cyclinE、CDK2在子宮平滑肌腫瘤中的表達(dá)

1、cyclinE、CDK2在子宮平滑肌腫瘤中的表達(dá)【關(guān)鍵詞】ylinE；DK2；子宮平滑肌腫瘤子宮平滑肌腫瘤uterinesthusleturs,USTs是婦女最常見(jiàn)的腫瘤。細(xì)胞周期素ylinE是G1期的周期蛋白，與細(xì)胞周期素依賴性激酶2DK2在G1期末結(jié)合而發(fā)揮作用，促進(jìn)細(xì)胞進(jìn)入S期。近年來(lái)，在多種腫瘤的研究中發(fā)現(xiàn)有ylinE、DK2表達(dá)的異常，但其在USTs中的研究，國(guó)內(nèi)文獻(xiàn)尚未見(jiàn)報(bào)道。增殖細(xì)胞核抗原PNA是反映細(xì)胞，特別是惡性腫瘤細(xì)胞增殖活性的一個(gè)指標(biāo)。本研究擬通過(guò)免疫組織化學(xué)方法討論ylinE、DK2及PNA在USTs中的表達(dá)及臨床意義。1資料與方法1.1臨床資料選取華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)

2、院附屬同濟(jì)醫(yī)院病理科1992年7月2022年10月存檔的因USTs而手術(shù)切除子宮的蠟塊標(biāo)本75例，其中，良性子宮平滑肌瘤usuallEiya,UL35例，交界性子宮平滑肌瘤brderlineleiya,BL22例，子宮平滑肌肉瘤leiysara,LS18例。于手術(shù)室另取正常子宮平滑肌組織yetriu,20例，4%多聚甲醛固定，石蠟包埋常規(guī)處理。1.2試劑鼠抗人ylinE單克隆抗體，工作濃度1100；鼠抗人DK2單克隆抗體，工作濃度150；鼠抗人PNA單克隆抗體，工作濃度150，均為美國(guó)Santaruz公司產(chǎn)品，購(gòu)于北京中山生物工程公司。SP試劑盒與DAB顯色試劑盒均為Zyed公司產(chǎn)品。1.3方

3、法采用免疫組織化學(xué)SP法分別檢測(cè)UL組、BL組、LS組及組的ylinE、DK2及PNA蛋白表達(dá)。以磷酸鹽緩沖液PBS代替一抗作為陰性對(duì)照，微波爐抗原修復(fù)，DAB顯色。1.4染色結(jié)果的判斷ylinE、DK2及PNA均以細(xì)胞核內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽(yáng)性染色。2結(jié)果2.1ylinE、DK2及PNA在各組中的染色ylinE及DK2在USTs中的表達(dá)，大多定位在細(xì)胞核內(nèi)，少數(shù)在胞漿。而PNA在USTs中的表達(dá)，幾乎均在細(xì)胞核內(nèi)，圖略。2.2ylinE、DK2及PNA在各組中的染色面積ylinE、DK2及PNA在UL組的表達(dá)1531.6373.9、1776.9264.3、2576.9247.4均明顯高于組64

4、3.9174.2、538.1134.7、946.2205.9，P0.05；其在BL組的表達(dá)僅DK2在BL組1623.4244.6低于UL組1776.9264.3，其余均高于UL組，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P0.05；而其在LS組的表達(dá)5511.7520.4、5335.3452.8、6174.6498.5均明顯高于UL組及BL組2078.8305.5、1868.5266.7、3072.1304.7，P0.05。2.3ylinE、DK2及PNA分別在各組USTs中的染色平均光度ylinE、DK2及PNA三個(gè)指標(biāo)在UL組的表達(dá)0.1380.015、0.1290.020、0.1630.018均明顯高于組0

5、.0530.002、0.0690.006、0.0770.005，P0.05；其在BL組的表達(dá)0.1570.016、0.1380.022、0.1810.023均高于UL組，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P0.05；而其在LS組0.2590.031、0.2380.026、0.2880.033的表達(dá)均明顯高于UL組及BL組，P0.05。2.4ylinE、DK2及PNA在USTs中的相關(guān)性分析ylinE、DK2及PNA在正常子宮肌組織中的表達(dá)均無(wú)明顯相關(guān)關(guān)系；在UL組及BL組隨著PNA表達(dá)的增加，ylinE、DK2的表達(dá)也相應(yīng)增加，但只有ylinE的表達(dá)與PNA之間呈正相關(guān)r=0.563，P0.05，其余均無(wú)統(tǒng)

6、計(jì)學(xué)意義，P0.05；在LS組ylinE與DK2，ylinE與PNA，DK2與PNA之間均呈正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)分別為：r=0.517，P0.05；r=0.623，P0.05；r=0.461，P0.05。3討論3.1PNA的表達(dá)與USTs的關(guān)系PNA亦稱細(xì)胞周期素，作為DNA聚合酶的輔助蛋白直接參與細(xì)胞增殖過(guò)程中的DNA復(fù)制1，其表達(dá)情況可作為細(xì)胞增殖狀態(tài)指標(biāo)。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，PNA的表達(dá)在UL組明顯高于組，LS組明顯高于UL組及BL組，差異均具有顯著性意義，P0.05。這些結(jié)果說(shuō)明，LS的細(xì)胞增殖活性明顯高于UL及BL。本研究還發(fā)現(xiàn)PNA在BL組的表達(dá)高于UL組，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P0.05，

7、說(shuō)明UL與BL的細(xì)胞增殖活性沒(méi)有明顯區(qū)別，盡管它們的細(xì)胞型和細(xì)胞非典型性存在差異。本研究結(jié)果說(shuō)明PNA的過(guò)量表達(dá)確實(shí)與USTs平滑肌細(xì)胞的過(guò)度增生和惡性轉(zhuǎn)化有親密關(guān)系，增生越活潑，惡性程度越高，表達(dá)亦越高。3.2ylinE、DK2的表達(dá)與USTs的關(guān)系ylinE是G1期重要的細(xì)胞周期調(diào)控因子之一，其異常表達(dá)能促進(jìn)腫瘤的發(fā)生開(kāi)展，可作為判斷預(yù)后的輔助指標(biāo)。ylinE在G1期合成，G1/S交界處急劇升高達(dá)頂峰，S期逐漸降低至消失2。DK2存在于整個(gè)細(xì)胞周期中，是ylinE的催化亞基，而ylinE是DK2的調(diào)節(jié)亞基，其與DK2結(jié)合形成一活性復(fù)合物并使DK2激活，可促使細(xì)胞由G1期進(jìn)入S期。ylinE

8、過(guò)高表達(dá)使DK2持續(xù)激活，細(xì)胞周期調(diào)節(jié)失控而異常增生。本次研究結(jié)果證實(shí)了ylinE、DK2在USTs的表達(dá)，與UL組相比，LS組中ylinE、DK2的表達(dá)有顯著升高，P0.05，說(shuō)明ylinE、DK2的高表達(dá)與平滑肌細(xì)胞的增殖活潑、腫瘤的惡性潛能有親密關(guān)系。事實(shí)上，ylinE、DK2的高表達(dá)很可能促進(jìn)了LS強(qiáng)大的增殖潛力。另外發(fā)現(xiàn)，ylinE、DK2在BL組的表達(dá)也高于UL組，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P0.05，說(shuō)明細(xì)胞周期調(diào)控機(jī)制在BL和UL中無(wú)明顯差異，暗示BL腫瘤可能已開(kāi)展成一種細(xì)胞周期調(diào)控失常的狀態(tài)，據(jù)此推測(cè)與這種腫瘤的診斷標(biāo)準(zhǔn)是相符的。本研究還發(fā)現(xiàn)ylinE和DK2在LS組中的表達(dá)與PNA有明顯的正相關(guān)性，提示LS具有高度的細(xì)胞增殖活性，進(jìn)一步證實(shí)了在子宮平滑肌腫瘤的發(fā)生開(kāi)展過(guò)程中存在有細(xì)胞周期G1期至S期細(xì)胞周期調(diào)控失常導(dǎo)致的細(xì)胞異常增生。Baek等3發(fā)現(xiàn)子宮肌瘤組織中ylinE和DK2的表達(dá)明顯高于正常子宮肌組織，并把ylinE作為有力的診斷工具，與本實(shí)驗(yàn)結(jié)果一致。Zhai等4也曾報(bào)道ylinE和DK2在子宮平滑肌腫瘤組織中有表達(dá)，且其表達(dá)程度的上下與惡性程度有關(guān)。綜上所述，ylinE、DK2和PNA在USTs發(fā)病機(jī)制中的作用是肯定的。ylinE和DK2的異常表達(dá)已在多種惡性腫瘤中被報(bào)道，其中包括乳腺癌、子宮內(nèi)膜癌、宮頸癌等，其在臨床上作為一種診斷及