奧硝唑結(jié)腸定位腸溶片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究

1、奧硝唑結(jié)腸定位腸溶片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究 【摘要】 目的 建立奧硝唑結(jié)腸定位腸溶片的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。方法 采用紫外分光光度法，測(cè)定奧硝唑結(jié)腸定位腸溶片中奧硝唑的含量，并采用轉(zhuǎn)籃法，在不同溶出介質(zhì)中測(cè)定奧硝唑結(jié)腸定位腸溶片的釋放度。結(jié)果 奧硝唑質(zhì)量濃度在4.012.0 g/mL范圍內(nèi)，線性關(guān)系良好(r=0.9999)，平均回收率為97.2%，RSD為0.603%；奧硝唑結(jié)腸定位腸溶片在pH1.0鹽酸溶液（91000）2 h、pH6.8的磷酸鹽緩沖溶液中4 h均未溶出，而在pH7.6的磷酸鹽緩沖溶液中開(kāi)始釋放，2 h的累積釋放度達(dá)90以上。結(jié)論 奧硝唑結(jié)腸定位腸溶片的含量和釋放度測(cè)定方法簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確，

2、可作為其質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。 【關(guān)鍵詞】 奧硝唑結(jié)腸定位腸溶片釋放度質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)Abstract:Objective To establish quality standard for ornidazole colonspecific enteric tablets. Methods The content of ornidazole colonspecific enteric tablets was determined by ultraviolet spectrophotometry, and the release property of ornidazole colonspecific ente

3、ric tablets was determined by rotating basket method in different dissolution environments. Results The detection concentration range of ornidazole was 4.012.0 g/mL(r=0.9999), and the linearity is good. The average recovery rate was 97.2%, RSD=0.603%. Ornidazole colonspecific enteric tablets has no

4、dissolution in 2 hours in hydrochloric acid solution（91000）, 4 hours in pH6.8 phosphate buffer. But in pH7.6 phosphate buffer, the accumulation release could reach over 90% in 2 hours. Conclusion The assaying method and release profile determination method are simple, quick and accurate; it could be

5、 applicable in quality control.Key words:ornidazole; colonspecific enteric tablets ; release in vitro; quality standard奧硝唑（ornidazole，ONZ）是繼甲硝唑、替硝唑后的第三代硝基咪唑類(lèi)衍生物，具有良好的抗厭氧菌、抗滴蟲(chóng)和抗阿米巴原蟲(chóng)作用，與甲硝唑、替硝唑相比，療效更確切、毒副作用更低、無(wú)致癌致突變作用，安全性更可靠，可用于腸道感染疾病和各種結(jié)腸炎的治療，如潰瘍性結(jié)腸炎、節(jié)段性結(jié)腸炎(crohns病)、偽膜性腸炎、阿米巴腸道感染等。隨著市場(chǎng)的不斷開(kāi)發(fā)，奧硝唑已逐漸形成

6、取代甲硝唑、替硝唑的勢(shì)頭。奧硝唑以確切的療效和巨大的市場(chǎng)容量獲得了顯著的社會(huì)經(jīng)濟(jì)效益，國(guó)內(nèi)已上市的奧硝唑制劑有片劑、膠囊劑、注射液等。奧硝唑普通制劑口服后，藥物主要在胃和小腸被吸收，到達(dá)結(jié)腸的藥物很少，不能充分發(fā)揮藥物治療結(jié)腸炎的作用，治療效果較差，且有惡心厭食等不良反應(yīng)?？诜Y(jié)腸定位給藥是最方便的給藥方式之一，將奧硝唑制成結(jié)腸定位腸溶片，到達(dá)結(jié)腸后釋放藥物，可在病變部位形成較高的藥物濃度，減少不良反應(yīng)，更好地發(fā)揮治療結(jié)腸炎癥的作用1。本文采用紫外分光光度法，測(cè)定奧硝唑結(jié)腸定位腸溶片中奧硝唑的含量，并采用轉(zhuǎn)籃法，在不同溶出介質(zhì)中測(cè)定奧硝唑結(jié)腸定位腸溶片的釋放度,建立了其質(zhì)量控制方法，報(bào)道如下。

7、1 儀器與試藥1 儀器 ZRS8G智能溶出試驗(yàn)儀（天津大學(xué)無(wú)線電廠）；UV2450紫外分光光度計(jì)(日本島津)；AY120電子天平(日本島津)；超聲波清洗器(上海之信儀器有限公司)。2 試藥 奧硝唑?qū)φ掌罚ü┖繙y(cè)定用，批號(hào)：100608-200301，中國(guó)藥品生物制品檢定所）； 奧硝唑原料藥（批號(hào)：200510A0706，湖南九典制藥有限公司）；奧硝唑結(jié)腸定位腸溶片（規(guī)格：250 mg/片，自制）；硫酸、三硝基苯酚、鹽酸、乙醇、氫氧化鈉、磷酸二氫鉀等試劑均為分析純。2 方法與結(jié)果2.1 性狀 本品為薄膜衣片，除去包衣后顯類(lèi)白色或白色。2.2 鑒別2 三硝基苯酚試驗(yàn)：取本品1片，除去薄膜衣，將片

8、芯研成細(xì)粉，取約相當(dāng)于奧硝唑0.1 g細(xì)粉，加硫酸溶液（3100）4 mL，振搖使奧硝唑溶解，濾過(guò)，濾液中加入三硝基苯酚試液10 mL，即成黃色沉淀。2.3 釋放度 pH1.0的鹽酸溶液（91000）中模擬胃液中的環(huán)境,pH6.8的磷酸鹽緩沖溶液中模擬小腸的環(huán)境,pH7.6的磷酸鹽緩沖溶液中模擬回腸下段以及回盲結(jié)合部的環(huán)境。 表1 奧硝唑在鹽酸溶液（91000）中回收率測(cè)定結(jié)果（略）Tab.1 Recovery of ONZ in hydrochloric acid solution（91000）表2 奧硝唑在pH6.8的磷酸鹽緩沖溶液中回收率測(cè)定結(jié)果（n=9）（略）Tab.2 Recover

9、y of ONZ in pH6.8 phosphate buffer （n=9）表3 奧硝唑在pH7.6的磷酸鹽緩沖溶液中回收率測(cè)定結(jié)果（n=9）（略）Tab.3 Recovery of ONZ in pH7.6 phosphate buffer （n=9） 取本品，照釋放度測(cè)定法（中國(guó)藥典2005年版二部附錄XC第一法）3，以鹽酸溶液（91000）900 mL為釋放介質(zhì)，轉(zhuǎn)速為100 r/min，依法操作，經(jīng)2 h時(shí)，立即將轉(zhuǎn)籃提出液面，供試品未見(jiàn)有裂縫或崩解現(xiàn)象，隨即將轉(zhuǎn)籃浸入磷酸鹽緩沖溶液（pH6.8）900 mL的釋放介質(zhì)中，轉(zhuǎn)速不變，繼續(xù)依法操作，經(jīng)4 h時(shí)，立即將轉(zhuǎn)籃提出液面，供試

10、品表面包衣層略見(jiàn)溶漲，但仍未見(jiàn)有裂縫或崩解現(xiàn)象。隨即將轉(zhuǎn)籃浸入磷酸鹽緩沖溶液（pH7.6）900 mL的釋放介質(zhì)中，轉(zhuǎn)速不變，繼續(xù)依法操作，每20 min取樣1次，每次取樣4 mL（取樣后立即補(bǔ)加相應(yīng)介質(zhì)4 mL），立即經(jīng)0.8 m微孔濾膜濾過(guò)，準(zhǔn)確量取續(xù)濾液0.4 mL，加相應(yīng)介質(zhì)稀釋至10 mL，在最大波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度。 結(jié)果測(cè)得3批樣品在鹽酸溶液（91000）2 h， pH6.8的磷酸鹽緩沖溶液中在4 h均無(wú)藥物溶出，而在pH7.6的磷酸鹽緩沖溶液開(kāi)始釋放，累積釋放度結(jié)果見(jiàn)圖1。圖1 6 h后，在pH7.6磷酸鹽緩沖液中的釋放曲線圖（略）Fig.1 Release profile of

11、ONZ colonspecific enteric tablets in pH7.6 PB (6 h)2.4 含量測(cè)定 精密稱(chēng)取經(jīng)60 干燥至恒重的奧硝唑?qū)φ掌愤m量（約5 mg）,置50 mL容量瓶中，以乙醇溶解并定容至刻度，精密吸取該對(duì)照品溶液1 mL置10 mL的容量瓶中，用乙醇稀釋至刻度。照分光光度法（中國(guó)藥典2005年版二部附錄A）測(cè)定，在200400 nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)進(jìn)行掃描，結(jié)果在312 nm波長(zhǎng)處有最大吸收，輔料在此波長(zhǎng)處無(wú)干擾吸收。故選擇312 nm作為測(cè)定波長(zhǎng)。 精密稱(chēng)取奧硝唑?qū)φ掌?0.01 mg，置100 mL棕色容量瓶中，用乙醇溶解并定容至刻度，再分別精密量取0.4、0.

12、6、0.8、1.0、1.2 mL置10 mL棕色容量瓶中，加乙醇稀釋至刻度。計(jì)算得回歸方程為A2.5910-4C0.043，r0.9999，表明奧硝唑質(zhì)量濃度在4.00 12.01 g/mL范圍內(nèi)與吸光度間線性關(guān)系良好。 精密量取奧硝唑?qū)φ掌啡芤海ㄙ|(zhì)量濃度為10.01 mg/mL）5 mL置50 mL棕色量瓶中，用乙醇溶解定容至刻度，在最大吸收波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，連續(xù)測(cè)定6次，算得RSD為0.381。 取本品10片，除去包衣，精密稱(chēng)定，研細(xì)，精密稱(chēng)取細(xì)粉62.9 mg，置100 mL棕色量瓶中，加乙醇75 mL振搖使溶解，再加乙醇稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液2 mL置100 mL量瓶中

13、，加乙醇稀釋至刻度搖勻,得供試液。取供試液分別在0、2、4、6、8 h于最大吸收波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，算得RSD為0.427。結(jié)果表明供試液在8 h內(nèi)穩(wěn)定。 精密稱(chēng)取奧硝唑?qū)φ掌?0.04 mg，置100 mL棕色量瓶中，加入壓片處方量輔料混勻，用乙醇溶解定容至刻度，濾過(guò)，分別取續(xù)濾液0.5 mL、1.0 mL、1.5 mL置10 mL棕色量瓶中，加乙醇稀釋至刻度，在最大吸收波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度。測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表4。表4 奧硝唑在乙醇中的回收率測(cè)定結(jié)果（n9）（略）Tab.4 Recovery of ONZ in alcohol （n9） 結(jié)果表明，低、中、高3種濃度的加樣回收率平均為97.2,RSD為0

14、.603%。 分別取3個(gè)不同批號(hào)的包衣片各10片，除去包衣精密稱(chēng)定，研細(xì)，分別精密稱(chēng)取粉末，置100 mL棕色量瓶中，加乙醇75 mL振搖使溶解，再加乙醇稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液2 mL置100 mL量瓶中，加乙醇稀釋至刻度搖勻制得供試品溶液。測(cè)得3個(gè)批號(hào)樣品的含量分別為256、254、248 mg/片。本品中含奧硝唑在標(biāo)示量的90.0%110.0%范圍之內(nèi)，符合規(guī)定。3 討論31 傳統(tǒng)觀點(diǎn)認(rèn)為結(jié)腸的pH值在整個(gè)胃腸道中最高，可達(dá)7.58.0，近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)，回腸下端至回盲結(jié)合部的pH值最高，約為7.40.4，進(jìn)入結(jié)腸后由于短鏈脂肪酸、CO2和一些發(fā)酵產(chǎn)物的存在，pH明顯下降，降至6.5左右。在疾病狀態(tài)下，會(huì)下降到更低4。作者曾將本品在鹽酸溶液中測(cè)試2 h（91000）后，樣品保持完整的情況下，隨即又將樣品浸入pH值5.5的緩沖溶液測(cè)試，也未見(jiàn)樣品開(kāi)裂或崩解。但在經(jīng)過(guò)pH值7.6的緩沖溶液測(cè)試后，再模擬結(jié)腸病理狀態(tài)，在pH值5.5的緩沖溶液中測(cè)試，奧硝唑可迅速釋放。可能是由于在pH值7.6弱堿性條件下，包衣膜溶解或破裂，耐酸性降低所致。因此認(rèn)為本品可在回腸下端至回盲接合部釋放藥物后隨即進(jìn)入結(jié)腸部位,未釋放完全的藥物，在結(jié)腸病變部位將繼續(xù)釋放。32 采用紫外分光光度法測(cè)定奧硝唑結(jié)腸定位腸溶片中奧硝