外源性化合物致突變

1、外源性化合物致突變第1頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，6點(diǎn)30分，星期四目的及要求遺傳和變異是生物界的普遍生命現(xiàn)象，是保證生物世代間生命延續(xù)的基本內(nèi)容，本章介紹的就是外源化學(xué)物對(duì)遺傳變異的影響。要求掌握突變、致突變的相關(guān)概念以及致突變類(lèi)型，致突變實(shí)驗(yàn)的遺傳學(xué)終點(diǎn)和實(shí)驗(yàn)組合的選擇以及相關(guān)的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容。第2頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，6點(diǎn)30分，星期四遺傳毒理學(xué)（ Genetic toxicology）第一節(jié) 概述第二節(jié) 化學(xué)毒物致突變的類(lèi)型第三節(jié) 致突變作用機(jī)制和后果第四節(jié) 機(jī)體對(duì)致突變作用的影響第五節(jié) 觀察化學(xué)毒物致突變作用 的基本方法第3頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，6

2、點(diǎn)30分，星期四第一節(jié) 概述第4頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，6點(diǎn)30分，星期四達(dá)爾文與進(jìn)化論自然選擇學(xué)說(shuō)歸納起來(lái)有如下5點(diǎn)：遺傳變異繁殖過(guò)剩生存斗爭(zhēng)適者生存基因突變是進(jìn)化的原料，而環(huán)境的選擇是一種動(dòng)力 第5頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，6點(diǎn)30分，星期四基本概念 變異（variation）-親代之間或子代個(gè)體之間出現(xiàn)不同程度的差異，這種差異稱(chēng)為變異 突變(Mutation)-遺傳物質(zhì)的結(jié)構(gòu)改變而引起的遺傳信息改變，均可稱(chēng)為突變。 按突變?cè)蚍譃樽园l(fā)突變(spontaneous mutation)和誘發(fā)突變(induced mutation)，自發(fā)突變與物種的進(jìn)化有關(guān)；誘發(fā)突變

3、指人為的造成突變。 致突變作用（mutagenesis）-外來(lái)因素引起細(xì)胞核中遺傳物質(zhì)發(fā)生改變的能力。 致突變物又稱(chēng)誘變劑（mutagen）-能夠引起突變的物質(zhì)為致突變物。第6頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，6點(diǎn)30分，星期四研究外源化學(xué)物及其他環(huán)境因素對(duì)生物體遺傳機(jī)構(gòu)的損害作用及其規(guī)律，是毒理學(xué)的一個(gè)分支。其主要目的是檢測(cè)那些能引起DNA損傷的環(huán)境因素，研究其遺傳毒作用的特點(diǎn)及對(duì)人類(lèi)的潛在危害。遺傳毒理學(xué)(Genetic Toxicology)第7頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，6點(diǎn)30分，星期四第二節(jié) 化學(xué)毒物致 突變的類(lèi)型第8頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，6點(diǎn)30分，

4、星期四遺傳學(xué)相關(guān)基本知識(shí)DNA的組成脫氧核糖、磷酸、堿基DNA的功能堿基的排列順序蘊(yùn)含著遺傳信息；DNA最主要的功能是編碼蛋白質(zhì)。第9頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，6點(diǎn)30分，星期四DNA的復(fù)制與翻譯復(fù)制：半保留復(fù)制翻譯：中心法則遺傳學(xué)相關(guān)基本知識(shí)第10頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，6點(diǎn)30分，星期四第11頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，6點(diǎn)30分，星期四堿基置換(basepair substitution)指某一堿基配對(duì)性能改變或脫落所致的突變，分為轉(zhuǎn)換(transition)和顛換(transvertion)兩種，如圖：一、基因突變(gene mutation)TAG

5、C轉(zhuǎn)換顛換基因突變-轉(zhuǎn)換與顛換示意圖 第12頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，6點(diǎn)30分，星期四Base-pair Substitutions 蛋氨酸賴(lài)氨酸苯丙氨酸甘氨酸蛋氨酸賴(lài)氨酸苯丙氨酸甘氨酸蛋氨酸賴(lài)氨酸苯丙氨酸甘氨酸蛋氨酸賴(lài)氨酸賴(lài)氨酸苯丙氨酸絲氨酸第13頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，6點(diǎn)30分，星期四移碼突變 (frame shift mutation) 指發(fā)生一對(duì)或幾對(duì)（三對(duì)除外）的堿基減少或增加，以致從受損點(diǎn)開(kāi)始?jí)A基序列完全改變，形成錯(cuò)誤的密碼，并轉(zhuǎn)譯成為不正常的氨基酸。frameshift mutation第14頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，6點(diǎn)30分，星期四F

6、rame shift mutation蛋氨酸賴(lài)氨酸苯丙氨酸甘氨酸蛋氨酸蛋氨酸蛋氨酸賴(lài)氨酸亮氨酸丙氨酸苯丙氨酸甘氨酸第15頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，6點(diǎn)30分，星期四后果 同義突變(synonymous mutation)：指沒(méi)有改變基因產(chǎn)物氨基酸序列的改變 錯(cuò)義突變（missense mutation)：指堿基 序列的改變引起了產(chǎn)物氨基酸序列的改變 Missense mutation第16頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，6點(diǎn)30分，星期四 無(wú)義突變(nonsense mutation)：指某個(gè)堿基的改變使代表某個(gè)氨基酸的密碼子變?yōu)榈鞍踪|(zhì)合成的終止密碼子，導(dǎo)致多肽鏈在成熟之前終

7、止合成的改變終止密碼突變 鏈終止突變：指無(wú)義突變使肽鏈過(guò)早終止 延長(zhǎng)突變：指如果終止密碼子因突變而為氨基酸編碼，結(jié)果產(chǎn)生過(guò)長(zhǎng) 的肽鏈的現(xiàn)象第17頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，6點(diǎn)30分，星期四指染色體的結(jié)構(gòu)改變 染色單體型畸變(chromatid-type aberration)染色體型畸變(chromosome aberration) 染色體畸變裂隙(gap) 斷裂(break) 斷片(fragment)和缺失(deletion) 微小體(minute body) 無(wú)著絲點(diǎn)環(huán)環(huán)狀染色體 雙著絲點(diǎn)染色體 倒位(inversion) 易位(translocation) 插入(insert

8、ion)和重復(fù)(duplication) 輻射體 二、染色體畸變(chromosome aberration)第18頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，6點(diǎn)30分，星期四（1）缺失 染色體少了某一片段,通常是致死的（2）重復(fù) 染色體上多出了一段（3）倒位 染色體內(nèi)部結(jié)構(gòu)的順序發(fā)生顛倒（4）易位 染色體斷裂，斷裂片斷接到其他地方染色體結(jié)構(gòu)畸變的類(lèi)型第19頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，6點(diǎn)30分，星期四缺失(deletion)第20頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，6點(diǎn)30分，星期四ABCFDEGHBCFADEGHBCCBFADEGHBCABCFDEGHBCNormalTandem順

9、接重復(fù)Reverse反接重復(fù)Displaced異位重復(fù)重復(fù)(duplication)第21頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，6點(diǎn)30分，星期四ABCFDEGHBCAABCFDEGHBCAAFDEGHBCFADEGHBCOverlap of homologuesSimultaneous breakReunion of homologues第22頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，6點(diǎn)30分，星期四ABCFDEGABCFDEGABCFDEGParacentricABCFDEGABCFDEGACBFEDGPericentric倒位(inversion)倒位的類(lèi)型1)、臂內(nèi)倒位(paracent

10、ric inversion) 2)、臂間倒位(pericentric inversion) 倒位片段不含著絲粒。 倒位片段含著絲粒。第23頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，6點(diǎn)30分，星期四易位(translocation)易位的類(lèi)型1)、相互易位(reciprocal translocation) 非同源染色體之間相互置換了一段染色體片段。2)、簡(jiǎn)單易位(interstitial translocation) 一條染色體片斷插入到非同源染色體區(qū)段之中。3)、羅伯遜式易位(Robertsonian translocation) 也稱(chēng)著絲粒融合或整臂融合。由兩個(gè)非同源的端著絲粒染色體的長(zhǎng)臂相

11、互重接成一條長(zhǎng)的中央著絲粒染色體；短臂相互連接成交互的產(chǎn)物，常在細(xì)胞分裂中丟失。第24頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，6點(diǎn)30分，星期四ABCFDEMNQOPAFDEMNQOPBCInterstitial translocation間質(zhì)異位ABCFDEMNQOPABCQOPMNFDEReciprocal translocation相互異位第25頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，6點(diǎn)30分，星期四Robertsonian translocation第26頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，6點(diǎn)30分，星期四三、非整倍體和多倍體 非整倍體(aneuploid)指細(xì)胞丟失或增加一條或幾條

12、染色體。缺失一條染色體時(shí)稱(chēng)為單體(monosome)增加一條染色體時(shí)稱(chēng)為三體(trisome)染色體數(shù)目的改變會(huì)導(dǎo)致基因平衡的失調(diào)，可能影響細(xì)胞的生存或造成形態(tài)及功能上的異常。如21三體導(dǎo)致先天愚型(Down氏綜合征)。第27頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，6點(diǎn)30分，星期四整倍體 (euploid) 指染色體數(shù)目的異常是以染色體組為單位的增減，如形成三倍體(triploid)、四倍體(tetraploid)等。 在人體，3n為69條染色體，4n為92條染色體。在腫瘤細(xì)胞及人類(lèi)自然流產(chǎn)的胎兒細(xì)胞中可有三倍體細(xì)胞的存在。發(fā)生于生殖細(xì)胞的整倍體改變，幾乎都是致死性的。第28頁(yè)，共72頁(yè)，20

13、22年，5月20日，6點(diǎn)30分，星期四誘發(fā)突變 基因突變 染色體畸變 堿基置換 （錯(cuò)配）移碼突變（缺失、插入）大段損傷結(jié)構(gòu)異常 缺失(deletion)重復(fù)(duplication)倒位(inversion)易位(translocation)臂間倒位臂內(nèi)倒位數(shù)目異常 非整倍體（aneuploidy） 多倍體 (polyploid) 轉(zhuǎn)換(transition)顛換(transversion)第29頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，6點(diǎn)30分，星期四第三節(jié) 致突變作用機(jī)制和后果第30頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，6點(diǎn)30分，星期四一、引起突變的DNA變化（一）堿基損傷 1.堿基錯(cuò)配

14、烷化劑(alkylating agent):是指對(duì)DNA和蛋白質(zhì)具有強(qiáng)烈烷化作用的物質(zhì) 一般情況下甲基化乙基化高碳烷基化 目前認(rèn)為最常受到烷化的是 鳥(niǎo)嘌呤的N7位，其次是O6位 腺嘌呤的N1、N3和N7也易烷化 AP位點(diǎn)（apurinic or apyrimidinic site)：是指丟失堿基的DNA留下了一個(gè)無(wú)嘌呤或無(wú)嘧啶的位點(diǎn)第31頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，6點(diǎn)30分，星期四2.平面大分子嵌入DNA鏈嵌入劑（intercalating agent)：指能以靜電吸附形式嵌入DNA單鏈的堿基之間或DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)的相鄰多核苷酸鏈之間的物質(zhì) 如丫啶類(lèi)染料分子多數(shù)是多環(huán)的平面結(jié)構(gòu)，特

15、別是三環(huán)結(jié)構(gòu)，其長(zhǎng)度為6.810 2 nm，恰好是DNA單鏈相鄰堿基距離的兩倍 通常引起移碼突變第32頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，6點(diǎn)30分，星期四3.堿基類(lèi)似物取代 有些化學(xué)物的結(jié)構(gòu)與堿基非常相似，稱(chēng)堿基類(lèi)似物 它們能在S期中可與天然堿基競(jìng)爭(zhēng)，并取代其位置 例如5溴脫氧尿嘧啶能取代胸腺嘧啶核苷； 2氨基嘌呤(2-AP）能取代鳥(niǎo)嘌呤 bromodeoxyuridineThymine第33頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，6點(diǎn)30分，星期四4.堿基的化學(xué)結(jié)構(gòu)的改變或破壞 化學(xué)物可對(duì)堿基產(chǎn)生氧化作用，從而破壞或改變堿基的結(jié)構(gòu)，基于引起鏈斷裂 有些化學(xué)物質(zhì)可在體內(nèi)形成有機(jī)過(guò)氧化物或自由

16、基，如甲醛、氨基甲酸乙酯和乙氧咖啡堿等，可間接使嘌呤的化學(xué)結(jié)構(gòu)破壞，容易出現(xiàn)DNA鏈斷裂 第34頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，6點(diǎn)30分，星期四（二）DNA鏈?zhǔn)軗p 1.二聚體的形成：紫外線(xiàn) 環(huán)丁烷嘧啶和4-6光產(chǎn)物 阻止DNA復(fù)制 引起細(xì)胞死亡Thymine dimers produced by ultraviolet irradiation 第35頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，6點(diǎn)30分，星期四2.DNA加合物形成（DNA adducts）活性化學(xué)物質(zhì)與細(xì)胞大分子之間通過(guò)共價(jià)鍵形成的穩(wěn)定復(fù)合物。如生物毒素、多環(huán)芳烴和芳香胺類(lèi)致癌物可使DNA形成大加合物，使DNA的立體構(gòu)象發(fā)生

17、明顯變化，阻斷受損部位的半保留復(fù)制和轉(zhuǎn)錄第36頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，6點(diǎn)30分，星期四3.DNA-蛋白質(zhì)交聯(lián)（DNA-protein crosslinks，DPC）第37頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，6點(diǎn)30分，星期四四、突變的后果 突變的后果取決于化學(xué)毒物所作用的靶細(xì)胞 體細(xì)胞：其影響僅能在直接接觸該物質(zhì)的個(gè)體身體上表現(xiàn)出來(lái)，不可能遺傳到下一代 生殖細(xì)胞：其影響有可能遺傳到下一代二、引起突變的細(xì)胞分裂過(guò)程改變（自學(xué)）三、其他改變（自學(xué)） 第38頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，6點(diǎn)30分，星期四突變的不良后果第39頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，6點(diǎn)30分，

18、星期四1.生殖細(xì)胞突變的后果（1）致死性突變： 顯性致死：突變配子與正常配子結(jié)合后，在著床前或著床后的早期胚胎死亡. 隱性致死：需要純合子或半合子才能出現(xiàn)死亡效應(yīng)現(xiàn).第40頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，6點(diǎn)30分，星期四（2）非致死性突變（可遺傳的改變） 先天畸形等遺傳性疾病 遺傳易感性改變生物個(gè)體生殖細(xì)胞發(fā)生突變或染色體畸變后，有些可能會(huì)在世代傳遞、選擇過(guò)程中在人群中固定下來(lái)，增加人類(lèi)的遺傳負(fù)荷 遺傳負(fù)荷（genetic load)：指人群中每個(gè)個(gè)體所攜帶有害基因或致死基因的平均水平第41頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，6點(diǎn)30分，星期四2.體細(xì)胞突變的后果（1）癌變：體細(xì)胞突

19、變是細(xì)胞癌變 的重要基礎(chǔ)，在許多腫瘤中，都可觀察到癌基因的活化和抑癌基因的失活，并存在缺失、易位、倒位等染色體畸變（2）致畸胎：致突變物可透過(guò)胎盤(pán)作用于胚胎體細(xì)胞引起畸胎，所以致畸作用不完全是親代生殖細(xì)胞突變的后果 （3）其他不良后果：動(dòng)脈粥樣硬化、衰老第42頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，6點(diǎn)30分，星期四第四節(jié) 機(jī)體對(duì)致突變作用的影響第43頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，6點(diǎn)30分，星期四機(jī)體修復(fù)DNA損傷的機(jī)制可分為兩大類(lèi)：損傷耐受機(jī)制：指DNA遺傳可繞過(guò)那些阻止DNA 復(fù)制的DNA損傷。第44頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，6點(diǎn)30分，星期四DNA修復(fù)直接修復(fù)切除修復(fù)

20、O6甲基鳥(niǎo)嘌呤修復(fù)光修復(fù)錯(cuò)配堿基修復(fù)堿基切除修復(fù)核苷酸切除修復(fù)復(fù)制后修復(fù)呼救性修復(fù)DNA損傷的修復(fù)機(jī)制（一）、DNA損傷的修復(fù) 第45頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，6點(diǎn)30分，星期四X射線(xiàn)損傷修復(fù)交叉互補(bǔ)基因（XRCC1）是一種重要的DNA修復(fù)蛋白在內(nèi)外氧劑及烷化劑導(dǎo)致的DNA單鏈斷裂和堿損傷修復(fù)中起重要作用，XRCC1能通過(guò)自身的不同部位與多種堿基切除修復(fù)相關(guān)蛋白結(jié)合，發(fā)生相互作用促進(jìn)對(duì)DNA損傷修復(fù)，對(duì)維持基因組的穩(wěn)定起關(guān)鍵作用，并參與順鉑（DDP）或卡鉑（CBP）引起的損傷修復(fù)過(guò)程。第46頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，6點(diǎn)30分，星期四DNA修復(fù)能力是與腫瘤易感性和腫瘤化

21、療敏感性密切相關(guān)的雙刃劍：DNA修復(fù)能力強(qiáng)，腫瘤易感性低，然而在腫瘤治療過(guò)程中，修復(fù)能力的增加卻阻礙了化療藥物的發(fā)揮。多年來(lái)，國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)XRCC1的多態(tài)性做了相關(guān)的研究，主要集中在Argl94Trp和Arg399Gln位點(diǎn)，發(fā)現(xiàn)由于XRCC1存在多態(tài)性, 不同個(gè)體的活性不一樣, 從而導(dǎo)致對(duì)鉑類(lèi)藥物化療敏感性的不同。第47頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，6點(diǎn)30分，星期四DNA損傷修復(fù)的一般特點(diǎn)1.DNA損傷不僅可因外源性因素所致，也可因內(nèi)源性因素所致 2.不同類(lèi)型DNA損傷通過(guò)不同的DNA修復(fù)途徑修復(fù) 3.不同類(lèi)型DNA損傷修復(fù)速度是不同的 4.DNA損傷修復(fù)機(jī)制有些是基本的，有些是可

22、誘導(dǎo)的5.DNA損傷修復(fù)功能存在物種和個(gè)體差異 突變模式： DNA損傷-修復(fù)-突變 任何DNA損傷，只要修復(fù)無(wú)誤，突變就不會(huì)發(fā)生，如果修復(fù)錯(cuò)誤或未經(jīng)修復(fù)，損傷就固定下來(lái)，于是發(fā)生突變第48頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，6點(diǎn)30分，星期四（二）、遺傳因素對(duì)致突變作用的影響 (一)代謝酶遺傳多態(tài)性 (二)修復(fù)功能的個(gè)體差異 第49頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，6點(diǎn)30分，星期四第五節(jié) 觀察化學(xué)毒物致突變 作用的基本方法第50頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，6點(diǎn)30分，星期四一、觀察項(xiàng)目的選擇1、觀察的效應(yīng)終點(diǎn)類(lèi)型 基因突變和染色體畸變的檢測(cè)可直接反映化學(xué)毒物的致突變性，是評(píng)價(jià)

23、化學(xué)毒物致突變性唯一可靠的方法。還有許多試驗(yàn)所觀察到的現(xiàn)象并不反映基因突變、染色體畸變和染色體分離異常，而僅反映致突變過(guò)程中發(fā)生的其他事件。 將試驗(yàn)觀察到的現(xiàn)象所反映的各種事件統(tǒng)稱(chēng)為遺傳學(xué)終點(diǎn)(genetic endpoint)。 第51頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，6點(diǎn)30分，星期四遺傳學(xué)終點(diǎn)分為5類(lèi)DNA完整性的改變(形成加合物，斷裂，交聯(lián))；DNA重排或交換；DNA堿基序列改變；染色體完整性改變；染色體分離改變。其中實(shí)際上指基因突變，指染色體畸變。 第52頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，6點(diǎn)30分，星期四2成套的觀察項(xiàng)目遺傳毒理學(xué)評(píng)價(jià)程序通常為一組體內(nèi)、外遺傳毒理學(xué)試驗(yàn)。因

24、為：化學(xué)毒物的種類(lèi)和結(jié)構(gòu)多種多樣，其致突變的機(jī)制不盡相同，作用的靶細(xì)胞也不一樣;致突變物中僅少數(shù)具有直接致突變作用，大多數(shù)為間接致突變作用，即需要在體內(nèi)代謝活化后，才具有致突變作用;化學(xué)毒物的致突變性有強(qiáng)，也有弱。第53頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，6點(diǎn)30分，星期四遺傳毒理學(xué)成套觀察項(xiàng)目中試驗(yàn)入選原則：選擇的遺傳毒性試驗(yàn)應(yīng)包括5種類(lèi)型的遺傳學(xué)終點(diǎn)。通常的實(shí)驗(yàn)材料有病毒、細(xì)菌、真菌、培養(yǎng)的哺乳細(xì)胞、植物、昆蟲(chóng)及哺乳動(dòng)物等。體內(nèi)試驗(yàn)與體外試驗(yàn)配合。應(yīng)包括生殖細(xì)胞和體細(xì)胞。第54頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，6點(diǎn)30分，星期四二、常用的致突變?cè)囼?yàn) (一)細(xì)菌回復(fù)突變?cè)囼?yàn)(Ames試

25、驗(yàn)) 左圖：發(fā)明ames test 的美國(guó)加州大學(xué)教授艾姆斯（B.N.Ames），依然建在。第55頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，6點(diǎn)30分，星期四原 理鼠傷寒沙門(mén)氏菌野生型（原養(yǎng)型）人工方法正向誘變鼠傷寒沙門(mén)氏菌組氨酸缺陷型（異養(yǎng)型）誘變物作用回復(fù)突變 Ames是檢測(cè)遺傳毒理學(xué)的體外試驗(yàn)，檢測(cè)終點(diǎn)是基因突變第56頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，6點(diǎn)30分，星期四第57頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，6點(diǎn)30分，星期四TA1537TA1538TA1535R因子R因子R因子TA97TA98TA100TA102移碼突變堿基置換突變移碼突變、堿基置換突變實(shí)驗(yàn)菌株第58頁(yè)，共72頁(yè)，

26、2022年，5月20日，6點(diǎn)30分，星期四Petri dishes containing sodium azideinduced revertants of tester strain TA1535. The top left dish (no chemical added) shows spontaneous revertant colonies. The increase in induced revertants reflects increases in the concentration of sodium azide.第59頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，6點(diǎn)30分，星期四(

27、二)微核試驗(yàn)微核(Micronucleus)的產(chǎn)生與染色體損傷有關(guān)，是染色體或染色單體的無(wú)著絲點(diǎn)斷片或紡錘絲受損傷而丟失的整個(gè)染色體，在細(xì)胞分裂后期遺留在細(xì)胞質(zhì)中，末期之后，單獨(dú)形成一個(gè)或幾個(gè)規(guī)則的次核，包含在子細(xì)胞的胞質(zhì)內(nèi)，因比主核小，故稱(chēng)微核。細(xì)胞質(zhì)中微核來(lái)源有二：微核試驗(yàn)(Micronucleus test，MNT)是觀察受試物能否產(chǎn)生微核的試驗(yàn)。其主要可檢出DNA斷裂劑和非整倍體誘變劑。第60頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，6點(diǎn)30分，星期四第61頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，6點(diǎn)30分，星期四MICRONUCLEUS TEST 第62頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，6點(diǎn)30分，星期四(三)染色體畸變分析 (四)姐妹染色單體交換試驗(yàn)（SCE） 第63頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，6點(diǎn)30分，星期四(五)果蠅伴性隱性致死試驗(yàn)(六)顯性致死試驗(yàn)(七)程序外DNA合成試驗(yàn) (八)單細(xì)胞凝膠電泳(九)觀察方法新進(jìn)展第64頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，6點(diǎn)30分，星期四三、致突變?cè)囼?yàn)中的一些問(wèn)題 (一)陰性和陽(yáng)性對(duì)照的設(shè)立 1、陰性對(duì)照（negative control）它是空白對(duì)照，即不加任何處理?；蛘呤侨軇?duì)照。2、陽(yáng)性對(duì)照（positive cont