各省PCR上崗證考試題庫(kù)

1、廣東省臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員理論培訓(xùn)班理論考試卷一， 填空（每題2分，共20分）1. DNA雙螺旋中兩條鏈走向是 反向 平行的，即一股鏈?zhǔn)?53 走向，另一股鏈為 35 走向；生物合成方向是 53 。2. 在極端的PH值或受熱條件下，核酸分子中的 氫鍵 斷裂， 雙螺旋 結(jié)構(gòu)解開，即為核酸變性。3. 核酸分子的雜交其實(shí)就是DNA 變性 、 復(fù)性 原理的應(yīng)用。4. PCR擴(kuò)增的三個(gè)基本階段是 變性 、 退火 、 延伸 ，引物與模板的結(jié)合發(fā)生在 退火 階段5. 反轉(zhuǎn)錄酶催化的DNA合成反應(yīng)按 53 方向進(jìn)行，在DNA合成時(shí)也需要引物，引物為病毒顆粒中的 mRNA 。6. PCR測(cè)定中的“假陽(yáng)

2、性”的最主要的來(lái)源是 PCR產(chǎn)物 的污染。7. 請(qǐng)?zhí)畛鲆韵赂鞣N微量移液器可取溶液的體積范圍P10 P20 2-20ul P100 20-100ul P200 50-200ul 如需吸取100ul液體，則最好使用 P100 加樣器。8. 在基因擴(kuò)增檢驗(yàn)中，使用的帶濾塞吸頭吸加液體，只要是為了 防止標(biāo)本間交叉污染 。9. TapMan熒光PCR測(cè)定原理中的關(guān)鍵點(diǎn)在于利用了Tap酶的 53 的外切酶活性，Ct值指的是 每個(gè)反應(yīng)管內(nèi)的熒光信號(hào)到達(dá)設(shè)定閾值時(shí)所經(jīng)歷的循環(huán)數(shù) 。10. 個(gè)體化醫(yī)學(xué)的全面定義： 分為疾病風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測(cè)（基因檢測(cè)）和個(gè)體化治療（基因檢測(cè)）兩個(gè)方面，基因預(yù)測(cè)疾病風(fēng)險(xiǎn)是指根據(jù)每個(gè)人的疾病

3、基因組信息預(yù)測(cè)疾病的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)。個(gè)體化治療是指根據(jù)每個(gè)人的疾病基因組信息對(duì)已發(fā)生的疾病進(jìn)行治療 。二， 是非題（正確的后面打，錯(cuò)誤的后面打，并將錯(cuò)誤處劃線并改正，每題兩分，未改正得1分，共20分）1. DNA雙鏈中，堿基對(duì)總是A-T ,C-G配伍，其間以兩個(gè)氫鍵相連。（） G-C間以三個(gè)氫鍵相連 2. 使用有防“污染”作用的UNG的PCR試劑盒，PCR實(shí)驗(yàn)室就不必嚴(yán)格分區(qū)。（） UNG酶只對(duì)低濃度的產(chǎn)物污染有效 3. 在全血、骨髓標(biāo)本的采集時(shí)，可使用EDTA、枸緣酸鈉或肝素抗凝。（）不能使用肝素抗凝 4. 血清HBeAg的存在是HBV感染及感染程度的確證標(biāo)志。（）HBeAg是病毒復(fù)制的標(biāo)志 5.

4、 在PCR試劑盒中所使用的UTP與天然RNA分子中的U沒(méi)什么區(qū)別。（）6. 基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室“可移動(dòng)紫外燈”的作用主要是便于實(shí)驗(yàn)室臺(tái)面的消毒殺菌。（）7. 定量PCR與定性PCR測(cè)定原理的最主要區(qū)別點(diǎn)在于前者的測(cè)定點(diǎn)在PCR的指數(shù)擴(kuò)增期，而后者多為擴(kuò)增平臺(tái)期。（）8. 加樣器只要在其量程范圍內(nèi)，其吸液準(zhǔn)確度均相同。（）不同規(guī)格的加樣器之間準(zhǔn)確度不同 9. 室內(nèi)質(zhì)量控制（IQC）監(jiān)測(cè)和控制的是實(shí)驗(yàn)室測(cè)定的精密度（重復(fù)性），而室間質(zhì)量評(píng)價(jià)則通過(guò)不同的實(shí)驗(yàn)室測(cè)定結(jié)果的比對(duì)而評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)室測(cè)定的準(zhǔn)確度。（）10. 臨床檢驗(yàn)中的系統(tǒng)誤差通常表現(xiàn)為質(zhì)控物測(cè)定SD的增大。（）三， 選擇題（每題2分，共20分）

5、1. 在核酸提取時(shí)，常需使用氯化鈉、醋酸鈉等鹽溶液，其目的是：（A）A 中和核酸的負(fù)離子，使其易于沉淀 B 調(diào)節(jié)PH值 C 保證核酸的完整性 D無(wú)特定目的2. 臨床上使用核酸擴(kuò)增方法診斷沙眼衣原體感染，在標(biāo)本收集上最為關(guān)鍵的是：（B ）A 標(biāo)本的采取方式 B標(biāo)本的保存方式 C標(biāo)本的運(yùn)送方式 D標(biāo)本采取的時(shí)間3. 之所以要將基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室的產(chǎn)物分析區(qū)設(shè)置為負(fù)壓狀態(tài)，目的是：（B）A 防止生物傳染危險(xiǎn)物的逸出 B 防止擴(kuò)增產(chǎn)物從該區(qū)進(jìn)入上游區(qū)域C 防止該區(qū)灰塵的逸出 D 無(wú)特殊目的4. 核酸探針的標(biāo)志性特征是：（D）A一小段已知序列的單鏈核酸 B 一小段未知序列的單鏈核酸C 一小段已知序列的雙

6、鏈核酸 D 有同位素或非同位素標(biāo)記物5. 核酸提取純化中，RNase最主要的潛在污染源是：（D）A 實(shí)驗(yàn)室環(huán)境 B 實(shí)驗(yàn)用品如吸頭、離心管等 C實(shí)驗(yàn)人員的手 D 以上A和B6. PCR方法檢測(cè)病原微生物所擴(kuò)增的區(qū)段，一般為：（B）A 整個(gè)病原體基因組 B 病原體基因組內(nèi)的保守區(qū)域 C 病原體基因組內(nèi)的任一區(qū)域 D 以上都不是7. 無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前基因診斷為胎兒做出基因檢測(cè)，需從孕婦外周血中分離獲取及少量的：（B）A 孕婦有核紅細(xì)胞 B 胎兒有核紅細(xì)胞 C 白細(xì)胞 D 以上均可8. 臨床PCR測(cè)定的重復(fù)性不好的原因如下，但除外：（B）A 試劑盒核酸提取方法對(duì)擴(kuò)增抑制物去除不干凈 B標(biāo)準(zhǔn)品濃度不準(zhǔn)C 核酸

7、擴(kuò)增儀空間溫度不均 D 加樣重復(fù)性差9. 有關(guān)于動(dòng)力學(xué)定量PCR方法中對(duì)擴(kuò)增效率的測(cè)定，下述哪一條是錯(cuò)誤的：（B）A 必須在擴(kuò)增的指數(shù)期內(nèi)測(cè)定 B 可在擴(kuò)增的任何階段進(jìn)行C 與擴(kuò)增產(chǎn)物的測(cè)定有關(guān) D 盡可能多選幾個(gè)測(cè)定點(diǎn)10. 臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)的室內(nèi)質(zhì)量控制與通常的臨床定性免疫測(cè)定IQC的最大不同在于：（D）A 弱陽(yáng)性質(zhì)控血清的設(shè)置 B強(qiáng)陽(yáng)性質(zhì)控血清的設(shè)置 C陰性質(zhì)控血清的設(shè)置 D 以上均是四， 問(wèn)答題（40分）1. 有一基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室在檢測(cè)臨床血清標(biāo)本HCV RNA時(shí)，以HCV擴(kuò)增片段的cDNA為標(biāo)準(zhǔn)品，檢測(cè)結(jié)果除了試劑盒所帶的cDNA標(biāo)準(zhǔn)品為陽(yáng)性外，所有臨床標(biāo)本及弱陽(yáng)性質(zhì)控原血清樣本、陽(yáng)性質(zhì)控樣本均為陽(yáng)性，并且陽(yáng)性強(qiáng)度都較為接近。顯然該次RT-PCR擴(kuò)增檢測(cè)存在問(wèn)題。那么，你能幫助該實(shí)驗(yàn)室分析一下可能的檢測(cè)失敗的原因嗎？并設(shè)計(jì)一個(gè)相應(yīng)的驗(yàn)證試驗(yàn)證實(shí)。（20分）2. 今有一傳染病醫(yī)院為監(jiān)測(cè)肝炎病人抗病毒治療效果，現(xiàn)有一間面積為50平方米的房間，想建立一個(gè)臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室開展HBV DNA和HCV RNA檢測(cè)項(xiàng)目，經(jīng)向有關(guān)專家咨詢，專家建議其按衛(wèi)生部要求將實(shí)驗(yàn)室分為三個(gè)區(qū)(圖示如下)，選用熒光PCR方法，儀器設(shè)備按要求配備，可選用有SDA批準(zhǔn)的熒光PCR試劑盒，你認(rèn)為該專家的實(shí)驗(yàn)室設(shè)置有無(wú)原則性問(wèn)題，對(duì)臨床實(shí)際檢測(cè)工作是否方便？如否，則請(qǐng)指出