各省PCR上崗證考試題庫

1、廣東省臨床基因擴增檢驗實驗室技術(shù)人員理論培訓(xùn)班理論考試卷一， 填空（每題2分，共20分）1. DNA雙螺旋中兩條鏈走向是 反向 平行的，即一股鏈是 53 走向，另一股鏈為 35 走向；生物合成方向是 53 。2. 在極端的PH值或受熱條件下，核酸分子中的 氫鍵 斷裂， 雙螺旋 結(jié)構(gòu)解開，即為核酸變性。3. 核酸分子的雜交其實就是DNA 變性 、 復(fù)性 原理的應(yīng)用。4. PCR擴增的三個基本階段是 變性 、 退火 、 延伸 ，引物與模板的結(jié)合發(fā)生在 退火 階段5. 反轉(zhuǎn)錄酶催化的DNA合成反應(yīng)按 53 方向進行，在DNA合成時也需要引物，引物為病毒顆粒中的 mRNA 。6. PCR測定中的“假陽

2、性”的最主要的來源是 PCR產(chǎn)物 的污染。7. 請?zhí)畛鲆韵赂鞣N微量移液器可取溶液的體積范圍P10 P20 2-20ul P100 20-100ul P200 50-200ul 如需吸取100ul液體，則最好使用 P100 加樣器。8. 在基因擴增檢驗中，使用的帶濾塞吸頭吸加液體，只要是為了 防止標本間交叉污染 。9. TapMan熒光PCR測定原理中的關(guān)鍵點在于利用了Tap酶的 53 的外切酶活性，Ct值指的是 每個反應(yīng)管內(nèi)的熒光信號到達設(shè)定閾值時所經(jīng)歷的循環(huán)數(shù) 。10. 個體化醫(yī)學(xué)的全面定義： 分為疾病風險預(yù)測（基因檢測）和個體化治療（基因檢測）兩個方面，基因預(yù)測疾病風險是指根據(jù)每個人的疾病

3、基因組信息預(yù)測疾病的發(fā)生風險。個體化治療是指根據(jù)每個人的疾病基因組信息對已發(fā)生的疾病進行治療 。二， 是非題（正確的后面打，錯誤的后面打，并將錯誤處劃線并改正，每題兩分，未改正得1分，共20分）1. DNA雙鏈中，堿基對總是A-T ,C-G配伍，其間以兩個氫鍵相連。（） G-C間以三個氫鍵相連 2. 使用有防“污染”作用的UNG的PCR試劑盒，PCR實驗室就不必嚴格分區(qū)。（） UNG酶只對低濃度的產(chǎn)物污染有效 3. 在全血、骨髓標本的采集時，可使用EDTA、枸緣酸鈉或肝素抗凝。（）不能使用肝素抗凝 4. 血清HBeAg的存在是HBV感染及感染程度的確證標志。（）HBeAg是病毒復(fù)制的標志 5.

4、 在PCR試劑盒中所使用的UTP與天然RNA分子中的U沒什么區(qū)別。（）6. 基因擴增檢驗實驗室“可移動紫外燈”的作用主要是便于實驗室臺面的消毒殺菌。（）7. 定量PCR與定性PCR測定原理的最主要區(qū)別點在于前者的測定點在PCR的指數(shù)擴增期，而后者多為擴增平臺期。（）8. 加樣器只要在其量程范圍內(nèi)，其吸液準確度均相同。（）不同規(guī)格的加樣器之間準確度不同 9. 室內(nèi)質(zhì)量控制（IQC）監(jiān)測和控制的是實驗室測定的精密度（重復(fù)性），而室間質(zhì)量評價則通過不同的實驗室測定結(jié)果的比對而評價實驗室測定的準確度。（）10. 臨床檢驗中的系統(tǒng)誤差通常表現(xiàn)為質(zhì)控物測定SD的增大。（）三， 選擇題（每題2分，共20分）

5、1. 在核酸提取時，常需使用氯化鈉、醋酸鈉等鹽溶液，其目的是：（A）A 中和核酸的負離子，使其易于沉淀 B 調(diào)節(jié)PH值 C 保證核酸的完整性 D無特定目的2. 臨床上使用核酸擴增方法診斷沙眼衣原體感染，在標本收集上最為關(guān)鍵的是：（B ）A 標本的采取方式 B標本的保存方式 C標本的運送方式 D標本采取的時間3. 之所以要將基因擴增檢驗實驗室的產(chǎn)物分析區(qū)設(shè)置為負壓狀態(tài)，目的是：（B）A 防止生物傳染危險物的逸出 B 防止擴增產(chǎn)物從該區(qū)進入上游區(qū)域C 防止該區(qū)灰塵的逸出 D 無特殊目的4. 核酸探針的標志性特征是：（D）A一小段已知序列的單鏈核酸 B 一小段未知序列的單鏈核酸C 一小段已知序列的雙

6、鏈核酸 D 有同位素或非同位素標記物5. 核酸提取純化中，RNase最主要的潛在污染源是：（D）A 實驗室環(huán)境 B 實驗用品如吸頭、離心管等 C實驗人員的手 D 以上A和B6. PCR方法檢測病原微生物所擴增的區(qū)段，一般為：（B）A 整個病原體基因組 B 病原體基因組內(nèi)的保守區(qū)域 C 病原體基因組內(nèi)的任一區(qū)域 D 以上都不是7. 無創(chuàng)產(chǎn)前基因診斷為胎兒做出基因檢測，需從孕婦外周血中分離獲取及少量的：（B）A 孕婦有核紅細胞 B 胎兒有核紅細胞 C 白細胞 D 以上均可8. 臨床PCR測定的重復(fù)性不好的原因如下，但除外：（B）A 試劑盒核酸提取方法對擴增抑制物去除不干凈 B標準品濃度不準C 核酸

7、擴增儀空間溫度不均 D 加樣重復(fù)性差9. 有關(guān)于動力學(xué)定量PCR方法中對擴增效率的測定，下述哪一條是錯誤的：（B）A 必須在擴增的指數(shù)期內(nèi)測定 B 可在擴增的任何階段進行C 與擴增產(chǎn)物的測定有關(guān) D 盡可能多選幾個測定點10. 臨床基因擴增檢驗的室內(nèi)質(zhì)量控制與通常的臨床定性免疫測定IQC的最大不同在于：（D）A 弱陽性質(zhì)控血清的設(shè)置 B強陽性質(zhì)控血清的設(shè)置 C陰性質(zhì)控血清的設(shè)置 D 以上均是四， 問答題（40分）1. 有一基因擴增檢驗實驗室在檢測臨床血清標本HCV RNA時，以HCV擴增片段的cDNA為標準品，檢測結(jié)果除了試劑盒所帶的cDNA標準品為陽性外，所有臨床標本及弱陽性質(zhì)控原血清樣本、陽性質(zhì)控樣本均為陽性，并且陽性強度都較為接近。顯然該次RT-PCR擴增檢測存在問題。那么，你能幫助該實驗室分析一下可能的檢測失敗的原因嗎？并設(shè)計一個相應(yīng)的驗證試驗證實。（20分）2. 今有一傳染病醫(yī)院為監(jiān)測肝炎病人抗病毒治療效果，現(xiàn)有一間面積為50平方米的房間，想建立一個臨床基因擴增檢驗實驗室開展HBV DNA和HCV RNA檢測項目，經(jīng)向有關(guān)專家咨詢，專家建議其按衛(wèi)生部要求將實驗室分為三個區(qū)(圖示如下)，選用熒光PCR方法，儀器設(shè)備按要求配備，可選用有SDA批準的熒光PCR試劑盒，你認為該專家的實驗室設(shè)置有無原則性問題，對臨床實際檢測工作是否方便？如否，則請指出