實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型在脾臟研究中的應(yīng)用(一)

1、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型在脾臟研究中的應(yīng)用 （一）【關(guān)鍵詞】動(dòng)物關(guān)鍵詞 模型；實(shí)驗(yàn)動(dòng)物；脾臟； 脾臟是機(jī)體最大的淋巴器官，脾臟在生理學(xué)上具有造血，儲(chǔ)血，濾血 和破壞衰老細(xì)胞的作用，同時(shí)脾臟具有特異性和非特異性免疫功能。 已知脾臟有廣泛的抗感染和抗腫瘤的作用 1。脾臟疾病動(dòng)物模型就是 指醫(yī)學(xué)研究中建立的具有人類外傷性和病理性脾臟疾病模擬表現(xiàn)的動(dòng) 物實(shí)驗(yàn)對(duì)象和相關(guān)材料，為臨床開展脾臟手術(shù)以及相關(guān)脾臟疾病的深 入研究提供前提 2。本文就目前主要開展的幾種脾臟疾病動(dòng)物模型加 以綜述。1 保留脾臟功能手術(shù)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型1.1 犬部分脾切除模型 犬的脾臟血管分布有明顯的規(guī)律性，脾動(dòng)脈距脾門稍遠(yuǎn)處分為上下兩 支：脾上葉

2、動(dòng)脈和脾下葉動(dòng)脈，分別分布于脾上、下葉，每葉動(dòng)脈又 分為兩個(gè)分支，即脾上段動(dòng)脈和脾中上段動(dòng)脈及脾中下段動(dòng)脈和脾下 段動(dòng)脈，分別營(yíng)養(yǎng)各個(gè)脾段。這種脾葉段血液供應(yīng)的特點(diǎn)為脾葉段切 除提供了解剖學(xué)依據(jù)。選用健康成年犬，雌雄不限。按常規(guī)術(shù)前準(zhǔn)備。用3%戊巴比妥鈉（30mg/kg）靜脈麻醉。仰臥固定于手術(shù)臺(tái)，腹部皮膚常規(guī)消毒鋪單。 行剖腹術(shù)后先探查肝、膽、脾。并測(cè)量脾臟長(zhǎng)度（正常15.521.5cm，平均 18.23cm），觀察脾臟血管主干、分支及其與脾葉的關(guān)系。預(yù)實(shí)驗(yàn) 時(shí)可先用無(wú)損傷血管鉗夾預(yù)切除脾臟部分的供應(yīng)血管如上葉動(dòng)脈，該 部分脾臟缺血后與正常供血部分脾臟出現(xiàn)明顯分界，以判斷是否達(dá)到 按實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

3、要求預(yù)切除脾臟的范圍。測(cè)量正常供血部分脾臟長(zhǎng)度以確 定切除部分脾臟所占比例。然后游離脾臟上極，切開脾腎韌帶和脾胃 韌帶，雙重結(jié)扎脾動(dòng)脈上葉分支，在脾缺血線處切斷脾上葉，使脾切 斷端呈凹陷的魚口狀以便于縫合脾斷端，結(jié)扎脾斷端創(chuàng)面的中央動(dòng)脈 和其它血管分支。用 4 號(hào)絲線水平褥式縫合脾斷端，再用大網(wǎng)膜覆蓋 縫合于脾創(chuàng)面。檢查確無(wú)出血后即可關(guān)腹。切除的脾臟按實(shí)驗(yàn)要求處 理后即可用于研究的自身對(duì)照。手術(shù)后靜脈注射 50%葡萄糖 60ml，根 據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康倪x用適當(dāng)抗生素。動(dòng)物按一般術(shù)后處理，喂養(yǎng)普通飼料， 觀察至傷口愈合。12 大鼠脾臟部分或次全切除模型 實(shí)驗(yàn)性大部分脾臟切除術(shù)亦可根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)選用較小型動(dòng)

4、物，如雜交 系大鼠。手術(shù)方法與大型動(dòng)物模型類似。大鼠實(shí)驗(yàn)性脾臟部分切除或 次全切除術(shù)模型制作較方便，實(shí)驗(yàn)者可一人完成手術(shù)。復(fù)制的模型亦 較穩(wěn)定，且費(fèi)用較低，有較多優(yōu)點(diǎn)。唯小型動(dòng)物對(duì)手術(shù)耐受性差，制作模型中動(dòng)物有一定死亡率，在實(shí)驗(yàn) 設(shè)計(jì)時(shí)應(yīng)予考慮。Wistar 大鼠，雌雄不限。1%戊巴比妥鈉腹腔內(nèi)注射麻醉， 劑量為 15mg/kg； 或開放式乙醚吸入麻醉。麻醉成功后，用帶有橡皮筋的塑料夾夾住大 鼠四肢，將其固定于手術(shù)臺(tái)板上，消毒后左上腹肋緣下 1.5cm 處作斜 切口入腹，游離脾臟，在脾門處結(jié)扎切斷脾臟下極血管，然后行脾臟 部分切除或次全切除，脾臟斷端徹底縫合止血，關(guān)閉腹腔完成手術(shù)。 術(shù)后予分籠

5、喂養(yǎng)。13 脾切除自體脾組織大網(wǎng)膜移植模型 臨床上當(dāng)外傷后脾臟損傷嚴(yán)重，傷及脾門或?yàn)槠⑴K碎裂性傷，無(wú)法行 脾修補(bǔ)或保留部分脾臟時(shí)需行全脾切除術(shù)。全脾切除術(shù)后為保留脾臟 功能則需行脾移植術(shù)。目前，自體脾組織大網(wǎng)膜內(nèi)移植術(shù)是較常用的 方法。具有手術(shù)操作簡(jiǎn)單，脾組織成活率較高和可恢復(fù)部分脾臟功能 的優(yōu)點(diǎn)。脾切除自體脾組織大網(wǎng)膜內(nèi)移植模型對(duì)于研究術(shù)后機(jī)體的病 理生理變化，移植脾的組織再生形態(tài)、脾功能恢復(fù)的程度、時(shí)間及其 抗感染能力等均具有重要價(jià)值。此模型大、中、小型動(dòng)物均可選用。按上述模型的操作步驟進(jìn)腹后， 常規(guī)方法行脾切除術(shù)，切脾時(shí)注意保持脾包膜完整。如有副脾則同時(shí) 切除。立即將切除的脾切成小塊狀：

6、如犬等大型動(dòng)物，則將脾切成 1cm 1cm 0.5cm小脾塊。取 5070個(gè)小脾塊，以 0.5cm 的間距平均置 于展平的大網(wǎng)膜上； 如鼠等小型動(dòng)物， 則將脾切成 1mm1mm1mm 的 脾碎塊置于展平的大網(wǎng)膜上。然后將大網(wǎng)膜游離端翻起覆蓋脾塊，使 移植脾組織上下面均有網(wǎng)膜覆蓋，適當(dāng)縫合大網(wǎng)膜固定脾組織，把置 入脾組織的網(wǎng)膜袋固定于脾窩處，關(guān)腹。術(shù)后處理同上。注意移植的 脾組織總量不得少于正常脾臟的 1/3，否則移植成功后可能顯示脾功能 低下。保留脾臟功能手術(shù)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型制作前后和模型成功后可根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)檢測(cè)各種生理和病理指標(biāo)2 門脈高壓癥疾病動(dòng)物模型 門靜脈系統(tǒng)血流受阻和血流量增加，導(dǎo)致門

7、靜脈及其屬支血管內(nèi)壓力 升高，稱為門靜脈高壓癥。 門靜脈高壓癥手術(shù)中脾臟具有重要的角色。 門靜脈通常有腸系膜上靜脈和脾靜脈匯合而成。 門靜脈系沒有靜脈瓣， 因此門靜脈壓力過高時(shí)，其所屬系統(tǒng)內(nèi)血流可以形成逆流，從而形成 脾腫大與脾功能亢進(jìn)。研究發(fā)現(xiàn)，門靜脈高壓癥可引起脾大和脾功能 亢進(jìn)，反之脾臟也參與肝硬化的形成 1，3。四氯化碳肝硬化動(dòng)物模型 2：Wistar或 SD大鼠，體重 180200g，皮下 注射 40%50%四氯化碳油溶液（ 0.3ml/100g），每周 2 次，第二周開始， 隔日以 20%30%酒精 1ml 灌胃（或作為唯一飲料） ，飼以單純玉米面（混 以 0.5%膽固醇）， 10 周后形成肝硬化，造成門靜脈高壓。該模型為目 前國(guó)內(nèi)外常采用的動(dòng)物模型， 可靠且復(fù)制時(shí)間短， 肝纖維化進(jìn)展穩(wěn)定， 適合于肝硬化發(fā)生發(fā)展過程的動(dòng)態(tài)研究。管洪庚 4 選取雄性體重為 200 220gWistar 大鼠，將硫代乙酰胺 （Thio