第三章園藝植物種子檢驗(yàn)的原理與技術(shù)詳解演示文稿

第三章園藝植物種子檢驗(yàn)的原理與技術(shù)詳解演示文稿現(xiàn)在是1頁\一共有36頁\編輯于星期五優(yōu)選第三章園藝植物種子檢驗(yàn)的原理與技術(shù)現(xiàn)在是2頁\一共有36頁\編輯于星期五四、真實(shí)性和品種純度鑒定（二）種子真實(shí)性和品種純度鑒定的原理檢驗(yàn)品種的特異性（Distinctness）、一致性（Uniformity）、穩(wěn)定性（Stability），即DUS測試特異性：每個(gè)品種都具有明顯區(qū)別其他品種的特征，包括表型特征、解剖特征、代謝特征、分子特征等一致性：每個(gè)品種不同個(gè)體之間具有相同的特征穩(wěn)定性：采用合理的繁殖方式，品種的特征是可以穩(wěn)定遺傳的借助各種有效手段，找出不同品種在形態(tài)學(xué)、細(xì)胞遺傳學(xué)、解剖學(xué)、生理學(xué)、生物化學(xué)、分子生物學(xué)等方面的差異現(xiàn)在是3頁\一共有36頁\編輯于星期五四、真實(shí)性和品種純度鑒定（三）種子真實(shí)性和品種純度的監(jiān)控途徑影響種子真實(shí)性和品種純度的因素有遺傳分離、自然變異、生物學(xué)混雜、機(jī)械混雜和其他不可預(yù)知的因素等。針對以上因素，監(jiān)控種子真實(shí)性和品種純度的主要途徑有：1、田間檢驗(yàn)：在種子田植株生長期間監(jiān)控種子真實(shí)性和品種純度，不符合田間標(biāo)準(zhǔn)的種子田不準(zhǔn)收獲2、實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)3、田間小區(qū)種植檢驗(yàn)防止機(jī)械混雜現(xiàn)在是4頁\一共有36頁\編輯于星期五四、真實(shí)性和品種純度鑒定（四）實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)各種方法在準(zhǔn)確性、經(jīng)濟(jì)性、可操作性等方面均有不同程度差異，可根據(jù)實(shí)際檢驗(yàn)?zāi)康暮鸵筮x擇合適的技術(shù)和方法。總的原則：簡單、易行、經(jīng)濟(jì)、準(zhǔn)確、快速。1、種子形態(tài)鑒定法根據(jù)不同品種在種子形態(tài)特征方面的差異進(jìn)行鑒定，如種子花紋、大小、形狀、光澤、蠟質(zhì)、種臍等鑒定時(shí)，需備好標(biāo)準(zhǔn)樣品的相關(guān)資料，必要時(shí)可借助放大鏡等工具逐粒檢驗(yàn)現(xiàn)在是5頁\一共有36頁\編輯于星期五四、真實(shí)性和品種純度鑒定（四）實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)1、種子形態(tài)鑒定法優(yōu)點(diǎn)：簡單易行，不需要復(fù)雜設(shè)備缺點(diǎn)：可供鑒別的種子形態(tài)特征有限，有時(shí)不易區(qū)分環(huán)境因素對種子形態(tài)特征的影響，且受主觀因素影響較大鑒定方法：隨機(jī)從送驗(yàn)樣品中數(shù)取4份種子，每份100粒種子，逐粒觀察，區(qū)分出本品種和異品種種子，計(jì)數(shù)，并按下列公式計(jì)算品種純度百分率。現(xiàn)在是6頁\一共有36頁\編輯于星期五四、真實(shí)性和品種純度鑒定（四）實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)2、幼苗形態(tài)鑒定法在合適的發(fā)育條件下，讓幼苗發(fā)育到一定階段，根據(jù)幼苗的形態(tài)特征區(qū)別不同品種，或在一定的逆境條件下，根據(jù)品種對逆境的反應(yīng)來鑒別不同品種。鑒定方法：隨機(jī)從送驗(yàn)樣品中數(shù)取4份種子，每份100粒。在培養(yǎng)室或溫室中種植，當(dāng)幼苗長到適宜評價(jià)的階段時(shí)，根據(jù)不同品種之間幼苗形態(tài)上的差異，對幼苗進(jìn)行鑒定。如葉緣形狀、下胚軸顏色、子葉形狀等?，F(xiàn)在是7頁\一共有36頁\編輯于星期五四、真實(shí)性和品種純度鑒定（四）實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)2、幼苗形態(tài)鑒定法甜菜不同品種的葉柄顏色現(xiàn)在是8頁\一共有36頁\編輯于星期五四、真實(shí)性和品種純度鑒定（四）實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)3、物理鑒定法應(yīng)用較多的是熒光分析法，其原理是不同類型和品種的種子，其種皮結(jié)構(gòu)和化學(xué)成分不同，在紫外線照射下發(fā)出的熒光也不同。鑒定方法：取試樣4份，每份100粒，分別排列在黑紙上，放于波長365nm的紫外光下照射，數(shù)分鐘后即可觀察。菜用豌豆發(fā)淡藍(lán)色或粉紅色熒光，谷實(shí)豌豆發(fā)褐色熒光白菜綠色，白芥鮮紅色，黑芥深藍(lán)色，田芥鮮藍(lán)色現(xiàn)在是9頁\一共有36頁\編輯于星期五四、真實(shí)性和品種純度鑒定（四）實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)4、化學(xué)鑒定法根據(jù)不同品種皮殼成分和化學(xué)物質(zhì)對不同化學(xué)試劑反應(yīng)顯色的差異來鑒定品種。鑒定方法：取試樣2份，每份100粒，將每粒種子放入直徑為8mm的小試管中，每管加入3滴10%的NaOH，25-28℃下放置2h，取出種子鑒定浸出液顏色結(jié)球甘藍(lán)櫻桃色，花椰菜櫻桃色至玫瑰色，抱子甘藍(lán)和皺葉甘藍(lán)濃茶色，油菜、芥菜和蕓薹淺黃色，蕪菁白色小麥種子NaOH現(xiàn)在是10頁\一共有36頁\編輯于星期五四、真實(shí)性和品種純度鑒定（四）實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)5、田間小區(qū)種植鑒定法鑒定品種真實(shí)性和純度最常用、最可靠、最準(zhǔn)確的方法，適用于種子質(zhì)量糾紛的仲裁試驗(yàn)，并作為賠償損失的依據(jù)。（1）標(biāo)準(zhǔn)樣品的使用為了鑒定品種真實(shí)性，應(yīng)在鑒定的各個(gè)階段與標(biāo)準(zhǔn)樣品進(jìn)行比較。標(biāo)準(zhǔn)樣品應(yīng)代表品種原有的特征、特性，最好是育種家種子?，F(xiàn)在是11頁\一共有36頁\編輯于星期五四、真實(shí)性和品種純度鑒定（四）實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)5、田間小區(qū)種植鑒定法（2）田間小區(qū)的設(shè)置為使品種特征、特性充分表現(xiàn)，試驗(yàn)的設(shè)計(jì)和布局上要選擇氣候環(huán)境條件適宜、土壤均勻、肥力一致、前茬無同類作物和雜草的田塊，并有適宜的栽培管理措施。每個(gè)樣品最少有2個(gè)重復(fù)，為了避免失敗，重復(fù)應(yīng)適當(dāng)布置在不同田塊上。小區(qū)的大小應(yīng)為準(zhǔn)確鑒定提供足夠的植株數(shù)?，F(xiàn)在是12頁\一共有36頁\編輯于星期五四、真實(shí)性和品種純度鑒定（四）實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)5、田間小區(qū)種植鑒定法（3）種植密度的確定和種植株數(shù)的計(jì)算播種時(shí)應(yīng)有足夠的株距和行距，大株作物可適當(dāng)增加行株距，必要時(shí)可用點(diǎn)播和點(diǎn)栽。種植株數(shù)要根據(jù)國家標(biāo)準(zhǔn)種子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的要求而定。一般用公式表示，b為標(biāo)準(zhǔn)品種純度。如標(biāo)準(zhǔn)純度為98%時(shí)，N為200株即可達(dá)到要求?，F(xiàn)在是13頁\一共有36頁\編輯于星期五四、真實(shí)性和品種純度鑒定（四）實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)5、田間小區(qū)種植鑒定法（4）鑒定時(shí)期許多種在幼苗期就有可能鑒別出品種真實(shí)性和純度，但成熟期，花期和食用器官成熟期是品種特征、特性表現(xiàn)最明顯的時(shí)期，必須進(jìn)行鑒定。現(xiàn)在是14頁\一共有36頁\編輯于星期五四、真實(shí)性和品種純度鑒定（四）實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)6、生理生化鑒定法根據(jù)品種所特有的蛋白質(zhì)或同工酶（電泳法、免疫技術(shù)）和代謝產(chǎn)物（色譜法）來進(jìn)行品種純度鑒定。比較簡單和常用的是電泳法，根據(jù)蛋白譜帶的組成及一致性，來區(qū)分本品種和異品種。現(xiàn)在是15頁\一共有36頁\編輯于星期五四、真實(shí)性和品種純度鑒定（四）實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)7、分子標(biāo)記鑒定法在DNA和RNA等分子水平上鑒別不同品種，最常用的是SSR、RAPD、AFLP、ISSR、SCAR、SRAP等。其中，SSR標(biāo)記應(yīng)用最多，為共顯性標(biāo)記，可區(qū)分雙親和F1。甘藍(lán)種子純度鑒定現(xiàn)在是16頁\一共有36頁\編輯于星期五現(xiàn)在是17頁\一共有36頁\編輯于星期五四、真實(shí)性和品種純度鑒定（四）實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)8、檢驗(yàn)結(jié)果報(bào)告現(xiàn)在是18頁\一共有36頁\編輯于星期五六、種子生活力測定（一）種子生活力測定的意義1、概念種子生活力指種子發(fā)芽的潛在能力或種胚所具有的生命力。2、意義（1）休眠種子必須通過測定生活力才能了解其真正品質(zhì)和潛在發(fā)芽能力。（2）種子貿(mào)易中可以快速預(yù)測種子發(fā)芽能力?，F(xiàn)在是19頁\一共有36頁\編輯于星期五六、種子生活力測定（二）種子生活力測定的方法1、四唑（TTC）染色法（1）原理：有活力種子的胚在呼吸過程中會(huì)發(fā)生氧化還原反應(yīng)，三苯基四氮唑（TTC）為無色指示劑，被種子活組織吸收后，會(huì)參與活細(xì)胞的還原反應(yīng)，從脫氫酶接受H+，在活細(xì)胞中產(chǎn)生紅色、穩(wěn)定、不擴(kuò)散、不溶于水的三苯基甲臜。而無活力組織無此反應(yīng)故不染色。判斷種子有無活力，主要取決于染色部位和染色面積，而不一定在于顏色的深淺?，F(xiàn)在是20頁\一共有36頁\編輯于星期五六、種子生活力測定（二）種子生活力測定的方法1、四唑（TTC）染色法（2）應(yīng)用范圍：測定休眠種子的發(fā)芽潛力測定收獲后馬上播種的種子發(fā)芽潛力測定發(fā)芽緩慢種子的發(fā)芽潛力測定發(fā)芽末期未發(fā)芽種子的發(fā)芽潛力測定因收獲或加工而受損種子的發(fā)芽潛力，并探明原因查明發(fā)芽試驗(yàn)中不正常幼苗的原因查明種子貯藏期間劣變衰老程度為種子貿(mào)易快速測定種子活力現(xiàn)在是21頁\一共有36頁\編輯于星期五六、種子生活力測定（二）種子生活力測定的方法1、四唑（TTC）染色法（3）測定方法①扦取試樣：從凈種子中隨機(jī)取樣4份，每份100粒。②預(yù)處理：使種子加快和充分吸濕，軟化種皮，方便樣品準(zhǔn)備和促進(jìn)活組織酶系統(tǒng)的活化。預(yù)措：除去種子外部的附屬物，包括剝?nèi)ス麣ず团品N皮，但不能損傷種子內(nèi)部胚的主要構(gòu)造。預(yù)濕：包括快速水浸預(yù)濕（活力強(qiáng)、不易破裂種子）、緩慢紙床預(yù)濕（活力弱、易破裂種子）、H2O2溶液浸種預(yù)濕等（加速酶系統(tǒng)活化）。現(xiàn)在是22頁\一共有36頁\編輯于星期五六、種子生活力測定（二）種子生活力測定的方法1、四唑（TTC）染色法（3）測定方法③樣品準(zhǔn)備：去掉種皮，沒種胚縱切成兩半，使種胚的主要構(gòu)造暴露在切面上，便于染色和鑒別。④TTC染色：將每份100-200個(gè)半粒種子，分別浸入TTC溶液，室溫下染色10-12h。為加快染色，可放入30-45℃的溫箱內(nèi)染色或采用抽真空技術(shù)。如在規(guī)定時(shí)間內(nèi)樣品的染色不夠充分，可適當(dāng)延長染色時(shí)間，以確定是TCC滲入速度問題，還是種子胚的缺陷現(xiàn)在是23頁\一共有36頁\編輯于星期五六、種子生活力測定（二）種子生活力測定的方法1、四唑（TTC）染色法（3）測定方法⑤鑒定：取出染色的種子并用清水沖洗干凈，放在白色濾紙上逐粒觀察胚和胚乳的染色情況。有生活力種子：胚被染成有光澤的鮮紅色不正常種子：胚的主要構(gòu)造局部不染色或染色異常死種子：完全不染色或染成無光澤的淡紅色或灰白色現(xiàn)在是24頁\一共有36頁\編輯于星期五六、種子生活力測定（二）種子生活力測定的方法1、四唑（TTC）染色法（3）測定方法⑥結(jié)果計(jì)算：統(tǒng)計(jì)有生活力種子的個(gè)數(shù)，并計(jì)算種子生活力百分率，如果重復(fù)間差距超過最大容許差距（P116，表4-4），需重新進(jìn)行測定。⑦測定結(jié)果填報(bào)在檢驗(yàn)結(jié)果報(bào)告單的規(guī)定空格中，精確度為1%。現(xiàn)在是25頁\一共有36頁\編輯于星期五六、種子生活力測定（二）種子生活力測定的方法現(xiàn)在是26頁\一共有36頁\編輯于星期五六、種子生活力測定（二）種子生活力測定的方法2、靛藍(lán)染色法和紅墨水染色法（1）測定原理衰老種子或死種子的原生質(zhì)膜失去選擇性透性，細(xì)胞外的染色劑容易進(jìn)入細(xì)胞，故細(xì)胞被染色，而活細(xì)胞不能被染色，所以根據(jù)胚組織的染色反應(yīng)可區(qū)分無活力種子和有活力種子。靛藍(lán)染色法：死胚染成藍(lán)色，活胚不染色紅墨水染色法：死胚染成紅色，活胚不染色應(yīng)用范圍：豆類、谷類和瓜類等大粒種子現(xiàn)在是27頁\一共有36頁\編輯于星期五六、種子生活力測定（二）種子生活力測定的方法2、靛藍(lán)染色法和紅墨水染色法（2）測定方法種子準(zhǔn)備與TTC法相同。將每份100-200個(gè)半粒種子放入培養(yǎng)皿中（剖面向下），立即注入靛藍(lán)溶液或紅墨水，淹沒種胚進(jìn)行染色。到規(guī)定時(shí)間將種子取出、洗凈，再進(jìn)行鑒定。種子活力鑒定方法與TTC法相同?，F(xiàn)在是28頁\一共有36頁\編輯于星期五第三節(jié)種子田間檢驗(yàn)技術(shù)在植物生長期間，到種子生長田進(jìn)行檢驗(yàn)，是保證種子質(zhì)量的重要措施，具有可操作性好且鑒定結(jié)果可靠等優(yōu)點(diǎn)。一、田間檢驗(yàn)的內(nèi)容（1）檢查種子生產(chǎn)田是否符合要求（如隔離、前茬作物等）（2）檢查種子生產(chǎn)程序是否符合要求（3）檢查異作物情況（4）檢查雜草情況（5）檢查病蟲害情況（6）檢查植株生長狀況（7）計(jì)算判定是否符合種子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，能否作為種用種子?，F(xiàn)在是29頁\一共有36頁\編輯于星期五二、對田間檢驗(yàn)員的要求田間檢驗(yàn)是通過田間檢驗(yàn)員來完成的，必須滿足以下條件（1）必須經(jīng)過培訓(xùn)，通過田間檢驗(yàn)原理和程序知識(shí)的書面考核、田間檢驗(yàn)技能的實(shí)踐考核（2）必須熟悉田間檢驗(yàn)方法和田間標(biāo)準(zhǔn)、品種特征特性、種子生產(chǎn)的方法和程序等方面的知識(shí)（3）必須具備能依據(jù)品種特征特性證實(shí)品種真實(shí)性，能鑒別種子田混雜株并使之量化的能力（4）對被檢品種有豐富的知識(shí)，熟悉被檢種品種間差異的特征特性現(xiàn)在是30頁\一共有36頁\編輯于星期五二、對田間檢驗(yàn)員的要求（5）有良好的健康，每年保持一定田間檢驗(yàn)工作量，技能一直保持良好的狀態(tài)（6）應(yīng)獨(dú)立地根據(jù)檢驗(yàn)結(jié)果報(bào)告田間狀況并作出評價(jià)，評價(jià)結(jié)果只對檢查機(jī)構(gòu)負(fù)責(zé)種子田間檢驗(yàn)現(xiàn)在是31頁\一共有36頁\編輯于星期五三、田間檢驗(yàn)的次數(shù)及時(shí)期田間檢驗(yàn)可按苗期、開花期、成熟期等3個(gè)時(shí)期分多次進(jìn)行如果條件不允許，也可在品種性狀表現(xiàn)最充分時(shí)進(jìn)行1次檢查。如雜交制種田在開花期，蔬菜植物在產(chǎn)品器官成熟期現(xiàn)在是32頁\一共有36頁\編輯于星期五四、田間檢驗(yàn)的一般程序（一）了解情況和檢查標(biāo)簽1、了解情況通過與生產(chǎn)者面談與檢查，全面了解：種子田編號(hào)、申請者姓名、作物、品種、類別（等級）、農(nóng)戶姓名和電話、種子田位置、田塊號(hào)碼、面積、前作詳情（檔案）、種子批號(hào)。2、檢查標(biāo)簽為了證實(shí)品種的真實(shí)性，有必要核查標(biāo)簽，了解種子來源詳情。為此，生產(chǎn)者至少應(yīng)保留種子批的兩個(gè)標(biāo)簽，一個(gè)樹立在田間，另一個(gè)留用備查。生產(chǎn)雜交種包括父、母本的種子標(biāo)簽和田間分布圖?，F(xiàn)在是33頁\一共有36頁\編輯于星期五四、田間檢驗(yàn)的一般程序（二）檢查隔離情況和種子田總體狀況1、檢查隔離情況檢驗(yàn)員根據(jù)生產(chǎn)者提供種子田和周邊田塊的地圖，繞種子田外圈行走，核查隔離情況。隔離距離應(yīng)達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的最低距離，其中包括收獲期間機(jī)械混雜隔離以及已受種傳病害感染的其他田塊的隔離。檢驗(yàn)員也應(yīng)該觀察種子田和周圍田塊的自生苗、其他作物或雜草，這也可能是污染的花粉源