光譜分析二紫外可見光度法

1、光譜分析二紫外可見光度法第1頁，共54頁，2022年，5月20日，5點(diǎn)9分，星期一2 一、概述1、紫外可見吸收光譜法 根據(jù)溶液中物質(zhì)的分子或離子對(duì)紫外光譜區(qū)或可見光譜區(qū)輻射能的吸收以研究物質(zhì)組成和結(jié)構(gòu)的方法。 2、可見吸收光譜法分類： 比色法、分光光度法 第一章 光譜分析 第一節(jié) 紫外可見吸收光譜法 第2頁，共54頁，2022年，5月20日，5點(diǎn)9分，星期一3 一、概述3、物質(zhì)對(duì)光的選擇性吸收(1)當(dāng)一束光照射到某物質(zhì)或其溶液時(shí)，組成該物質(zhì)的分子、原子或離子與光子發(fā)生“碰撞”，光子的能量就轉(zhuǎn)移到分子、原子上，使這些粒子由最低能態(tài)（基態(tài)）躍遷到較高能態(tài)（激發(fā)態(tài)）： M + h M* 這個(gè)作用叫物

2、質(zhì)對(duì)光的吸收。 第一章 光譜分析 第一節(jié) 紫外可見吸收光譜法 第3頁，共54頁，2022年，5月20日，5點(diǎn)9分，星期一4 一、概述(2)分子、原子或離子具有不連續(xù)的量子化能級(jí)，僅當(dāng)照射光光子的能量（h）與被照射物質(zhì)粒子的基態(tài)和激發(fā)態(tài)能量之差相當(dāng)或?yàn)槠湔麛?shù)倍時(shí)才能發(fā)生吸收。不同的物質(zhì)微粒由于結(jié)構(gòu)不同而具有不同的量子化能級(jí)，其能量差也不相同。所以物質(zhì)對(duì)光的吸收具有選擇性?；鶓B(tài)能級(jí)激發(fā)態(tài)能級(jí)E0E2E1第一章 光譜分析 第一節(jié) 紫外可見吸收光譜法 第4頁，共54頁，2022年，5月20日，5點(diǎn)9分，星期一5 一、概述（3）吸收曲線（吸收光譜） 吸光度(A)-波長()曲線稱-。 光吸收程度最大處的波

3、長叫 最大吸收波長，用max表示。 高錳酸鉀的max=525nm。 濃度不同時(shí)，光吸收曲線形狀不同，最大吸收波長不變，只是相應(yīng)的吸光度大小不同。 第一章 光譜分析 第一節(jié) 紫外可見吸收光譜法 第5頁，共54頁，2022年，5月20日，5點(diǎn)9分，星期一6 一、概述4、可見吸收光譜法的特點(diǎn) （1）靈敏度高 常用于測(cè)定試樣中1%-10-3 %的微量組分，甚至可測(cè)定低至10-4 %-10-5 %的痕量組分。 （2）準(zhǔn)確度較高 相對(duì)誤差為2%-10%。如采用精密分光光度計(jì)測(cè)量，相對(duì)誤差可減少至1%-2%。 （3）應(yīng)用廣泛 幾乎所有的無機(jī)離子和許多有機(jī)化合物都可直接或間接地用此法測(cè)定。 （4）操作簡便快速

4、，儀器設(shè)備也不復(fù)雜 第一章 光譜分析 第一節(jié) 紫外可見吸收光譜法 第6頁，共54頁，2022年，5月20日，5點(diǎn)9分，星期一7 一、概述作業(yè)： 解釋下列名詞： （1）光吸收曲線 （2）最大吸收波長 返回 第一章 光譜分析 第一節(jié) 紫外可見吸收光譜法 第7頁，共54頁，2022年，5月20日，5點(diǎn)9分，星期一8 二、光吸收的基本定律朗白比耳定律: A = lg(I0/It) = K b c 該公式的物理意義為：當(dāng)一束平行單色光通過單一均勻的、非散射的吸光物質(zhì)的理想溶液時(shí)，溶液的吸光度與溶液的濃度和液層厚度的乘積成正比。該定律適用于溶液，也適用于其他均勻非散射的吸光物質(zhì)（氣體、固體），是各類 吸光

5、光度法定量分析的依據(jù)。 第一章 光譜分析 第一節(jié) 紫外可見吸收光譜法 第8頁，共54頁，2022年，5月20日，5點(diǎn)9分，星期一二、光吸收的基本定律1、溶液對(duì)光的形為及有關(guān)術(shù)語當(dāng)光束照射到物質(zhì)上時(shí),物質(zhì)可以產(chǎn)生反射、散射、吸收、透射。如果被照射的是均勻的溶液，那么光的散射可以忽略，所以對(duì)于溶液來說，對(duì)光的就是產(chǎn)生一部分被溶液吸收，一部分被界面反射，其余光則透過溶液。I0=It+Ia+IrIa-吸收光的強(qiáng)度It-透射光的強(qiáng)度Ir-反射光的強(qiáng)度Io-入射光的強(qiáng)度第一章 光譜分析 第一節(jié) 紫外可見吸收光譜法 ItI0IrIa1-1-2光通過溶液的情況9 第9頁，共54頁，2022年，5月20日，5點(diǎn)

6、9分，星期一二、光吸收的基本定律2、溶液對(duì)光的形為及有關(guān)術(shù)語 當(dāng)一束平行單色光照射溶液時(shí)，一部分光被溶液吸收，其余的光透過溶液，我們把透射光強(qiáng)度與入射光強(qiáng)度的比值稱為透光度或透光率。用“T”表示。則： T= It /I0 透光度T還常用百分透光率表示： T%=T100% 溶液的透光度越大，表示它對(duì)光的吸收越?。环粗?，透光度越小，表示它對(duì)光的吸收越大。常用吸光度來表示物質(zhì)對(duì)光的吸收程度，其定義為： A= -gT=lg1/T=lg(I0/It) 第一章 光譜分析 第一節(jié) 紫外可見吸收光譜法 10 第10頁，共54頁，2022年，5月20日，5點(diǎn)9分，星期一二、光吸收的基本定律3、Lambert定律

7、 該定律是由Lambert于1760年提出的，他在研究物質(zhì)對(duì)光的吸收時(shí)發(fā)現(xiàn)，如果溶液的濃度一定， 則光的吸收程度與液層的厚度成正比，這個(gè)關(guān)系稱為Lambert定律。 A=k1b A-吸收度； k1-比例系數(shù)； b -液層厚度或收光程長度。第一章 光譜分析 第一節(jié) 紫外可見吸收光譜法 11 第11頁，共54頁，2022年，5月20日，5點(diǎn)9分，星期一二、光吸收的基本定律4、Beer定律 該定律是由Beer于1852年研究發(fā)現(xiàn)的， Beer研究了各種無機(jī)鹽水溶液對(duì)紅光的吸收，從而得出這樣一個(gè)結(jié)論：當(dāng)單色光通過液層厚度一定時(shí)，溶液的吸光度與溶液的濃度成正比。表示為： A=k2c k2-比例常數(shù)； c

8、 -溶液濃度。第一章 光譜分析 第一節(jié) 紫外可見吸收光譜法 12 第12頁，共54頁，2022年，5月20日，5點(diǎn)9分，星期一 同時(shí)考慮溶液的濃度和液層厚度這兩個(gè)因素，如果同時(shí)變化，那么都影響物質(zhì)對(duì)光的吸收，所以兩個(gè)定律合并在一起，稱為Lamber-Beer定律，即表示為：A=abc a 是一個(gè)新的比例常數(shù)，稱為吸光系數(shù)。液層厚度用“cm”表示，濃度以“g/L”為單位。因?yàn)锳是無因次量，則的單位是“L/gcm”。通常濃度以mol/l為單位，此時(shí)吸光系數(shù)稱為摩爾吸光系數(shù)，用“”表示，單位為“L/molcm”,所以Lamber-Beer定律也可以表示為： A=bc 物理意義：當(dāng)束平行單色光通過單一

9、均勻的、非散射的吸光物質(zhì)溶液時(shí)，溶液的吸光度與溶液濃度和液層厚度的乘積成正比。這個(gè)定律是各類吸光光度法定量分析的基礎(chǔ)。第一章 第一節(jié) 紫外可見吸收光譜法 二、光吸收的基本定律13 第13頁，共54頁，2022年，5月20日，5點(diǎn)9分，星期一14 二、光吸收的基本定律 （1）是吸光物質(zhì)在特定波長和溶劑情況下的一個(gè)特征常數(shù)，數(shù)值上等于1 molL-1吸光物質(zhì)在1 cm光程中的A。 第一章 光譜分析 第一節(jié) 紫外可見吸收光譜法 第14頁，共54頁，2022年，5月20日，5點(diǎn)9分，星期一15 二、光吸收的基本定律（2）影響值的因素： 內(nèi)因-吸光物質(zhì)分子結(jié)構(gòu)； 外因入射光波長； （3）是吸光物質(zhì)吸光能

10、力的量度 它可作定性鑒定參數(shù)，也可用以估量定量方法的靈敏度：值愈大，方法靈敏度愈高。第一章 光譜分析 第一節(jié) 紫外可見吸收光譜法 第15頁，共54頁，2022年，5月20日，5點(diǎn)9分，星期一16 二、光吸收的基本定律例1：鐵（）濃度為5010-4 gL-1的溶液,與1,10-鄰二氮雜菲反應(yīng),生成橙紅色絡(luò)合物，該絡(luò)合物在波長508 nm有最大吸收 ,比色皿厚度為2cm時(shí),測(cè)得A=0.190 。計(jì)算1,10-鄰二氮雜菲亞鐵的a及。(已知鐵的相對(duì)原子質(zhì)量為55.85) 解：根據(jù)比耳定律 A = a b c 得： a = A/ b c = 0.190/(25010-4)=19 Lg-1cm-1 = M

11、 a = 55.8519 = 11102 Lmol-1cm-1 第一章 光譜分析 第一節(jié) 紫外可見吸收光譜法 第16頁，共54頁，2022年，5月20日，5點(diǎn)9分，星期一17 二、光吸收的基本定律 偏離朗伯-比耳定律的原因 據(jù)比耳定律：abc=Kc AC，作圖，應(yīng)得到一過 原點(diǎn)的直線，稱標(biāo)準(zhǔn)曲線 或工作曲線。 但在實(shí)際中，常發(fā)現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn) 曲線不成直線，這種情況 稱偏離朗伯-比耳定律。第一章 光譜分析 第一節(jié) 紫外可見吸收光譜法 第17頁，共54頁，2022年，5月20日，5點(diǎn)9分，星期一18 二、光吸收的基本定律最重要的引起偏離比耳定律的因素: (一） 由于非單色光引起的偏離 （二） 由于溶液本身

12、的化學(xué)和物理因素引起的偏離 返回 第一章 光譜分析 第一節(jié) 紫外可見吸收光譜法 第18頁，共54頁，2022年，5月20日，5點(diǎn)9分，星期一(一） 由于非單色光引起的偏離 Lamber-Beer 定律的基本假設(shè)條件是入射光為單色光。但目前儀器所提供的入射光實(shí)際上是由波長范圍較窄的光帶的組成的復(fù)合光。由于物質(zhì)對(duì)不同波長光的吸收程度不同，因而引起了對(duì)Lamber-Beer 偏離。 第一章 光譜分析 第一節(jié) 紫外可見吸收光譜法 19 第19頁，共54頁，2022年，5月20日，5點(diǎn)9分，星期一假設(shè)入射光僅由兩種波長1 和2的光組成，在這兩種波長下Lamber-Beer定律適用的，摩爾吸收系數(shù)分別為1

13、和2和，入射光強(qiáng)度 分別是0、0，透射光強(qiáng)度分別為1、2，對(duì)于波長為1的單色光吸光度為A，則：A= 1 bc=lg0/ 1 1= 0 10- 1 bc對(duì)于波長為2的單色光吸光度為A，則：A = 2bc=lg 0 / 2 2= 0 10- 2 bc測(cè)定時(shí)入射光強(qiáng)度為（ 0+ 0 ），透射光強(qiáng)度為（ 1 + 2 ），因此所得吸光度值為：A=lg0+ 00 10 - 1 bc + 0 10 - 2 bc第一章 第一節(jié) 紫外可見吸收光譜法 20 第20頁，共54頁，2022年，5月20日，5點(diǎn)9分，星期一當(dāng)1=2=時(shí)，A=bc,A與c成直線關(guān)系。如果12，A 與c則不成直線關(guān)系。 1與2差別越大，A

14、與c間的線性關(guān)系的偏離也越大。其它條件一定時(shí)，隨入射光波長而變化。實(shí)驗(yàn)證明，若能用一束吸光度隨波長變化不大的復(fù)合光作入射光來進(jìn)行測(cè)定，由于變化不大，所引起的偏離就小，標(biāo)準(zhǔn)曲線基本上呈直線。所以光度分析并不嚴(yán)格要求用很純的單色光，只要入射光所包含的波長范圍在被測(cè)溶液的吸收曲線較平直部分，也可得到較好的線型關(guān)系。譜帶A譜帶BA第一章 第一節(jié) 紫外可見吸收光譜法 21 第21頁，共54頁，2022年，5月20日，5點(diǎn)9分，星期一(二）化學(xué)因素引起的偏離 Lamber-Beer定律的基本假設(shè)，除要求入射光是單色光外，還假設(shè)吸收粒子是獨(dú)立的，彼此之間相互無作用，在高濃度時(shí)（通常0.01mol/L)，隨濃

15、度增大，吸光度與濃度的關(guān)系就偏離線性關(guān)系。所以一般認(rèn)為該定律僅適用于稀溶液。 另一方面，溶液中有吸光物質(zhì)等構(gòu)成的化學(xué)體系，常因條件變化而形成新的化合物或改變吸光物質(zhì)的濃度，例如,重鉻酸鉀在水溶液中存在如下平衡: Cr2o72- + H2o 2H+ + 2Cro42-第一章 第一節(jié) 紫外可見吸收光譜法 橙色黃色22 第22頁，共54頁，2022年，5月20日，5點(diǎn)9分，星期一作業(yè)： 朗白-比爾定律的物理意義是什么？什么是透光度？什么是吸光度？二者之間的關(guān)系是什么？ 第一章 第一節(jié) 紫外可見吸收光譜法23 第23頁，共54頁，2022年，5月20日，5點(diǎn)9分，星期一24 三、分光光度計(jì)結(jié)構(gòu)簡介儀器

16、組成及作用： 光源 單色器 吸收池 檢測(cè)系統(tǒng) A 光源：提供所需波長范圍內(nèi)的連續(xù)光源。 B 單色器：將光源發(fā)出的連續(xù)光譜分解為最容易被樣液吸收的單色光 C 吸收池 ：用于盛吸收試液 D 檢測(cè)系統(tǒng)：將透過吸收池的光It轉(zhuǎn)換成電流測(cè)量。 第一章 光譜分析 第一節(jié) 紫外可見吸收光譜法 第24頁，共54頁，2022年，5月20日，5點(diǎn)9分，星期一25 三、分光光度計(jì)結(jié)構(gòu)簡介作業(yè)： 簡述光度計(jì)儀器組成及各部件的作用。 返回 第一章 光譜分析 第一節(jié) 紫外可見吸收光譜法 第25頁，共54頁，2022年，5月20日，5點(diǎn)9分，星期一26 四、顯色反應(yīng)及其影響因素 1、吸光光度法對(duì)顯色反應(yīng)的要求 顯色反應(yīng)的定

17、義： 將待測(cè)組分轉(zhuǎn)變成可能測(cè)量的有色化合物的反應(yīng)，叫-。 顯色劑： 與待測(cè)組分形成有色化合物的試劑稱-。第一章 光譜分析 第一節(jié) 紫外可見吸收光譜法 第26頁，共54頁，2022年，5月20日，5點(diǎn)9分，星期一27 四、顯色反應(yīng)及其影響因素2、顯色反應(yīng)滿足下列要求 （1）選擇性好，干擾少，或干擾容易消除。 （2）靈敏度足夠高 常選高的顯色反應(yīng)。但靈敏度高不一定選擇性好，另外，對(duì)于高含量組分測(cè)定，也不一定選用最靈敏的顯色反應(yīng)。 （3）有色化合物的組成恒定，符合一定的化學(xué)式 第一章 光譜分析 第一節(jié) 紫外可見吸收光譜法 第27頁，共54頁，2022年，5月20日，5點(diǎn)9分，星期一28 四、顯色反應(yīng)

18、及其影響因素（4）有色化合物的化學(xué)性質(zhì)應(yīng)足夠穩(wěn)定，至少保證在測(cè)量過程中溶液的A變化小。要求有色化合物不易受外界環(huán)境影響，如光射、空氣中氧和二氧化碳的作用等。 （5）有色化合物與顯色劑之間的顏色差別要大 顏色差別用“反襯度（對(duì)比度）” 表示 ，要求60nm 第一章 光譜分析 第一節(jié) 紫外可見吸收光譜法 第28頁，共54頁，2022年，5月20日，5點(diǎn)9分，星期一29 四、顯色反應(yīng)及其影響因素3、顯色條件的選擇 顯色條件：指M+R=MR這一反應(yīng)相關(guān)的條件。如,顯色劑濃度及用量;酸度;溫度; 顯色時(shí)間;緩沖溶液種類及用量; 用表面活性劑的加入等等。 選擇的總原則：AMR最大且恒定 第一章 光譜分析

19、第一節(jié) 紫外可見吸收光譜法 第29頁，共54頁，2022年，5月20日，5點(diǎn)9分，星期一30 四、顯色反應(yīng)及其影響因素3、顯色條件的選擇（1） 顯色劑R的用量 顯色反應(yīng)一般可用下式表示： M + R MR 被測(cè)組分 顯色劑 有色化合物 AMR=MR b cMR 據(jù)平衡原理, R, MR,則AMR,靈敏度 但R過量,有時(shí)會(huì)引起副反應(yīng)故, 顯色劑( R ) 用量最終應(yīng)由實(shí)驗(yàn)來定。第一章 光譜分析 第一節(jié) 紫外可見吸收光譜法 第30頁，共54頁，2022年，5月20日，5點(diǎn)9分，星期一31 四、顯色反應(yīng)及其影響因素R用量對(duì)顯色反應(yīng)的影響情況如圖所示。 a、開始時(shí)，隨R，試液的A，當(dāng)R濃度達(dá)到某一數(shù)值

20、時(shí)，A不再增加，出現(xiàn)ab平坦部分?？稍赼b間選合適的R濃度測(cè)定。返回 試液吸光度與顯色劑的關(guān)系第一章 光譜分析 第一節(jié) 紫外可見吸收光譜法 第31頁，共54頁，2022年，5月20日，5點(diǎn)9分，星期一（b)的平坦部分窄，當(dāng)顯色劑濃度繼續(xù)增大時(shí)，試液的吸光度反而下降。例：用SCN-測(cè)定MO時(shí)，可以生成MO（SCN)2+(淺紅）、MO(SCN)5(橙紅）、MO（SCN)6-(淺紅）配位數(shù)不同的配合物，用吸光度測(cè)的是MO(SCN)5的吸光度。因此必須嚴(yán)格控制顯色劑量，否則的不到正確的結(jié)果。（c）圖是隨著顯色劑用量增大，試液的吸光度也增大。例：用SCN-測(cè)定Fe3+，隨著SCN-濃度的增大，生成顏色越

21、來越深的高配合物Fe（SCN）4-和Fe（SCN)52- ，溶液顏色由橙黃變至血紅色。所以只有嚴(yán)格控制顯色劑用量才能的到正確的結(jié)果。第32頁，共54頁，2022年，5月20日，5點(diǎn)9分，星期一（2）溶液的酸度a 影響顯色劑的平衡濃度和顏色 例 M+ + HR MR+H+b 影響被測(cè)金屬離子的存在狀態(tài)c 影響配合物的組成第一章 第一節(jié) 紫外可見吸收光譜法 四、顯色反應(yīng)及其影響因素33 第33頁，共54頁，2022年，5月20日，5點(diǎn)9分，星期一（3）顯色反應(yīng)時(shí)間 必須經(jīng)實(shí)驗(yàn)來確定最合適測(cè)定的時(shí)間范圍。實(shí)驗(yàn)方法為配制一份顯色溶液，從加入顯色劑其計(jì)算時(shí)間，每隔幾分鐘測(cè)量一次吸光度，制作吸光度-時(shí)間曲

22、線，根據(jù)曲線來確定適宜時(shí)間。（4）顯色反應(yīng)溫度 顯色反應(yīng)一般在室溫下進(jìn)行。但有些反應(yīng)需加熱到一定溫度才能完成。例：硅鉬酸測(cè)定硅的反應(yīng)是，在室溫下需10min才能完成；而在沸水浴中則只需30s完成。許多有色化合物溫度高時(shí)也容易發(fā)生分解。（5）溶劑第一章 第一節(jié) 紫外可見吸收光譜法 四、顯色反應(yīng)及其影響因素34 第34頁，共54頁，2022年，5月20日，5點(diǎn)9分，星期一有機(jī)溶劑常降低有色化合物的解離度，提高了顯色反應(yīng)的靈敏度。例： Fe（SCN)3的溶液中加入與水混溶的有機(jī)溶劑（如丙酮），由于降低了Fe（SCN)3的解離度而使顏色加深，提高了靈敏度。 此外，有機(jī)溶劑還能提高顯色反應(yīng)的速率，影響有

23、色配合物的溶解度和組成。如用偶氮氯膦法測(cè)定Ca2+，加入乙醇后，吸光度顯著增大。第35頁，共54頁，2022年，5月20日，5點(diǎn)9分，星期一36 五、測(cè)量誤差和測(cè)量條件的選擇 1、儀器測(cè)量誤差 在光分析中，儀器誤差是測(cè)量 不準(zhǔn)確的主要因素。 適宜的吸光度范圍: (T:15-65%)或（） 最佳的取值點(diǎn): 當(dāng)T=36.8%或A=0434 第一章 光譜分析 第一節(jié) 紫外可見吸收光譜法 第36頁，共54頁，2022年，5月20日，5點(diǎn)9分，星期一37 五、測(cè)量誤差和測(cè)量條件的選擇 2、測(cè)量條件的選擇 為使測(cè)定結(jié)果有較高的靈敏度和準(zhǔn)確度，必須注意： 入射光波長的選擇 最大吸收原則： 選max的光作入射

24、光。此時(shí)，靈敏度較高，測(cè)定時(shí)偏離朗伯-比耳定律的程度減小，其準(zhǔn)確度也較好。 “MR的吸收最大、對(duì)MR測(cè)定的干擾最小”的原則：當(dāng)有干擾物質(zhì)存在時(shí)，應(yīng)據(jù)此來選擇入射光的波長。 第一章 光譜分析 第一節(jié) 紫外可見吸收光譜法 第37頁，共54頁，2022年，5月20日，5點(diǎn)9分，星期一38 五、測(cè)量誤差和測(cè)量條件的選擇 例;丁二酮肟比色法測(cè)鋼中的 鎳，丁二酮肟鎳max470nm， 試樣中的鐵用酒石酸鈉鉀掩蔽 后，在470nm也有吸收，對(duì)測(cè)定 有干擾。當(dāng)測(cè)500nm后，干 擾較小。因此，可在520nm處測(cè) 定，否則，要分離鐵后才能測(cè)定 第一章 光譜分析 第一節(jié) 紫外可見吸收光譜法 第38頁，共54頁，2

25、022年，5月20日，5點(diǎn)9分，星期一39 五、測(cè)量誤差和測(cè)量條件的選擇控制適當(dāng)?shù)奈舛确秶?為使測(cè)量結(jié)果的測(cè)量誤差較小，準(zhǔn)確度較高，應(yīng)控制A在 0.2 0.8 (0.434)范圍內(nèi)。方法： 1、選擇不同厚度的吸收池。 2、控制溶液濃度，如改變?cè)嚇臃Q量和改變?nèi)芤合♂尪鹊取?第一章 光譜分析 第一節(jié) 紫外可見吸收光譜法 第39頁，共54頁，2022年，5月20日，5點(diǎn)9分，星期一40 五、測(cè)量誤差和測(cè)量條件的選擇 例某鋼樣含鎳約0.12%，用丁二酮肟光度法（=13104Lmol-1 cm-1）進(jìn)行測(cè)定。試樣溶解后，轉(zhuǎn)入100mL容量瓶中，顯色，再加入水稀釋至刻度。取部分試液于波長470nm處用1

26、cm吸收池進(jìn)行測(cè)量，如果希望此時(shí)的測(cè)量誤差最小，應(yīng)稱取試樣多少？(鎳: 58.69) 第一章 光譜分析 第一節(jié) 紫外可見吸收光譜法 第40頁，共54頁，2022年，5月20日，5點(diǎn)9分，星期一41 五、測(cè)量誤差和測(cè)量條件的選擇解： A= b C C=A/ b 將A=0.434 b=1 =13104 Lmol-1 cm-1 代入上式 C=0.434/ 13104 =3.34 10-6 mol L-1 設(shè)應(yīng)稱取試樣 Wg， 則:W 0.12% =100 10-3 3.34 10-6 58.69 W=0.016g 第一章 光譜分析 第一節(jié) 紫外可見吸收光譜法 第41頁，共54頁，2022年，5月20

27、日，5點(diǎn)9分，星期一42 五、測(cè)量誤差和測(cè)量條件的選擇選擇適當(dāng)?shù)膮⒈热芤?在吸光度測(cè)量中,必須將溶液裝入由透明材料制成的比色皿中由于材料及溶劑對(duì)I0將產(chǎn)生一定的反射、吸收、散射等，最終導(dǎo)致It減弱。 參比溶液的作用：使光強(qiáng)度的減弱僅與溶液中待測(cè)物的濃度有關(guān)。 方 法：用光學(xué)性質(zhì)及厚度相同的比色皿盛純?cè)噭┳鲄⒈?，調(diào)節(jié)儀器，使透過參比皿的A=0或T=100%。 第一章 光譜分析 第一節(jié) 紫外可見吸收光譜法 第42頁，共54頁，2022年，5月20日，5點(diǎn)9分，星期一43 五、測(cè)量誤差和測(cè)量條件的選擇選 用 原 則：待測(cè)離子( M ) 顯色劑( R ) 參比溶液的選用 無色 無色 純?nèi)軇┗蛘麴s水 有

28、色 無色 試樣空白（不加顯色劑的待測(cè)試液） 無色 有色 試劑空白（不加M的顯色劑） 有色 有色 將試樣加適當(dāng)掩蔽劑，將M掩蔽起來，然后加入顯色劑作參比溶液 返回 第一章 光譜分析 第一節(jié) 紫外可見吸收光譜法 第43頁，共54頁，2022年，5月20日，5點(diǎn)9分，星期一44 六、常用的定量分析方法 由吸光度值確定試樣的濃度的理論依據(jù)是朗白-比耳定律，即： A = a b c 或A C 1 標(biāo)準(zhǔn)曲線法（工作曲線法） 是指先配制標(biāo)準(zhǔn)系列的溶液，測(cè)繪 出標(biāo)準(zhǔn)曲線，后，在相同條件下，配制樣品溶液，測(cè)其吸光度，在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出樣品濃度的一種分析方法。第一章 光譜分析 第一節(jié) 紫外可見吸收光譜法 第44頁，

29、共54頁，2022年，5月20日，5點(diǎn)9分，星期一45 六、常用的定量分析方法2、示差吸光光度法一般分光光度測(cè)定選用試劑空白或溶液空白作為參比，差示法則選用一已知濃度的溶液作參比。 設(shè)用作參比的標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為c0，待測(cè)試液濃度為cx，且cx大于c0。根Lambert-Beer定律得到：Ax=cxb A0=c0bA相對(duì)=A =Ax-A0=b(cx-c0)=b c =bc相對(duì)返回 第一章 光譜分析 第一節(jié) 紫外可見吸收光譜法 第45頁，共54頁，2022年，5月20日，5點(diǎn)9分，星期一3、雙波長吸光光度法 它是通過兩個(gè)單色器分別將光源發(fā)出的光分成1，2兩束單色光，經(jīng)切光器并束后交替通過同一吸收池。

30、因此檢測(cè)的是試樣溶液對(duì)兩波長光吸收后的吸光度差。設(shè)波長為1和2的兩束單色光的強(qiáng)度相等，則有：A 1 = 1 bc A 2 = 2 bc A=A 1 -A 2 =( 1 - 2 )bc第46頁，共54頁，2022年，5月20日，5點(diǎn)9分，星期一雙波長分光光度法的特點(diǎn)： 1、可用于懸濁液和懸浮液的測(cè)定，消除背景吸收。2、無須分離，可用于吸收峰相互重疊的混合組分 的同時(shí)測(cè)定。3、可用于測(cè)定高濃度溶液中吸光度在以下的痕量組分。第47頁，共54頁，2022年，5月20日，5點(diǎn)9分，星期一48 七、 絡(luò)合物組成及弱酸離解常數(shù)測(cè)定1、絡(luò)合物組成的測(cè)定 飽和法 固定金屬離子M濃度，變 絡(luò)合劑（R）濃度，測(cè)得 AR/ M 曲線。 外推法得一交點(diǎn)，從交點(diǎn)向橫坐標(biāo)作垂線，對(duì)應(yīng)的R/ M比值即是絡(luò)合比。 該法簡單、快速，對(duì)離解度小的絡(luò)合物，