試劑盒使用說明

*質(zhì)粒小量提取試劑盒產(chǎn)品說明：■本產(chǎn)品采用經(jīng)典的硅膠膜及堿裂法技術(shù)，硅膠膜柱可以在高鹽、低pH值情況下高效可逆的結(jié)合.該試劑盒具有高效、快速、1～5ml的過夜培養(yǎng)的菌液中純化得到DNA(OD260/OD280=1.8～2.0)，此質(zhì)粒DNA可直接用于DNA序列分析以及各種酶促反應(yīng)DNA,而蛋白及其它雜質(zhì)不被結(jié)合而被除去,被結(jié)合的核酸在低鹽、高pH值情況下可被洗脫出來方便之特點(diǎn)，全套操作只需半個(gè)小時(shí)便可完成。使用本試劑盒可從1～40μg的高純度質(zhì)粒等。試劑盒組成：產(chǎn)品編號GS001-1GS001-2GS001-3試劑盒組成純化次數(shù)50次100次300μl30ml200次600μl60mlRNaseA（10mg/ml）溶液Ⅰ150μl15ml15ml20ml30ml30ml5ml溶液Ⅱ30ml60ml溶液Ⅲ40ml80ml溶液PB溶液W溶液EluentDNA純化柱50ml100ml3×40ml20ml2×30ml10ml50個(gè)100個(gè)200個(gè)溶液W初次使用用前無水乙醇按用途：提取用于酶切、轉(zhuǎn)化、測序、保存：1：1.5稀釋，即含60%乙醇。PCR等試驗(yàn)用質(zhì)粒。初次使用本試劑盒時(shí)，請將RNaseA全部加入到溶液Ⅰ中，均勻混合后4℃保存。溶液Ⅱ：室溫保存，若出現(xiàn)沉淀，請于37℃保溫溶解，待恢復(fù)至室溫后使用。其他試劑：室溫保存。操作步驟：1.用1.5ml離心管收集1.5-5ml菌液，12000rpm離心60秒，棄上清。(應(yīng)根據(jù)所培養(yǎng)的菌液的濃度確定收集的菌液量)2.加入250μl溶液Ⅰ/RNaseA混合液，漩渦振蕩使菌液完全重新懸浮。(菌液重新懸浮對于獲得高產(chǎn)量是非常重要的3.250μl溶液Ⅱ，溫和反復(fù)顛倒混勻,為使RNA被RNaseA充分降解,讓懸浮菌液靜置1-2分鐘4-10次,室溫放置1-2分鐘,以獲得澄清的裂解液。DNA斷裂.)(不可劇烈混和,否則會使染色體

4.加入350μl溶液Ⅲ，反復(fù)顛倒混勻5.將上清置于DNA純化柱中，靜置4-6次,12000rpm離心10分鐘。1-2分鐘。6.12000rpm離心60秒，棄慮液。(注：此時(shí)DNA被吸附于DNA純化柱中的硅膠膜上。)7.加入500μl溶液PB,12000rpm離心60秒，棄慮液。注：目的是將硅膠膜上吸附的蛋白、鹽等雜質(zhì)洗脫,得到高質(zhì)量的DNA。如果所需的DNA質(zhì)量要求不是很高此步可以省去.8.加入500μl溶液W,12000rpm離心60秒，棄慮液。9.可選做步驟:重復(fù)步驟8,再用500ul溶液W洗滌柱子一次.10．12000rpm再次離心60秒，甩干剩余液體。主要是去除殘余酒精，以利于DNA溶解。11.將DNA純化柱置于新的離心管中，加入適量（12000rpm離心60秒，管底即為質(zhì)粒注：溶液Eluent可用無菌雙蒸水代替，但其50-100μl）Eluent（≥60℃預(yù)熱）室溫放置pH需為8.0-8.5,加入體積視質(zhì)?？截悢?shù)多少、2分鐘DNA。用戶對質(zhì)粒濃要度求而定。60℃預(yù)熱，目的是提高產(chǎn)量，溫不度需很準(zhǔn)，50℃－65℃均可。*DNA凝膠回收試劑盒產(chǎn)品說明：本試劑盒所帶DNA純化柱，具有在高鹽、低pH值情況下吸附DNA的50bp-40kb的DNA帶,回收率高達(dá)85%.目的DNA帶從凝,然后轉(zhuǎn)移到一個(gè)DNA回收純化柱上，洗脫出來，PCR、連接、DNA,低鹽、高pH值情況下釋放性質(zhì).該試劑盒能從各個(gè)等級的瓊脂糖凝膠中很好的回收膠上切下來后，經(jīng)特定的溶液BD處理，可將含目的帶的瓊脂糖溶解完全DNA便可用去離子水經(jīng)過溶液PE快速的洗滌步驟后，（或低鹽緩沖液）回收產(chǎn)物可用于測序、限制性酶切等應(yīng)用。該試劑盒還適用于PCR產(chǎn)物純化、酶切產(chǎn)物回收及基因組DNA純化。試劑盒組成：產(chǎn)品編號GS002-1GS002-2GS002-3試劑盒組成純化次數(shù)50次100次40ml200次80ml溶液BD溶液PE溶液EluentDNA純化柱20ml15ml2.5ml50個(gè)2×15ml5.0ml100個(gè)3×20ml10ml200個(gè)

溶液PE初次使用前用無水乙醇按1：4稀釋，即含80%乙醇。保存條件：產(chǎn)品特點(diǎn)：室溫保存大于24個(gè)月?？焖侉D―15min內(nèi)從凝膠中回收可靠――最適宜的緩沖液系統(tǒng)保證了高純度的安全――無有機(jī)溶液抽提DNADNA質(zhì)量――純凈的可以高效的回收小片段操作步驟：DNA適用于多種下游應(yīng)用DNA.1.通過把切取含脂DNA片段的瓊脂糖凝膠裝在1.5ml小離心管中，稱其重量近似地確定其體積，每100mg瓊糖凝膠相當(dāng)于100μl體積,稱量每次切取含DNA片段的瓊脂糖凝膠加入等體積的溶液BD。PCR產(chǎn)物純化、酶切產(chǎn)物回收及基因組DNA則加入等體積的溶液BD混勻，進(jìn)入步驟3.2.55℃-65℃水浴7-10分鐘，直膠至完全融化，期間振蕩3次，瓊脂糖必須完全融化。如果體積大于500μl，可適當(dāng)增加融膠時(shí)間，若此時(shí)溶液變紅，可加10μl3MNaAC(pH5.0)。3.將溶液置于DNA純化柱中，靜置2分鐘，12,000rpm離心60秒，若一次加不完，可分兩次離心,棄慮液。4.加入500μl溶液PE（初次使用前用無水乙醇按1：4稀釋）于離心柱中12,000rpm,離心60秒，棄慮液.5.用溶液PE（初次使用前用無水乙醇按1：4稀釋）500μl再洗一遍，12,000rpm離心60秒。（注：此步對獲得較好的DNA產(chǎn)量十分重要）12,000rpm再次離心2分鐘，以甩干剩余液體。6.將離心柱置于新的離心管中，加入60℃預(yù)熱的溶液Eluent25-35μl于純化柱中（硅膠膜中央），靜置2分鐘,12,000rpm離心60秒，管底即為回收的7.將DNA貯存于-20℃。DNA。*PCR產(chǎn)物及DNA片段純化試劑盒產(chǎn)品說明：

本試劑盒所帶性質(zhì)。該試劑盒能很好的回收處理，然后轉(zhuǎn)移到一個(gè)DNA純化柱，具有在高鹽、低pH值情況下吸附DNA,低鹽、高pH值情況下釋放DNA的BD溶液50bp-40kb的DNA片段,回收率高達(dá)85%.PCR產(chǎn)物或酶切產(chǎn)物經(jīng)特定的DNA回收純化柱上，經(jīng)過離心吸附,然后經(jīng)溶液PE快速的洗滌步驟后，PCR、連接、測序、限制性酶切等應(yīng)用。該試劑盒可從DNA,有效去除PCR反應(yīng)體系中的DNA便可用去離子水（或低鹽緩沖液）洗脫出來，回收產(chǎn)物可用于擴(kuò)增體系、酶切和其它水溶液體系中快速回收純化試劑盒可以高效的回收小片段PCRdNTPs、引物和聚合酶.該DNA（50bp、100bp）.該試劑盒還可以用于從瓊脂糖凝膠中回收DNA片段。試劑盒組成：產(chǎn)品編號GS010-1GS010-2GS010-3試劑盒組成純化次數(shù)50次100次40ml2×15ml5.0ml100個(gè)200次80ml3×20ml10ml200個(gè)1溶液BD溶液PE溶液EluentDNA純化柱說明書20ml15ml2.5ml50個(gè)11溶液PE初次使用前用無乙醇按水1：4稀釋，即含80%乙醇。保存條件：室溫保存大于24個(gè)月。產(chǎn)品特點(diǎn)：·快速――10min內(nèi)從PCR產(chǎn)物中回收DNA·可靠――最適宜的緩沖液系統(tǒng)保證了高純度的·安全――無有機(jī)溶液抽提DNA·質(zhì)量――純凈的·可以高效的回收小片段注意事項(xiàng)：DNA適用于多種下游應(yīng)用DNA（50bp）.1.溶液PE初次使用前請用水無乙醇按1：4稀釋，即含80%乙醇。2.溶液Eluent(10mMTris/HCl,pH8.5)可用無菌雙蒸水代替，但其DNA量pH需為8.0-8.5,加入體積視回收-65℃均可。的多少及用戶對濃度要求而定。60℃預(yù)熱，目的是提高產(chǎn)量，溫度不需很準(zhǔn)，50℃操作步驟：1.確定PCR反應(yīng)產(chǎn)物體積，將PCR產(chǎn)物轉(zhuǎn)移至一個(gè)1.5ml離心管中，加入等體積的BD溶液,旋渦混勻,

然后進(jìn)入步驟2.(如果用于從瓊脂糖凝膠中回收DNA片段則先進(jìn)行步驟a和步驟b再進(jìn)入步驟2)a.通過把切取含脂糖凝膠相當(dāng)于DNA片段的瓊脂糖凝膠裝在1.5ml小離心管中，稱其重量近似地確定其體積，每DNA片段的瓊脂糖凝膠加入等體積的溶液100mg瓊100μl體積,稱量每次切取含BD。b.55℃-65℃水浴7-10分鐘，直至膠完全融化，期間振蕩3次，瓊脂糖必須完全融化。如果體積大于500μl，可適當(dāng)增加融膠時(shí)間，若此時(shí)溶液變紅，可加10μl3MNaAC(pH5.0)。3.將溶液置于DNA純化柱中，靜置2分鐘，12,000rpm離心60秒.1：4稀釋）于離心柱中4.加入500μl溶液PE（初次使用前用無水乙醇按液.12,000rpm,離心60秒，棄慮5.用溶液PE（初次使用前用無水乙醇按6.12,000rpm再次離心2分鐘，以甩干剩余液體。7.將離心柱置于一新的離心管中，加入1：4稀釋）500μl再洗一遍，12,000rpm離心60秒。（注：此步對獲得較好的DNA產(chǎn)量十分重要）60℃預(yù)熱的30-100μl溶液Eluent于純化柱中（硅膠中膜央），DNA。靜置2分鐘，12,000rpm離心60秒，管底即為回收的8.將DNA貯存于-20℃。效果圖*GzolReagent(RNA提取試劑)CatNo.GS004-150ml;CatNo.GS004-2100ml產(chǎn)品說明■TRIzol是目前最常用的RNA。RNA提取試劑.采用異硫氰酸胍一步法提取總RNA原理，在短時(shí)間內(nèi)提取高質(zhì)量的總■方便從人、動物、植物和細(xì)菌組織提取總RNA，可同時(shí)處理大量樣本，提取的RNA沒有DNA和蛋白的污染，可用于RT-PCR、NorthernBlot、Dotblot、Nucleaseprotectionassays、cDNA合成等下游應(yīng)用。保存室溫下可穩(wěn)定保存1年，為保證試劑質(zhì)量，建議保存在2-8℃的環(huán)境下。實(shí)驗(yàn)所需試劑但未提供的物品★氯仿★異丙醇★75%乙醇(用DEPC處理過的水配制)★無RNA酶的水或0.5%SDS溶液[調(diào)配無RNA酶的水，將水加入無RNA酶的玻璃瓶中，加入DEPC至0.1%(v/v)。放置過夜并高壓滅菌。SDS溶液必須用DEPC處理過并經(jīng)高壓滅菌的水配制。預(yù)防RNA酶污染：在抽提RNA過中程任一環(huán)節(jié)的不正確操作都可能導(dǎo)致污染是十分必要的。在實(shí)際的操作中應(yīng)遵循以下指南：RNA酶的污染。由于RNA酶的活性很難完全抑制，預(yù)防其*全程佩戴一次性手套。皮膚經(jīng)常帶有細(xì)菌和霉菌，可能污染生物實(shí)驗(yàn)操作習(xí)慣預(yù)防微生物污染。RNA的抽提并成為RNA酶的來源。培養(yǎng)良好的微RNA酶交叉污染。例如，*使用滅菌的，一次性的塑料器皿和自動吸管抽提使用RNA探針的實(shí)驗(yàn)室可能用可能富含RNA酶。RNA，避免使用公共儀器所導(dǎo)致的RNA酶A或T1來降低濾紙上的背景，因而某些非一次性的物品（如自動吸管）*在TRIzol中，RNA是隔離在RNA酶污染之外的。而對樣品的后續(xù)操作會要求用無4小時(shí)。塑料器皿可以在RNA酶的非一次性的玻璃器皿或塑料器皿。玻璃器皿可以在150°C的烘箱中烘烤0.5MNaOH中浸泡10分鐘，用水徹底漂洗干凈后高壓滅菌備用。RNA抽提操作步驟注意：用TRIzol抽提RNA時(shí)要戴手套和護(hù)眼罩。避免接觸皮膚和衣服。在化學(xué)通風(fēng)櫥完成操作。避免呼吸道吸入。如無例外，所有的操作應(yīng)該在在15~30°C的條件下。

實(shí)驗(yàn)所需試劑但未提供的物品：*氯仿*異丙醇*75%乙醇(用DEPC處理過的水配制)*無RNA酶的水或0.5%SDS溶液[調(diào)配無RNA酶的水，將水加入無RNA酶的玻璃瓶中，加入DEPC至0.1%(v/v)。放置過夜并高壓滅菌。1.勻漿化作用a.組織SDS溶液必須用DEPC處理過并經(jīng)高壓滅菌的水配制。用glass或強(qiáng)力勻漿器攪勻組織樣品，每TRIzol容積的10%。50~100mg組織加1ml的TRIzol。勻漿化時(shí)組織樣品容積不能超過b.單層生長的細(xì)胞直接往直徑3.5cm的培養(yǎng)板中加入面積而不是依據(jù)細(xì)胞的數(shù)量來決定所需的中污染有DNA。1ml的TRIzol溶解細(xì)胞，通過移液管分次移出細(xì)胞裂解物。依據(jù)培養(yǎng)板的TRIzol量（每10cm2加1ml）。當(dāng)TRIzol量不足時(shí)可導(dǎo)致抽提的RNAc.懸浮生長的細(xì)胞通過離心來沉淀細(xì)胞。在TRIzol試劑中用移液管反復(fù)吹打來裂解細(xì)胞。每5~10×106的動物細(xì)胞，植物或酵母菌細(xì)胞或每1×107細(xì)菌加1ml的TRIzol。在加入TRIzol前應(yīng)避免洗滌細(xì)胞，因?yàn)槟菢訒黾觤RNA降解的可能性。破裂某些酵母菌和細(xì)菌可能需要使用勻漿器?？蛇x方案：當(dāng)樣品富含蛋白質(zhì)，脂肪，多糖或是細(xì)胞外物質(zhì)例如肌肉，脂肪組織和植物的塊莖部分時(shí)可能需要一額外的分離步驟。勻漿化后在2~8°C的條件下以12,000×g的離心力離心DNA，而上層的超浮游物含有10分鐘，移除勻漿中不溶解的物質(zhì)，余下的RNA。在來自于脂肪組織的樣品中，沉淀中包含有細(xì)胞外膜，多糖，以及高分子量大量的脂肪漂在最上層因而應(yīng)該除掉。在每一個(gè)個(gè)案中，將清亮的勻漿溶液轉(zhuǎn)移到一干凈的試管中加入氯仿并繼續(xù)進(jìn)行下述的分離步驟。2.分離階段將勻漿樣品在15-30°C條件下孵育5分鐘以使核蛋白體完全分解。每1mlTRIzol加0.2ml氯仿。蓋緊樣品管蓋，用手用力搖晃試管15秒并將其在30°C下孵育2~3分鐘。在2~8°C下以不超過12,000×g的離心力高速冷凍離心15分鐘。離心后混合物分成三層：下層苯酚地存在于水樣層當(dāng)中。水樣層的容量大約為所加-氯仿層，中間層，上層無色的水樣層。TRIzol容量的60%。RNA無一例外3.RNA的沉淀

將水樣層轉(zhuǎn)移到一干凈的試管中，如果希望分離DNA和蛋白，有機(jī)層同樣要予以保留。通過將水樣層和異丙醇混合來沉淀RNA。最初均化時(shí)的每1mlTRIzol對應(yīng)0.5ml異丙醇。將混合的樣品在15-30°C條件下孵育10分鐘并在2~8°C下以不超過12,000×g的離心力高速冷凍離心一膠狀片狀沉淀附著于試管壁和管底。10分鐘。RNA沉淀在離心前通常不可見，形成4.RNA的漂洗移去上層懸液。用75%的乙醇洗滌RNA沉淀一次，每1ml的TRIzol至少加1ml的75%乙醇。旋渦振蕩混合樣品5分鐘。并在2~8°C下以不超過7,500×g的離心力高速冷凍離心5.RNA的再溶解在操作的最后，簡單干燥的是，不能讓RNA沉淀（空氣干燥或真空干燥5~10分鐘）不要在真空管里離心干燥RNA。尤為重要RNA沉淀完全干燥那樣會極大地降低它的可溶性。部分溶解的RNA樣品其A260/280比值<1.6。用移液管尖分幾次移取無并在55~60°C下孵育10分鐘（當(dāng)RNA以后要用于酶切反應(yīng)時(shí)，避免使用RNA酶的水或0.5%SDS溶液來溶解RNA，SDS。）RNA還能被100%甲酰胺（除去離子）再溶解并保存在–70°C。RNA抽提注意事項(xiàng)：1.從少量的組織(1~10mg)或細(xì)胞(102~104)中分離RNA樣品：往組織或細(xì)胞中加入800μlTRIzol。待樣品裂解后，加入氯仿并進(jìn)行步驟2中的抽提操作。在用異丙醇沉淀RNA之前，加入5~10μg無RNA酶的glycogen作為水樣層的載體。為降低其黏度在加入氯仿前用樣層中并和RNA共析出。在濃縮到26號注射器抽吸兩次以切斷基因組4mg/ml之前它不會抑制逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)第一鏈的合成也不會抑制DNA。Glycogen會留在水PCR。2.在勻化后和加入氯仿之前，樣品可以在–60~–70°C保存至少一個(gè)月。5~–20°C下至少可保存一年。RNA沉淀（步驟4，RNA漂洗）溶于75%的乙醇在2~8°C至少可以保存一周，在–3.臺式離心機(jī)最能大達(dá)到2,600×g的離心力，如果將離心時(shí)間延長到30~60分鐘可以滿足步驟2和步驟3中的操作疑難解答：每1mg組織或1×106培養(yǎng)細(xì)胞預(yù)期的RNA產(chǎn)量1.肝和脾，6~10μg。2.腎，3~4μg。3.骨骼肌和腦組織，1~1.5μg。4.胎盤，1~4μg。5.上皮細(xì)胞(1×106culturedcells)，8~15μg。6.纖維母細(xì)胞(1×106culturedcells)，5~7μg抽提得率低1.樣品均化或裂解不完全。2.終RNA不完全再溶解。A260/A280比率<1.651.在分光光度計(jì)測量前用水而不是用TE緩沖液稀釋RNA樣品。低離子強(qiáng)度和低pH溶液會增加280nm處的光吸

收值。2.樣品勻漿化時(shí)所加的3.勻漿化后樣品沒有在室溫下放置4.分離的水樣層中污染有苯酚層。5.終RNA沒有完全溶解。RNA降解TRIzol量太少。5分鐘。1.從動物體取下的組織沒有立即進(jìn)行抽提或冰凍保存。2.用于抽提的樣品，或抽提的RNA樣品保存于–5~–20°C，而不是存放于–60~–70°C。3.細(xì)胞經(jīng)胰酶消化而分散。4.水溶液或試管污染有5.用于瓊脂糖凝膠電泳的福爾馬林DNA污染RNA酶。pH低于3.5。1.樣品勻漿化時(shí)所加的TRIzol量太少。2.用于抽提的樣品包含有機(jī)溶媒（例如，乙醇，蛋白多糖和多糖污染DMSO），強(qiáng)緩沖液，或堿性溶液。RNA中移去復(fù)合污染。以勻漿化時(shí)每下述的對RNA沉淀方法（步驟3）的改進(jìn)能從抽提的0.25ml的高鹽溶液改進(jìn)后的沉淀法能有效地析出1mlTRIzol為例，在水樣層中加入0.25ml異丙醇后再加入(0.8M檸檬酸鈉和1.2MNaCl)。將終溶液混勻，離RNA而多糖和蛋白多糖仍以可溶的的形式留在溶心并繼續(xù)進(jìn)行前述的抽提操作。液中。對于含有大量多糖的植物，要抽提其RNA將改進(jìn)后的沉淀法和在最初勻漿化時(shí)多加一次離心(RNA抽提指南，可選方案)合并使用是十分必要的。*總RNA快速抽提試劑盒適用范圍：全血、骨髓、組織、細(xì)胞、體液保存條件：室溫，保質(zhì)期2年。RB1液置4℃避光保存保質(zhì)期更長。

性能介紹：樣本量耗時(shí)全血、骨髓1-2ml，培養(yǎng)細(xì)胞<1×107，組織培養(yǎng)細(xì)胞:22min；全血:25min25-50μl<30mg，體液根據(jù)細(xì)胞量洗脫體積產(chǎn)量3-10μg/ml全血，100-300μg/1×107細(xì)胞，1-6μg/mg組織純度OD260/OD280:1.9－2.1特點(diǎn)1.特別設(shè)計(jì)針對1-2ml全血的提取，無需淋巴細(xì)胞分離液離心，不丟失粒細(xì)胞，因此獲得的RNA產(chǎn)量增加一倍2.是替代Trizol的升級產(chǎn)品，獲得的RNA產(chǎn)量與Trizol提取相同，但酚和乙醇?xì)埩羯?，提取過程中被RNase污染機(jī)會少，提取速度快3.使用Trizol提取少量RNA時(shí)，反復(fù)離心沉淀往往造成RNA丟失，每次提取的得率不一。本試劑盒可以捕獲少量RNA，不同提取批次間變異小cDNA文庫，RPA，NorthernBlot等用途RT-PCR，表達(dá)芯片分析，構(gòu)建試劑盒組成產(chǎn)品編號GS005-1(50次)GS005-2(200次)試劑盒組成RB150ml200ml80ml3×20ml10ml200套RB220ml洗液15ml洗脫液10ml內(nèi)套柱，外套柱鋼網(wǎng)，平皿，研磨棒說明書50套需要時(shí)另配（提取組織RNA時(shí)用）1份操作流程實(shí)驗(yàn)操作前請先認(rèn)真閱讀“注意事項(xiàng)”1．樣本預(yù)處理a．抗凝全血、骨髓：取1-2ml放入離心管中，12,000rpm離心2min，吸取中間白膜層細(xì)胞5mm尖即可。吸取的白膜層細(xì)胞中混有大量紅細(xì)胞，100μl至1.5ml1ml/30mg組織），eppendorf管中（吸取時(shí)用普通加樣槍頭口太小，剪去約不影響后繼提?。?；b．組織塊：剪切成小塊后放入平皿（置冰袋上預(yù)冷）中的鋼網(wǎng)上，加入用研磨棒將組織研磨擠壓過鋼網(wǎng)，收集過網(wǎng)懸液，取PBS或生理鹽水（約100μl放入eppendorf管中；c．培養(yǎng)細(xì)胞：懸浮細(xì)胞離心后留下細(xì)胞團(tuán)塊和適量上清（>100μl/1×107細(xì)胞），充分吹打直至沒有細(xì)胞團(tuán)

塊，取100μl放入eppendorf管中；貼壁細(xì)胞消化后處理同上。d．體液及其它液體性樣本：尿液、腹水、胸水、腦積液等根據(jù)需要取1-10ml，3,000rpm離心2min，留下沉100μl放入eppendorf管中；5min。淀及約100μl上清，充分震蕩懸浮沉淀，取2．處理好的樣本中，加入RB1液1ml，充分顛倒混勻直至完全溶解，室溫放置3．加入氯仿200μl，充分顛倒混勻1min，成均一的乳糜狀，離心5min。4．將上清液小心轉(zhuǎn)移到RNase-free的1.5mleppendorf里(離心分層后，可以吸取上層無色液體約為)。350μl，注意不要吸取任何中間層物質(zhì)5．加入RB2液350μl，充分顛倒混勻6．將混勻后的液體吸入或直接倒入內(nèi)套管，離心1min。1min。500μl洗液，離心1min。再重復(fù)此過程洗一次。1min。eppendorf管中，在膜中央加入洗脫液（或pH>7.0的DEPC處理水）25-50μl，室溫靜7．棄去外套管中液體，內(nèi)套管中加入8．取出內(nèi)套管，棄去外套管中液體，仍然套回內(nèi)套管，不加洗液，離心9．將內(nèi)套管移入新的置1min，離心1min，獲得總RNA。注意事項(xiàng)1.重要提示：RB1具有強(qiáng)烈腐蝕性立即用大量清水沖洗，必要時(shí)到門診處理。，操作時(shí)要戴手套和防護(hù)眼鏡，最好在通風(fēng)柜中進(jìn)行，若不慎沾染，2.離心速度均為12,000rpm-14,000rpm，室溫離心（有條件可4℃離心）。以eppendorf5417離心機(jī)為例，12,000rpm＝13,362g，其它類型離心機(jī)轉(zhuǎn)速應(yīng)達(dá)到相近的g數(shù)。3.首次使用時(shí)在洗液瓶中加入45ml無污染的分析純無水乙醇，用后擰緊瓶蓋。氯仿自備。4.避免環(huán)境中RNA酶污染，操作要戴手套，所有槍頭和eppendorf管以DEPC水處理。RNA大部分丟失，不能用于提取。5.血液抽取后應(yīng)在4小時(shí)內(nèi)提取RNA。凍存的血液6.盡量保證在膜中央加入洗脫液25μl-50μl，低于25μl將不能保證充分浸潤吸附膜。RNA的洗脫效率，而國內(nèi)實(shí)驗(yàn)室用水大多呈偏酸性，自備洗脫液時(shí)應(yīng)當(dāng)注7.洗脫液pH<7.0時(shí)會明顯降低意。本試劑盒提供的洗脫液為pH7.6。

*基因組DNA快速提取試劑盒適用范圍：全血、骨髓、細(xì)胞、組織、體液產(chǎn)品簡介：本試劑盒采用獨(dú)特的裂解緩沖液，裂解細(xì)胞釋放出核酸的漂洗液除去余留的蛋白和鹽份,再以特異性結(jié)合,然后通過洗脫得到高純度的基因組DNA的離心吸附柱吸附DNA.離心吸附柱中采用的硅基質(zhì)材料為本RNA及細(xì)胞中其他有機(jī)化合物。提取的DNA可適用于各種常規(guī)操作，DNA,通過特殊公司特有新型材料，高效、專一吸附DNA，可最大限度去除雜質(zhì)蛋白、基因組DNA片段大，純度高，質(zhì)量穩(wěn)定可靠。使用本試劑盒回收的包括酶切、PCR、文庫構(gòu)建、Southern雜交、分子標(biāo)記分析等實(shí)驗(yàn)。本試劑盒可從1μl-200μl全血中提取到3-35μgDNA.產(chǎn)品特點(diǎn)：簡單快速：30分鐘內(nèi)即可獲得超純的基因組超純高質(zhì)：獲得的DNA純度高，可直接用于酶切、DNA。Southern雜交、PCR等分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。安全方便:整個(gè)操作中不用酚保存條件：室溫，保質(zhì)期試劑盒組成:產(chǎn)品編號/氯仿有機(jī)物.2年。GS003-1GS003-2試劑盒組成純化次數(shù)50次200次溶液XY1溶液XY2漂洗液WP溶液XY3溶液Eluent純化柱100ml35ml30ml15ml5ml4×100ml2×70ml120ml2×30ml20ml50個(gè)200個(gè)注:溶液XY3初次使用前用無水乙醇按注意事項(xiàng):1：3稀釋，即含75%乙醇。1.離心速度均為12,000rpm-14,000rpm，室溫離心。2.首次使用時(shí)在洗液瓶中加入45ml無水乙醇。3.加XY1液100μl后，要漩渦振蕩或上下來回顛倒，確保形成均一的細(xì)胞懸液，此步驟非常重要，否則此

后DNA易聚集成團(tuán)，難以被充分裂解，降低得率。4.提取微量DNA樣本時(shí)，振蕩后靜置時(shí)間可以延長至20min，中間振蕩數(shù)次；5.樣本單次提取的限量是：全血<200μl，培養(yǎng)細(xì)胞<2×106，組織<10mg。樣本裂解物加入內(nèi)套管中離心1min結(jié)束后，如管中仍有液體，表明樣本超量或裂解不完全，導(dǎo)致吸附膜阻塞，應(yīng)減少樣品用量；6.盡量保證在膜中央加入洗脫液30-100μl，低于30μl將不能保證吸附膜被充分浸潤；室溫放置2min可以洗脫絕大部分DNA，如果是要求全部回收（如微量DNA提取），則放入55℃-60℃水浴5min。7.洗脫液pH<8.0時(shí)會明顯降低DNA的洗脫效率，而國內(nèi)實(shí)驗(yàn)室用水大多呈偏酸性，自洗備脫液時(shí)應(yīng)當(dāng)注意。本試劑盒提供的洗脫液為pH8.5（10mMTris-HCl）。8.提取的DNA可以放在4℃或-20℃保存數(shù)周，長期應(yīng)在-80℃分裝保存，避免反復(fù)凍融。操作方案:1.樣本預(yù)處理ⅰ．抗凝全血及骨髓：（1）取1-200μl放入1.5mleppendorf管中，加1ml溶液XY1，漩渦振蕩或上下來回顛倒混勻1min，充分吸棄上清，留下底部細(xì)胞團(tuán)塊；5-10次，離心（2）再加500μl溶液XY1,漩渦振蕩或上下來回顛倒懸浮細(xì)胞團(tuán)塊；,然后5000rpm,離心1分鐘，棄上清，留下底部（3）加100μl溶液XY1，漩渦振蕩或上下來回顛倒混，確保形成均一的細(xì)胞懸浮液；(如果從鳥類、兩棲類或更低級的動物中提取基因組DNA,因其血液中紅細(xì)胞有核,血液用量勿超過10μl).ⅱ．培養(yǎng)細(xì)胞：懸浮細(xì)胞（2×106）離心后吸去上清留下細(xì)胞團(tuán)塊，加入XY1液100μl，漩渦振蕩或上下來回顛倒混，確保形成均一的細(xì)胞懸液；貼壁細(xì)胞倒去培養(yǎng)上清后，加XY1液（100μl/2×106細(xì)胞），靜置2min，輕輕晃動形成細(xì)胞裂解液，取100μl放入eppendorf管中；ⅲ．組織塊：加XY1液（100μl/10mg組織）研磨組織，收集懸液用液氮中搗碎或勻漿的方法）；50μl-100μl放入eppendorf管中（也可采1-10ml，離心1min，吸棄上清，加入ⅳ．體液及其它液體性樣本：尿液、腹水、胸水、腦積液等根據(jù)需要取XY1液100μl，漩渦振蕩或上下來回顛倒混，確保形成均一的細(xì)胞懸液（細(xì)胞密度較大的樣本參照培養(yǎng)懸浮細(xì)胞處理）；痰液用粗頭吸管直接吸取約100μl，放入eppendorf管中；5mm，放入eppendorf管中；ⅴ．頭發(fā)：連毛囊拔取后，剪取近發(fā)根處約ⅵ．其它：如咽拭子、血跡斑塊、沾染布片、煙頭、郵票等，直接剪取可能的痕跡沾染部分（直徑放入eppendorf管中，加XY1液100μl浸泡5min。<1cm），

2.加入600μl細(xì)胞核裂解液XY2,漩渦振蕩懸浮沉淀,室溫放置10分鐘，12000rpm,離心2分鐘。2分鐘，12000rpm,離心2分鐘，棄濾液。,12000rpm,離心1分鐘，棄濾液。3.將上清轉(zhuǎn)移至核酸純化柱中，室溫放置4.加500μl漂洗液WP于柱中5.加500μl溶液XY3于柱中,12000rpm,離心1分鐘，棄濾液。6.重復(fù)步驟4。7.12000rpm再離心2分鐘，以便去除干乙醇。8.將純化柱置于一新1.5ml小離心管中,加30-100μl溶液Elutent于柱中央，室溫放置2分鐘,12000rpm,離心2分鐘,得到基因組DNA溶液。*血液基因組DNA快速提取試劑盒(離心法)產(chǎn)品簡介：本試劑盒采用獨(dú)特的裂解緩沖液，裂解細(xì)胞釋放出核酸的漂洗液除去余留的蛋白和鹽份,再以特異性結(jié)合DNA的離心吸附柱吸附DNA,通過特殊,然后通過洗脫得到高純度的血液基因組DNA，可最大限度去除雜質(zhì)蛋白、使用本試劑盒回收的DNA.離心吸附柱中采用的硅基質(zhì)材料RNA及細(xì)胞中其他有機(jī)化合物。提DNA可適用于各種常規(guī)操作，為本公司特有新型材料，高效、專一吸附取的基因組DNA片段大，純度高，質(zhì)量穩(wěn)定可靠。包括酶切、PCR、文庫構(gòu)建、Southern雜交、分子標(biāo)記分析等實(shí)驗(yàn)。從1μl-200μl全血中可以提取到3-35μgDNA.本試劑盒可用于新鮮血液及冷凍血保存液基因組產(chǎn)品特點(diǎn)：DNA的提取.簡單快速：30分鐘內(nèi)即可獲得超純的基因組超純高質(zhì)：獲得的DNA純度高，可直接用于酶切、DNA。Southern雜交、PCR等分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。安全方便:整個(gè)操作中不用酚試劑盒組成：/氯仿有機(jī)物.產(chǎn)品編號GS006-1GS006-2試劑盒組成純化次數(shù)50次200次

紅細(xì)胞裂解液RS80ml35ml15ml5ml4×80ml2×65ml3×20ml20ml裂解液LS漂洗液PE洗脫液Eluent純化柱50個(gè)200個(gè)注:漂洗液PE初次使用前用無水乙醇按操作步驟1：3稀釋，即含75%乙醇。1.加1ml紅細(xì)胞裂解液RS于1.5ml小離心管中,然后加入血液1-200μl加有抗凝劑的血液,漩渦振蕩或上下來回顛倒混勻,5000rpm,離心1分鐘，棄上清.注：如果從鳥類、兩棲類或更低級的動物中提取基因組DNA,因其血液中紅細(xì)胞有核,血液用量勿超過10μl。2.加500μl紅細(xì)胞裂解液RS,漩渦振蕩或上下來回顛倒混勻,5000rpm,離心1分鐘，棄上清。注：若紅細(xì)胞溶解不完全,則沉淀物發(fā)紅,可再加300μl紅細(xì)胞裂解液RS,漩渦振蕩混勻,5000rpm,離心1分鐘。3.加入100μl紅細(xì)胞裂解液RS,完全懸浮沉淀。4.加入600μl裂解液LS,漩渦振蕩或上下來回顛倒混勻后,室溫放置10-15分鐘。5.將上清轉(zhuǎn)移至核酸純化柱中，室溫放置2分鐘，12000rpm,離心2分鐘，棄濾液。6.加500μl漂洗液PE于柱中,12000rpm,離心1分鐘，棄濾液。7.重復(fù)步驟6。8.≥12000rpm再離心2分鐘，以便去除干乙醇。9.將純化柱置于一新1.5ml小離心管中,加30-100μl洗脫液Eluent于純化柱中央,室溫放置2分鐘,12,000rpm~14,000rpm,離心2分鐘,得到DNA溶液。注：洗脫緩沖液體積不應(yīng)少于其pH值在7.0-8.5范圍內(nèi)，pH值低于7.0會降低洗脫效率；且測得的到基因組DNA片段的大小與樣品保存時(shí)間、操作過程中的剪切力等因素有關(guān)?；厥盏玫降暮妥贤夥止夤舛扔?jì)檢測濃度與純度。DNA應(yīng)在OD260處有顯著吸收峰，30μl，體積過小影響回收效率。洗脫液的pH對于洗脫效率有很大影響。若用水做洗脫液應(yīng)保證DNA產(chǎn)物應(yīng)保存在-20℃，以防DNA降解。DNA濃度及純度檢DNA片段可用瓊脂糖凝膠電泳OD260值為1相當(dāng)于大約50μg/ml雙鏈DNA、40μg/mlpH值和離子存單鏈DNA。OD260/OD280比值應(yīng)為1.7-1.9，如果洗脫時(shí)不使用洗脫緩沖液，而使用去離子水，比值會偏低，因?yàn)樵跁绊懝馕罩?，但并不表示純度低。儲存條件：該試劑盒置于室溫（15-25℃）干燥條件下，可保存24個(gè)月.*組織基因組DNA提取試劑盒(離心法)

產(chǎn)品簡介：本試劑盒采用獨(dú)特的裂解緩沖液，裂解細(xì)胞釋放出核酸的漂洗液除去余留的蛋白和鹽份,再以特異性結(jié)合DNA的離心吸附柱吸附DNA.離心吸附柱中采用的硅基質(zhì)材料為本RNA及細(xì)胞中其他有機(jī)化合物。提取的DNA可適用于各種常規(guī)操作，DNA,通過特殊,然后通過洗脫得到高純度的基因組DNA，可最大限度去除雜質(zhì)蛋白、使用本試劑盒回收的公司特有新型材料，高效、專一吸附基因組DNA片段大，純度高，質(zhì)量穩(wěn)定可靠。包括酶切、PCR、文庫構(gòu)建、Southern雜交、分子標(biāo)記分析等實(shí)驗(yàn)。產(chǎn)品特點(diǎn)：簡單快速：30分鐘內(nèi)即可獲得超純的基因組DNA。超純高質(zhì)：獲得的安全方便:整個(gè)操作中不用酚試劑盒組成：DNA純度高，可直接用于酶切、Southern雜交、PCR等分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。/氯仿有機(jī)物.產(chǎn)品編號GS007-1GS007-2試劑盒組成純化次數(shù)50次200次緩沖液ZS裂解液LS漂洗液PE洗脫液Eluent純化柱25ml35ml15ml5ml50個(gè)100ml2×70ml2×30ml20ml200個(gè)注:溶液DZPE初次使用前用無水乙醇按1：3稀釋，即含75%乙醇。組織基因組DNA提取操作步驟：1.將樣品研磨成勻漿后（研磨成粉末后取100μl緩沖液ZS/10mg組織），取100μl放入1.5ml離心管中，或用液氮10mg放入1.5ml離心管中,加100μlZS漩渦振蕩混勻，確保形成均一的懸浮液，室溫放置5分鐘。2.加入600μl裂解液LS,漩渦振蕩懸浮沉淀3.將上清轉(zhuǎn)移至核酸純化柱中，室溫放置,室溫放置10分鐘，12000rpm,離心1分鐘。2分鐘，12000rpm,離心2分鐘，棄濾液。4.加500μl漂洗液PE于純化柱中,12000rpm,離心1分鐘，棄濾液。5.重復(fù)步驟4。6.12000rpm再離心2分鐘，以便去除干乙醇。7.將純化柱置于一新1.5ml小離心管中,加30-100μl洗脫液Eluent于純化柱中央,室溫放置2分鐘.12000rpm,離心2分鐘,得到DNA溶液。注：洗脫緩沖液體積不應(yīng)少于30μl，體積過小影響回收效率。洗脫液的pH對于洗脫效率有很大影響。若用水做洗脫液應(yīng)保證DNA產(chǎn)物應(yīng)保存在-20℃，以防DNA降解。DNA濃度及純度檢其pH值在7.0-8.5范圍內(nèi)，pH值低于7.0會降低洗脫效率；且

測得到的基因組DNA片段的大小與樣品保存時(shí)間、操作過程中的剪切力等因素有關(guān)。回收得到的DNA片段可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計(jì)檢測濃度與純度。DNA應(yīng)在OD260處有顯著吸收峰，OD260值為1相當(dāng)于大約50μg/ml雙鏈DNA、40μg/mlpH值和離子存單鏈DNA。OD260/OD280比值應(yīng)為1.7-1.9，如果洗脫時(shí)不使用洗脫緩沖液，而使用去離子水，比值會偏低，因?yàn)樵跁绊懝馕罩担⒉槐硎炯兌鹊?。注：所用的組織量不要多于10mg。儲存條件：該試劑盒置于室溫（15-25℃）干燥條件下，可保存24個(gè)月.*培養(yǎng)細(xì)胞基因組DNA提取試劑盒(離心法)產(chǎn)品簡介：本試劑盒采用獨(dú)特的裂解緩沖液，裂解細(xì)胞釋放出核酸的漂洗液除去余留的蛋白和鹽份,再以特異性結(jié)合DNA的離心吸附柱吸附DNA.離心吸附柱中采用的硅基質(zhì)材料為本RNA及細(xì)胞中其他有機(jī)化合物。提取的DNA可適用于各種常規(guī)操作，DNA,通過特殊,然后通過洗脫得到高純度的基因組DNA，可最大限度去除雜質(zhì)蛋白、公司特有新型材料，高效、專一吸附基因組DNA片段大，純度高，質(zhì)量穩(wěn)定可靠。使用本試劑盒回收的包括酶切、PCR、文庫構(gòu)建、Southern雜交、分子標(biāo)記分析等實(shí)驗(yàn)。產(chǎn)品特點(diǎn)：單簡快速：30分鐘內(nèi)即可獲得超純的基因組超純高質(zhì)：獲得的DNA純度高，可直接用于酶切、DNA。Southern雜交、PCR等分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。安全方便:整個(gè)操作中不用酚試劑盒組成：/氯仿有機(jī)物.產(chǎn)品編號GS008-1GS008-2試劑盒組成純化次數(shù)50次200次100ml2×70ml2×30ml20ml緩沖液XS裂解液LS漂洗液PE洗脫液Eluent純化柱25ml35ml15ml5ml50個(gè)200個(gè)注:溶液JYPE初次使用前用無水乙醇按1：3稀釋，即含75%乙醇。培養(yǎng)細(xì)胞基因組DNA提取操作步驟：1.用1.5ml離心管收集0.5-1.0ml菌液，12000rpm離心60秒，棄上清。

2.加100μl緩沖液XS,漩渦振蕩或上下來回顛倒混勻，完全懸浮沉淀，室溫放置5分鐘，以便下一步裂解充分。3.加入600μl裂解液LS,漩渦振蕩懸浮沉淀4.將上清轉(zhuǎn)移至核酸純化柱中，室溫放置,室溫放置10分鐘。2分鐘，12000rpm,離心2分鐘，棄濾液。5.加500μl漂洗液重復(fù)步驟5。PE于純化柱中,12000rpm,離心1分鐘，棄濾液。6.12000rpm再離心7.將純化柱置于一新2分鐘，以便去除干乙醇。1.5ml小離心管中,加30-100μl洗脫液Eluent于純化柱中央,室溫放置2分鐘,12000rpm,離心2分鐘,得到DNA溶液。注：洗脫緩沖液體積不應(yīng)少于30μl，體積過小影響回收效率