感染性疾病和腫瘤。（一）免疫增強劑概念：是增強、促進和調節(jié)機體免疫功能的生物制細胞因子細胞因子作為一類重要和有效的生物反應調節(jié)劑，正逐漸稱為一種常規(guī)手段應用于免疫治療。目前已在臨床得到應用的細胞因子包括IL、IFN、CSF、TNF等。它們主要用于免疫缺陷、自身免疫、病毒感染性疾病和腫瘤的治療。細胞因子細胞因子作為一類重要和有效的生物反應調節(jié)劑，正逐漸稱微生物學藥學專業(yè)免疫學應用課件過繼免疫過繼免疫治療：過繼免疫是將對疾病有免疫力的供者的免疫應答產物轉移給其他個體，或自體的細胞經(jīng)體外處理后回輸自身，以發(fā)揮治療疾病的作用。用于過繼免疫的物質：包括免疫血清、免疫細胞、細胞因子如轉移因子、免疫核糖核酸等。過繼免疫過繼免疫治療：過繼免疫是將對疾病有免疫力的供者的免疫骨髓干細胞移植概念：是取患者或健康人的骨髓回輸給患者，讓骨髓中的干細胞進入患者體內定居、分化、增殖，使患者恢復造血功能和免疫力。類型：1.自體骨髓干細胞移植2.異體骨髓干細胞移植3.臍血干細胞移植應用：1.免疫缺陷病2.再生障礙性貧血3.白血病骨髓干細胞移植概念：是取患者或健康人的骨髓回輸給患者，讓骨髓（二）免疫抑制劑概念：是一類抑制機體免疫功能的生物制劑或非生物制劑。常見種類：1.真菌代謝產物2.McAb3.抗腫瘤藥物4.中藥制劑5.激素特點：1.作用是非特異性2.大多有毒副作用（二）免疫抑制劑概念：是一類抑制機體免疫功能的生物制劑或非生治療性疫苗概念：是以抗原為治療劑，用特定的抗原成分制成的疫苗。進入機體后可增強免疫應答或誘導免疫耐受，從而達到治療疾病的目的。用途：

1.增強免疫應答的疫苗：治療感染和腫瘤。

2.誘導免疫耐受的疫苗：治療自身免疫病和超敏反應，防止免疫排斥。治療性疫苗概念：是以抗原為治療劑，用特定的抗原成分制成的疫苗第三節(jié)免疫學診斷一、體液免疫測定法第三節(jié)免疫學診斷一、體液免疫測定法（一）抗原抗體反應的原理和特點原理：抗原決定簇與抗體的抗原結合部位間存在結構的互補性，二者相互結合，在適宜條件下，出現(xiàn)可見反應。原則：用已知抗體檢測未知抗原，也可用已知抗原檢測未知抗體。特點：

1.特異性2.可見性3.可逆性（一）抗原抗體反應的原理和特點原理：抗原決定簇與抗體的抗原結1.特異性

一種抗原一般僅能與由它刺激所產生的抗體結合，這種抗原-抗體結合反應的專一性即特異性。1.特異性2.可見性若抗原、抗體的數(shù)量比例恰當，抗體分子的兩個Fab段分別與兩個抗原分子結合，相互交叉連接成網(wǎng)格狀復合體，反應體系中基本無游離的抗原或抗體。此時，可形成肉眼可見的明顯反應物（沉淀物或凝集物）。因此，確定抗原、抗體的最適比例十分重要，應根據(jù)抗原的物理性狀，對抗原或抗體進行稀釋，以確定最適比例。2.可見性若抗原、抗體的數(shù)量比例恰當，抗體分子的兩個Fab段3.可逆性抗原與抗體的結合為分子表面的非共價結合，結合穩(wěn)定且可逆。在一定條件下，抗原抗體結合形成的復合物可被解離，如低pH、高濃度鹽、凍融等。解離后的抗原或抗體分子仍保持原有的理化特性和生物學活性。如解離后的外毒素恢復其毒性，細菌仍可存活。3.可逆性抗原與抗體的結合為分子表面的非共價結合，結合穩(wěn)定且（二）抗原或抗體的檢測方法

根據(jù)抗原的性質、結合反應的現(xiàn)象、參與反應的成分因素，可將抗原抗體反應分為：凝集反應沉淀反應補體參與的反應采用標記物的抗原抗體反應（二）抗原或抗體的檢測方法根據(jù)抗原的性質、結合反應的現(xiàn)象、1.凝集反應概念：細菌、紅細胞等顆粒性抗原與相應抗體結合后形成凝集團塊，此類反應稱為凝集反應。方法：（1）直接凝集（2）間接凝集1.凝集反應概念：細菌、紅細胞等顆粒性抗原與相應抗體結合后形（1）直接凝集將細菌或紅細胞與相應抗體直接反應，出現(xiàn)細菌凝集或紅細胞凝集現(xiàn)象。玻片法：是用已知抗體與相應抗原在玻片上反應，用于抗原的定性檢測，如ABO血型鑒定、細菌鑒定。試管法：是在試管中連續(xù)稀釋待檢血清，加入已知顆粒性抗原，用于抗體的定量檢測，如診斷傷寒病的肥達試驗。（1）直接凝集將細菌或紅細胞與相應抗體直接反應，出現(xiàn)細菌凝（2）間接凝集概念：將可溶性抗原包被在與免疫無關的載體顆粒表面，再與相應抗體反應，出現(xiàn)顆粒物凝集的現(xiàn)象。常用的載體：

人O型血紅細胞聚苯乙烯乳膠顆粒反應的類型：（2）間接凝集概念：將可溶性抗原包被在與免疫無關的載體顆粒表間接凝集反應的類型根據(jù)致敏載體用的是抗原或抗體以及凝集反應的方式，間接凝集反應可分為：（正向）間接凝集反應：用抗原致敏載體以檢測標本中的相應抗體。反向間接凝集反應：用特異性抗體致敏載體以檢測標本中的相應抗原。間接凝集抑制反應間接凝集反應的類型根據(jù)致敏載體用的是抗原或抗體以及凝集反應的間接凝集抑制反應診斷試劑：為抗原致敏的顆粒載體及相應的抗體，用于檢測標本中是否存在與致敏抗原相同的抗原。檢測方法：為將標本先與抗體試劑作用，然后再加入致敏的載體，若出現(xiàn)凝集現(xiàn)象，說明標本中不存在相同抗原，抗體試劑未被結合，因此仍與載體上的抗原起作用。如標本中存在相同抗原，則凝集反應被抑制。間接凝集抑制反應診斷試劑：為抗原致敏的顆粒載體及相應的抗體，2、沉淀反應概念：血清蛋白質、細胞裂解液或組織浸液等可溶性抗原與相應抗體結合后出現(xiàn)沉淀物，此類反應稱為沉淀反應。方法：沉淀反應多用半固體瓊脂凝膠作為介質進行瓊脂擴散或免疫擴散。即可溶性抗原與抗體在凝膠中擴散，在比例合適處相遇時形成可見的白色沉淀。2、沉淀反應概念：血清蛋白質、細胞裂解液或組織浸液等可溶性抗（1）單向瓊脂擴散方法：將一定量已知抗體混于瓊脂凝膠中制成瓊脂板，在適當位置打孔后將抗原加入孔中擴散。結果：抗原在擴散過程中與凝膠中的抗體相遇，形成以抗原孔為中心的沉淀環(huán)，環(huán)的直徑與抗原含量呈正相關。取已知量抗原繪制標準曲線，可根據(jù)所形成沉淀環(huán)的直徑，從標準曲線中查出待檢標本的抗原含量。應用：本法常用于定量測定血清IgG、IgM、IgA和C3等。（1）單向瓊脂擴散方法：將一定量已知抗體混于瓊脂凝膠中制（2）雙向免疫擴散將抗原與抗體分別加于瓊脂凝膠的小孔中，二者自由向四周擴散，在相遇處形成沉淀線。若反應體系中含兩種以上抗原-抗體系統(tǒng)，則小孔間可出現(xiàn)兩條以上沉淀線。本法常用于抗原或抗體的定性檢測、組成和兩種抗原的相關性分析。（2）雙向免疫擴散將抗原與抗體分別加于瓊脂凝膠的小孔中，（3）免疫電泳方法：先將待檢血清標本作瓊脂凝膠電泳，血清中各蛋白組份被分為不同區(qū)帶，然后按電泳方向平行挖一小槽，加入相應抗血清，與已分成區(qū)帶的蛋白抗原成分作雙向免疫擴散，在各區(qū)帶相應位置形成沉淀弧。結果：對照正常血清形成的沉淀弧數(shù)量、位置和形態(tài)，可分析標本中所含抗原成分的性質和含量。應用：該法常用于血清蛋白種類分析，以觀察Ig異常增多或缺失，可診斷骨髓瘤及性聯(lián)低丙種球蛋白血癥等疾病。（3）免疫電泳方法：先將待檢血清標本作瓊脂凝膠電泳，血清中各（4）免疫比濁方法：在一定量抗體中分別加入遞增量的抗原，經(jīng)一定時間形成免疫復合物，液體混濁。結果：用濁度計測量反應液體的濁度，復合物形成越多則濁度越高，可繪制標準曲線并依據(jù)反應液體的濁度推算樣品中抗原含量。應用：該法快速簡便，可取代單向免疫擴散用于測定Ig含量。（4）免疫比濁方法：在一定量抗體中分別加入遞增量的抗原，經(jīng)一3.免疫標記技術概念：免疫標記技術乃用熒光素、酶或放射性核素等標記抗體或抗原，進行抗原-抗體反應。標記物與抗體或抗原連接后并不改變后者的免疫特性。優(yōu)點：具有靈敏度高、快速、可定性、定量、定位等優(yōu)點。是目前應用最為廣泛的免疫學檢測技術。3.免疫標記技術概念：免疫標記技術乃用熒光素、酶或放射性核素（1）免疫熒光法(IF)

概念：用熒光素與抗體連接成熒光抗體，再與待檢標本中抗原反應，置熒光顯微鏡下觀察，抗原-抗體復合物散發(fā)熒光，借此鑒定或定位標本中的抗原。常用的熒光素：有異硫氰酸熒光素(FITC)和藻紅蛋白（PE），前者發(fā)黃綠色熒光，后者發(fā)紅色熒光。方法：（1）免疫熒光法(IF)概念：用熒光素與抗體連接成熒光抗體直接熒光法方法：將熒光素直接標記抗體，對標本進行染色。優(yōu)點：是特異性高。缺點：是檢查任一抗原均須制備相應熒光抗體。

直接熒光法方法：將熒光素直接標記抗體，對標本進行染色。間接熒光法方法：用一抗與標本中抗原結合，再用熒光素標記的二抗染色。優(yōu)點：是敏感度比直接法高，制備一種熒光素標記的二抗即可用于多種抗原的檢查，但非特異性反應亦增加。間接熒光法方法：用一抗與標本中抗原結合，再用熒光素標記的二抗免疫熒光法的應用檢查細菌、病毒、螺旋體等抗原或抗體，用于診斷傳染病。鑒定免疫細胞表面的CD分子。檢測自身免疫病的抗核抗體。免疫熒光法的應用檢查細菌、病毒、螺旋體等抗原或抗體，用于診斷（2）酶免疫測定(EIA)方法：將抗原-抗體反應的特異性與酶催化作用的高效性相結合，通過酶作用于底物后的顯色反應判定結果。結果觀察：可用目測定性，也可用酶標測定儀測定光密度（OD）值以反映抗原含量，靈敏度可達每毫升ng甚至pg水平。常用于標記的酶：有辣根過氧化物酶、堿性磷酸酶等。常用的方法：酶聯(lián)免疫吸附試驗：測定可溶性抗原或抗體酶免疫組化法：檢測組織或細胞表面抗原（2）酶免疫測定(EIA)方法：將抗原-抗體反應的特異性與酶酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)是酶免疫測定中應用最廣的技術?；痉椒ㄊ牵簩⒁阎乖蚩贵w吸附在固相載體（聚苯乙烯微量反應板）表面，使抗原-抗體反應在固相表面進行，用洗滌法將固相上的抗原-抗體復合物與液相中的游離成份分開。ELISA的操作方法很多，簡介以下方法：

雙抗體夾心法間接法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)是酶免疫測定中應用最廣的技術。雙抗體夾心法用于檢查特異性抗原。方法：將已知抗體包被固相，加入待檢標本，標本中若含有相應抗原即與固相表面的抗體結合，洗滌去除未結合成分，加入該抗原特異的酶標記抗體，洗去未結合的酶標記抗體，加底物后顯色。若標本中無相應抗原，固相表面即無抗原結合，加入的酶標記抗體則不能結合于固相并被洗滌去除，當加入無色底物后，因無酶催化故不顯色。

雙抗體夾心法用于檢查特異性抗原。間接法用于檢查特異性抗體。方法：用已知抗原包被固相，加入待檢血清標本，再加酶標記的二抗，加底物觀察顯色反應。ELISA敏感性高、操作簡便，配套儀器設備的發(fā)展使操作程序規(guī)范化和自動化，并進一步提高了穩(wěn)定性，被廣泛用于檢測多種病原體抗原或抗體、血液及其它體液中微量蛋白成分、細胞因子等。間接法用于檢查特異性抗體。免疫組化技術概念：是應用標記的抗體與組織或細胞抗原發(fā)生反應，結合形態(tài)學觀察，對抗原作定性、定量、定位檢測。常用的技術包括：酶免疫組化（辣根過氧化物酶標記）免疫金組化（膠體金顆粒標記）免疫電鏡技術（鐵蛋白、膠體金、過氧化物酶標記）免疫組化技術概念：是應用標記的抗體與組織或細胞抗原發(fā)生反應，

（3）放射免疫測定法(RIA)概念：用放射性核素標記抗原或抗體進行免疫學檢測。它將放射性核素具有的高靈敏度和抗原-抗體反應的特異性相結合，使檢測的靈敏度達pg水平。常用于標記的放射性核素有：125I和131I。采用的方法分為：液相法和固相法兩種。應用：常用于測定微量物質，如胰島素、生長激素、甲狀腺素、孕酮等激素，嗎啡、地高辛等藥物，以及IgE等。（3）放射免疫測定法(RIA)概念：用放射性核素標記抗原或二、細胞免疫測定法檢測淋巴細胞的類別、數(shù)量與功能，是判斷機體免疫功能狀態(tài)的重要手段。患者外周血是主要的標本來源，但僅代表再循環(huán)的淋巴細胞。實驗動物還可取胸腺、脾臟、淋巴結等作為標本進行檢查。二、細胞免疫測定法檢測淋巴細胞的類別、數(shù)量與功能，是判斷機體（一）體外測定法1.E花結試驗：

人成熟T細胞表面CD2分子是綿羊紅細胞（SRBC）受體，能結合SRBC而形成花結。（一）體外測定法1.E花結試驗：2.T細胞增殖試驗原理：植物血凝素（PHA）、刀豆蛋白A（ConA）等絲裂原以及抗CD3抗體等均能非特異性激活培養(yǎng)的T細胞，使其轉化為淋巴母細胞。在增殖過程中，細胞DNA、RNA、蛋白質合成增加，細胞形態(tài)發(fā)生改變，最終細胞分裂。方法：3H-TdR摻入法2.T細胞增殖試驗原理：植物血凝素（PHA）、刀豆蛋白A（C3H-TdR摻入法方法：在外周血單個核細胞（PBMC）中加入PHA共同培養(yǎng)，終止培養(yǎng)前8-15小時加入氚標記的胸腺嘧啶核苷（3H-TdR），由于3H-TdR能摻入細胞合成的DNA中，故細胞增殖水平越高，摻入的放射性核素亦越多。培養(yǎng)結束后收集細胞，用液體閃爍儀測定樣品的放射活性，可反映細胞的增殖狀況。特點：該法靈敏可靠，應用廣泛，但需特殊儀器，易發(fā)生放射性污染。3H-TdR摻入法方法：在外周血單個核細胞（PBMC）中加入3.T細胞亞群測定法用間接免疫熒光法檢測淋巴細胞表面標志或鑒定細胞亞群。3.T細胞亞群測定法用間接免疫熒光法檢測淋巴細胞表面標志或4.細胞因子檢測應用：了解其免疫調節(jié)作用；鑒定分離的淋巴細胞；監(jiān)測某些疾病狀態(tài)的細胞免疫功能。檢測方法包括以下三種：

（1）ELISA（2）生物活性測定法（3）聚合酶鏈反應（PCR）4.細胞因子檢測應用：了解其免疫調節(jié)作用；鑒定分離的淋巴細胞（1）ELISA用抗細胞因子抗體包被固相的雙抗體夾心法，也可使用RIA法。此法可用于檢測IL-2、IL-5、IL-6等。（1）ELISA用抗細胞因子抗體包被固相的雙抗體夾心法，也可（2）生物活性測定法根據(jù)細胞因子生物學活性選用相應實驗系統(tǒng)，包括細胞增殖法、直接殺傷法、保護細胞免受病毒致病變法等。細胞增殖法：如選用細胞因子依賴的細胞株，其增殖反應與細胞因子量呈正相關，通過與相應標準品比較，可確定樣品中細胞因子（如IL-1、IL-2、IL-4、IL-6）含量。（2）生物活性測定法根據(jù)細胞因子生物學活性選用相應實驗系統(tǒng)，（3）聚合酶鏈反應（PCR）根據(jù)細胞因子的核苷酸序列，設計相應細胞因子的引物，借助逆轉錄PCR測定待檢細胞中特異性mRNA。該法可用于多種細胞因子的檢定。（3）聚合酶鏈反應（PCR）根據(jù)細胞因子的核苷酸序列，設計相（二）體外測定法

皮膚試驗原理：正常機體對特定抗原產生細胞免疫應答后，再用相同抗原作皮膚試驗，即出現(xiàn)以局部紅腫為特征的遲發(fā)型超敏反應，細胞免疫正常者呈陽性反應，而細胞免疫低下者則呈陰性反應。皮膚試驗方法簡便，可幫助診斷某些病原微生物感染（結核桿菌、麻風桿菌）、免疫缺陷病等。皮膚試驗常用的生物性抗原多從病原體中提取，如結核菌素、麻風菌素、鏈激酶-鏈道酶、念珠菌素、腮腺炎病毒等。（二）體外測定法

皮膚試驗原理：正常機體對特定抗原產生細胞免微生物學藥學專業(yè)免疫學應用微生物學藥學專業(yè)免疫學應用第一節(jié)免疫學預防第一節(jié)免疫學預防免疫天然獲得性被動主動人工天然人工天然自然感染（隱性、顯性）抗毒素免疫球蛋白疫苗類毒素來自母親的抗體（IgG，sIgA）區(qū)別免疫天然獲得性被動主動人工天然人工天然自然感染抗毒素疫苗來自天然被動免疫:

母親通過胎盤將IgG、通過初乳將IgA傳給嬰兒。天然被動免疫:母親通過胎盤將IgG、通過初乳一、人工主動免疫概念：給機體輸入抗原物質，使免疫系統(tǒng)因抗原的刺激，產生類似感染時所發(fā)生的免疫過程，從而產生特異性免疫力。疫苗的概念：1.將細菌制作的人工主動免疫的生物制劑稱為菌苗。2.將病毒、立克次體、螺旋體等制成的人工主動免疫的生物制劑稱為疫苗。3.國際上將細菌制劑、病毒制劑以及類毒素統(tǒng)稱為疫苗。一、人工主動免疫概念：給機體輸入抗原物質，使免疫系統(tǒng)因抗原的抗原(Ag)與T細胞結合，激活T細胞記憶T細胞活化的T殺傷細胞與B細胞結合，誘導B細胞釋放抗體記憶B細胞活化的B細胞抗體抗原(Ag)與T細胞結合，激活T細胞記憶T細胞活化的T殺免疫記憶AB白喉疫苗DE抗白喉抗體白喉Bmcell抗白喉抗體白喉Bmcell免疫記憶A抗白喉抗體白喉Bmcell抗白喉抗體白喉Bm活疫苗死疫苗類毒素

用于主動免疫的疫苗活疫苗用于主動免疫的疫苗活疫苗：由

減毒或無毒力的活病原微生物制成。常見種類：卡介苗、麻疹活疫苗、脊髓灰質炎活疫苗。

死疫苗：病原微生物經(jīng)理化方法滅活制成。常見種類：傷寒、百日咳、霍亂、鉤端螺旋體病、流感、狂犬病、乙型腦炎疫苗活疫苗：由減毒或無毒力的活病原微生物制成。常見種類：卡介活疫苗與死疫苗的比較特點制劑特點

接種劑量及次數(shù)恢復傾向無毒或減毒的活微生物量較小，一般僅需要一次相對穩(wěn)定性不穩(wěn)定可以回復為毒株強毒死微生物量較大，需要多次接種較穩(wěn)定不回復為毒株免疫效果較好，維持3-5年甚至更長較差，維持半年至一年活疫苗死疫苗誘導的免疫類型體液免疫和細胞免疫體液免疫為主活疫苗與死疫苗的比較特點制劑特點接種劑量及次數(shù)恢復傾向無毒活疫苗病毒疫苗脊髓灰質炎,麻疹,腮腺炎,風疹,雞水痘,甲肝,黃熱病。結核(BCG).活菌疫苗（唯一）死病毒疫苗(加熱,化學或紫外光照射)流感,狂犬病

傷寒,霍亂,百日咳etc.死疫苗死菌疫苗（大多數(shù)細菌）常見的疫苗活疫苗病毒疫苗脊髓灰質炎,麻疹,腮腺炎,風疹,雞水類毒素概念：種類：類毒素概念：新型疫苗1.亞單位疫苗：腦膜炎球菌2.合成肽疫苗3.基因工程疫苗重組乙型肝炎病毒表面抗原

新型疫苗1.亞單位疫苗：二、人工被動免疫將一個免疫了的供體的血清或免疫球蛋白轉入到一個未免疫的個體.

沒有抗原刺激免疫系統(tǒng)免疫細胞？二、人工被動免疫將一個免疫了的供體的血清或免疫球蛋白轉入到一免疫血清概念：是指用免疫動物后獲得的免疫血清或從機體組織中提取制成的免疫球蛋白，主要成分為抗體。常用的種類有：（一）抗毒素血清（二）胎盤丙種球蛋白和人血清丙種球蛋白（三）抗菌免疫血清（四）抗病毒免疫血清（五）抗淋巴細胞丙種球蛋白免疫血清概念：是指用免疫動物后獲得的免疫血清或從機體組織中提破傷風抗毒素(馬血清)異源?同源人工注射人的球蛋白或免疫動物的球蛋白。破傷風抗毒素異源?馬血清抗毒素的兩重性：2、異種抗原，可刺激機體產生抗馬血清抗體，或超敏反應（I，III）。1、特異性抗體----中和毒素馬血清抗毒素的兩重性：2、異種抗原，可刺激機體產生抗馬血清抗人工主動免疫與人工被動免疫區(qū)別點人工主動免疫人工被動免疫接種物抗原抗體免疫力出現(xiàn)時間慢，要經(jīng)過1-4周誘導期快，即刻產生免疫力維持時間長（數(shù)月-數(shù)年）較短（2周-數(shù)周）用途預防治療或緊急預防人工主動免疫與人工被動免疫區(qū)別點人工主動免疫人工被動免疫接種免疫學治療第二節(jié)免疫學治療第二節(jié)（一）免疫增強劑概念：是增強、促進和調節(jié)機體免疫功能的生物制劑或非生物制劑。常見種類：免疫因子微生物制劑化學藥物中藥制劑常用來治療免疫缺陷、病毒感染性疾病和腫瘤。（一）免疫增強劑概念：是增強、促進和調節(jié)機體免疫功能的生物制細胞因子細胞因子作為一類重要和有效的生物反應調節(jié)劑，正逐漸稱為一種常規(guī)手段應用于免疫治療。目前已在臨床得到應用的細胞因子包括IL、IFN、CSF、TNF等。它們主要用于免疫缺陷、自身免疫、病毒感染性疾病和腫瘤的治療。細胞因子細胞因子作為一類重要和有效的生物反應調節(jié)劑，正逐漸稱微生物學藥學專業(yè)免疫學應用課件過繼免疫過繼免疫治療：過繼免疫是將對疾病有免疫力的供者的免疫應答產物轉移給其他個體，或自體的細胞經(jīng)體外處理后回輸自身，以發(fā)揮治療疾病的作用。用于過繼免疫的物質：包括免疫血清、免疫細胞、細胞因子如轉移因子、免疫核糖核酸等。過繼免疫過繼免疫治療：過繼免疫是將對疾病有免疫力的供者的免疫骨髓干細胞移植概念：是取患者或健康人的骨髓回輸給患者，讓骨髓中的干細胞進入患者體內定居、分化、增殖，使患者恢復造血功能和免疫力。類型：1.自體骨髓干細胞移植2.異體骨髓干細胞移植3.臍血干細胞移植應用：1.免疫缺陷病2.再生障礙性貧血3.白血病骨髓干細胞移植概念：是取患者或健康人的骨髓回輸給患者，讓骨髓（二）免疫抑制劑概念：是一類抑制機體免疫功能的生物制劑或非生物制劑。常見種類：1.真菌代謝產物2.McAb3.抗腫瘤藥物4.中藥制劑5.激素特點：1.作用是非特異性2.大多有毒副作用（二）免疫抑制劑概念：是一類抑制機體免疫功能的生物制劑或非生治療性疫苗概念：是以抗原為治療劑，用特定的抗原成分制成的疫苗。進入機體后可增強免疫應答或誘導免疫耐受，從而達到治療疾病的目的。用途：

1.增強免疫應答的疫苗：治療感染和腫瘤。

2.誘導免疫耐受的疫苗：治療自身免疫病和超敏反應，防止免疫排斥。治療性疫苗概念：是以抗原為治療劑，用特定的抗原成分制成的疫苗第三節(jié)免疫學診斷一、體液免疫測定法第三節(jié)免疫學診斷一、體液免疫測定法（一）抗原抗體反應的原理和特點原理：抗原決定簇與抗體的抗原結合部位間存在結構的互補性，二者相互結合，在適宜條件下，出現(xiàn)可見反應。原則：用已知抗體檢測未知抗原，也可用已知抗原檢測未知抗體。特點：

1.特異性2.可見性3.可逆性（一）抗原抗體反應的原理和特點原理：抗原決定簇與抗體的抗原結1.特異性

一種抗原一般僅能與由它刺激所產生的抗體結合，這種抗原-抗體結合反應的專一性即特異性。1.特異性2.可見性若抗原、抗體的數(shù)量比例恰當，抗體分子的兩個Fab段分別與兩個抗原分子結合，相互交叉連接成網(wǎng)格狀復合體，反應體系中基本無游離的抗原或抗體。此時，可形成肉眼可見的明顯反應物（沉淀物或凝集物）。因此，確定抗原、抗體的最適比例十分重要，應根據(jù)抗原的物理性狀，對抗原或抗體進行稀釋，以確定最適比例。2.可見性若抗原、抗體的數(shù)量比例恰當，抗體分子的兩個Fab段3.可逆性抗原與抗體的結合為分子表面的非共價結合，結合穩(wěn)定且可逆。在一定條件下，抗原抗體結合形成的復合物可被解離，如低pH、高濃度鹽、凍融等。解離后的抗原或抗體分子仍保持原有的理化特性和生物學活性。如解離后的外毒素恢復其毒性，細菌仍可存活。3.可逆性抗原與抗體的結合為分子表面的非共價結合，結合穩(wěn)定且（二）抗原或抗體的檢測方法

根據(jù)抗原的性質、結合反應的現(xiàn)象、參與反應的成分因素，可將抗原抗體反應分為：凝集反應沉淀反應補體參與的反應采用標記物的抗原抗體反應（二）抗原或抗體的檢測方法根據(jù)抗原的性質、結合反應的現(xiàn)象、1.凝集反應概念：細菌、紅細胞等顆粒性抗原與相應抗體結合后形成凝集團塊，此類反應稱為凝集反應。方法：（1）直接凝集（2）間接凝集1.凝集反應概念：細菌、紅細胞等顆粒性抗原與相應抗體結合后形（1）直接凝集將細菌或紅細胞與相應抗體直接反應，出現(xiàn)細菌凝集或紅細胞凝集現(xiàn)象。玻片法：是用已知抗體與相應抗原在玻片上反應，用于抗原的定性檢測，如ABO血型鑒定、細菌鑒定。試管法：是在試管中連續(xù)稀釋待檢血清，加入已知顆粒性抗原，用于抗體的定量檢測，如診斷傷寒病的肥達試驗。（1）直接凝集將細菌或紅細胞與相應抗體直接反應，出現(xiàn)細菌凝（2）間接凝集概念：將可溶性抗原包被在與免疫無關的載體顆粒表面，再與相應抗體反應，出現(xiàn)顆粒物凝集的現(xiàn)象。常用的載體：

人O型血紅細胞聚苯乙烯乳膠顆粒反應的類型：（2）間接凝集概念：將可溶性抗原包被在與免疫無關的載體顆粒表間接凝集反應的類型根據(jù)致敏載體用的是抗原或抗體以及凝集反應的方式，間接凝集反應可分為：（正向）間接凝集反應：用抗原致敏載體以檢測標本中的相應抗體。反向間接凝集反應：用特異性抗體致敏載體以檢測標本中的相應抗原。間接凝集抑制反應間接凝集反應的類型根據(jù)致敏載體用的是抗原或抗體以及凝集反應的間接凝集抑制反應診斷試劑：為抗原致敏的顆粒載體及相應的抗體，用于檢測標本中是否存在與致敏抗原相同的抗原。檢測方法：為將標本先與抗體試劑作用，然后再加入致敏的載體，若出現(xiàn)凝集現(xiàn)象，說明標本中不存在相同抗原，抗體試劑未被結合，因此仍與載體上的抗原起作用。如標本中存在相同抗原，則凝集反應被抑制。間接凝集抑制反應診斷試劑：為抗原致敏的顆粒載體及相應的抗體，2、沉淀反應概念：血清蛋白質、細胞裂解液或組織浸液等可溶性抗原與相應抗體結合后出現(xiàn)沉淀物，此類反應稱為沉淀反應。方法：沉淀反應多用半固體瓊脂凝膠作為介質進行瓊脂擴散或免疫擴散。即可溶性抗原與抗體在凝膠中擴散，在比例合適處相遇時形成可見的白色沉淀。2、沉淀反應概念：血清蛋白質、細胞裂解液或組織浸液等可溶性抗（1）單向瓊脂擴散方法：將一定量已知抗體混于瓊脂凝膠中制成瓊脂板，在適當位置打孔后將抗原加入孔中擴散。結果：抗原在擴散過程中與凝膠中的抗體相遇，形成以抗原孔為中心的沉淀環(huán)，環(huán)的直徑與抗原含量呈正相關。取已知量抗原繪制標準曲線，可根據(jù)所形成沉淀環(huán)的直徑，從標準曲線中查出待檢標本的抗原含量。應用：本法常用于定量測定血清IgG、IgM、IgA和C3等。（1）單向瓊脂擴散方法：將一定量已知抗體混于瓊脂凝膠中制（2）雙向免疫擴散將抗原與抗體分別加于瓊脂凝膠的小孔中，二者自由向四周擴散，在相遇處形成沉淀線。若反應體系中含兩種以上抗原-抗體系統(tǒng)，則小孔間可出現(xiàn)兩條以上沉淀線。本法常用于抗原或抗體的定性檢測、組成和兩種抗原的相關性分析。（2）雙向免疫擴散將抗原與抗體分別加于瓊脂凝膠的小孔中，（3）免疫電泳方法：先將待檢血清標本作瓊脂凝膠電泳，血清中各蛋白組份被分為不同區(qū)帶，然后按電泳方向平行挖一小槽，加入相應抗血清，與已分成區(qū)帶的蛋白抗原成分作雙向免疫擴散，在各區(qū)帶相應位置形成沉淀弧。結果：對照正常血清形成的沉淀弧數(shù)量、位置和形態(tài)，可分析標本中所含抗原成分的性質和含量。應用：該法常用于血清蛋白種類分析，以觀察Ig異常增多或缺失，可診斷骨髓瘤及性聯(lián)低丙種球蛋白血癥等疾病。（3）免疫電泳方法：先將待檢血清標本作瓊脂凝膠電泳，血清中各（4）免疫比濁方法：在一定量抗體中分別加入遞增量的抗原，經(jīng)一定時間形成免疫復合物，液體混濁。結果：用濁度計測量反應液體的濁度，復合物形成越多則濁度越高，可繪制標準曲線并依據(jù)反應液體的濁度推算樣品中抗原含量。應用：該法快速簡便，可取代單向免疫擴散用于測定Ig含量。（4）免疫比濁方法：在一定量抗體中分別加入遞增量的抗原，經(jīng)一3.免疫標記技術概念：免疫標記技術乃用熒光素、酶或放射性核素等標記抗體或抗原，進行抗原-抗體反應。標記物與抗體或抗原連接后并不改變后者的免疫特性。優(yōu)點：具有靈敏度高、快速、可定性、定量、定位等優(yōu)點。是目前應用最為廣泛的免疫學檢測技術。3.免疫標記技術概念：免疫標記技術乃用熒光素、酶或放射性核素（1）免疫熒光法(IF)

概念：用熒光素與抗體連接成熒光抗體，再與待檢標本中抗原反應，置熒光顯微鏡下觀察，抗原-抗體復合物散發(fā)熒光，借此鑒定或定位標本中的抗原。常用的熒光素：有異硫氰酸熒光素(FITC)和藻紅蛋白（PE），前者發(fā)黃綠色熒光，后者發(fā)紅色熒光。方法：（1）免疫熒光法(IF)概念：用熒光素與抗體連接成熒光抗體直接熒光法方法：將熒光素直接標記抗體，對標本進行染色。優(yōu)點：是特異性高。缺點：是檢查任一抗原均須制備相應熒光抗體。

直接熒光法方法：將熒光素直接標記抗體，對標本進行染色。間接熒光法方法：用一抗與標本中抗原結合，再用熒光素標記的二抗染色。優(yōu)點：是敏感度比直接法高，制備一種熒光素標記的二抗即可用于多種抗原的檢查，但非特異性反應亦增加。間接熒光法方法：用一抗與標本中抗原結合，再用熒光素標記的二抗免疫熒光法的應用檢查細菌、病毒、螺旋體等抗原或抗體，用于診斷傳染病。鑒定免疫細胞表面的CD分子。檢測自身免疫病的抗核抗體。免疫熒光法的應用檢查細菌、病毒、螺旋體等抗原或抗體，用于診斷（2）酶免疫測定(EIA)方法：將抗原-抗體反應的特異性與酶催化作用的高效性相結合，通過酶作用于底物后的顯色反應判定結果。結果觀察：可用目測定性，也可用酶標測定儀測定光密度（OD）值以反映抗原含量，靈敏度可達每毫升ng甚至pg水平。常用于標記的酶：有辣根過氧化物酶、堿性磷酸酶等。常用的方法：酶聯(lián)免疫吸附試驗：測定可溶性抗原或抗體酶免疫組化法：檢測組織或細胞表面抗原（2）酶免疫測定(EIA)方法：將抗原-抗體反應的特異性與酶酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)是酶免疫測定中應用最廣的技術。基本方法是：將已知抗原或抗體吸附在固相載體（聚苯乙烯微量反應板）表面，使抗原-抗體反應在固相表面進行，用洗滌法將固相上的抗原-抗體復合物與液相中的游離成份分開。ELISA的操作方法很多，簡介以下方法：

雙抗體夾心法間接法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)是酶免疫測定中應用最廣的技術。雙抗體夾心法用于檢查特異性抗原。方法：將已知抗體包被固相，加入待檢標本，標本中若含有相應抗原即與固相表面的抗體結合，洗滌去除未結合成分，加入該抗原特異的酶標記抗體，洗去未結合的酶標記抗體，加底物后顯色。若標本中無相應抗原，固相表面即無抗原結合，加入的酶標記抗體則不能結合于固相并被洗滌去除，當加入無色底物后，因無酶催化故不顯色。

雙抗體夾心法用于檢查特異性抗原。間接法用于檢查特異性抗體。方法：用已知抗原包被固相，加入待檢血清標本，再加酶標記的二抗，加底物觀察顯色反應。ELISA敏感性高、操作簡便，配套儀器設備的發(fā)展使操作程序規(guī)范化和自動化，并進一步提高了穩(wěn)定性，被廣泛用于檢測多種病原體抗原或抗體、血液及其它體液中微量蛋白成分、細胞因子等。間接法用于檢查特異性抗體。免疫組化技術概念：是應用標記的抗體與組織或細胞抗原發(fā)生反應，結合形態(tài)學觀察，對抗原作定性、定量、定位檢測。常用的技術包括：酶免疫組化（辣根過氧化物酶標記）免疫金組化（膠體金顆粒標記）免疫