2019_2020學(xué)年高中生物專題1基因工程綜合檢測一含解斬新人教版選修3

1、高中生物專題:專題綜合檢測一基因工程時間：90分鐘 滿分：100分一、選擇題（每小題2分，共20分）L 2019 烏魯木齊市第四中學(xué)高二期中基因工程是DNA分子水平的操作，下列有關(guān) 基因工程的敘述中，錯誤的是（）A.限制酶作用能使堿基對之間的氫鍵斷裂B.載體與目的基因通常用同種限制旃處理C.基因工程所用的工具酶包括限制前和DNA連接酶D.帶有目的基因的載體是否進入受體細胞需檢測解析：限制酶作用能使DNA兩條鏈上特定的脫氧核甘酸之間的磷酸二酯鍵斷裂，A錯誤: 載體與目的基因通常用同種限制酶處理，以便形成相同的黏性末端，B正確：基因工程所用的 工具酶包括限制性核酸內(nèi)切語（限制旃）、DNA連接酶，C

2、正確：帶有目的基因的載體是否進入 受體細胞需檢測，如采用DXA分子雜交技術(shù)，D正確。答案：A2.2019 河北高二期末下列有關(guān)基因組文庫和cDNA文庫的說法，正確的是（）A.基因組文庫中的基因都可在不同物種間進行交流B.基因組文庫只包含生物的部分基因C.構(gòu)建cDA文庫需要逆轉(zhuǎn)錄酶D. cDNA文庫的基因中有內(nèi)含子解析：從基因組文庫中獲取的基因只有部分可在物種間進行交流，A錯誤：基因組文庫 包含某種生物所有的基因，B錯誤；根據(jù)以上分析可知，構(gòu)建cDNA文庫需要逆轉(zhuǎn)錄酶，C正 確：cDNA文庫的基因是mRNA經(jīng)過逆轉(zhuǎn)錄形成的，無內(nèi)含子，D錯誤。答案：C3.2019 北京高二期末下列關(guān)于DA分子雜交

3、和抗原一抗體雜交的敘述，正確的是 （）A. DNA分子雜交是指兩條脫氧核甘酸鏈的雜交B.抗原一抗體雜交的原理為堿基互補配對原則C. DNA分子雜交可檢測目的基因的存在和轉(zhuǎn)錄D.抗原一抗體雜交中目的基因產(chǎn)物常作為抗體解析：DNA分子雜交是指兩條核昔酸鏈的雜交，A正確：抗原一抗體雜交的原理為抗體 與抗原特異性結(jié)合，B錯誤：DA分子雜交可檢測目的基因的存在，檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出 了 mRNA,用分子雜交技術(shù)，C錯誤；抗原一抗體雜交中目的基因產(chǎn)物常作為抗原，D錯誤。答案：A4.己019 延安市寶塔區(qū)第四中學(xué)高二期末關(guān)于下圖所示黏性末端的敘述中，正確的 是（）TCC-GTTTCCAAAATTCAGCT

4、TAA.與由相同限制酶切割產(chǎn)生B.連接酶可催化與的拼接C.經(jīng)酶切形成需要消耗2個水分子D.一中的化學(xué)鍵均為相同化學(xué)鍵解析：A項和B項、與的末端不能進行堿基互補配對，不是由相同限制酶切割產(chǎn)生, 不能由DNA連接酶連接，A項、B項錯誤；經(jīng)酶切形成打開兩個磷酸二酯鍵，需要消耗2個 水分子，C正確；一中的化學(xué)鍵有氫鍵和磷酸二酯鍵，D錯誤。答案：C5.2019 黃陵中學(xué)高新部高一期末在基因工程技術(shù)中，限制性核酸內(nèi)切酶主要用于 （）A.目的基因的提取和導(dǎo)入B.目的基因的導(dǎo)入和檢測C.目的基因與運載體的結(jié)合和導(dǎo)入D.目的基因的提取和運載體切割解析：目的基因的提取需要限制酶，而導(dǎo)入需要載體，A錯誤：目的基因的

5、導(dǎo)入需要載 體，目的基因的檢測不需要限制靖，B錯誤；目的基因與運載體的結(jié)合即基因表達載體的構(gòu)建 需要限制酶，而導(dǎo)入不需要，C錯誤：獲取目的基因需要限制酶切割DNA分子，目的基因與運 載體結(jié)合是基因表達載體構(gòu)建過程，此時需要同一種限制酶切割目的基因和運載體，使它們 露出相同的黏性末端或平末端，之后用DNA連接酶連接成基因表達載體（重組DNA分子），D正 確。答案：D6.下列有關(guān)基因工程技術(shù)的敘述正確的是（）A.培育抗蟲棉，導(dǎo)入抗蟲基因時只能以受精卵為受體細胞B.重組DNA技術(shù)所用的工具酶是限制的、DNA連接酶、運載體C.常選用細菌作為重組質(zhì)粒的受體細胞是因為細菌繁殖快D.目的基因?qū)胧荏w細胞就能

6、成功表達解析：植物細胞的全能性較高，目的基因可導(dǎo)入植物體細胞或受精卵，A錯誤：運載體 不是工具酶，B錯誤：常用細菌作為受體細胞，原因是其繁殖快、代謝快，C正確：目的基因 導(dǎo)入受體細胞后，不一定能成功表達，需要進行檢測和鑒定，D錯誤。答案：C7. 2019 福建省泉州市泉港區(qū)第一中學(xué)高二期末下而關(guān)于多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）的敘 述正確的是（）A. PCR過程中只需要兩個引物分子B.PCR的循環(huán)過程分為變性、復(fù)性和延伸三步C. PCR擴增儀需保持在37° C以維持7aq酶最佳活性D. PCR過程中邊解旋邊復(fù)制解析：PCR過程中需要兩種引物，引物的數(shù)目需要根據(jù)擴增的次數(shù)確定，A錯誤；PCR

7、 的循環(huán)過程分為高溫變性（DNA雙鏈打開八復(fù)性（模板鏈與引物結(jié)合）和延伸（合成子鏈）三步， B正確；PCR擴增儀溫度會達到9095 °C, C錯誤；PCR過程中，在變性階段打開雙鏈，延伸 階段合成子鏈，故先解旋再復(fù)制，D錯誤。答案：B8 .辦019 遼寧高二期中下列有關(guān)基因治療的敘述中，正確的是（）A.基因治療可以治愈所有人類的遺傳類疾病B.對有基因缺陷的細胞提供營養(yǎng)，從而使其恢復(fù)正常，達到治療疾病的目的C.運用基因工程技術(shù)，把有缺陷的基因切除，達到治療疾病的目的D.用于治療的基因有的是編碼可以殺死癌變細胞的蛋白酶基因，又稱自殺基因解析：目前在基因水平上治療遺傳病尚處于試驗研究階段，

8、仍不能達到治愈所有人類遺 傳病，A錯誤：基因治療只是把正?；?qū)氩∪梭w內(nèi)，沒有對有基因缺陷的細胞額外提供營 養(yǎng)，B錯誤：基因治療是把正?；?qū)氩∪梭w內(nèi)，達到治療疾病的目的，并沒有切除基因， C錯誤；用于基因治療的基因可以是編碼可以殺死癌變細胞的蛋白酹基因，導(dǎo)入受體細胞后誘 導(dǎo)其編程性死亡，即自殺基因，D正確,答案：D9 . M用蘇云金芽泡桿菌的抗蟲基因培育出的抗蟲棉是否成功，需要檢測（）A.是否能分離到目的基因B.是否有抗蟲的性狀出現(xiàn)C.是否有抗生素產(chǎn)生D.目的基因是否得到表達解析：能否分離出目的基因為基因?qū)胧欠癯晒Φ臋z測標(biāo)志，A錯誤；抗蟲棉培育成功 的標(biāo)志是目的基因成功表達，且表現(xiàn)出抗

9、蟲性狀，B正確，D錯誤：抗蟲棉是否表現(xiàn)抗蟲性狀 與抗生素產(chǎn)生與否無關(guān)，C錯誤。答案：B10 .2019 遼源市田家炳高級中學(xué)高二期中下列關(guān)于基因工程及其產(chǎn)品的說法中，不 正確的是（）A.基因工程的一項關(guān)鍵技術(shù)是構(gòu)建基因表達載體B.基因工程的優(yōu)勢是可定向地改造生物遺傳性狀C.消費者對轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品應(yīng)該有選擇權(quán)D.基因工程中產(chǎn)生的可遺傳變異屬于染色體變異解析：基因工程的核心步驟是基因表達載體的構(gòu)建，故A正確：基因工程可以按照人們 的意愿，定向地改造生物的遺傳性狀，故B正確；消費者對轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品應(yīng)該有知情權(quán)和選擇 權(quán)，故C正確；基因工程中產(chǎn)生的可遺傳的變異屬于基因重組，故D錯誤。答案：D二、非選擇題（每小

10、題10,共80分）11 .胰島素可以用于治療糖尿病，但是胰島素被注射到人體中后，會堆積在皮下，要經(jīng) 過較長的時間才能進入血液，而進入血液的胰島素又容易被分解，因此，治療效果受到影響， 如圖是用蛋白質(zhì)工程設(shè)計速效胰島素的生產(chǎn)過程，據(jù)圖回答下列問題：3(D蛋白質(zhì)工程的目標(biāo)是根據(jù)人們對 的特定需求，對蛋白質(zhì)的進行分子設(shè)計。(2)人工合成的新的胰島素基因在導(dǎo)入受體細胞前要先構(gòu)建，其目的是使目的基因在 中穩(wěn)定存在，并且可以遺傳給下一代，同時使目的基因能夠.在這個過程中需要 酶的參與。成熟的基因表達載體除了含有新的胰島素基因外，還必須有啟動子、終止子以及 等.(3)在將基因表達載體導(dǎo)入大腸桿菌時，一般要用

11、 處理該菌，使之成為 細胞，以便吸收周圍環(huán)境中的DNA分子。(4)在大腸桿菌中直接生產(chǎn)的胰島素還不具有生物活性，原因是解析：(1)蛋白質(zhì)工程的流程：預(yù)期蛋白質(zhì)功能一設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)一推測應(yīng)有氨 基酸序列一找到對應(yīng)的脫氧核甘酸序列(基因)。(2)基因工程的核心步驟是基因表達載體的構(gòu) 建，然后導(dǎo)入受體細胞，可以使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在，并且可以遺傳給下一代， 同時使目的基因能夠表達和發(fā)揮作用，在這個過程中需要DNA連接酶和限制性核酸內(nèi)切酶； 基因表達載體由啟動子、終止子、標(biāo)記基因和目的基因組成0 (3)用Ca(或氯化鈣)處理大腸 桿菌，使之處于一種能吸收環(huán)境中DXA的生理狀態(tài)即感受態(tài)。(

12、4)大腸桿菌是原核生物，沒有 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體，不能對胰島素原進行加工，因此不能產(chǎn)生具有活性的胰島素。答案：(1)蛋白質(zhì)功能結(jié)構(gòu)(2)基因表達載體受體細胞表達和發(fā)揮作用限制酶和DNA連接標(biāo)記基因 (3)Ca"感受態(tài)(4)大腸桿菌是原核生物，沒有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體，不能加工出有活性的胰島素12 .2019 天津高考模擬研究發(fā)現(xiàn)，從錐形蝸牛體內(nèi)提取出的錐形蝸牛毒蛋白(Con -Ins GD能加速受體細胞信號轉(zhuǎn)換，比人類胰島素更加快速的發(fā)揮作用，因此制造這類“速 效胰島素”以及利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)實現(xiàn)批量生產(chǎn)為I型號糖尿病治療的新思路°(1)利用基因工程制造速效胰島素過程中，構(gòu)建的基因表

13、達載體一般包括目的基因、啟 動子、標(biāo)記基因和復(fù)制原點，標(biāo)記基因的作用是c(2)為了獲得目的基因，可以通過提取分析毒蛋白中的 序列推知毒蛋白基因的核昔酸序列，再用DNA合成儀直接合成?；蚬こ讨行枰狣NA連接酶，根據(jù)酶的來源不同 分為兩類，其中“縫合”雙鏈DNA片段平末端的是。(3)將人工合成的目的基因?qū)氪竽c桿菌體內(nèi)，一般先用 處理大腸桿菌使之成為 細胞，再將重組表達載體DNA分子溶于 中與該類細胞混合，在一定溫度下促進細胞吸收DNA分子完成轉(zhuǎn)化過程。(4)經(jīng)過目的基因的檢測和表達，獲得Con-Ins GI毒蛋白活性未能達到期待的“速效 胰島素”的生物活性，導(dǎo)致這種差異的原因可能是解析：(1)

14、基因表達載體的構(gòu)建是基因工程的核心內(nèi)容，一個基因表達載體的組成，除 了目的基因外，還有啟動子、終止子、標(biāo)記基因和復(fù)制原點，標(biāo)記基因的作用是為了鑒別受 體細胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細胞篩選出來，所以說標(biāo)記基因的作用 是鑒別和篩選含有目的基因的細胞。(2)蛋白質(zhì)的氨基酸序列就是蛋白質(zhì)的組成分子，即氨基 酸的排列順序，為了獲得目的基因，可以通過提取分析毒蛋白中的頷基酸序列推知毒蛋白基 因的核昔酸序列，再用DNA合成儀直接合成?；蚬こ讨行枰狣NA連接酶，根據(jù)酶的來源不 同分為°。MDA連接酶和T.DNA連接酶兩類，加DNA連接酶只能連接黏性末端，而 TDNA連接酶既可以連

15、接黏性末端，也可以連接平末端。(3)用Ca"處理細胞，使細胞處于能 吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)，這種細胞稱為感受態(tài)細胞。將人工合成的目的基因?qū)?入大腸桿菌體內(nèi)，一般先用Ca”處理大腸桿菌使之成為感受態(tài)細胞，再將重組表達載體DNA 分子溶于緩沖液中與該類細胞混合，在一定溫度下促進細胞吸收DA分子完成轉(zhuǎn)化過程。(4) 大腸桿菌細胞內(nèi)沒有復(fù)雜的細胞器，不能對蛋白質(zhì)進行加工，不能形成具有功能的蛋白質(zhì)， 獲得Con-Ins GI毒蛋白活性未能達到期待的“速效胰島素”的生物活性，所以是大腸桿菌 中基因表達獲得的蛋白質(zhì)未加工。答案：(1)終止子 鑒別和篩選含有目的基因的細胞(2)氨基酸TD

16、NA連接酶(3)Ca2+感受態(tài)緩沖液(4)大腸桿菌中基因表達獲得的蛋白質(zhì)未加工13 . 2019 烏魯木齊市第四中學(xué)高二期中某轉(zhuǎn)基因抗病植物的培育過程如圖1所示， 圖2表示尸s"、Sma I、氏°R I和Apa I四種限制酶的識別序列及酶切位點。請據(jù)圖回答下 列問題:YTGC 士- -CCxliGG GAATTC GGGCCT-TiACXiU (KKK：CC- -CriAACr- - CCCGGG- ，Psi I $4】IEcoH |tI A(w限制梅根JWrf列及苒切位點圖2(1)圖中限制酶切割DNA時破壞的是兩個 之間的化學(xué)鍵。(2)在構(gòu)建圖1中的重組質(zhì)粒時要保證目的基

17、因被連接在質(zhì)粒上特定的 和終止子之間才能保證目的基因在受體細胞中被成功(3)將抗病基因從含抗病基因的DNA中切割下來，使用的限制酶是，同時也應(yīng)該用相同的酶對質(zhì)粒進行切割，這樣處理的原因是o請寫出單獨用尸sM切割質(zhì)粒后的片段：(4)轉(zhuǎn)基因抗病植物的培育是否發(fā)生了可遺傳變異？ o藥物A會抑制 香蕉愈傷組織細胞的生長，根據(jù)這一原理可以利用含藥物A的培養(yǎng)基篩選已導(dǎo)入重組質(zhì)粒的 受體細胞。由此推斷，重組質(zhì)粒中應(yīng)含有基因作為標(biāo)記基因。解析：(1)限制酶切割的是DNA分子中特定的兩個脫氧核甘酸之間的磷酸二酯鍵。(2) 為了保證目的基因在受體細胞中能夠成功表達(或轉(zhuǎn)錄)，在構(gòu)建圖1中的重組質(zhì)粒時，目的 基因上

18、游和下游必須連接有特定的啟動子和終止子。(3)根據(jù)以上分析可知，切割圖示目的基 因和質(zhì)粒采用的限制酶都是尸sT和反。RI ,這樣才能使得質(zhì)粒和目的基因的兩端具有相同 的黏性末端，便于二者進行正確的拼接。根據(jù)圖2分析限制酶的識別序列和切割位點可知，CTGCAG-單獨用尸s"切割質(zhì)粒后的片段為： G和ACGTC o轉(zhuǎn)基因技術(shù)的原理是基因重組，屬于可遺傳變異；根據(jù)題意分析，欲利用含藥物A的培養(yǎng)基篩選已導(dǎo)入抗病基因(目的 基因或重組質(zhì)粒)的香蕉細胞，則重組質(zhì)粒中應(yīng)含有抗藥物A基因作為標(biāo)記基因。答案：(1)脫氧(核糖)核昔酸(2)啟動子轉(zhuǎn)錄(或表達)尸st【和 反國I用相同的酶切割質(zhì)粒才能產(chǎn)生

19、與目的基因相同的末端，便于二者CTGCAG進行拼接(；和ACGTC一(4)是抗藥物A14 . 2019 河北高二期末利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)使外源DNA片段在組織或器官中特異性表達 的轉(zhuǎn)基因生物叫生物反應(yīng)器。請回答下列問題：(D利用轉(zhuǎn)基因動物生產(chǎn)生長激素時，若要使生長激素在動物的乳汁中批量生產(chǎn)，應(yīng)選 擇性染色體組成為 的哺乳動物的 作為受體細胞°(2)外源基因在血液中表達的轉(zhuǎn)基因動物叫血液生物反應(yīng)器，血液生物反應(yīng)器中的轉(zhuǎn)基 因產(chǎn)物應(yīng)從 中提取。不宜用血液生物反應(yīng)器生產(chǎn)動物激素，原因是O(3)葉綠體生物反應(yīng)器是通過將目的基因?qū)肴~綠體基因組實現(xiàn)的，葉綠體基因組有基 因區(qū)和基因間隔區(qū)，為了保證原有

20、基因的功能不受影響，外源基因應(yīng)導(dǎo)入?yún)^(qū)o葉綠體基因工程能避免外源基因隨花粉擴散，原因是解析：(1)只有雌性動物具有分泌乳汁的功能，因此若要使生長激素在動物的乳汁中批 量生產(chǎn)，應(yīng)選擇性染色體組成為XX的哺乳動物的受精卵作為受體細胞。(2)血液生物反應(yīng)器 中外源基因在血液中表達，因此應(yīng)該在血液或血漿中提取轉(zhuǎn)基因產(chǎn)物；由于外源基因表達的 動物激素可能影響受體動物的生理代謝，所以不宜用血液生物反應(yīng)器生產(chǎn)動物激素，(3)已知 葉綠體基因組有基因區(qū)和基因間隔區(qū)，為了保證原有基因的功能不受影響，則外源基因應(yīng)導(dǎo) 入基因間隔區(qū)：由于花粉中不含葉綠體，因此也不含已導(dǎo)入葉綠體的外源基因，所以葉綠體 基因工程能避免外源

21、基因隨花粉擴散，答案：(DXX受精卵(2)血清或血漿 外源基因表達的動物激素可能影響受體動物的生理代謝(3)基因間隔花粉中不含葉綠體，因此也不含已導(dǎo)入葉綠體的外源基因15 . 2019 江蘇高二期末中科院動物研究所利用CRISPR/Cas9技術(shù)，向豬的基因組內(nèi) 插入一個解耦聯(lián)蛋白基因(UCP1)經(jīng)過基因改造的豬瘦肉率高、脂肪少、抗寒能力強。下圖是 基因改造過程中涉及的相關(guān)限制酶及酶切位點.請回答下列問題：wrH I 上 c I 八 Smul抗生素、 抗性基因& "RI UCPl £eR IHind HI |EcoR |I Snui I(D圖中的抗生素抗性基因的作用是

22、作為基因，以便于篩選。為了獲取重組質(zhì)粒，除了使用限制酶外，還需使用 陋，(2)重組質(zhì)粒上應(yīng)有 識別和結(jié)合的部位，以驅(qū)動解耦聯(lián)蛋白基因(UCP1)轉(zhuǎn)錄，該部位稱為(3)在構(gòu)建基因表達載體過程中，為避免出現(xiàn)質(zhì)粒和目的基因自身環(huán)化，常用 兩種限制酶同時切割質(zhì)粒和UCP1基因。(4)獲得目的基因后，常采用PCR技術(shù)擴增目的基因，在此過程中，由于DNA聚合酶不 能從頭開始合成DNA單鏈，只能從端延伸DNA單鏈，因此需要加入引物。(5)科研人員通過法，將基因表達載體導(dǎo)入豬的受精卵中?？赏ㄟ^技術(shù)，來檢測UCP1基因是否已導(dǎo)入到豬受精卵細胞。解析：(1)圖中的抗生素抗性基因作為標(biāo)記基因，以便篩選含有目的基因的

23、受體細胞。 為了獲取重組質(zhì)粒，除了使用限制酶外，還需使用DMA連接酶將目的基因與質(zhì)粒連接。(2)重 組質(zhì)粒的組成包括目的基因、啟動子、終止子、標(biāo)記基因等，其中的啟動子是RNA聚合酶識 別和結(jié)合的部位，驅(qū)動解耦聯(lián)蛋白基因(ICP1)轉(zhuǎn)錄出mRNL (3)圖中質(zhì)粒上和含UCP1基因的 外源DNA中含有的酶切位點相同，而且在UCP1基因的兩端分別存在后就I和必力加【的識別 位點，因此在構(gòu)建基因表達載體過程中，使用和必力/【這兩種限制酶同時切割質(zhì)粒和 含UCP1基因的外源DNA,可以避免出現(xiàn)質(zhì)粒和目的基因(UCP1基因)自身環(huán)化。利用PCR 技術(shù)擴增目的基因的過程中，由于DNA聚合酶只能從3'

24、端延伸DNA單鏈，因此需要加入引物。 將基因表達載體導(dǎo)入豬的受精卵中，應(yīng)采用顯微注射法。UCP1基因?qū)儆谀康幕颍瑱z測目 的基因是否己導(dǎo)入到豬受精卵細胞中，應(yīng)采用DNA分子雜交技術(shù)。答案：(1)標(biāo)記DNA連接(2)RNA聚合酶啟動子(3) Basil I 和 HincAW3,(5)顯微注射DMA分子雜交16 .2019 浙江高二期中嗜熱土壤芽泡桿菌產(chǎn)生的B葡萄糖甘酶(四加)是一種耐7未知序列mRNA 已知序列引物1加入末端轉(zhuǎn)移朝AAA(A>1 HPCR TTT(TVr AAAfAki(1)過程反應(yīng)體系中需要加入 酶，生成雜合雙鏈物質(zhì)【，(2)利用DNA末端轉(zhuǎn)移酶催化過程，使cDNA單鏈左

25、側(cè)末端增加十多個腺噂吟脫氧核普 酸序列AAA(A，進而利于過程擴增獲得目的基因序列HL在過程反應(yīng)體系中還需要添加 新的引物，新引物的堿基序列應(yīng)該是,(3)得到物質(zhì)IH后，通常還需在其兩端增加 序列，以便切割后與相應(yīng)的運載體重組。將基因表達載體導(dǎo)入大腸桿菌之前，還需用 處理大腸桿菌。(4)在利用PCR技術(shù)擴增某DNA中的某一目的基因時，需要用到的酶是 ,依據(jù)的原理是o解析：(1)過程以mRNA為模板合成DNA屬于逆轉(zhuǎn)錄過程，需要逆轉(zhuǎn)錄酶催化，生成雜 合雙鏈物質(zhì)I (一條脫氧核甘酸鏈，一條核糖核甘酸鏈)，(2)利用DNA末端轉(zhuǎn)移酶催化過程, 使cDNA單鏈左側(cè)末端增加AAA(A).故在過程PCR反

26、應(yīng)體系中還需要添加新的引物，即與左 側(cè)AAA(A),互補的TTT(T)乍為引物.(3)得到物質(zhì)IU即目的基因后，通常還需在其兩端增加限 制酶序列，以便利用限制酶和DNA連接酶構(gòu)建基因表達載體。將基因表達載體導(dǎo)入大腸桿菌 之前，還需用鈣離子處理大腸桿菌，使其處于感受態(tài)。(4)PCR擴增時需要耐高溫的DNA聚合 酶參與，PCR的原理是DNA雙鏈復(fù)制。答案：(1)逆轉(zhuǎn)錄(2)TTT(T)a(3)限制酶識別Ca"(CaCL溶液)(4)熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Tag酶)DNA雙鏈復(fù)制(DA復(fù)制)18. 2019 河北開灤第二中學(xué)高二期末某植物細胞中含有抗煙草花葉病毒(TMV)基因, 可以合成一種抗TMV蛋白，使葉片對TMV具有抗感染性。煙草是重要的經(jīng)濟作物，由于TMV 的感染會導(dǎo)致大幅度減產(chǎn)。研究人員利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)培育出了抗TMV的煙草，主要流程如下 圖所示：麗皿而里漏就觥如質(zhì)粒在含有卡那毒武導(dǎo)入轉(zhuǎn)基因抗TMV煙草再生柢株的里譬!湖齊爻體細胞(1)過程涉及有 酶Q獲得的DNA必須在兩側(cè)添加 0(2)在過程培養(yǎng)基中除含有卡那莓素及植物必需的各種營養(yǎng)成分外，還必須添加 ,以保證受體細胞能培養(yǎng)成再生植株，(3)由圖分析，在過程構(gòu)建的重組Ti質(zhì)粒上應(yīng)該含有