2022年糖化血紅蛋白操作程序

1、糖化血紅蛋白操作程序一、檢測(cè)方法離子交換層析法二、方法學(xué)原理H50采用基于離子交換的高效液相色譜檢測(cè)原理，測(cè)量血紅蛋白色譜圖，計(jì)算相關(guān)參數(shù)?；诟咝щx子交換的液相色譜檢測(cè)原理，測(cè)量時(shí)先將含有各種血紅蛋白的血液樣本載入層析柱，在選定的低離子強(qiáng)度緩沖液及pH條件下，血液樣本中的HbA1c幾乎不帶正電荷，首先被洗脫；血液樣本中的HbA0帶正電荷，用高離子強(qiáng)度的洗脫液最后洗脫出來(lái)，得到相應(yīng)的血紅蛋白層析譜，然后算出HbA1c峰值和總Hb的比值。三、試劑品牌、包裝規(guī)格、內(nèi)含物3.1試劑品牌：邁瑞3.2試劑成分和規(guī)格3.2.1：離子交換層析柱： 規(guī)格：1*13.2.2糖化血紅蛋白溶血?jiǎng)毫姿峋彌_液 規(guī)格：

2、2L*33.2.3糖化血紅蛋白洗脫液A：琥珀酸緩沖液 規(guī)格：900ml*43.2.4糖化血紅蛋白洗脫液B：磷酸緩沖液 規(guī)格100ml*23.3儲(chǔ)存溫度：2303.4開(kāi)瓶有效期：100day。四、儀器品牌、型號(hào)品牌型號(hào)：邁瑞H-50五、 操作程序5.1開(kāi)機(jī)程序5.1.1按主機(jī)上的電源開(kāi)關(guān)，接通電源；5.1.2儀器自動(dòng)執(zhí)行一項(xiàng)自檢操作，包括系統(tǒng)檢查、關(guān)機(jī)檢查和機(jī)械初始化。整個(gè)過(guò)程約持續(xù)15分鐘；5.1.3系統(tǒng)自檢完成后，彈出登錄對(duì)話框。在對(duì)話框中輸入用戶名和密碼后，點(diǎn)擊“登陸；“液路初始化完成后進(jìn)入主界面，進(jìn)展樣本分析；5.2質(zhì)控程序容器類(lèi)型1. 使用離心管或微量杯，分別使用各自的適配器，放入質(zhì)控

3、品試管架，試管架上部有CRL標(biāo)貼。2. 儀器會(huì)自動(dòng)識(shí)別試管架，采用預(yù)稀釋模式測(cè)量。質(zhì)控品樣本液的制備5.2.2.1廠家質(zhì)控1. 對(duì)于新開(kāi)瓶質(zhì)控品，首先將其自28冰箱中取出；2. 輕敲瓶蓋，確保凍干樣品全部散落在瓶底，小心地翻開(kāi)瓶蓋和橡皮塞，使瓶蓋朝上，留神瓶蓋上黏附的冰凍粉末被風(fēng)吹下造成內(nèi)容物的損失；3. 獲取2mL糖化血紅蛋白溶血?jiǎng)徛⑷雰蓚€(gè)水平的質(zhì)控品瓶中，仔細(xì)蓋上橡皮塞后，輕緩翻轉(zhuǎn)小瓶10秒進(jìn)展混勻，然后避光放置約2-3分鐘期間輕緩翻轉(zhuǎn)小瓶，確保內(nèi)容物完全溶解，翻轉(zhuǎn)過(guò)程防止產(chǎn)生泡沫；4. 待其完全復(fù)溶后混勻，可用移液器分別取兩個(gè)水平的質(zhì)控品各200ul置于兩個(gè)預(yù)稀釋樣本杯或1.5ml

4、 EP管中剩余的質(zhì)控品可置于28低溫下保存14天，使用前從低溫環(huán)境下取出即可直接使用，每一瓶質(zhì)控品開(kāi)瓶后均需在瓶身上記錄開(kāi)瓶日期，5. 每一批質(zhì)控品開(kāi)瓶后第一次使用時(shí)均需在儀器上錄入質(zhì)控品試劑的參考值、批號(hào)和有效期：點(diǎn)擊“質(zhì)控菜單“設(shè)定選擇新的文件號(hào)點(diǎn)擊“編輯選擇質(zhì)控水平、參考值類(lèi)型，偏差限格式，輸入批號(hào)、有效期、參考值和偏差限，每個(gè)水平質(zhì)控建立一個(gè)相對(duì)應(yīng)的文件夾并勾選“在用列，儀器后續(xù)質(zhì)控測(cè)試將默認(rèn)保存在該文件夾中直到有效期失效。5.2.2.2上海市臨床檢驗(yàn)中心質(zhì)控1. 對(duì)于新開(kāi)瓶質(zhì)控品，首先將其自28冰箱中取出；2.取低、高值質(zhì)控品各5ul分別用5ml的糖化血紅蛋白溶血?jiǎng)┤苎獋溆谩Ｗⅲ喝芙?/p>

5、的質(zhì)控品可以做兩次質(zhì)控，第一次做好之后蓋好蓋子放入28冰箱保存5.3質(zhì)控程序1. 分析儀開(kāi)機(jī)完成后，將質(zhì)控品樣本杯或1.5ml EP管分別放置于配套的適配器內(nèi)，然后放置于質(zhì)控試管架上，低值質(zhì)控品放置于2號(hào)位，高值質(zhì)控品放置于4號(hào)位；2. 將試管架置于自動(dòng)進(jìn)樣器上，在儀器的“樣本分析界面，點(diǎn)擊“模式，選擇進(jìn)樣模式為“自動(dòng)，再點(diǎn)擊“啟動(dòng)分析按鈕，儀器會(huì)自動(dòng)識(shí)別此為質(zhì)控品，結(jié)果記錄在儀器的質(zhì)控界面下。3. 測(cè)試完畢后，點(diǎn)擊“質(zhì)控菜單，進(jìn)入到“質(zhì)控圖界面，根據(jù)用戶在儀器上自定義的質(zhì)控允許偏差限或質(zhì)控規(guī)那么對(duì)儀器質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)進(jìn)展判斷。4. 如果出現(xiàn)“失控，建議按照實(shí)驗(yàn)室管理標(biāo)準(zhǔn)的操作進(jìn)展問(wèn)題排查及確認(rèn)；5.

6、4 儀器校準(zhǔn)程序 容器類(lèi)型1. 使用離心管或微量杯，分別使用各自的適配器，放入校準(zhǔn)品試管架，試管架上部有CAL標(biāo)貼。2. 儀器會(huì)自動(dòng)識(shí)別試管架，采用預(yù)稀釋模式測(cè)量。校準(zhǔn)條件1. 客戶端裝機(jī)；2. 客戶端更換層析柱；3. 進(jìn)展測(cè)量系統(tǒng)的維修和維護(hù)；4. 長(zhǎng)時(shí)間未使用或更改工作地點(diǎn)；5. 非質(zhì)控操作或者質(zhì)控品原因，排除儀器非故障性改變導(dǎo)致的質(zhì)控結(jié)果失控；6.校準(zhǔn)品樣本液的制備1. 對(duì)于新開(kāi)瓶校準(zhǔn)品，首先將其自2-8環(huán)境中取出；2. 輕敲瓶蓋，確保凍干樣品全部散落在瓶底，小心地翻開(kāi)瓶蓋和橡皮塞，防止內(nèi)容物的損失；3. 獲取2mL糖化血紅蛋白溶血?jiǎng)?，緩慢注入瓶中，蓋上橡皮塞，輕輕翻轉(zhuǎn)小瓶數(shù)秒進(jìn)展混勻，

7、然后避光放置約23分鐘期間輕輕翻轉(zhuǎn)小瓶數(shù)次，確保內(nèi)容物完全溶解，翻轉(zhuǎn)過(guò)程防止產(chǎn)生泡沫；4. 待其完全復(fù)溶后混勻，可用移液器分別取兩個(gè)水平的校準(zhǔn)品各1mL置于兩個(gè)預(yù)稀釋樣本杯或1.5ml EP管中剩余的校準(zhǔn)品可置于28低溫下保存7天，使用前從低溫環(huán)境下取出即可直接使用，分別放置于配套的適配器內(nèi)，然后放置于校準(zhǔn)品試管架上，低值校準(zhǔn)品放置于2號(hào)位，高值校準(zhǔn)品放置于4號(hào)位上；儀器校準(zhǔn)1. 在糖化分析儀上選擇“校準(zhǔn)-“校準(zhǔn)物校準(zhǔn)，在校準(zhǔn)界面選擇要校準(zhǔn)的HbA1c參考值類(lèi)型NGSP或IFCC，分別輸入兩個(gè)水平校準(zhǔn)品靶值單上一樣單位下的參考值，校準(zhǔn)品批次和有效期，并選擇每個(gè)水平校準(zhǔn)品需要進(jìn)展校準(zhǔn)測(cè)試的次數(shù)可

8、以選擇1-3次，儀器默認(rèn)每個(gè)水平校準(zhǔn)品樣本測(cè)試3次；2. 將校準(zhǔn)品試管架置于自動(dòng)進(jìn)樣器上，點(diǎn)擊“啟動(dòng)分析按鈕，儀器根據(jù)糖化分析儀上已設(shè)置的測(cè)試次數(shù)進(jìn)展兩個(gè)水平校準(zhǔn)品的測(cè)試，自動(dòng)計(jì)算校準(zhǔn)公式：Y=aX+b，退出校準(zhǔn)界面時(shí)手動(dòng)點(diǎn)擊保存生效；5.5 樣本測(cè)定程序樣本準(zhǔn)備1. 全血模式：使用推薦的抗凝真空管采集靜脈血樣本，確保樣本量不小于1ml；2. 預(yù)稀釋模式：采集靜脈血或末梢血，用溶血?jiǎng)┻M(jìn)展稀釋，確保預(yù)稀釋后樣本量不小于0.5ml；建議HGB正常值樣本的稀釋比例為1：100；HGB濃度過(guò)低的樣本建議調(diào)整稀釋比例為1：50為佳；自動(dòng)模式全血樣本分析1. 儀器進(jìn)入分析界面后，將樣本放入全血試管架試管架

9、上部有WB標(biāo)貼；2. 點(diǎn)擊“模式，選擇進(jìn)樣模式為“自動(dòng)；并進(jìn)展起始樣本編號(hào)，點(diǎn)擊“確定保存退出；3. 在分析界面下點(diǎn)擊“啟動(dòng)分析，儀器會(huì)自動(dòng)識(shí)別試管架，采用全血模式測(cè)量。自動(dòng)模式預(yù)稀釋樣本分析1. 預(yù)稀釋樣本使用1.5mlEP管或微量杯，并分別使用各自的適配器，放入預(yù)稀釋試管架試管架上部有PD標(biāo)貼。2. 點(diǎn)擊“模式，選擇進(jìn)樣模式為“自動(dòng)；并進(jìn)展起始樣本編號(hào)，點(diǎn)擊“確定保存退出；3. 在分析界面下點(diǎn)擊“啟動(dòng)分析，儀器會(huì)自動(dòng)識(shí)別試管架，采用預(yù)稀釋模式測(cè)量。封閉全血模式樣本分析1. 按儀器上的開(kāi)倉(cāng)鍵，翻開(kāi)樣本倉(cāng)門(mén)，將混勻后的全血樣本放到樣本倉(cāng)內(nèi)；2. 推倉(cāng)門(mén)，關(guān)閉樣本倉(cāng)門(mén)；3. 儀器進(jìn)入分析界面后，

10、點(diǎn)擊“模式，選擇進(jìn)樣模式為“封閉，并進(jìn)展起始樣本編號(hào)，點(diǎn)擊“確定保存退出；4. 在分析界面下，點(diǎn)擊“啟動(dòng)分析，儀器執(zhí)行封閉全血測(cè)試。急診模式樣本分析1. 如果在自動(dòng)進(jìn)樣測(cè)試過(guò)程中需要進(jìn)展一些急診測(cè)試分析，按儀器上的開(kāi)倉(cāng)鍵急診鍵，翻開(kāi)樣本倉(cāng)門(mén)，將全血樣本混勻后放到樣本倉(cāng)內(nèi)；2. 關(guān)閉樣本倉(cāng)門(mén)，點(diǎn)擊“模式，進(jìn)展樣本編號(hào)，確定后點(diǎn)擊“啟動(dòng)分析；3. 急診樣本測(cè)試完畢后，點(diǎn)擊“取消急診，繼續(xù)自動(dòng)模式樣本分析。5.6關(guān)機(jī)如果需要關(guān)閉儀器，點(diǎn)擊菜單>“關(guān)機(jī)，彈出對(duì)話框。點(diǎn)擊“是，按照屏幕提示要求關(guān)閉儀器電源。六、參考范圍正常值范圍4.0%6%七、臨床意義7.1HbA1c與紅細(xì)胞壽命和平均血糖水平有關(guān)

11、，是評(píng)價(jià)糖尿病患者長(zhǎng)期血糖控制較理想的指標(biāo)，可放映過(guò)去2-3個(gè)月的平均血糖水平，不受每天血糖波動(dòng)影響。7.2 與微血管和大血管并發(fā)癥的發(fā)生關(guān)系密切。HbA1c水平升高，糖尿病視網(wǎng)膜病變、腎臟病變、神經(jīng)病變、心血管事件發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)均相應(yīng)增加。.7.3 HbA1c對(duì)于糖尿病發(fā)生有較好德?tīng)栴A(yù)測(cè)能力 。2021年，美國(guó)糖尿病會(huì)ADA發(fā)布的糖尿病診治指南中正式采納以HbA1c6.5%作為糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn)之一。HbA1c水平在5.7%-6.4%為糖尿病高危人群，預(yù)示進(jìn)展至糖尿病前期階段，患糖尿病和心血管病風(fēng)險(xiǎn)均升高。2021年世界衛(wèi)生組織WHO也推薦HbA1c6.5%作為糖尿病診斷切點(diǎn)。八、病人準(zhǔn)備、標(biāo)本類(lèi)型和

12、要求1. 采血管/抗凝劑類(lèi)型：使用干凈的抗凝真空采血管推薦的抗凝劑種類(lèi)： EDTA- K2， EDTA- K3，肝素鋰，檸檬酸鈉， 草酸鉀/氟化鈉、硅化玻璃/塑料試管、離心管和硅硼化玻璃毛細(xì)管樣本儲(chǔ)存2. 全血樣本冷藏保存10天內(nèi)。九、考前須知1請(qǐng)注意標(biāo)本的感染預(yù)防。2樣品采集和制備：根據(jù)實(shí)驗(yàn)室的標(biāo)準(zhǔn)程序采集和制備樣品。3標(biāo)本處理和保存：處理標(biāo)本時(shí)要將其當(dāng)成生物污染品。標(biāo)本要放在帶蓋的容器內(nèi)防污染和蒸發(fā)。請(qǐng)于當(dāng)日測(cè)定。如當(dāng)天不能檢測(cè)，：28保存。請(qǐng)防止重復(fù)冷凍溶解。十、參考文獻(xiàn)1、尚紅、葉應(yīng)嫵、王毓三主編，全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程，中華人民共和國(guó)衛(wèi)生和方案生育委員會(huì)醫(yī)政醫(yī)管局、人民為啥功能出版社、第4版、20212、邁瑞H-50糖化血紅蛋白分析儀使用說(shuō)明書(shū)。編寫(xiě)： 批準(zhǔn)日期：20 年 月 日內(nèi)容總結(jié)