高三一輪復(fù)習(xí)生物：生物技術(shù)與工程專項練習(xí)

1、生物技術(shù)實踐-高考生物 專項練習(xí)一、選擇題1.下列關(guān)于發(fā)酵技術(shù)的敘述，不正確的是（ ）A.腐乳外部有一層致密的“皮”，這層“皮”就是由毛霉的直立菌絲構(gòu)成的B.在氧氣充足、缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿酑.長期放置的酒表面會出現(xiàn)一層膜，這層膜是醋酸菌在液體表面繁殖形成的D.泡菜腌制過程中，泡菜壇表面會長出一層白膜，這層白膜是產(chǎn)膜酵母大量增殖形成的2.下列關(guān)于發(fā)酵過程中產(chǎn)物檢驗的說法，正確的是（ ）A.果汁發(fā)酵是否產(chǎn)生酒精，可用NaOH來檢驗B.檢驗醋酸產(chǎn)生的簡單易行的方法是品嘗或用pH試紙鑒定C.在用比色法測定亞硝酸鹽含量時，可以不必配制標(biāo)準(zhǔn)顯色液D.測定果酒、果醋的產(chǎn)生和亞

2、硝酸鹽的含量均可用品嘗法3.下列有關(guān)說法正確的有（ ）利用葡萄汁發(fā)酵產(chǎn)生果酒的后期，加入醋酸菌即可產(chǎn)生醋酸泡菜制作的菌種主要是醋酸菌泡菜壇的選擇、發(fā)酵過程中壇沿要注滿水都有利于泡菜的無氧發(fā)酵在制作果酒、果醋時，適當(dāng)加大接種量可以提高發(fā)酵速率，抑制雜菌生長繁殖泡菜的制作前期需要通入氧氣，后期應(yīng)嚴(yán)格保持無氧條件酵母菌是嗜溫菌，所以果酒發(fā)酵所需的最適溫度高于果醋發(fā)酵最適溫度A.兩項B.一項C.三項D.四項4.關(guān)于探究果膠酶最適用量的實驗，下列敘述錯誤的是（ ）A.先配制不同濃度的果膠酶溶液，再向各組中加入等量的酶溶液B.調(diào)節(jié)pH，使各組中的pH相同而且處于適宜狀態(tài)C.用玻璃棒攪拌加酶的果泥，攪拌時間

3、要相同D.不能通過測定濾出的果汁體積來判斷果膠酶最適用量5.新型冠狀病毒是一種RNA病毒，醫(yī)務(wù)工作者利用PCR技術(shù)進(jìn)行病毒檢測，下列關(guān)于此技術(shù)的敘述正確的是（ ）A.PCR反應(yīng)體系中需要添加解旋酶以獲得單鏈模板B.在恒溫條件下進(jìn)行PCR擴(kuò)增避免溫度變化導(dǎo)致酶失活C.分析該病毒的RNA序列是設(shè)計PCR引物的前提條件D.在設(shè)計兩種引物時，需要讓引物和引物之間的堿基序列互補(bǔ)6.下列關(guān)于植物組織培養(yǎng)的敘述中，正確的是（ ）A.蘿卜韌皮部細(xì)胞在不離體的情況下可以通過脫分化形成愈傷組織B.組織培養(yǎng)過程中應(yīng)給予適當(dāng)光照以促進(jìn)愈傷組織的光合作用C.培養(yǎng)基中的生長素和細(xì)胞分裂素影響愈傷組織的生長和分化D.以一株

4、植物的葉片或花藥為外植體培育的植株基因型相同7.下列有關(guān)NaCl在生物技術(shù)實踐中應(yīng)用的敘述，正確的是（ ）A.在配制牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基時，需加入瓊脂，不需要添加NaClB.利用DNA在不同濃度的NaCl溶液中的溶解度不同，粗提取DNAC.腐乳制作過程中，裝瓶時需逐層加入等量NaCl，以防雜菌污染D.將哺乳動物的成熟紅細(xì)胞浸泡于質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.9%的NaCl溶液中，用以制備純凈的細(xì)胞膜8.SRY基因是Y染色體上的性別決定基因，可用SRY-PCR法鑒定胚胎性別，其基本程序如圖。相關(guān)說法正確的是（ ）A.通常取囊胚期內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞的DNA作為復(fù)制模板B.新合成的DNA都含模板DNA的兩條鏈C.上述過

5、程需要使用的工具酶之一是RNA聚合酶D.SRY探針能與雄性胚胎樣品中DNA配對9.一定濃度的福爾馬林（甲醛的水溶液）通過使蛋白質(zhì)變性而起防腐作用。可從活性污泥中分離出高效分解甲醛的細(xì)菌，以處理廢棄的福爾馬林。如圖是篩選和純化甲醛分解菌的實驗過程示意圖，其中LB培養(yǎng)基能使菌種成倍擴(kuò)增。下列相關(guān)敘述錯誤的是（ ）A.篩選甲醛分解菌的培養(yǎng)基中要添加甲醛作為唯一的碳源B.接種的目的是通過單個菌落分離出甲醛分解菌C.步驟中，各個培養(yǎng)瓶中的甲醛溶液要有一定的濃度梯度D.測定并選出甲醛濃度最低的培養(yǎng)瓶后，篩選對應(yīng)的菌株二、綜合題10.請利用植物體內(nèi)有效成分提取的相關(guān)知識回答下列問題：（1）胡蘿卜含有的胡蘿卜

6、素中，最主要的是_（填“-胡蘿卜素”“-胡蘿卜素”或“-胡蘿卜素”），該胡蘿卜素在人體內(nèi)可以轉(zhuǎn)變成_；從胡蘿卜中提取胡蘿卜素時，通常在萃取前要將胡蘿_和干燥，以提高萃取效率；萃取加熱時需安裝冷凝回流裝置，該冷凝回流裝置與玫瑰精油提取中用到的冷凝回流裝置作用_（填“相同”或“不同”）；水蒸氣蒸餾法_（填“是”或“不”）適合胡蘿卜素的提??；鑒定萃取物中是否含有胡蘿卜素時，通?？刹捎眉垖游龇ㄟM(jìn)行鑒定，其原理是_。（2）玫瑰精油提取過程中，當(dāng)蒸餾瓶中的水和原料量一定時，蒸餾過程中，影響精油提取量的主要因素有_；當(dāng)原料量等其他條件一定時，提取量隨蒸餾時間的變化趨勢是_。如果蒸餾過程中不使用冷凝回流裝置，

7、則精油提取量會_，原因是_。11.【生物選修1:生物技術(shù)實踐】蘋果汁、蘋果酒、蘋果醋等是人們餐桌上的常見食品。結(jié)合相關(guān)知識回答以下問題：（1）如圖所示是在蘋果酒的基礎(chǔ)上制作蘋果醋的流程圖。蘋果酒制作是否成功，發(fā)酵后可在酸性條件下用 溶液來鑒定。在酒精發(fā)酵旺盛時，醋酸菌 （答“能”或“不能”）將果汁中的糖發(fā)酵成醋酸，原因是 。（2）過程常用的醋酸菌是可以在食醋中獲得，分離和純化該微生物的方法如下：第一步：配制培養(yǎng)基。根據(jù)物理性質(zhì)，純化微生物常用的培養(yǎng)基為 。第二步：采用 法對培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌處理。第三步：接種。第四步：培養(yǎng)溫度控制在 。第五步：挑選符合要求的菌落。（3）某同學(xué)計劃統(tǒng)計食醋中該發(fā)酵菌

8、的總數(shù)，他選用10-4、10-5、10-6稀釋液進(jìn)行涂布，每種稀釋液都設(shè)置了3個培養(yǎng)皿。從設(shè)計實驗的角度看，還應(yīng)設(shè)置的一組對照實驗是 ，此對照實驗的目的是 。12.毒死蜱(C9H11C13NO3PS)是一種有機(jī)磷殺蟲劑，長期使用將導(dǎo)致土壤中農(nóng)藥殘留嚴(yán)重。某研究小組從長期施藥的韭黃溫室土壤(偏酸性)里分離出能降解毒死蜱的木霉，并對其降解特性進(jìn)行初步研究。請回答:(1)按照培養(yǎng)基的功能劃分，用于分離木霉菌種的培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基。配制此培養(yǎng)基時，應(yīng)加入_作為唯一碳源。接種前，將培養(yǎng)基在適宜溫度下放置適當(dāng)?shù)臅r間，觀察培養(yǎng)基_，以確定培養(yǎng)基是否被污染。(2)純化木霉時，統(tǒng)計出0.2mL樣液在稀釋105倍

9、后接種平板上的平均菌落數(shù)為40個，則每毫升樣液中的菌落數(shù)為_個。用此法測定木霉數(shù)量，實際活菌數(shù)量要比統(tǒng)計的菌落數(shù)量_，原因是_。(3)探究pH對木霉降解毒死蜱活性的影響研究小組向不同pH的培養(yǎng)基中分別加入100mgL-1毒死蜱，5天后檢測毒死蜱的殘留量(如圖甲)。由圖可推知:在偏酸性的土壤中，_。研究小組向不同pH的培養(yǎng)基中分別加入100mgL-1毒死蜱，再分別接種1mL木霉懸液，混合均勻，5天后檢測毒死蜱的殘留量(如圖乙)。在此韭黃溫室土壤中，若要提高木霉對毒死蜱的降解活性，可對土壤做何處理?_。13.多孔陶瓷具有制備簡單、廉價、高效、節(jié)能、環(huán)保及良品率高等優(yōu)點。某科研小組對多孔陶瓷球固定化

10、-葡萄糖苷酶的條件進(jìn)行研究,并將固定化酶的性質(zhì)與游離酶進(jìn)行比較,得到如下曲線?；卮鹣铝袉栴}:(1)固定化酶的方法一般包括_和物理吸附法;采用物理吸附法固定化酶,因條件溫和,_,且操作簡便、載體廉價易得,可反復(fù)使用。根據(jù)酶的特性,固定化酶需要在_條件下保存。與固定化細(xì)胞相比,其主要缺點是_。(2)-葡萄糖苷酶能催化硝基苯酚-D-葡萄糖苷水解成對硝基苯酚,實驗中一般要測定酶活性,該實驗中測定-葡萄糖苷酶活性時,可用單位時間內(nèi)_表示。(3)從曲線分析能得出的結(jié)論是_。(4)實驗中固定化酶在pH為4.8時的殘余酶活性稍低于游離酶,其可能的原因是_。14.辣椒是某市的重要蔬菜品種之一，但近年有退化、減產(chǎn)

11、的趨勢，若想通過花藥培養(yǎng)的方法培育出優(yōu)質(zhì)、高產(chǎn)、無病毒的辣椒苗，請完成下面的辣椒苗培育方案。(1)材料的選取:對所選擇的花藥一般要通過進(jìn)一步的鏡檢來確定其中的花粉是否處于適宜的發(fā)育期，確定花粉發(fā)育時期最常用的方法是_，對不易著色的花粉細(xì)胞核需用_法，這兩種方法分別能將花粉細(xì)胞核染成_和_，一般當(dāng)花粉位于_期時可用作培育的材料。(2)培養(yǎng)原理:如圖是溫度與花藥胚誘導(dǎo)率的關(guān)系圖，溫度為_左右時，花藥胚的誘導(dǎo)率最高。(3)材料的準(zhǔn)備:取辣椒花蕾用體積分?jǐn)?shù)為70%的_浸泡約30s，立即取出，在無菌水中清洗。取出后用無菌吸水紙吸干花蕾表面的水分，放入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1%的_溶液中24min，取出后再用無菌

12、水沖洗35次。(4)接種和培養(yǎng):接種用的花藥要徹底除去花絲，因為與花絲相連的花藥不利于_的形成。(5)鑒定和篩選:經(jīng)過一段時間的培育，花藥開裂釋放出胚狀體，一個花藥內(nèi)能產(chǎn)生大量幼小植株，幼小植株需要移到新的培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)。培養(yǎng)出來的植株要做進(jìn)一步鑒定和篩選的原因是_。15.新型冠狀病毒是一種單鏈RNA病毒，新型冠狀病毒感染的常規(guī)檢測方法是通過實時熒光PCR技術(shù)鑒定。(1)首先從樣本中提取病毒RNA，經(jīng)_酶作用生成cDNA。然后以cDNA為模板進(jìn)行實時熒光PCR擴(kuò)增，測定樣品中病毒核酸量。(2)通過實時熒光PCR擴(kuò)增目的基因，需額外添加熒光標(biāo)記探針(一小段單鏈DNA，可與目的基因中部序列特異性

13、結(jié)合)。當(dāng)探針完整時，不產(chǎn)生熒光。在PCR過程中，與目的基因結(jié)合的探針被TaqDNA聚合酶水解，R與Q分離后，R發(fā)出的熒光可被檢測到(如圖1)。當(dāng)樣本中有目的基因時，引物和探針與目的基因退火，通過形成而_特異性結(jié)合。在PCR循環(huán)的_階段，TaqDNA聚合酶催化子鏈的合成并水解探針。檢測到的熒光強(qiáng)度與反應(yīng)體系中DNA分子數(shù)呈_關(guān)系。(3)在通過實時熒光PCR檢測新型冠狀病毒時，檢測到的熒光強(qiáng)度變化如圖2所示。與指數(shù)增長期相比，線性增長期目的基因數(shù)量的增長率下降，原因有_。Ct值的含義:在PCR擴(kuò)增過程中，每個反應(yīng)管內(nèi)的熒光信號達(dá)到設(shè)定的熒光閾值時所經(jīng)歷的擴(kuò)增循環(huán)數(shù)。因此，當(dāng)樣本中初始模板越多時，

14、Ct值就_。某新型冠狀病毒核酸檢測說明書標(biāo)明，Ct值37判定為陽性，Ct值40或無Ct值判定為陰性。圖2所示新型冠狀病毒核酸檢測結(jié)果應(yīng)判定為_。(4)陰性結(jié)果也不能排除新型冠狀病毒感染。可能產(chǎn)生假陰性的因素有_(填序號)。a.取樣太早，樣本中病毒量少，達(dá)不到實時熒光PCR檢測閾值b.樣本被污染，RNA酶將病毒RNA降解c.病毒發(fā)生變異答案解析1.答案：A解析：腐乳外部的一層致密的“皮”是發(fā)酵前期毛霉在豆腐表面生長的菌絲（匍匐菌絲），對人體無害，它能形成腐乳的“皮”，使腐乳成形，A錯誤；在氧氣充足、缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿幔珺正確；長期放置的酒表面會岀現(xiàn)一層膜，是醋酸菌

15、在液體表面繁殖形成的，C正確；泡菜在腌制過程中，表面會長出一層白色的膜，這層白膜是產(chǎn)膜酵母大量增殖形成的，D正確。2.答案：B解析：果汁發(fā)酵是否產(chǎn)生酒精，可用酸性重銘酸鉀來檢驗，A錯誤;檢驗醋酸產(chǎn)生的簡單易行的方法是品嘗或用pH試紙鑒定，B正確；比色法測定亞硝酸鹽含量的一般步驟：配制溶液制備標(biāo)準(zhǔn)顯色液制備樣品處理液比色、計算，C錯誤;測定果酒、果醋的產(chǎn)生可用品嘗法，而測定亞硝酸鹽的含量不可用品嘗法，D錯誤。3.答案：A解析：利用葡萄汁發(fā)酵產(chǎn)生果酒的條件是無氧，醋酸菌是好氧菌，在果酒發(fā)酵后期加入醋酸菌，沒有氣體環(huán)境，不能產(chǎn)生醋酸，同時也應(yīng)該調(diào)整發(fā)酵溫度，錯誤；泡菜制作的菌種主要是乳酸菌，而不是醋

16、酸菌，錯誤；選擇泡菜壇時要保證泡菜壇火候好、無裂紋、無砂眼、壇沿深、蓋子吻合好，發(fā)酵過程中壇沿要注滿水，目的都是保證泡菜發(fā)酵時，乳酸菌繁殖所需的無氧環(huán)境，正確；在制作果酒、果醋時，適當(dāng)加大接種量可以提高發(fā)酵速率，抑制雜菌生長繁殖，正確；泡菜制作的菌種是乳酸菌，為厭氧細(xì)菌，全程都需要保持無氧條件，錯誤；酵母菌發(fā)酵的最適溫度為1825醋酸菌發(fā)酵的最適溫度為3035，果酒發(fā)酵所需的最適溫度低于果醋發(fā)酵最適溫度，錯誤。綜上所述，正確的有，A正確。4.答案：D解析：由于要探究果膠酶最適用量，故可配制不同濃度的果膠酶溶液，并在各組中加入等量的酶溶液，A正確；該實驗中pH為無關(guān)變量，故應(yīng)調(diào)節(jié)pH，使各組中的

17、pH相同而且處于適宜狀態(tài)，B正確；攪拌時間屬于無關(guān)變量，各組要保持一致，故用玻璃棒攪拌加酶的果泥，攪拌時間必須相同，C正確；可以通過測定濾出的果汁體積來判斷果膠酶最適用量，D錯誤。5.答案：C解析：PCR反應(yīng)體系中不需要添加解旋酶，高溫條件下雙鏈DNA間的氫鍵可自動解開，A錯誤；PCR反應(yīng)過程不是在恒溫條件下進(jìn)行的，包括95下使模板DNA變性、55下退火(引物與DNA模板鏈結(jié)合)、72下延伸，B錯誤；PCR的前提是有一段已知目的基因的核昔酸序列以便合成一對引物，分析該病毒的RNA序列是設(shè)計PCR引物的前提條件，C正確；在設(shè)計兩種引物時，引物和引物之間的堿基序列不能互補(bǔ)，否則引物之間會相互結(jié)合，

18、D錯誤。6.答案：C解析：蘿卜韌皮部細(xì)胞在離體和適宜的條件下可以通過脫分化形成愈傷組織，A錯誤；脫分化形成愈傷組織的過程中應(yīng)該避光，B錯誤；植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基中的生長素和細(xì)胞分裂素的含量和比例會影響愈傷組織的生長和分化，在脫分化形成愈傷組織的過程中要求生長素和細(xì)胞分裂素的比值適中，而在再分化過程中，生長素和細(xì)胞分裂素比值高時有利于根的分化，比值低時有利于芽的分化，C正確；同一株植物不同部位的細(xì)胞經(jīng)培養(yǎng)獲得的植株基因型不一定相同，如二倍體的花藥離體培養(yǎng)得到的個體是單倍體植株，而體細(xì)胞組織培養(yǎng)形成的個體是二倍體，D錯誤。7.答案：B解析：雖然各種培養(yǎng)基的具體配方不同，但一般都含有水、碳源(提供碳

19、元素)、氮源(提供氮元素)和無機(jī)鹽。牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基中要加入牛肉膏、蛋白胨、NaCl、凝固劑瓊脂，再用蒸餾水定容，A錯誤；DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同，所以可利用這一特點來粗提取DNA，B正確；在腐乳制作過程中，裝瓶時需要逐層增加鹽的用量，因為越接近瓶口，被雜菌污染的可能越大，C錯誤；利用滲透原理，將哺乳動物的成熟紅細(xì)胞浸泡于蒸餾水中，來制備純凈的細(xì)胞膜，質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.9%的NaCl溶液是紅細(xì)胞的等滲溶液，不能用于制備純凈的細(xì)胞膜，D錯誤。8.答案：D解析：SRY-PCR法鑒定胎兒性別通常取囊胚滋養(yǎng)層細(xì)胞的DNA作為復(fù)制模板，A錯誤；DNA分子的復(fù)制方式為半

20、保留復(fù)制，因此新合成的DNA只含模板DNA的一條鏈，B錯誤。SRY-PCR法中，需要使用的工具酶之一是熱穩(wěn)定DNA聚合酶，C錯誤；SRY探針是用位于Y染色體上的性別決定基因(SRY基因)制成的，因此SRY探針能與雄性胚胎樣品中DNA配對，D正確。9.答案：C解析：由題意可知，由于甲醛分解菌能利用甲醛作為碳源，而不能分解甲醛的微生物不能利用甲醛作為碳源，所以篩選甲醛分解菌的培養(yǎng)基中要添加甲醛作為唯一的碳源，在此培養(yǎng)基上不能分解甲醛的微生物因缺少碳源而不能生長，A正確；過程可以篩選出能分解甲醛的微生物，過程可以獲得單菌落，接種的目的是通過形成單個菌落分離出甲醛分解菌，B正確；步驟中，各個培養(yǎng)瓶中的

21、甲醛溶液的濃度要相同，將不同的甲醛分解菌分別接種到各個培養(yǎng)瓶中，一段時間后檢測培養(yǎng)瓶中甲醛的濃度，選出甲醛濃度最低的培養(yǎng)瓶后，篩選對應(yīng)的菌株可獲得分解甲醛能力強(qiáng)的甲醛分解菌，C錯誤，D正確。10.答案：(1)-胡蘿卜素；維生素A；粉碎；不同；不；不同的色素在層析液中的溶解度不同，隨層析液在濾紙上的擴(kuò)散速度也就不同(2)蒸餾時間和蒸餾溫度；在一定時間內(nèi)提取量隨蒸餾時間的延長而增加，一定時間后提取量不再增加；下降；部分精油會隨水蒸氣揮發(fā)而流失解析： （1）胡蘿卜含有的胡蘿卜素中，最主要的是-胡蘿卜素，該胡蘿卜素在人體內(nèi)可以轉(zhuǎn)變成維生素A，從胡蘿卜中提取胡蘿卜素時，通常在萃取前將胡蘿卜粉碎和干燥，以

22、提高萃取效率。萃取加熱時需安裝冷凝回流裝置，該冷凝回流裝置與玫瑰精油提取中用到的冷凝回流裝置作用不同，萃取過程中的冷凝回流裝置是為了防止加熱時有機(jī)溶劑的揮發(fā)，而玫瑰精油提取過程中的冷凝回流裝置是為了讓揮發(fā)出來的玫瑰精油冷凝。水蒸氣蒸餾法不適合胡蘿卜素的提取，原因是水蒸氣蒸餾法適用于蒸餾揮發(fā)性物質(zhì)，而胡蘿卜素不易揮發(fā)，不能隨水蒸氣蒸餾出來；鑒定萃取物中是否含有胡蘿卜素時，通常可采用紙層析法，原理是不同的色素在層析液中的溶解度不同，隨層析液在濾紙上的擴(kuò)散速度也就不同。（2）當(dāng)蒸餾瓶中的水和原料量一定時，蒸餾過程中，影響精油提取量的主要因素有蒸餾時間和蒸餾溫度。當(dāng)原料量等其他條件一定時，在一定時間內(nèi)

23、提取量隨蒸餾時間的延長而增加，一定時間后提取量不再增加。如果蒸餾過程中不使用冷凝回流裝置，則部分精油會隨水蒸氣揮發(fā)而流失，導(dǎo)致精油提取量下降。11.答案：（1）重鉻酸鉀 不能 醋酸菌是好氧菌，酒精發(fā)酵時氧氣不足（2）固體培養(yǎng)基 高壓蒸汽滅菌 30-35（3）不接種的空白培養(yǎng)基檢查培養(yǎng)基制備過程中是否被雜菌污染（合理即可）解析：（1）如圖所示是在蘋果酒的基礎(chǔ)上制作蘋果醋的流程圖。蘋果酒制作是否成功，發(fā)酵后可在酸性條件下用重鉻酸鉀溶液來鑒定，若產(chǎn)生灰綠色反應(yīng)，則說明產(chǎn)生了酒精。在酒精發(fā)酵旺盛時，利用的是酵母菌的無氧呼吸，此時的發(fā)酵環(huán)境為無氧環(huán)境，而醋酸菌是好氧菌，故醋酸菌不能將果汁中的糖發(fā)酵成醋酸

24、。（2）過程常用的醋酸菌是可以在食醋中獲得，分離和純化該微生物的方法如下：第一步：配制培養(yǎng)基。根據(jù)物理性質(zhì)，純化微生物常用的培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基。第二步：采用高壓蒸汽滅菌法對培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌處理。第三步：接種。第四步：醋酸菌的最適生長溫度為3035。第五步：挑選符合要求的菌落。（3）某同學(xué)計劃統(tǒng)計食醋中該發(fā)酵菌的總數(shù)，他選用10-4、10-5、10-6稀釋液進(jìn)行涂布，每種稀釋液都設(shè)置了3個培養(yǎng)皿。從設(shè)計實驗的角度看，還應(yīng)設(shè)置的一組對照實驗是不接種的空白培養(yǎng)基，此對照實驗的目的是檢查培養(yǎng)基制備過程中是否被雜菌污染，以確保實驗的準(zhǔn)確性。12.答案：(1)選擇；毒死蜱；是否產(chǎn)生菌落(2)2107；多；當(dāng)

25、兩個或多個細(xì)胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落(3)毒死蜱穩(wěn)定性較好適當(dāng)提高土壤的pH至7左右解析：(1)要分離出能降解毒死蜱的木霉，需要以毒死蜱作為唯一碳源配制培養(yǎng)基，在該培養(yǎng)基上只有能降解毒死蜱的木霉能生存，其他微生物都不能生存，因此該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。接種前，將空白培養(yǎng)基在適宜溫度下放置適當(dāng)?shù)臅r間，觀察培養(yǎng)基是否產(chǎn)生菌落，以確定培養(yǎng)基是否被污染。(2)純化木霉時，統(tǒng)計出0.2mL樣液在稀釋105倍后接種，平板上的平均菌落數(shù)為40個，根據(jù)公式可以計算出每毫升樣液中的菌落數(shù)為400.2105=2107個。用稀釋涂布平板法測定木霉數(shù)量時，由于當(dāng)兩個或多個細(xì)胞連在一起時，平板上觀察到的

26、只是一個菌落，因此實際活菌數(shù)量要比統(tǒng)計的菌落數(shù)量多。(3)由圖甲可知，pH為57時，毒死蜱的殘留量比pH為89時要高且穩(wěn)定，因此在偏酸性的土壤中，毒死蜱穩(wěn)定性較好。由圖乙可知，在pH為7時，木霉對毒死蜱的降解活性是最高的，此時毒死蜱的殘留量最低，因此在這個韭黃溫室土壤(偏酸性)中，若要提高木霉對毒死蜱的降解活性，可適當(dāng)提高土壤的pH至7左右。13.答案：(1)化學(xué)結(jié)合法；不會引起酶變性或失活；低溫；只能固定一種酶，不利于催化一系列的酶促反應(yīng)(2)硝基苯酚-D-葡萄糖苷消耗量或?qū)ο趸椒由闪?3)-葡萄糖苷酶經(jīng)過固定化后，其性質(zhì)穩(wěn)定的pH范圍更廣(4)少量酶發(fā)生滲漏解析：(1)固定化酶和固定化

27、細(xì)胞是利用物理或化學(xué)方法將酶或細(xì)胞固定在一定空間內(nèi)的技術(shù)，包括包埋法、化學(xué)結(jié)合法和物理吸附法。由于酶分子很小，一般來說更適合采用化學(xué)結(jié)合法和物理吸附法固定化。物理吸附法是將酶吸附于載體表面的方法，采用物理吸附法固定化酶，因其條件溫和，所以不會引起酶變性或失活，且操作簡便、載體廉價易得，可反復(fù)使用。溫度過高會使酶的空間結(jié)構(gòu)遭到破壞，導(dǎo)致酶永久失活；低溫時，酶的活性很低，但空間結(jié)構(gòu)穩(wěn)定，在適宜的溫度下酶的活性可以恢復(fù)，可見，固定化酶需要在低溫條件下保存。固定化細(xì)胞固定的是多酶系統(tǒng)，而固定化酶只能固定一種酶，不利于催化一系列的酶促反應(yīng)。(2)-葡萄糖苷酶能催化硝基苯酚-D-葡萄糖苷水解成對硝基苯酚。酶活性的高低可以通過酶所催化的化學(xué)反應(yīng)在單位時間內(nèi)反應(yīng)物的消耗量或產(chǎn)物的生成量來加以體現(xiàn)?？梢?，若測定-葡萄糖苷酶活性，可用單位時間內(nèi)硝基苯酚-D-葡萄糖苷的消耗量或?qū)ο趸椒拥纳闪縼肀硎尽?3)曲線圖顯示，pH在4.25.0之間，游離酶的殘余酶活性略高于固定化酶，但pH在3.04.2與5.07.2之間，游離酶的殘余酶活性明顯低于固定化酶，而且隨pH的變化，固定化酶的殘余酶活性的變化幅度比游離酶的小，由此說明-葡萄糖苷酶經(jīng)過固定化后，其