病毒感染過程中病毒鋅指蛋白的功能研究,病毒學(xué)論文

病毒感染過程中病毒鋅指蛋白的功能研究,病毒學(xué)論文摘要：鋅指(zincfingers,ZF)構(gòu)造是一種廣泛存在于動植物、微生物包括很多病毒中的蛋白構(gòu)造，肽鏈中氨基酸殘基的特征基團與Zn2+結(jié)合進而穩(wěn)定構(gòu)成一種很短的、可自我折疊成“手指〞形狀的多肽空間構(gòu)型。具有ZF構(gòu)造的蛋白被稱為鋅指蛋白(zinc-fingerprotein,ZNF),研究發(fā)現(xiàn)，部分病毒能夠編碼具有ZF構(gòu)造的蛋白且該蛋白會影響到病毒的復(fù)制、成熟病毒粒子的包裝釋放、調(diào)節(jié)激活病毒轉(zhuǎn)錄和裂解性感染及協(xié)助病毒的先天免疫逃逸等。本文就當前病毒的ZNF在病毒感染經(jīng)過中發(fā)揮作用的研究進展作一綜述，為ZNF的深切進入研究及以ZNF為靶位點的抗病毒藥物研制提供參考。本文關(guān)鍵詞語:鋅指蛋白;鋅指;病毒感染，Abstract：Zincfinger(ZF)structureisakindofcommonproteinstructurewidelyexistinginanimals,plants,microorganismsincludingmanyviruses.ThecharacteristicgroupofaminoacidresiduesinthepeptidechaincombineswithZn2+,thusformingaveryshortpeptidespaceconfigurationwhichcanselffoldintofingershape.Zinc-fingerproteins(ZNF)areproteinswithzincfingerstructure.Ithasbeenfoundthatsomevirusescanencodezincfingerproteins,whichcanaffectvirusreplication,packagingandreleaseofmaturevirusparticles,regulateandactivatevirustranscriptionandcleavageinfection,andassistvirusininnateimmuneescape.Inthispaper,theresearchprogressoftheroleofZNFintheprocessofvirusinfectionisreviewed,whichprovidesareferenceforthefurtherstudyofZNFandthedevelopmentofitstargetingantiviraldrugs.Keyword：zincfingerprotein;zincfingers;viralinfection;鋅指(zincfingers,ZF)構(gòu)造是一套廣泛的蛋白構(gòu)造元件，其通過結(jié)合Zn2+來穩(wěn)定一種很短的能夠自我折疊的蛋白構(gòu)造[1],鋅指蛋白(zinc-fingerprotein,ZNF)是迄今在真核生物基因組中分布最廣的蛋白之一[2],可見ZF構(gòu)造在真核生物生命進程中扮演著特別重要的角色。很多病毒可以以編碼具有ZF構(gòu)造的蛋白且該構(gòu)造的改變會影響病毒的生物學(xué)特性，本文對常見的病毒ZF構(gòu)造蛋白在病毒感染中所發(fā)揮作用的研究進展作一綜述，以期為ZNF的研究提供參考。1、鋅指蛋白的構(gòu)造與種類鋅指(zincfingers,ZF)構(gòu)造是一種通過肽鏈中的半胱氨酸或組氨酸與鋅離子結(jié)合后自我折疊構(gòu)成的指狀空間構(gòu)造[3],其定義為：在一段氨基酸序列中，有幾個固定位置的半胱氨酸(cysteine,C)殘基或組氨酸(histidine,H)殘基，這些殘基與Zn2+特異性結(jié)合后，肽鏈旋轉(zhuǎn)折疊構(gòu)成一種穩(wěn)定的三維手指狀構(gòu)造，這一構(gòu)造被稱為ZF構(gòu)造[4]。鋅指蛋白(zinc-fingerproteins,ZNFs)通常是指由一系列具有重復(fù)構(gòu)造的ZF構(gòu)造組成的蛋白質(zhì)，可與DNA、RNA以及其他蛋白相結(jié)合并產(chǎn)生互相作用，進而對生物的生命經(jīng)過起到調(diào)節(jié)作用，在真核生物中研究頗為廣泛[5]。非洲爪蟾卵母細胞中的轉(zhuǎn)錄因子TFIIIa(transcriptionfactorIIIa)是第一個被鑒定為含有ZF構(gòu)造的蛋白[6,7],自此，研究人員開場對該領(lǐng)域展開研究。越來越多的研究表示清楚，很多病毒可以以編碼合成ZNF,且該蛋白構(gòu)造的改變會影響病毒的生物學(xué)特性，可見ZNF在病毒生命周期中扮演著特別重要的角色[8]。當前，已經(jīng)知道的ZF構(gòu)造有很多種類，根據(jù)其保守構(gòu)造域的不同以及半胱氨酸和組氨酸的數(shù)目和位置，可分為C2H2、C2HC、C3H、C4、C6、C4HC3、C3HC4、聯(lián)合型等多種類型[9]。最為常見的是C2H2型ZF,該ZF含有兩個半胱氨酸與兩個組氨酸，分別與鋅離子絡(luò)合后通過1個α螺旋與2個反向β折疊構(gòu)成一個手指狀構(gòu)造[10]。2、病毒鋅指蛋白在病毒感染中的作用病毒感染是指病毒通太多種途徑侵入機體，在易感宿主細胞中增殖并釋放到細胞外再侵入鄰近細胞的經(jīng)過。當前，發(fā)現(xiàn)能編碼ZNF的病毒包括：1型人類免疫缺陷病毒(HIV-1)、鼠白血病病毒(MuLV)、猴免疫缺陷病毒(SIV)、部分皰疹病毒(herpesvirus)、冠狀病毒(CoV)[11]、蝦白斑綜合征病毒(WSSV)[12]等。下文將對當前病毒的ZNF在病毒感染中所發(fā)揮作用的研究進展進行概述。2.1、逆轉(zhuǎn)錄病毒鋅指蛋白對病毒感染的影響逆轉(zhuǎn)錄病毒侵入宿主后，在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下，以病毒基因組RNA為模板合成cDNA,之后再以該DNA為模板進行轉(zhuǎn)錄、翻譯等一系列生命活動[13]。絕大部分逆轉(zhuǎn)錄病毒的核衣殼蛋白(nucleocapsid,NC)域包含1～2個ZF構(gòu)造-C2HC(圖1),ZF之間由基本序列29RAPRKKG35連接[14],該構(gòu)造高度保守，對病毒基因組RNA組裝期間的辨別和包裝具有重要作用，介入病毒的早期感染[15,16]。圖1NC區(qū)域ZF構(gòu)造示意圖[17]Fig.1SchematicdiagramofZFstructureinNCregion[17]研究證明，逆轉(zhuǎn)錄病毒的NC蛋白構(gòu)造域能夠與病毒編碼的Tat蛋白產(chǎn)生互作，NC蛋白通過在胞質(zhì)中堆積來阻礙Tat蛋白介導(dǎo)的病毒mRNA的轉(zhuǎn)錄以及翻譯，進而調(diào)節(jié)病毒的復(fù)制[18]。NC蛋白還能與宿主蛋白Alix發(fā)生互相作用，Alix是一種內(nèi)吞體分選轉(zhuǎn)運復(fù)合體(endosomalsortingcomplexrequiredfortransport,ESCRT),介導(dǎo)內(nèi)吞小泡出芽和多泡體(multivesicularbodies,MVBs)的構(gòu)成[19],其擁有2個構(gòu)造域：N端回形域Bro1和中心V型構(gòu)造域，NC蛋白能夠與Bro1相結(jié)合，介入病毒的釋放[20]。2.1.1、人類免疫缺陷病毒NC蛋白人類免疫缺陷病毒(humanimmunodeficiencyvirus,HIV)的NC蛋白是HIV的Gag蛋白的前體多蛋白(pr55Gag)的N末端蛋白[21,22]。pr55Gag蛋白介入構(gòu)成寡聚體支架，促進病毒基因組RNA的組裝，構(gòu)成新的感染顆粒[23,24],是病毒在反轉(zhuǎn)錄經(jīng)過中的主要構(gòu)造蛋白。病毒組裝集中在病毒衣殼的主要構(gòu)造蛋白——Gag蛋白上，該蛋白是一個55ku的多聚蛋白[25],包含4個主要的子域，即基質(zhì)(MA)、衣殼(CA)、核仁(NC)和p6。華而不實，NC在病毒粒子的組裝、萌芽以及成熟階段皆具有重要功能。首先，作為逆轉(zhuǎn)錄病毒的復(fù)制核心蛋白，NC在其內(nèi)部穩(wěn)定的ZF基序作用下可行使核酸伴侶功能，即與基因組RNA構(gòu)成二聚體，并促進其反轉(zhuǎn)錄的發(fā)生[26,27,28]。其次，NC蛋白能募集大量宿主蛋白，包括肌動蛋白和肌動蛋白結(jié)合蛋白、親環(huán)蛋白A、泛素以及賴氨酰-tRNA合成酶和很多RNA結(jié)合蛋白[29,30],華而不實，雙鏈RNA結(jié)合蛋白Staufen1[31]是一種介入mRNA轉(zhuǎn)運和翻譯的宿主因子，NC蛋白與Staufen1互相作用調(diào)節(jié)病毒復(fù)制周期中的多個步驟，如Gag多聚化和基因組RNA衣殼化。Gag介導(dǎo)子代病毒顆粒衣殼的構(gòu)成[32,33],NC蛋白通過激活PKR和毀壞多囊泡來誘導(dǎo)病毒組裝的發(fā)生，Staufen1通過結(jié)合和隔離NC蛋白并與RNA結(jié)合進而穩(wěn)定多核糖體來毀壞NC誘導(dǎo)的病毒粒子裝配。研究表示清楚，T細胞是HIV感染的靶細胞，通常在淋巴器官中呈極化形態(tài)，極化T細胞具有前緣區(qū)與尾足區(qū)兩端，HIV的Gag會在其尾足區(qū)富集。受感染的T細胞通過富集有Gag蛋白的尾足與未感染T細胞接觸，這個接觸區(qū)域可能在病毒胞間傳遞中起著重要作用[34],被稱為病毒突觸(virologicalsynapse,VS)。Llewellyn等[35]發(fā)現(xiàn)，NC蛋白能驅(qū)使Gag在極化的T細胞尾足區(qū)富集，促進VS的構(gòu)成，為病毒的胞間感染傳播提供平臺，而NC蛋白的缺失將導(dǎo)致病毒胞間傳遞受阻。NC蛋白含有兩個ZF構(gòu)造域[36],Boutant等[37]通過對該區(qū)域進行兩種突變，分別將核衣殼蛋白ZF域23位和44位的半胱氨酸替換為組氨酸，電鏡下觀察病毒的包裝經(jīng)過并未出現(xiàn)問題，但胞間感染能力卻大大降低。相關(guān)研究證明，NC蛋白內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄(reversetranscription,ERT)是部分RNA病毒的一種逆轉(zhuǎn)錄方式[38],NC蛋白ZF構(gòu)造的突變會導(dǎo)致病毒的蛋白酶失活，使病毒拷貝數(shù)明顯下降[39],這講明HIV病毒的NC蛋白內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄與病毒感染性之間存在因果關(guān)系。2.1.2、小鼠白血病病毒Ncp10蛋白小鼠白血病病毒(murineleukemiavirus,MuLV)是一種可引起小鼠白血病和神經(jīng)系統(tǒng)疾病的逆轉(zhuǎn)錄病毒[40],其核衣殼蛋白Ncp10的ZF構(gòu)造最早于1995年被Darlix等[41]發(fā)現(xiàn)并報道，Gorelick等[42]對該病毒核衣殼區(qū)域ZF構(gòu)造進行了兩種突變：CCCC和CCHH,兩種突變病毒都可正常組裝基因組，但是突變病毒的堿基出現(xiàn)缺失，DNA復(fù)制能力大幅降低，證明在MuLV感染宿主時，其NC蛋白中完好且嚴格保守的ZF構(gòu)造是病毒復(fù)制所必需的。Gorelick等[43,44]還對MuLV的核衣殼蛋白中的一個C2HCZF構(gòu)造進行了兩種點突變，使原39位的半胱氨酸突變?yōu)榻M氨酸以及使原來34位的組氨酸突變?yōu)榘腚装彼?，結(jié)果證明，兩種突變體病毒都能夠表示出出正常數(shù)量的Gag前體蛋白以及Env包膜蛋白，且突變株均包含了病毒的全長RNA,但是兩株突變體無法合成cDNA,感染能力僅為親本株的4×10-4倍，即幾乎沒有感染能力。除了對ZF構(gòu)造的突變，Housset等[45]針對ZF側(cè)堿性氨基酸也進行了突變，通過使用中性氨基酸將15到18位的ERRR殘基以及40～42位的PKK殘基進行多種替換和突變，發(fā)現(xiàn)當用1或2個中性氨基酸取代原來的堿性殘基后并不會影響成熟病毒粒子的產(chǎn)生，但病毒的胞間傳播能力皆減弱，當超過2個基本殘基被中性氨基酸取代時，逆轉(zhuǎn)錄起始及基因組RNA二聚體包裝發(fā)生嚴重缺陷，病毒胞間傳播極度減弱。這些結(jié)果講明，NCp10ZF區(qū)域的穩(wěn)定是MuLV感染性病毒粒子增殖所必需的。2.1.3、猴免疫缺陷病毒NC蛋白Gorelick等[46]對猿猴免疫缺陷病毒(simianimmunodeficiencyvirus,SIV)的核衣殼區(qū)域兩個ZF構(gòu)造進行了9種突變，所得到的突變病毒均可表示出出正常的病毒蛋白，且表示出量與親本株沒有顯著差異，電鏡觀察所有突變病毒都具有與親本株中未成熟病毒粒子類似的形態(tài)，然而，突變體的體外復(fù)制能力卻明顯下降，其感染性是野生型病毒的10-5～10-6倍。華而不實一個缺失了第2個ZF區(qū)域第33到第36位氨基酸的突變體病毒靜脈注射到豚尾獼猴體內(nèi)時，病毒喪失了感染能力。這講明SIV核衣殼蛋白ZF突變體病毒在體外和體內(nèi)均存在復(fù)制缺陷。為了找出突變病毒失去感染性的原因，Akahata等[47]還進一步通過定量PCR檢測了SIV感染細胞不同時間后突變病毒cDNA的合成量，證明了ZF構(gòu)造突變體病毒感染能力減弱，部分原因是病毒cDNA合成減少以及基因組RNA的包裝效率降低。Yovandich等[48]構(gòu)建了6株在NC區(qū)域2個ZF中半胱氨酸殘基被刪減或替換的SIV突變病毒，這些突變體病毒均存在復(fù)制缺陷，通過電鏡觀察發(fā)現(xiàn)，點突變或缺失病毒的表型類似，與野生型病毒粒子相比，病毒粒子含有濃縮的核，核的電子密度更??；ZF遠端的突變以及兩種ZF中的點突變都可導(dǎo)致Gag蛋白的加工不完好，病毒粒子中的全長基因組RNA的轉(zhuǎn)錄水平降低約30%;同時，ZF中半胱氨酸殘基以及它們之間的基本鏈接區(qū)域缺失的突變體病毒能夠有效的完成Gag前體蛋白的加工，但其基因組RNA的包裝僅僅為野生型病毒水平的10%,所產(chǎn)生的病毒粒子顆粒在大小和核心形態(tài)上也是異常的。這些結(jié)果表示清楚，ZF構(gòu)造基序的完好是Gag前體的正常加工和NC蛋白穩(wěn)定表示出的前提，也是影響病毒感染能力的重要因素。2.2、皰疹病毒鋅指蛋白對病毒感染的影響2.2.1、皰疹病毒US10蛋白研究證明，HSV-1[49]、ILTV[50]、DPV[51,52,53]的US10蛋白均含有13個氨基酸構(gòu)成的保守序列，經(jīng)揣測，該序列編碼的氨基酸最終表示出為C2H2型ZF構(gòu)造蛋白。Ma等[54]通過細菌人工染色體[55](bacterialartificialchromosome,BAC)平臺構(gòu)建了鴨瘟病毒US10基因缺失毒株，在感染鴨胚細胞后發(fā)現(xiàn)，該重組病毒的滴度下降了10～100倍，但定量檢測顯示，缺失株與親本株的基因組拷貝數(shù)無明顯差異，揣測US10蛋白的ZF構(gòu)造主要影響皰疹病毒感染性病毒粒子的包裝，對其基因組的復(fù)制無明顯影響。2.2.2、皰疹病毒UL52蛋白單純皰疹病毒1型(HSV-1)編碼了一種由UL5、UL8和UL52編碼蛋白組成的解旋酶/引物酶異源三聚體復(fù)合物。作為大型多蛋白分子復(fù)合物的一部分，解旋酶和引物酶在構(gòu)造和功能上存在關(guān)聯(lián)，并與其他幾個復(fù)制體蛋白互相作用[56]。UL52蛋白C端含有保守的引發(fā)酶基序，華而不實包括一個ZF基序。然而，HSV-1和HSV-2的UL52蛋白在986位置是一個亮氨酸殘基，大多數(shù)其他皰疹病毒在這個位置是一個苯丙氨酸殘基，Chen等[57]將該位置的亮氨酸替換為苯丙氨酸，發(fā)現(xiàn)突變體病毒引發(fā)酶的活性大幅降低(約為野生型的25%)。由于該突變位點位于UL52的ZF構(gòu)造中，能否是該突變引起ZF構(gòu)造和功能的改變，進而導(dǎo)致UL52功能變化有待考證，以及該ZF構(gòu)造對引發(fā)酶的詳細影響機制，還需做更深一步探究。2.2.3、單純皰疹病毒1型的ICP0蛋白HSV-1的ICP0蛋白是病毒立即早期基因ICP0編碼的一種重要的轉(zhuǎn)錄調(diào)控蛋白，可刺激潛伏狀態(tài)病毒發(fā)生增殖性感染。該蛋白具有一段C3HC4ZF構(gòu)造域，早期研究發(fā)現(xiàn)，定點突變該構(gòu)造域中任何一個半胱氨酸或組氨酸都將導(dǎo)致病毒轉(zhuǎn)錄激活失敗，并且ICP0的核內(nèi)定位發(fā)生改變[58]。牛皰疹病毒1型(bovineherpesvirus1,BoHV-1)屬于皰疹病毒科皰疹病毒甲亞科成員，是一種α皰疹病毒病[59]。在BoHV-1ICP0基因中有一段ZF序列-C3HC4,該ZF被以為用于激活病毒胸苷激酶(TK)基因啟動子進而激活病毒的增殖性感染，Inman等[60]首先報道該ZF構(gòu)造對病毒的毒力具有重要作用，缺失了356～677位氨基酸的ZF構(gòu)造突變將導(dǎo)致ICP0的亞細胞定位發(fā)生改變，無法激活TK啟動子。Saira等[61]將該ZF構(gòu)造中51位半胱氨酸突變?yōu)楦拾彼幔l(fā)現(xiàn)相對于正常的BoHV-1,突變病毒表示出了更多的ICP0蛋白，但檢測到其在牛的細胞中的病毒滴度卻有下降，并且其表示出的突變蛋白無法反式激活病毒TK的啟動子，表示清楚ICP0高度保守的ZF構(gòu)造對激活病毒轉(zhuǎn)錄和病毒裂解性感染至關(guān)重要。2.3、其他病毒鋅指蛋白對病毒感染的影響尼多病毒(Nidoviruses)目編碼的一種非構(gòu)造蛋白，在動脈病毒中被稱為nsp10,在冠狀病毒中被稱為nsp14,包含一個解旋酶域和N端鋅結(jié)合域(ZBD)[62]。研究證明，小動脈病毒的nsp10ZBD突變體(Ser-59→Pro)的解旋酶活性遭到顯著毀壞，導(dǎo)致基因組mRNA合成缺乏。在反向遺傳學(xué)研究中，大多數(shù)這些ZBD突變使該病毒無法生存[63]。馬動脈炎病毒(equinearteritisvirus,EAV)的nsp10的ZBD對病毒復(fù)制也是必不可少的[64]。Seybert等[65]構(gòu)建了38種nsp10ZBD突變體，ZBD突變體具有復(fù)制和轉(zhuǎn)錄能力，但不產(chǎn)生傳染性子代病毒，且EAVZBD突變體mRNA的轉(zhuǎn)錄水平降低到正常水平的1%下面，這講明EAV的ZF對于該病毒的感染性至關(guān)重要。嚴重急性呼吸系統(tǒng)綜合征冠狀病毒(SARS-CoV)的nsp14構(gòu)造域包含5條β鏈組成的β折疊[66],在β-折疊片的兩邊都存在ZF,外切核糖核酸酶(ExoN)的活性依靠于非構(gòu)造蛋白nsp14中ZBD的存在[67,68],nsp14的ZBD位點突變毀壞了nsp14ZF構(gòu)造，導(dǎo)致nsp14酶活性減弱，表示清楚SARS-CoV的ZNF在催化病毒RNA合成中具有一定調(diào)節(jié)作用[69]。總的來講，病毒的ZF構(gòu)造能夠通過對病毒解旋酶活性的調(diào)控作用介入病毒的基因組復(fù)制或者轉(zhuǎn)錄經(jīng)過，進而對病毒的生命周期起到調(diào)節(jié)作用，影響病毒感染的效率。2.4、病毒鋅指蛋白介入天然免疫調(diào)節(jié)2.4.1、豬繁衍與呼吸綜合征病毒nsp1α蛋白豬繁衍與呼吸綜合征是由豬繁衍與呼吸綜合征病毒(porcinereproductiveandrespiratorysyndromevirus,PRRSV)引起的妊娠母豬繁衍障礙和仔豬呼吸道異常感覺和狀態(tài)為特征的一種傳染病[70]。NLRP3炎性體作為先天免疫的重要組成部分，在宿主抗病毒免疫中發(fā)揮著極其重要的作用[71,72]。研究表示清楚，PRRSV能夠激活NLRP3炎性小體，誘導(dǎo)促炎性細胞因子IL-1β分泌[73]。PRRSV的非構(gòu)造蛋白1α(nsp1α)是病毒的重要免疫抑制蛋白，可抑制IFN-β轉(zhuǎn)錄和TNF-α的產(chǎn)生等[74,75],其N端有一個ZF構(gòu)造域[76],王超等[77,78]通過刪除或突變該ZF域氨基端，發(fā)現(xiàn)突變體沒有能阻止poly(I:C)誘導(dǎo)炎癥小體啟動子的激活并釋放β干擾素。該研究初次表示清楚，nsp1α有能力抑制NLRP3炎癥體所介導(dǎo)的β干擾素分泌，且ZF構(gòu)造的高度保守對nsp1α抑制NLRP3介導(dǎo)的β干擾素釋放至關(guān)重要。但是，該ZF構(gòu)造在nsplα行使功能時所起到的詳細作用機制還有待探究。2.4.2、人巨細胞病毒US10蛋白人巨細胞病毒(humancytomegalovirus,HCMV)入侵宿主后，能夠干擾T細胞的辨別功能以及自然殺傷細胞(naturekill,NK)的毒性作用，進而介入免疫逃避作用[79,80]。NK細胞的激活取決于外表受體HLA-G,HLA-G可抑制外周血NK細胞對Ⅰ型人類B細胞系721.221的殺傷作用[81,82]。Park等[83]研究發(fā)現(xiàn)，HCMV的US10蛋白定位于細胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，能夠干擾HLA-G在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的加工經(jīng)過，降低HLA-G在膜外表的表示出量，使NK細胞免疫作用紊亂，進而完成病毒免疫逃避。2.4.3、冠狀病毒nsp14蛋白冠狀病毒(CoV)非構(gòu)造蛋白14(nsp14)是復(fù)制-轉(zhuǎn)錄復(fù)合物的一部分。SARS-CoV的nsp14構(gòu)造中存在3個ZF[84],它是一種雙功能酶，具有3′到5′外切核糖核酸酶(ExoN)和鳥嘌呤-N7-甲基轉(zhuǎn)移酶(N7-MTase)活性[85,86]。nsp14N7-MTase活性對防止宿主免疫系統(tǒng)辨別病毒RNA至關(guān)重要[87]。Case等[88]使用傳染性胃腸炎病毒(TGEV)作為Alphacoronavirus模型，構(gòu)建了一組nsp14點突變病毒，華而不實ZF1(ZF-C)的特定突變體(rTGEV-ZF-C)與親本病毒相比，rTGEV-ZF-C導(dǎo)致細胞病變效應(yīng)和細胞凋亡水平降低，在感染后期dsRNA積累水平降低，導(dǎo)致β干擾素(IFN-β)、腫瘤壞死因子(TNF)刺激基因拷貝數(shù)降低，都證實了該突變體引發(fā)的宿主抗病毒反響水平降低?？傮w而言，該研究揭示了ZF在病毒抵抗天然免疫反響中的潛在作用。這為抗病毒策略提供了新的思路。3、展望ZF特殊的空間構(gòu)造使得它能夠與特定的核酸或者蛋白互相作用，對病毒在感染宿主細胞中具有重要作用。當前，對ZNF的研究主要集中于抗病毒以及抗癌方面的研究[89,90,91,92,93],研究證明，某些Cys-Cys-Cys-His(CCCH)型ZNF,在免疫系統(tǒng)中起重要作用[94],對病毒ZF構(gòu)造和功能的深切進入研究，有利于人們理解病毒在宿主體內(nèi)的感染機制，也有利于抗病毒藥物的研發(fā)。靶向ZF基序的化合物可廢除逆轉(zhuǎn)錄病毒(如HIV-1和MuLV)的感染性，但是單純靶向于ZF的藥物無法鑒別宿主與病毒的ZF,毒性較大具有明顯副作用，這也是當前沒有研發(fā)出高安全性的商品化藥物的原因之一。相信將來研究人員會攻克這一難題。以下為參考文獻[1]0GO0A.TYSONJ,COCKELLSJ,etal.ThezincfingerproteinZNF658regulatesthetranscriptionofgenesinvolvedinzinchomeostasisandffectsribosomebiogenesisthroughthezinctranscriptionalregulatoryelement[J].MolCellBiol,2021,35(6):977987.[2]NAJAFABADIHSALBUM,HUGHESTR.IdentificationofC2H2-ZFbindingpreferencesfromChIP-seqdatausingRCADE[J]Bioinformatics2021,31(17):2879-2881.[3]BENHALEVYD,GUPTASK,DANANCH.etal.TheHumanCCHC-typezincfingernucleicacid-bindingproteinbindsG-richelementsintargetmRNAcodingsequencesandpromotestranslation[J].CellRep,2021,18(12).2979-2990.[4]MALGIERIG,PALMIERIM.RUSSOL,etal.Theprokaryoticzin-finger.structure.functionandcomparisonwiththeeukaryoticcounterpart[J]FEBSJ,2021,282(23)-4480-4496.[5]WUSY,TONGXL,LICL,etal.BmBlimp-1geneencodingaC2H2zincfingerproteinisrequiredforwingdevelopmentinthesilkwormBombyxmori[J.IntJBiolSci,2022,15(12):2664-2675.[6]BHATIASS,WEISSTC,ROMANIUKPJ.Contributionofindividualaminoacidstothe5SRNAbindingactivityoftheXenopuszincfingerproteinp43[J]Biochemistry,2008,47(32)-8398-8405.[7]ZHANGXH,MIAOYJ,HUXD,etal.Gammaradiation-induceddamageinthezincfingerofthetranscriptionfactorIIA[J]BioinorgChemAppl,2021,2021:1642064.[8]LOMBARDOCM.KUMARMVV,DOUATC.etal.Designandstructuredeterminationofacompositezincfingercontaininganonpeptidefoldamerhelicaldomain[J.JAmChemSoc,2022,141(6):2516-2525.[9]CASSANDRIM,SMIRNOVA,NOVELLIF,etal.Zinc-fingerproteinsinhealthanddisease[J].CellDeathDiscov,2021,3:17071.[10]FEDOTOVAAA,BONCHUKAN,MOGILAVA.etal.C2H2zincfingerproteins:thelargestbutpoorlyexploredfamilyofhighereukaryotictranscriptionfactors[J].ActaNatur,2021,9(2):47-58.[11]BECARESM.PASCUAL-IGLESIASA.NOGALESA.etal.MutagenesisofCoronavirusnsp14revealsitspotentialroleinmodulationoftheinnateimmuneresponse[J]JVirol,2016May12;90(11):5399-5414.[12]SHEKARM.VENUGOPALMN.Insightintoatranscriptionaladaptorzincfingerencodedbyaputativeproteininthewhitespotsyndromevirusgenome[J].InterdiscipSciComputLifeSci,2022.11(1):145-151.[13]ZUCKTF,THOMSONRA,SCHREIBERGB,etal.TheRetrovirusEpidemiologyDonorStudy(REDS):rationaleandmethods[J].Transfusion,2018,35(11):944-951.[14]DOSTALKOVAA,KAUFMANE,kRiZovAI,etal.Mutationsinthebasicregionofthemason-Pfizermonkeyvirusnucleocapsidproteinafectreversetranscription,genomicRNApackaging,andthevirusassemblysite[J].JVirol,2021,92(10):e00106-18.[15]HATAYAMAM.ARUGAJ.Roleofzicfamilyproteinsintranscriptionalregulationandchromatinremodeling[J]AdvExpMedBiol,2021;1046:353-380.[16]EOMKS,CHEONGJS,LEESJ.StructuralanalysesofzincfingerdomainsforspecificinteractionswithDNA[J].JMicroBiolBiotechnol,2021.26(12):2022-2029.[17]DINGPF,KHARYTONCHYKS,WALLERA,etal.ldentificationoftheinitialnucleocapsidrecognitionelementintheHIV-1RNApackagingsigal[J].ProcNatlAcadSciUSA,220.117(30):17737-17746.[18]WEISSER,GOTTLINGERH.TheroleofcellularfactorsinpromotingHIVbudding[J.JMolBiol,2018Jul22;410(4):525-33.[19]LEE|J,STOKASIMOVE,DEMPSEYN,etal.FactorspromotingnuclearenvelopeassemblyindependentofthecanonicalESCRTpathway[J.JCellBiol,2020,219(6):e20220232.[20]KIERNANRE,VANHULLEC.SCHILTZL,etal.HIV-1Tattranscriptionalactivityisregulatedbyacetylation[J.EMBOJ,2014,18(21):6106-6118.[21]RAOS,CINTIA.TEMZIA.etal.HIV-1NC-inducedstressgranuleassemblyandtranslationarrestareinhibitedbythedsRNAbindingproteinStauen1[J].RNA,2021,24(2).219-236.[22]TANWARHS,KH0OKK,GARVEYM,etal.ThethermodynamicsofPrssGag-RNAinteractionregulatetheassemblyofHIV[J]PLoSPathog,2021,13(2):e1006221.[23]KLINGLERJ,ANTONH,REALE,etal.HowHIV-1gagmanipulatesitshostcellproteins:afocusoninteractorsofthenucleocapsiddomain[J]Viruses.2020,12(8)888.[24]COMAS-GARCIAM,DATTASA,BAKERL,etal.DissectionofspecificbindingofHIV-1GagtothepackagingsignalinviralRNA[J].eLife,2021,6:e27055.[25]NOVIKOVAM,ADAMSLJ.FONTANAJ,etal.ldentificationofastructuralelementinHIV-1gagrequiredforvirusparticleassemblyand