食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)：食品中酸價(jià)的測定.docx

1、食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中酸價(jià)的測定21.5.3 15 mL離心管，錐底，帶螺旋蓋。21.5.4 5 mL一次性塑料注射器，帶長30 mm針頭。21.5.5 一次性碟形針頭式過濾器，直徑25 mm,尼龍濾膜，0.22 pm孔徑。21.5.6 硅膠固相莘取柱：500 mg/6 mLo22儀器和設(shè)備22. 1天平:感量分別為0.001 g和0.0001 go22. 2可見光分光光度計(jì)，配備I cm比色皿，最大檢測波長可達(dá)800 nm。22.3旋渦振蕩混合器，轉(zhuǎn)速可達(dá)3000 r/mino22.4 pH 計(jì)。22.5恒溫水浴鍋。22. 6離心機(jī)，最高轉(zhuǎn)速不低J- 8（X）（） r/mino22.7旋轉(zhuǎn)蒸

2、發(fā)儀。22.8負(fù)壓固相萃取裝置，及其配套隔膜真空泵。23分析步驟23.1油脂試樣提取若待檢樣品中含有硬脂酰乳酸鹽類乳化劑，則提取獲得的油脂試樣必須先按照23.2的要求進(jìn)行凈 化后，才能按照23.3進(jìn)行油脂試樣溶液的制備。否則，提取獲得的油脂試樣直接按照23.3進(jìn)行油脂試 樣溶液的制備。23.1.1食用油脂制品（人造奶油、植脂奶油、粉末油脂）同 5.1.1、5.1.2 和 5.1.3。23.1.2其他含油食品同 11.1.4。23.2油脂試樣凈化用10 mL固相萃取上樣液充分沖洗浸潤固相萃取柱，并連接在固相萃取裝置上，備用。稱取1.00 g （精確至O.OOlg）油脂試樣于10 mL具塞刻度試管

3、中，加入固相萃取上祥液溶解并定 容至5 mL （若油脂樣品凝固，應(yīng)先置于55°C的水浴中充分溶解，然后冷卻至室溫再定容）,將全部 試樣溶液轉(zhuǎn)移至固相萃取柱，打開真空泵并調(diào)節(jié)流速，以1-2滴/秒的速度過固相萃取柱，收集全部流出 液于15 mL離心管中，然后再用6 mL固相萃取上樣液沖洗10 mL具塞刻度試管并過柱，合并流出液, 轉(zhuǎn)移至燒瓶中，于60C的旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀內(nèi)，減壓蒸干有機(jī)溶劑，殘留物作為凈化后的油脂試樣。再按 23.3的操作，將凈化后的油脂試樣全部制備成試樣溶液。23.3油脂試樣溶液的制備23. 3. 1液態(tài)油脂的試樣溶液制備稱取1.00 g （精確至0.001 g）液態(tài)油脂試樣

4、于10 mL具塞刻度試管中（若油脂試樣經(jīng)過凈化，以 23.2中的稱樣量為準(zhǔn)），用環(huán)己烷溶解并定容至5 mL,然后全部轉(zhuǎn)移至50 mL離心管中，加入3 mL5 mL水，加蓋密封后，于旋渦振蕩混合器上充分振蕩混合40s60s,以洗滌油脂試樣溶液，洗滌后靜 置分層（或用離心機(jī)離心分層），取上層的油脂試樣溶液，按照23.4.2的要求進(jìn)行酸價(jià)的測定。23. 3. 2固態(tài)油脂的試樣溶液制備取適量的油脂試樣，置于比其熔點(diǎn)高10°C左右的水浴或恒溫鼓風(fēng)干燥箱內(nèi)，加熱熔化，稱取1.00 g （精確至0.001 g）油脂試樣于10 mL具塞刻度試管中（若油脂試樣經(jīng)過凈化，以23.2中的稱樣量為 準(zhǔn)），用

5、環(huán)己烷溶解并定容到10 mL,然后全部轉(zhuǎn)移至50 niL離心管中，加入3 n】L5 mL水，加蓋密 封后，于旋渦振蕩混合器上充分振蕩混合40 s6（） s,以洗滌油脂試樣溶液，洗滌后靜置分層（或用離 心機(jī)離心分層），取上層的油脂試樣溶液，按照23.4.2的要求進(jìn)行酸價(jià)的測定。23.4測定23. 4. 1標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作取 6 支 50 mL 離心管，分別加入 5mL 濃度為 O.Omg/niL、0.1 mg/mL、0.5 mg/mL 1.0 mg/mL 3.0 mg/mL和5.0 mg/mL的油酸標(biāo)準(zhǔn)工作液，各加入2 mL的銅皂染色液，加蓋后置于旋渦振蕩混合器 上，以不少于3000 r/min的

6、轉(zhuǎn)速充分振蕩混合反應(yīng)30 s,然后靜置使溶液分層，取上層清液經(jīng)濾膜過 濾后，用1 cm比色皿，以濃度為0.0 mg/mL的油酸標(biāo)準(zhǔn)工作液顯色管為參比，于710 mn波長處測量 吸光度，繪制工作曲線。23. 4. 2試樣的測定取50 mL離心管，加入4.5 mL5 mL的油脂試樣溶液（23.3）（注意盡量不要帶入油脂試樣溶液 制備后的下層溶液），加入2mL銅皂染色液，加蓋后置于旋渦振蕩混合器上，以不少于3000 r/min 的轉(zhuǎn)速充分振蕩混合反應(yīng)30 s,然后靜置使溶液分層（若出現(xiàn)乳化現(xiàn)象難以分層，可采用4000 r/min-6（X）0 r/min離心）,取上層清液經(jīng)濾膜過濾后，用I cm比色皿

7、，以濃度為（）.0 mg/mL的油酸標(biāo) 準(zhǔn)工作液顯色管為參比（若油脂試樣的色澤比較深，則用未經(jīng)反應(yīng)的、該油脂試樣溶液調(diào)零點(diǎn)），于 710 nm波長處測量吸光度，根據(jù)工作曲線計(jì)算試樣中的酸價(jià)。24分析結(jié)果的表述試樣中酸價(jià)的含量按公式（2）計(jì)算：x=xVx5M（2）m x 282.45式中：X一試樣中酸價(jià)的含量，單位為亳克每克（mg/g）；p由標(biāo)準(zhǔn)曲線得到的試樣溶液中總游離脂肪酸濃度所相當(dāng)?shù)挠退釢舛龋瑔挝粸楹量嗣亢辽╩g/mL）；一油脂試樣溶液的定容體積，單位為毫升（mL）；m油脂試樣的取樣量，單位為克（g）:56.1氫氧化鉀的摩爾質(zhì)量，單位為克每摩爾（g/mol）；282.45油酸的摩爾質(zhì)量，

8、單位為克每摩爾（g/mol）。計(jì)算結(jié)果以重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)測定結(jié)果的算術(shù)平均值表示。酸價(jià)mg/g時(shí)，計(jì)算結(jié) 果保留2位小數(shù)；1 mg/g酸價(jià)W100 mg/g時(shí)，計(jì)算結(jié)果保留1位小數(shù)；酸價(jià) 100 mg/g，計(jì)算結(jié)果 保留至整數(shù)位。同7o26其他本方法液態(tài)油脂酸價(jià)的定量限為0.1 nig/g,固態(tài)油脂酸價(jià)的定量限為0.2mg/g。附錄A油脂試樣的除雜和干燥脫水A.1油脂試樣的除雜油脂試樣出現(xiàn)明顯渾濁、乳化、分層或沉淀，則應(yīng)進(jìn)行除雜處理。先將油脂試樣置于50C的水浴或 恒溫干燥箱內(nèi)，將油脂的溫度加熱至50°C并充分振搖以熔化可能的油脂結(jié)品。若此時(shí)油脂樣品變?yōu)槌?清、無沉淀，則可作

9、為試樣，否則應(yīng)趁熱用濾紙過濾不溶性雜質(zhì)，取濾液作為試樣，過濾過程應(yīng)盡快 完成。若油脂樣品中的雜質(zhì)含量較高，且顆粒細(xì)小難以過濾干凈，可先將油脂樣品用離心機(jī)以8(X)0r/min 的轉(zhuǎn)速離心1() min20 min,去除雜質(zhì)。對于凝固點(diǎn)高于50C或含有凝固點(diǎn)高于50°C油脂成分的樣品，則應(yīng)將油脂置于比其凝固點(diǎn)高10°C左 右的水浴或恒溫干燥箱內(nèi)，將油脂加熱并充分振搖熔化油脂結(jié)晶。若還需過濾，則將油脂置于比其凝固 點(diǎn)高IO°C左右的恒溫干燥箱內(nèi)，用濾紙過濾不溶性的雜質(zhì)，取過濾后的澄清液體油脂作為試樣，過濾 過程應(yīng)盡快完成。A. 2油脂試樣的干燥脫水若油脂試樣中含有水分

10、，通過A.1的處理后仍舊無法達(dá)到澄清，應(yīng)進(jìn)行干燥脫水。對于無結(jié)晶或 凝固現(xiàn)象的油脂試樣，以及經(jīng)過A.1的處理并冷卻至室溫后無結(jié)晶或凝固現(xiàn)象的油脂試樣，可按每10g 油脂試樣添加1 g2g的比例加入無水硫酸鈉，并充分?jǐn)嚢杌旌希缓笥脼V紙過濾，取過濾后的澄清 液體油脂作為試樣。若油脂樣品中的水分含量較高，可先將油脂樣品用離心機(jī)以8000 r/min的轉(zhuǎn)速離心10 n】in20 min, 分層后，取上層的油脂試樣用無水硫酸鈉吸附脫水。對于室溫下有結(jié)晶或凝固現(xiàn)象的油脂試樣，以及經(jīng)過A.1的處理并冷卻至室溫后有明顯結(jié)晶或凝 固現(xiàn)象的油脂試樣，可將油脂試樣用適量的石油醒，于40°C55C水浴內(nèi)完

11、全溶解后，加入適量無水 硫酸鈉，在維持加熱條件卜充分?jǐn)嚢杌旌希o置后收集上清液，置于水浴溫度不高于4()°C的旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀 內(nèi)，減壓蒸干，取殘留的液體油脂作為試樣。對于由于凝固點(diǎn)過高而無法溶解于石油醍的油脂試樣，則將試樣置于比其凝固點(diǎn)高10°C左右的水 浴或恒溫干燥箱內(nèi)，加熱并充分振搖以熔化可能的油脂結(jié)晶或凝固物，然后加入適量無水硫酸鈉，在 同樣的溫度環(huán)境下，充分?jǐn)嚢杌旌?，然后趁熱過濾，取過濾后的澄清液體油脂作為試樣。附錄B自動(dòng)電位滴定法的滴定終點(diǎn)判定示意圖B. 1典型“S”型pH-滴定體積實(shí)時(shí)變化曲線，見圖B.loB.2多次“pH突躍”的“S”型pH-滴定體積實(shí)時(shí)變化曲線，

12、見圖B.2。B.3 “直接突躍”型pH-滴定體積實(shí)時(shí)變化曲線，見圖B.3。B.4 “pH突躍”中多個(gè)一階微分峰的“S"型pH-滴定體積實(shí)時(shí)變化曲線，見圖B.4-8.20 0.2 0.4 0.6 0.81 1.2 1.4 1.6 1.8 2歸冬起會(huì)；9 5 1 624.91H-Jq 瑟冬滴加的標(biāo)準(zhǔn)滴定液體積mLpH-滴定體積實(shí)時(shí)變化曲線 一階微分曲線潸定終點(diǎn) pH突躍起點(diǎn)圖B.1典型“S”型pH值-滴定體積實(shí)時(shí)變化曲線63.55546.6 38. 1 29.6 .21.2 12. 7 4.2滴加的標(biāo)準(zhǔn)滴定液體積，mLpH滴定體積實(shí)時(shí)變化曲線一階微分曲線滴定終點(diǎn) pH突躍起點(diǎn)圖B.2多次

13、“pH突躍”的“S”型pH值-滴定體積實(shí)時(shí)變化曲線BH7S住，pH滴定體積實(shí)時(shí)變化曲線階微分曲線滴定終點(diǎn)圖B.3 “直接突躍”型pH值-滴定體積實(shí)時(shí)變化曲線滴加的標(biāo)準(zhǔn)滴定液體枳mLpH滴定體積實(shí)時(shí)變化曲線階微分曲線滴定終點(diǎn) pH突既起點(diǎn)S1B.4 "pH突躍”中多個(gè)一階微分峰的“S”型pH值-滴定體積實(shí)時(shí)變化曲線1刖 舌本標(biāo)準(zhǔn)代替GB 5009.229-2016食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中酸價(jià)的測定。 本標(biāo)準(zhǔn)與GB 5009.229-2016相比，主要變化如下：修改了方法適用范圍；修改了稱樣量；增加了銅皂絡(luò)合比色法作為第四法；刪除了附錄B、C、D,食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中酸價(jià)的測定1范圍本標(biāo)

14、準(zhǔn)規(guī)定了食品中酸價(jià)的測定方法。第一法冷溶劑指示劑滴定法適用于油脂（包括含油食品中提取的油脂）在常溫下能夠被冷溶劑完 全溶解成澄清溶液的食用動(dòng)植物油脂及其制品、植物油料中酸價(jià)的測定，不適用于添加了干擾物的食 品中酸價(jià)的測定。第二法冷溶劑自動(dòng)電位滴定法適用于油脂（包括含油食品中提取的油脂）在常溫下能夠被冷溶劑 完全溶解成澄清溶液的食用動(dòng)植物汕脂及其制品、植物油料、半固態(tài)復(fù)合調(diào)味料（堅(jiān)果與籽類的醬、 其他添加了食用油的醬）、腌臘肉制品、油炸方便面、糕點(diǎn)、面包、餅干、薯類和膨化食品、油炸小 食品、堅(jiān)果與籽類食品、動(dòng)物性水產(chǎn)干制品中酸價(jià)的測定，不適用于添加了干擾物的食品中酸價(jià)的測 定。第三法熱乙醇指示劑

15、滴定法適用于油脂（包括含油食品中提取的油脂）在常溫下不能夠被冷溶劑 完全溶解成澄清溶液的食用動(dòng)植物油脂及其制品中酸價(jià)的測定，不適用于添加了干擾物的食品中酸價(jià) 的測定。第四法銅皂絡(luò)合比色法適用于添加了干擾物的食用油脂制品（人造奶油、植脂奶油、粉末油脂）、 半固態(tài)復(fù)合調(diào)味料（堅(jiān)果與籽類和其它添加食用油的醬）、油炸方便面、糕點(diǎn)、餅干、薯類和膨化食 品、堅(jiān)果與籽類食品中酸價(jià)的測定。注：干擾物包括山梨酸、苯甲酸、脫氫乙酸、乙酸、丙酸、雙乙酸鈉、糖精、肉桂酸、3-乙氧基-4-羥基苯甲酸、 3-甲基戊酸、2-甲基-2-戊烯酸、水楊酸、丁酸、2-甲基丁酸、3-甲基丁酸、阿魏酸、香豆蔻酸、硬脂酰乳酸鈉、硬脂酰

16、乳酸鈣。第一法冷溶劑指示劑滴定法2原理經(jīng)制備的油脂試樣在乙醒（或甲基叔丁基醒）和異丙醇中溶解，用氫氧化鉀或氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定 溶液中和試樣溶液中的游離脂肪酸，以酸堿指示劑確定滴定終點(diǎn)，根據(jù)滴定溶液的消耗量計(jì)算試樣的 酸價(jià)。3試劑和材料除非另有說明，本方法所用試劑均為分析純，水為GB/T 6682規(guī)定的三級(jí)水。3. 1試劑3.1.1 異丙（C3H8O） o3. 1.2 無水乙酷（C4H|0O）。3.1.3甲基叔丁基醒（CsHnO）。3. 1.4 乙醇（C2H5OH） : 95 %03.1.5 酚猷(C20H14O4)。3.1.6 百里香酚猷(C28H30O4)。3. 1.7 堿性藍(lán)6B (C37H

17、29N3O3S, CAS號(hào)：1324-76-1)。3. 1.8 液氮 <N2):純度99.99%o3.1.9石油酷：沸程為30°C60C。3. 1. 10無水硫酸鈉(NazSCh) 03. 1.11 氫氧化鉀(KOH)。3. 1. 12 氫氧化鈉(NaOH)。3.2試劑配制3.2.2冷溶劑：將無水乙酷(或甲基叔丁基酷)與異丙醇按1:1的體積比混合均勻。3.2.3酚猷指示劑(10g/L):稱取lg酚猷，用95%乙醇溶解并定容至lOOmL。3.2.4百里香酚酰指示劑(20g/L):稱取2 g百里香酚猷，用95%乙醇溶解并定容至100mL。3.2.5堿性藍(lán)6B指示劑(20g/L):稱

18、取2g堿性藍(lán)6B,用95%乙醇溶解并定容至lOOmL。3.3標(biāo)準(zhǔn)溶液配制3.3.1氫氧化鉀標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液(0.1 mol/L):按照GB/T 5009.1的要求配制和標(biāo)定，或購買經(jīng)國家認(rèn) 證并授予標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書的標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液。3. 3.2氫氧化鉀標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液(0.05 mol/L):用氫氧化鉀標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液(0.1 mol/L)稀釋獲得，臨 用前配制，必要時(shí)重新標(biāo)定。3. 3.3狙氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液(0.5 mol/L或0.1 mol/L):按照GB/T 5009.1或GB/T 601的要求配制和 標(biāo)定，或購買經(jīng)國家認(rèn)證并授予標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書的標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液。3. 3.4氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液(0.05 m

19、ol/L):用氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液(0.5 niol/L或0.1 mol/L)稀 釋獲得，臨用前配制，必要時(shí)重新標(biāo)定。4儀器和設(shè)備 4. 1滴定管：容量10 mL,最小刻度0.05mL。4.2滴定管：容量25mL或50 mL,最小刻度0.1 mL。4. 3 天平：感量為0.01 g、0.001 go4.4食品粉碎機(jī)或搗碎機(jī)。4.5瓷研體。4.6恒溫水浴鍋。4.7恒溫鼓風(fēng)干燥箱。4. 8離心機(jī)：最高轉(zhuǎn)速不低于8000 r/mino4.9旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀。4.10索氏抽提裝置。5.1試樣制備5.1.1食用動(dòng)植物油脂及其制品（不包括植脂奶油、粉末油脂）若樣品在常溫下為液態(tài)，則充分混勻后直接取樣：若樣品在常

20、溫下為固態(tài)（或半固態(tài)），則應(yīng)選 取有代表性的樣品置于比其熔點(diǎn)高l（）°C左右的水浴或恒溫鼓風(fēng)干燥箱內(nèi)，加熱熔化、混勻后取樣。若 油脂試樣有明顯渾濁、乳化、分層或沉淀，則應(yīng)按附錄A進(jìn)行除雜和脫水處理。5.1.2植脂奶油取具有代表性的樣品于廣口瓶中，加入適量無水硫酸鈉充分?jǐn)嚢杳撍?，再加入樣品體積2倍5 倍的石油酰充分?jǐn)嚢瑁芍糜诓桓哂?0°C水浴內(nèi)加熱并攪拌），然后靜置使混合液分層，將上清液轉(zhuǎn) 移至燒瓶中，置于水浴溫度不高于40C的旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀內(nèi)，減壓蒸干有機(jī)溶劑，殘留物作為油脂試樣進(jìn) 行酸價(jià)測定。若樣品難以溶解在石油醒中，可用石油醒-甲基叔丁基暇混合液（1+3）替代石油醒。若殘

21、留物有明顯渾濁、乳化、分層或沉淀，則應(yīng)按附錄A進(jìn)行除雜和脫水處理。5.1.3粉末油脂取具有代表性的樣品于燒杯中，加入適量水并攪拌成糊狀，再加入適量異丙醇繼續(xù)攪拌，直至樣 品狀態(tài)為糊狀且不黏稠，加入約2倍樣品體積的石油醍?dāng)嚢杈鶆?，然后靜置使混合液分層，將上消液轉(zhuǎn) 移至分液漏斗中，加入與石油醍等體積的水，充分振搖后靜置，棄去下層溶液，然后將上清液經(jīng)加有無 水硫酸鈉的漏斗進(jìn)行過濾，轉(zhuǎn)移至燒瓶中，置于水浴溫度不高于40 °C的旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀內(nèi)，減壓蒸干有機(jī)溶 劑，殘留物作為油脂試樣進(jìn)行酸價(jià)測定。若殘留物有明顯渾濁、乳化、分層或沉淀，則應(yīng)按附錄A進(jìn)行除雜和脫水處理。5. 1.4植物油料取具有代表性

22、的樣品用食品粉碎機(jī)、搗碎機(jī)或瓷研缽充分粉碎，粉碎過程若試樣明顯發(fā)熱，則應(yīng) 加入適量的液氮，在冷凍狀態(tài)下進(jìn)行粉碎處理。將粉碎后的樣品用濾紙筒裝好后放入索氏抽提裝置中，由抽提裝置冷凝管上端加入無水乙酷或石 油酰至瓶內(nèi)容積的三分之二處，于水浴上加熱抽提4 h。回收提取液于燒瓶中，置于水浴溫度不高于 40C的旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀內(nèi)，減壓蒸干有機(jī)溶劑，殘留物作為油脂試樣進(jìn)行酸價(jià)測定。若殘留物有明顯渾濁、乳化、分層或沉淀，則應(yīng)按附錄A進(jìn)行除雜和脫水處理。5.2試樣稱量根據(jù)試樣估計(jì)的酸價(jià)，按照表1規(guī)定的稱樣量稱取油脂試樣，置于250 mL錐形瓶中。表1食用動(dòng)植物油脂試樣稱樣量及使用滴定液的濃度估計(jì)的酸價(jià)試樣的最小稱樣

23、量使用標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的濃度試樣稱重的精確度mg/ggmol/Lg。120 （動(dòng)植物油脂）5 （除動(dòng)植物油脂外）0.05 或 0.10.051410 （動(dòng)植物油脂）5 （除動(dòng)植物油脂外）0.05 或 0.10.024152.50.10.0115 750.5 3.00.1 或 0.50.001>750.2 1.00.50.001試樣稱樣量和滴定液濃度應(yīng)使滴定液用量在0.2mL10mL之間（扣除空白后）。若檢測后，發(fā) 現(xiàn)實(shí)際稱樣量與該試樣酸價(jià)所對應(yīng)的應(yīng)有稱樣量不符，應(yīng)按照表1要求，調(diào)整稱樣量后重新檢測。5.3試樣測定在稱取的油脂試樣中加入50 mL100 mL冷溶劑，輕輕振搖試樣至完全溶解，加入

24、3滴4滴酚 猷指示劑，立即用表1規(guī)定濃度的氫氧化鉀或氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液進(jìn)行滴定，直至溶液出現(xiàn)微紅色， 且15 s不褪色為終點(diǎn)。同時(shí)進(jìn)行空白試驗(yàn)（若試樣測定前先將冷溶劑調(diào)至中性，則不需要進(jìn)行空白試 驗(yàn)，即 *）=0 mL）。注：當(dāng)油脂試樣的顏色影響終點(diǎn)判斷時(shí)，可用百里香酚釀指示劑或堿性藍(lán)6B指示劑替代酚仙指示劑。滴定時(shí)，當(dāng) 溶液顏色變?yōu)樗{(lán)色時(shí)為百里香酚猷的滴定終點(diǎn)，堿性藍(lán)6B指示劑的滴定終點(diǎn)為由藍(lán)色變紅色。米糠油（格米油）的酸 價(jià)測定采用堿性藍(lán)6B指示劑。6分析結(jié)果的表述試樣中酸價(jià)的含量按公式（1）計(jì)算：x_（V-Vcx56. （1）m式中：X一酸價(jià)，單位為毫克每克（mg/g）；V滴定試樣溶液

25、所消耗的標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的體積，單位為亳升（mL）；Vo空白試驗(yàn)所消耗的標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的體積，單位為毫升（mL）； c一一所用標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的濃度，單位為摩爾每升（mol/L）；m油脂試樣的質(zhì)量，單位為克（g）：56.1氫氧化鉀的摩爾質(zhì)量，單位為克每摩爾（g/mol）。酸價(jià)W1 mg/g時(shí)，計(jì)算結(jié)果保留2位小數(shù)；mg/gV酸價(jià)W100 mg/g時(shí)，計(jì)算結(jié)果保留1位小數(shù)； 酸價(jià)100 mg/g,計(jì)算結(jié)果保留至整數(shù)位。7精密度當(dāng)酸價(jià)VI mg/g時(shí)，在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測定結(jié)果的絕對差值不得超過算術(shù)平均值的 15%；當(dāng)酸價(jià) I mg/g時(shí)，在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測定結(jié)果的絕對差值不得超過算術(shù)

26、平均值 的 12%o第二法冷溶劑自動(dòng)電位滴定法8原理經(jīng)制備的油脂試樣在乙醒（或甲基叔丁基醒）和異丙醇中溶解，采用自動(dòng)電位滴定儀進(jìn)行滴定， 用氫氧化鉀或氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液中和試樣溶液中的游離脂肪酸，以中和反應(yīng)所引起的“pH突躍” 確定滴定終點(diǎn)，根據(jù)滴定溶液的消耗量計(jì)算試樣的酸價(jià)。9試劑和材料同3。10儀器和設(shè)備 10. 1自動(dòng)電位滴定儀：具備自動(dòng)pH電極校正功能、動(dòng)態(tài)滴定模式功能；由微機(jī)控制，能實(shí)時(shí)自動(dòng)繪制 和記錄滴定時(shí)的pH值-滴定體積實(shí)時(shí)變化曲線及相應(yīng)的一階微分曲線；滴定精度（）.01 mL/滴，電信號(hào)測 量精度0.1 mV；滴定口配備防擴(kuò)散頭。10.2非水相酸堿滴定專用復(fù)合pH電極：采用

27、Ag/AgCl內(nèi)參比電極，具有移動(dòng)套管式隔膜和電磁屏蔽 功能。10. 3磁力攪拌器：配備聚四氟乙烯磁力攪拌子。其余同4.34.10。11分析步驟11.1試樣制備11.1.1食用動(dòng)植物油脂及其制品（不包括植脂奶油、粉末油脂）同 5.1.1。11.1.2植脂奶油和粉末油脂同 5.1.2 和 5.1.3。11.1.3植物油料同 5.1.4o11.1.4其他含油食品取具有代表性樣品的可食部分（含水分較多的樣品可先用紗布將水瀝干），用食品粉碎機(jī)、搗碎機(jī) 或瓷研缽將樣品充分粉碎（使樣品中的游離脂肪能被石油醒充分提?。糜趶V口瓶中（含水分較多的 樣品可先加入適量無水硫酸鈉脫水），加入2倍3倍樣品體積的石油

28、醍，搖勻，充分混合，密封后靜 置浸提12 h以上。經(jīng)裝有無水硫酸鈉的漏斗過濾，取濾液，在不高于4（）笆的水浴中，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀減壓 蒸干石油醒，殘留物作為油脂試樣進(jìn)行酸價(jià)測定。若殘留物有明顯渾濁、乳化、分層或沉淀，則應(yīng)按附錄A進(jìn)行除雜和脫水處理。11.2試樣稱量根據(jù)試樣估計(jì)的酸價(jià)，按照表1規(guī)定的稱樣量稱取油脂試樣，置于200 mL燒杯中。11.3試樣測定在稱取的油脂試樣中加入50 mL100 mL冷溶劑，再加入1顆聚四氟乙烯磁力攪拌子，將試樣置 于磁力攪拌器上攪拌溶解。然后，將已連接在自動(dòng)電位滴定儀上的電極和滴定管插入試樣溶液中，注 意應(yīng)將電極的玻璃球泡和滴定管的防擴(kuò)散頭完全浸沒在樣品溶液的液面

29、以下，避免碰到燒杯內(nèi)壁。啟 動(dòng)自動(dòng)電位滴定儀，用氫氧化鉀或氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液進(jìn)行滴定。自動(dòng)電位滴定儀的參數(shù)設(shè)置：最小加液體積：0.01 mL/滴0.06 mL/滴；最大加液體積：20 pL50 pL；信號(hào)漂移：20 mV30 mV；啟動(dòng)自動(dòng)監(jiān)控功能，實(shí)時(shí)自動(dòng)繪制相應(yīng)的pH值-滴定體積變化曲線及對應(yīng)的一階微分曲線， 如附錄B所示；終點(diǎn)判定方法：以游離脂肪酸發(fā)生中和反應(yīng)時(shí)，其產(chǎn)生的“S”型pH值-滴定體積實(shí)時(shí)變化 曲線上的“pH突躍”導(dǎo)致的一階微分曲線的峰頂點(diǎn)所指示的點(diǎn)為滴定終點(diǎn)（如附錄B中圖B.1所示）。 過了滴定終點(diǎn)后自動(dòng)電位滴定儀會(huì)自動(dòng)停止滴定，滴定結(jié)束，并自動(dòng)顯示消耗的標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的體積

30、。若 在滴定過程中，出現(xiàn)多次“pH突躍”的油脂試樣（如米糠油等），則以“突躍”起點(diǎn)的pH值最符合 或接近于pH值7.59.5范圍的“pH突躍”作為滴定終點(diǎn)（如附錄B中圖B.2所示）：若產(chǎn)生“直接 突躍”型pH值-滴定體積變化曲線，則直接以對應(yīng)的一階微分曲線的頂點(diǎn)為滴定終點(diǎn)（如附錄B中圖 B.3所示）；若在一個(gè)“pH突躍”上產(chǎn)生多個(gè)一階微分峰，則以最高峰作為滴定終點(diǎn)（如附錄B中 圖B.4所示）。每個(gè)試樣滴定結(jié)束后，電極、滴定管和攪拌子應(yīng)先用溶劑沖洗，再用一定最的蒸循水沖洗后方可 進(jìn)行下一個(gè)試樣的測定，同時(shí)做空白試驗(yàn)。12分析結(jié)果的表述同6。13精密度同7。第三法熱乙醇指示劑滴定法14原理經(jīng)制備的油脂試樣溶解在熱乙醇中，用氫氧化鉀或氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液中和試樣溶液中的游離 脂肪酸，以酸堿指示劑確定滴定終點(diǎn)，根據(jù)滴定溶液的消耗量計(jì)算試樣的酸價(jià)。15試劑和材料同3。16儀器和設(shè)備同4。17分析步驟17.1試樣制備同 5.1.1 5.1.3。17.2試樣稱量同 5.2o17.3試樣測定另取一個(gè)250 mL錐形瓶，加入50 mL100 mL 95%乙酩 再加入0.5mLIm L酚酉太指示劑，搖 勻后置于水浴中加熱至微沸。取出該錐形瓶，趁乙醇溶液的溫度還在70C以上時(shí)，用氫氧化鉀或氫氧化 鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液滴定至微紅色，旦15 s不褪色。將該溶