實驗動物學(xué)第四章實驗動物環(huán)境控制課件_第1頁
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文檔簡介

第四章實驗動物的環(huán)境控制第一節(jié)實驗動物環(huán)境第二節(jié)實驗動物設(shè)施第三節(jié)特殊動物實驗設(shè)施第四節(jié)設(shè)施的維護和管理第五節(jié)實驗動物設(shè)施的環(huán)境監(jiān)測2022/12/121第四章實驗動物的環(huán)境控制第一節(jié)實驗動物環(huán)境2022/基因型表現(xiàn)型演出型發(fā)育環(huán)境周圍環(huán)境1959年Russell和Bruch提出的動物遺傳和環(huán)境之間相互關(guān)系的學(xué)說

在動物實驗中。為了使動物經(jīng)過實驗處理后的反應(yīng)保持穩(wěn)定,就必須要求每個動物的表現(xiàn)型和演出型都保持穩(wěn)定;而要求每個動物的表現(xiàn)型和演出型保持穩(wěn)定,就必須對動物的生存環(huán)境進行控制。

1959-1962年孕婦服用反應(yīng)停后出生的海豹兒2022/12/122基因型表現(xiàn)型演出型發(fā)育環(huán)境周圍環(huán)境1959年Russell和環(huán)境對動物實驗處理的影響

R=(A+B+C)×D+E式中:R:

實驗動物的總反應(yīng)

A:

實驗動物種屬的共同反應(yīng)

B:動物品種及品系特有的反應(yīng)

C:

動物的個體反應(yīng)(個體差異)

D:

環(huán)境的影響(包括實驗處理)

E:

實驗誤差2022/12/123環(huán)境對動物實驗處理的影響2022/12/113第一節(jié)實驗動物環(huán)境一、實驗動物環(huán)境的概念外環(huán)境大環(huán)境內(nèi)環(huán)境小環(huán)境2022/12/124國家標準:實驗動物環(huán)境及設(shè)施(GB14925-2010)4.2選址4.2.1應(yīng)避開自然疫源地。生產(chǎn)設(shè)施宜遠離可能產(chǎn)生交叉感染的動物飼養(yǎng)場所。4.2.2宜選在環(huán)境空氣質(zhì)量即自然環(huán)境條件較好的區(qū)域。4.2.3宜遠離有嚴重空氣污染、振動或噪聲干擾的鐵路、碼頭、飛機場、交通要道、工廠、儲倉、堆場等區(qū)域。第一節(jié)實驗動物環(huán)境一、實驗動物環(huán)境的概念2022/12/二、實驗動物環(huán)境的分類及控制指標實驗動物環(huán)境的分類:

1.普通環(huán)境:飼養(yǎng)普通級動物

2.屏障環(huán)境:飼養(yǎng)清潔級、SPF級動物

3.隔離環(huán)境:飼養(yǎng)無菌級、悉生動物52022/12/12二、實驗動物環(huán)境的分類及控制指標52022/12/111.普通環(huán)境(conventionalenvironment)

普通環(huán)境符合動物居住的基本要求,不能完全控制傳染因子,但能控制野生動物的進入,適用于飼養(yǎng)普通級實驗動物。

普通環(huán)境溫度犬、兔、猴、小型豬等控制在16-28℃,豚鼠、地鼠控制在18-29℃范圍;日溫差≤4℃,相對濕度控制在40-70%,換氣次數(shù)最少8次/h。2022/12/1261.普通環(huán)境(conventionalenvironme2.屏障環(huán)境(barrierenvironment)屏障環(huán)境是專門為清潔級、SPF級動物飼養(yǎng)和動物實驗設(shè)計的環(huán)境,符合動物居住的要求。通過對出入屏障環(huán)境的人員、物品、動物和空氣潔凈度的控制,避免各種可能的傳染因子傳入屏障環(huán)境內(nèi);通過對溫濕度、噪聲和換氣次數(shù)等各種理化因子的控制,給實驗動物的繁育營造良好的環(huán)境。屏障環(huán)境溫度控制在20-26℃,日溫差≤4℃;相對濕度控制在40-70%,換氣次數(shù)控制在15次/h,空氣潔凈度7級。2022/12/1272.屏障環(huán)境(barrierenvironment)203.隔離環(huán)境(isolationenvironment)采用無菌隔離裝置以保持無菌狀態(tài)或無外來污染物。隔離裝置內(nèi)的空氣、飼料、水、墊料和設(shè)備應(yīng)無菌,動物和物料的動態(tài)傳遞須經(jīng)特殊的傳遞系統(tǒng),該系統(tǒng)既能保證與環(huán)境的絕對隔離,又能滿足轉(zhuǎn)運動物時保持內(nèi)環(huán)境一致。適用于飼育SPF級、悉生及無菌實驗動物。隔離環(huán)境溫度控制在20-26℃,日溫差≤4℃;相對濕度控制在40-70%,換氣次數(shù)≥20次/h,飼養(yǎng)無菌動物或悉生動物的隔離裝置空氣潔凈度為5級。為了保證良好的隔離環(huán)境,隔離裝置內(nèi)外的靜壓差要保持在50Pa。2022/12/1283.隔離環(huán)境(isolationenvironment)指標單位范圍其他溫度攝氏(℃)20-26日溫差≤4℃濕度相對濕度(%)40-70換氣量次/小時≥15氣流速度米/秒≤0.2梯度壓差帕斯卡(Pa)≥10清潔走廊>飼養(yǎng)室>次清潔走廊空氣潔凈度級7級美國宇航局標準落下菌數(shù)個/平皿≤3氨濃度毫克/立方米(mg/m3)≤14噪聲分貝(dB)≤60工作照度勒克斯(Lux)≥20012/12或10/14SPF動物實驗室環(huán)境控制指標2022/12/129指標單位范圍其他溫度攝氏(℃)20-26日溫環(huán)境分類使用功能適用動物等級普通環(huán)境---實驗動物生產(chǎn)、動物實驗、檢疫普通動物屏障環(huán)境正壓實驗動物生產(chǎn)、動物實驗、檢疫清潔動物、SPF動物負壓動物實驗、檢疫清潔動物、SPF動物隔離環(huán)境正壓實驗動物生產(chǎn)、動物實驗、檢疫SPF動物、悉生動物、無菌動物負壓動物實驗、檢疫SPF動物、悉生動物、無菌動物不同實驗動物環(huán)境的使用功能和適用動物等級2022/12/1210環(huán)境分類使用功能適用動物等級普通環(huán)境---實驗動物生產(chǎn)、動物1.保證實驗動物健康和質(zhì)量標準化。2.保障實驗研究獲得正確結(jié)果。3.合乎標準的環(huán)境為動物實驗工作者提供適宜的工作環(huán)境,避免不利的因素對人的傷害。實驗動物環(huán)境控制的意義2022/12/12111.保證實驗動物健康和質(zhì)量標準化。實驗動物環(huán)境控制的意義2第二節(jié)實驗動物設(shè)施實驗動物設(shè)施是為實驗動物和動物實驗提供能夠控制的、穩(wěn)定的、適合實驗動物生長/繁殖的環(huán)境。依據(jù)功能,可分為

生產(chǎn)繁殖設(shè)施動物實驗設(shè)施2022/12/1212第二節(jié)實驗動物設(shè)施實驗動物設(shè)施是為實驗動物和動物實驗提供一、普通設(shè)施

普通設(shè)施應(yīng)符合普通環(huán)境控制要求,用于飼養(yǎng)普通級動物。設(shè)施通常為單走廊專用房舍,有空調(diào)和送、排風(fēng)裝置,有防野鼠、防昆蟲措施。此外還應(yīng)配置動物實驗室、手術(shù)室、清洗室、籠器具和飼料墊料倉庫。因普通級大動物糞尿排泄量大,在設(shè)施建造設(shè)計時應(yīng)注意足夠的通風(fēng)換氣量和通暢的下水管道?;\具要定期清洗消毒,飼料應(yīng)確保未污染和霉變。工作人員進入時應(yīng)采取一定的防護措施,如穿著工作服,戴口罩、帽子和手套。2022/12/1213一、普通設(shè)施2022/12/111314二、屏障設(shè)施根據(jù)屏障控制規(guī)模的大小,分為:屏障系統(tǒng)屏障單元局部屏障設(shè)備2022/12/1214二、屏障設(shè)施2022/12/111.屏障系統(tǒng)一般設(shè)計為雙走廊或三走廊。空氣要經(jīng)過初、中、高效三級過濾,其空氣潔凈度達到7級(相當(dāng)于美國宇航局標準10000級)。屏障系統(tǒng)內(nèi)保持正壓,通過設(shè)定清潔走廊、飼養(yǎng)室/動物實驗室和次清潔走廊之間的壓差調(diào)節(jié)氣流走向。屏障系統(tǒng)的出入口一般都設(shè)兩道門,形成緩沖間(氣閘),防止開門時外界空氣逆流進入屏障系統(tǒng)內(nèi)。2022/12/12151.屏障系統(tǒng)2022/12/1115雙走廊屏障系統(tǒng)內(nèi)人、動物、物品的移動路向2022/12/1216雙走廊屏障系統(tǒng)內(nèi)人、動物、物品的移動路向2022/12/11氣流走向

清潔走廊飼養(yǎng)室/動物實驗室次清潔走廊外部區(qū)域人員走向:

更衣室淋?。L(fēng)淋)清潔走廊飼養(yǎng)室/動物實驗室次清潔走廊更衣室物品移動走向耐高壓物品:

物品高壓滅菌內(nèi)準備室清潔走廊飼養(yǎng)室/動物飼養(yǎng)室次清潔走廊外部區(qū)域

不耐高壓物品:

物品傳遞窗噴霧消毒內(nèi)準備室清潔走廊飼養(yǎng)室/動物飼養(yǎng)室次清潔走廊外部區(qū)域屏障系統(tǒng)內(nèi)氣流、人員、物品走向(以雙走廊為例)2022/12/1217氣流走向屏障系統(tǒng)內(nèi)氣流、人員、物品走向2022/12/1112022/12/12182022/12/11182.屏障單元

將單間飼養(yǎng)室/動物實驗室進行凈化控制,用于清潔級大小鼠飼養(yǎng)/動物實驗,但其清洗、高壓滅菌、倉庫等設(shè)施并不連成一體。常見于動物實驗規(guī)模較小的研究所或醫(yī)院。2022/12/12192.屏障單元2022/12/11193.局部屏障設(shè)備:

層流架獨立通氣籠盒(IVC)層流架獨立通氣籠盒(IndividuallyVentilatedCages,IVC)2022/12/12203.局部屏障設(shè)備:層流架獨立通氣籠盒(Individuall21屏障系統(tǒng)與IVC設(shè)備在通風(fēng)換氣上的差異進氣孔出氣孔2022/12/1221屏障系統(tǒng)與IVC設(shè)備在通風(fēng)換氣上的差異進氣孔出氣孔202三、隔離設(shè)施隔離設(shè)施是采用特制的隔離裝置以營造與外界隔離的環(huán)境,用于無菌動物的制備、無菌動物和悉生動物的維持和動物實驗。亦可用于SPF動物的保種和一般的感染性試驗??芍糜谑覂?nèi)普通環(huán)境中運轉(zhuǎn)。無菌隔離器可用硬質(zhì)或軟質(zhì)材料制成。硬質(zhì)材料采用PVC塑料或不銹鋼,軟質(zhì)材料通常采用聚乙烯透明塑料,通氣后鼓脹成型。目前全世界應(yīng)用最廣泛的是聚氯乙烯全透明薄膜隔離器。2022/12/1222三、隔離設(shè)施2022/12/1122隔離器的基本構(gòu)造示意圖2022/12/1223隔離器的基本構(gòu)造示意圖2022/12/1123第三節(jié)特殊動物實驗設(shè)施感染性動物實驗設(shè)施放射性動物實驗設(shè)施特殊化學(xué)物質(zhì)動物實驗設(shè)施2022/12/1224第三節(jié)特殊動物實驗設(shè)施感染性動物實驗設(shè)施2022/12/1危險度1級(無或極低的個體和群體危險)

不太可能引起人或動物致病的微生物。如大腸桿菌、乳酸桿菌等危險度2級(個體危險中等,群體危險低)

病原體能夠?qū)θ嘶騽游镏虏?,但對實驗室工作人員、社區(qū)、牲畜或環(huán)境不易導(dǎo)致嚴重危害。實驗室暴露也許會引起嚴重感染,但對感染有有效的預(yù)防和治療措施,并且疾病傳播的危險有限。如傷寒桿菌、沙門氏菌、致病性大腸桿菌等危險度3級(個體危險高,群體危險低)

病原體通常能引起人或動物的嚴重疾病,但一般不會發(fā)生感染個體向其他個體的傳播,并且對感染有有效的預(yù)防和治療措施。如霍亂弧菌、炭疽桿菌等危險度4級(個體和群體的危險均高)

病原體通常能引起人或動物的嚴重疾病,并且很容易發(fā)生個體之間的直接或間接傳播,對感染一般沒有有效的預(yù)防和治療措施。如SARS病毒、甲流病毒等WHO《實驗室生物安全手冊》第三版中文版感染性微生物的危險度等級分類2022/12/1225危險度1級(無或極低的個體和群體危險)WHO《實驗室生

感染性動物實驗設(shè)施設(shè)計理念防護措施二段封閉防護:病原體和人隔離開,感染性實驗室和外界環(huán)境隔離開。感染性動物實驗室的等級

ABSL-1(Animalfacility-BiosafetyLevel-1,P1)ABSL-2(Animalfacility-BiosafetyLevel-2,P2)

ABSL-3(Animalfacility-BiosafetyLevel-3,P3)

ABSL-4(Animalfacility-BiosafetyLevel-4,P4)

2022/12/1226感染性動物實驗設(shè)施2022/12/1126不同級別感染性動物實驗室的要求ABSL-1適用:危險度1級(無或極低的個體和群體危險)動物飼育室要求:①飼育籠具應(yīng)有防逃出裝置;②感染實驗區(qū)應(yīng)與其他區(qū)域分開,有防昆蟲和嚙齒類動物侵入的裝置;③靠近出口處設(shè)洗手池;④地面、墻壁應(yīng)使用耐水耐消毒藥的材料。2022/12/1227不同級別感染性動物實驗室的要求2022/12/1127ABSL-2適用:危險度2級(個體危險中等,群體危險低)

ABSL-2是在ABSL-1的操作規(guī)范、處理方法、安全設(shè)備和實驗室要求的基礎(chǔ)上建立起來的。飼養(yǎng)室門應(yīng)保持關(guān)閉,有明顯的“生物危害”標志牌。動物飼育室要求:(1)應(yīng)分別設(shè)置動物飼育室和實驗操作室、檢疫觀察室。動物實驗宜在隔離器、IVC和生物安全柜內(nèi)進行。(2)門應(yīng)帶鎖、可自動關(guān)閉。實驗室的門應(yīng)具有可視窗。動物實驗室不宜設(shè)下水地漏。(3)應(yīng)設(shè)置恒溫恒濕空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)和空氣凈化機組,一般宜采用全新風(fēng)。2022/12/1228ABSL-22022/12/1128(4)應(yīng)配備高壓蒸汽滅菌器。(5)污物處理應(yīng)保證滿足實驗室運轉(zhuǎn)和控制污染的要求。固體廢棄物經(jīng)高壓蒸汽滅菌后交環(huán)保部門統(tǒng)一處理;污染的廢水必須經(jīng)過有效消毒。有害污染廢棄物要與一般廢棄物分開放置。(6)應(yīng)有可靠的電力供應(yīng)和應(yīng)急照明。保證緊急情況下基本設(shè)備的用電需要。(7)應(yīng)按規(guī)定設(shè)置火災(zāi)報警、消防器材以及洗眼設(shè)施。2022/12/1229(4)應(yīng)配備高壓蒸汽滅菌器。2022/12/1129ABSL-3適用:

危險度3級(個體危險高,群體危險低)三級實驗動物生物安全實驗室(ABSL-3)適用于飼養(yǎng)接種了危險度3級微生物的動物。這種病原微生物對人體、動植物或環(huán)境具有高度危險性,主要通過氣溶膠使人傳染上嚴重的甚至是致命疾病,或?qū)又参锖铜h(huán)境具有高度危害的致病因子。實驗人員需接受過專門操作訓(xùn)練,并由具有上述工作經(jīng)驗的能勝任的科學(xué)人員監(jiān)督管理。ABSL-3要有雙重密封門或氣閘室(緩沖隔離室)和外界隔離的實驗區(qū)。外部空氣通過高效過濾器送入室內(nèi),排出的空氣亦需經(jīng)高效過濾器過濾。感染材料的所有操作應(yīng)在生物安全柜內(nèi)或其他封閉設(shè)備內(nèi)進行。所有傳染性液體或固體廢棄物應(yīng)先經(jīng)過高溫高壓或化學(xué)處理去除污染后再處理。2022/12/1230ABSL-32022/12/1130ABSL-3設(shè)施設(shè)備要求:(1)應(yīng)為全封閉系統(tǒng),有清潔區(qū)、半污染區(qū)和污染區(qū)組成,各區(qū)之間設(shè)緩沖間。(2)室內(nèi)配管線應(yīng)內(nèi)藏,適應(yīng)熏蒸消毒和沖洗消毒的需要。(3)動物飼養(yǎng)區(qū)和生物安全柜內(nèi)應(yīng)保持負壓,排出的氣體應(yīng)經(jīng)過高效過濾器過濾。(4)每個動物實驗室出口處附近要有自動開關(guān)洗手池。(5)在適當(dāng)?shù)奈恢冒仓酶邏簻缇?,感染性廢棄物在運出ABSL-3前必須經(jīng)高壓滅菌。2022/12/1231ABSL-3設(shè)施設(shè)備要求:2022/12/1131ABSL-4適用:

危險度4級(個體和群體的危險均高)四級實驗動物生物安全實驗室(ABSL-4)是最高度安全實驗室。適用于未知的或能引起致命疾病的,對個人有高度風(fēng)險的病原體的工作。實驗人員應(yīng)經(jīng)過專門的操作培訓(xùn),并由有經(jīng)驗的科學(xué)人員監(jiān)督管理。采用獨立的建筑物內(nèi)用隔離區(qū)和外部隔斷的構(gòu)造。根據(jù)相應(yīng)的隔離等級使室內(nèi)保持負壓。在密封型(即Ⅲ級)生物安全柜內(nèi)進行實驗,工作人員應(yīng)穿上通過維持生命裝置換氣的整體式正壓個人防護服。非本區(qū)的工作人員嚴禁入內(nèi)。

2022/12/1232ABSL-42022/12/1132ABSL-4在ABSL-3設(shè)施設(shè)備的基礎(chǔ)上,還要求:(1)獨立的建筑物,應(yīng)設(shè)置隔離區(qū)和一定的相關(guān)區(qū)域。(2)墻、屋頂應(yīng)耐水和封閉,排氣管、電線、煤氣、水管等也應(yīng)封閉。(3)必須通過氣鎖緩沖室才能進入設(shè)施。氣鎖緩沖室的潔凈側(cè)與限制側(cè)之間必須有更衣室和淋浴室隔開。(4)進入實驗室的氣體應(yīng)經(jīng)高效過濾,排出的氣體應(yīng)經(jīng)二層高效過濾器過濾后再排出。(5)一切動物飼育實驗應(yīng)在完全密閉、安全的隔離工作臺內(nèi)進行。感染區(qū)域應(yīng)設(shè)有雙門高壓滅菌器、消毒藥槽及二重門的器材移動出入口(傳遞間)。(6)從實驗室內(nèi)排出的水應(yīng)經(jīng)120℃加熱滅菌,冷卻后再排入普通下水道。2022/12/1233ABSL-4在ABSL-3設(shè)施設(shè)備的基礎(chǔ)上,還要求:2022二、放射性同位素動物實驗設(shè)施

放射性同位素動物實驗設(shè)施(簡稱RI動物實驗設(shè)施)。設(shè)施要求防止放射性同位素對人的影響,防止射線對一般動物和環(huán)境的放射能污染及同位素的泄漏。其要求應(yīng)按國家有關(guān)規(guī)定執(zhí)行。三、特殊化學(xué)物質(zhì)動物實驗設(shè)施用化學(xué)物質(zhì)制作動物模型或作安全性試驗等的特殊動物實驗對實驗者及有關(guān)人員的健康有一定影響,如:致癌性物質(zhì)等,其設(shè)施與設(shè)備必須防止對人的危害和對實驗場所及周圍環(huán)境的污染。2022/12/1234二、放射性同位素動物實驗設(shè)施2022/12/1134思考題1.如何理解Russel和Bruch的動物的遺傳與環(huán)境之間相互關(guān)系的學(xué)說和動物對實驗處理的反應(yīng)式R=(A+B+C)×D+E。2.普通環(huán)境、屏障環(huán)境、隔離環(huán)境各飼養(yǎng)什么級別的實驗動物?3.什么叫屏障環(huán)境?屏障環(huán)境是通過控制什么,避免各種可能的傳染因子傳入屏障環(huán)境內(nèi)?

4.在雙走廊屏障系統(tǒng)中,人、動物、物品的移動路向是怎樣的?5.國家標準中對SPF動物實驗室的環(huán)境控制指標有哪幾項?其正常范圍是多少?6.ABSL-3和ABSL-4對動物飼育室有什么要求?2022/12/1235思考題1.如何理解Russel和Bruch的動物的遺傳與環(huán)境第四章實驗動物的環(huán)境控制第一節(jié)實驗動物環(huán)境第二節(jié)實驗動物設(shè)施第三節(jié)特殊動物實驗設(shè)施第四節(jié)設(shè)施的維護和管理第五節(jié)實驗動物設(shè)施的環(huán)境監(jiān)測2022/12/1236第四章實驗動物的環(huán)境控制第一節(jié)實驗動物環(huán)境2022/基因型表現(xiàn)型演出型發(fā)育環(huán)境周圍環(huán)境1959年Russell和Bruch提出的動物遺傳和環(huán)境之間相互關(guān)系的學(xué)說

在動物實驗中。為了使動物經(jīng)過實驗處理后的反應(yīng)保持穩(wěn)定,就必須要求每個動物的表現(xiàn)型和演出型都保持穩(wěn)定;而要求每個動物的表現(xiàn)型和演出型保持穩(wěn)定,就必須對動物的生存環(huán)境進行控制。

1959-1962年孕婦服用反應(yīng)停后出生的海豹兒2022/12/1237基因型表現(xiàn)型演出型發(fā)育環(huán)境周圍環(huán)境1959年Russell和環(huán)境對動物實驗處理的影響

R=(A+B+C)×D+E式中:R:

實驗動物的總反應(yīng)

A:

實驗動物種屬的共同反應(yīng)

B:動物品種及品系特有的反應(yīng)

C:

動物的個體反應(yīng)(個體差異)

D:

環(huán)境的影響(包括實驗處理)

E:

實驗誤差2022/12/1238環(huán)境對動物實驗處理的影響2022/12/113第一節(jié)實驗動物環(huán)境一、實驗動物環(huán)境的概念外環(huán)境大環(huán)境內(nèi)環(huán)境小環(huán)境2022/12/1239國家標準:實驗動物環(huán)境及設(shè)施(GB14925-2010)4.2選址4.2.1應(yīng)避開自然疫源地。生產(chǎn)設(shè)施宜遠離可能產(chǎn)生交叉感染的動物飼養(yǎng)場所。4.2.2宜選在環(huán)境空氣質(zhì)量即自然環(huán)境條件較好的區(qū)域。4.2.3宜遠離有嚴重空氣污染、振動或噪聲干擾的鐵路、碼頭、飛機場、交通要道、工廠、儲倉、堆場等區(qū)域。第一節(jié)實驗動物環(huán)境一、實驗動物環(huán)境的概念2022/12/二、實驗動物環(huán)境的分類及控制指標實驗動物環(huán)境的分類:

1.普通環(huán)境:飼養(yǎng)普通級動物

2.屏障環(huán)境:飼養(yǎng)清潔級、SPF級動物

3.隔離環(huán)境:飼養(yǎng)無菌級、悉生動物402022/12/12二、實驗動物環(huán)境的分類及控制指標52022/12/111.普通環(huán)境(conventionalenvironment)

普通環(huán)境符合動物居住的基本要求,不能完全控制傳染因子,但能控制野生動物的進入,適用于飼養(yǎng)普通級實驗動物。

普通環(huán)境溫度犬、兔、猴、小型豬等控制在16-28℃,豚鼠、地鼠控制在18-29℃范圍;日溫差≤4℃,相對濕度控制在40-70%,換氣次數(shù)最少8次/h。2022/12/12411.普通環(huán)境(conventionalenvironme2.屏障環(huán)境(barrierenvironment)屏障環(huán)境是專門為清潔級、SPF級動物飼養(yǎng)和動物實驗設(shè)計的環(huán)境,符合動物居住的要求。通過對出入屏障環(huán)境的人員、物品、動物和空氣潔凈度的控制,避免各種可能的傳染因子傳入屏障環(huán)境內(nèi);通過對溫濕度、噪聲和換氣次數(shù)等各種理化因子的控制,給實驗動物的繁育營造良好的環(huán)境。屏障環(huán)境溫度控制在20-26℃,日溫差≤4℃;相對濕度控制在40-70%,換氣次數(shù)控制在15次/h,空氣潔凈度7級。2022/12/12422.屏障環(huán)境(barrierenvironment)203.隔離環(huán)境(isolationenvironment)采用無菌隔離裝置以保持無菌狀態(tài)或無外來污染物。隔離裝置內(nèi)的空氣、飼料、水、墊料和設(shè)備應(yīng)無菌,動物和物料的動態(tài)傳遞須經(jīng)特殊的傳遞系統(tǒng),該系統(tǒng)既能保證與環(huán)境的絕對隔離,又能滿足轉(zhuǎn)運動物時保持內(nèi)環(huán)境一致。適用于飼育SPF級、悉生及無菌實驗動物。隔離環(huán)境溫度控制在20-26℃,日溫差≤4℃;相對濕度控制在40-70%,換氣次數(shù)≥20次/h,飼養(yǎng)無菌動物或悉生動物的隔離裝置空氣潔凈度為5級。為了保證良好的隔離環(huán)境,隔離裝置內(nèi)外的靜壓差要保持在50Pa。2022/12/12433.隔離環(huán)境(isolationenvironment)指標單位范圍其他溫度攝氏(℃)20-26日溫差≤4℃濕度相對濕度(%)40-70換氣量次/小時≥15氣流速度米/秒≤0.2梯度壓差帕斯卡(Pa)≥10清潔走廊>飼養(yǎng)室>次清潔走廊空氣潔凈度級7級美國宇航局標準落下菌數(shù)個/平皿≤3氨濃度毫克/立方米(mg/m3)≤14噪聲分貝(dB)≤60工作照度勒克斯(Lux)≥20012/12或10/14SPF動物實驗室環(huán)境控制指標2022/12/1244指標單位范圍其他溫度攝氏(℃)20-26日溫環(huán)境分類使用功能適用動物等級普通環(huán)境---實驗動物生產(chǎn)、動物實驗、檢疫普通動物屏障環(huán)境正壓實驗動物生產(chǎn)、動物實驗、檢疫清潔動物、SPF動物負壓動物實驗、檢疫清潔動物、SPF動物隔離環(huán)境正壓實驗動物生產(chǎn)、動物實驗、檢疫SPF動物、悉生動物、無菌動物負壓動物實驗、檢疫SPF動物、悉生動物、無菌動物不同實驗動物環(huán)境的使用功能和適用動物等級2022/12/1245環(huán)境分類使用功能適用動物等級普通環(huán)境---實驗動物生產(chǎn)、動物1.保證實驗動物健康和質(zhì)量標準化。2.保障實驗研究獲得正確結(jié)果。3.合乎標準的環(huán)境為動物實驗工作者提供適宜的工作環(huán)境,避免不利的因素對人的傷害。實驗動物環(huán)境控制的意義2022/12/12461.保證實驗動物健康和質(zhì)量標準化。實驗動物環(huán)境控制的意義2第二節(jié)實驗動物設(shè)施實驗動物設(shè)施是為實驗動物和動物實驗提供能夠控制的、穩(wěn)定的、適合實驗動物生長/繁殖的環(huán)境。依據(jù)功能,可分為

生產(chǎn)繁殖設(shè)施動物實驗設(shè)施2022/12/1247第二節(jié)實驗動物設(shè)施實驗動物設(shè)施是為實驗動物和動物實驗提供一、普通設(shè)施

普通設(shè)施應(yīng)符合普通環(huán)境控制要求,用于飼養(yǎng)普通級動物。設(shè)施通常為單走廊專用房舍,有空調(diào)和送、排風(fēng)裝置,有防野鼠、防昆蟲措施。此外還應(yīng)配置動物實驗室、手術(shù)室、清洗室、籠器具和飼料墊料倉庫。因普通級大動物糞尿排泄量大,在設(shè)施建造設(shè)計時應(yīng)注意足夠的通風(fēng)換氣量和通暢的下水管道?;\具要定期清洗消毒,飼料應(yīng)確保未污染和霉變。工作人員進入時應(yīng)采取一定的防護措施,如穿著工作服,戴口罩、帽子和手套。2022/12/1248一、普通設(shè)施2022/12/111349二、屏障設(shè)施根據(jù)屏障控制規(guī)模的大小,分為:屏障系統(tǒng)屏障單元局部屏障設(shè)備2022/12/1214二、屏障設(shè)施2022/12/111.屏障系統(tǒng)一般設(shè)計為雙走廊或三走廊??諝庖?jīng)過初、中、高效三級過濾,其空氣潔凈度達到7級(相當(dāng)于美國宇航局標準10000級)。屏障系統(tǒng)內(nèi)保持正壓,通過設(shè)定清潔走廊、飼養(yǎng)室/動物實驗室和次清潔走廊之間的壓差調(diào)節(jié)氣流走向。屏障系統(tǒng)的出入口一般都設(shè)兩道門,形成緩沖間(氣閘),防止開門時外界空氣逆流進入屏障系統(tǒng)內(nèi)。2022/12/12501.屏障系統(tǒng)2022/12/1115雙走廊屏障系統(tǒng)內(nèi)人、動物、物品的移動路向2022/12/1251雙走廊屏障系統(tǒng)內(nèi)人、動物、物品的移動路向2022/12/11氣流走向

清潔走廊飼養(yǎng)室/動物實驗室次清潔走廊外部區(qū)域人員走向:

更衣室淋?。L(fēng)淋)清潔走廊飼養(yǎng)室/動物實驗室次清潔走廊更衣室物品移動走向耐高壓物品:

物品高壓滅菌內(nèi)準備室清潔走廊飼養(yǎng)室/動物飼養(yǎng)室次清潔走廊外部區(qū)域

不耐高壓物品:

物品傳遞窗噴霧消毒內(nèi)準備室清潔走廊飼養(yǎng)室/動物飼養(yǎng)室次清潔走廊外部區(qū)域屏障系統(tǒng)內(nèi)氣流、人員、物品走向(以雙走廊為例)2022/12/1252氣流走向屏障系統(tǒng)內(nèi)氣流、人員、物品走向2022/12/1112022/12/12532022/12/11182.屏障單元

將單間飼養(yǎng)室/動物實驗室進行凈化控制,用于清潔級大小鼠飼養(yǎng)/動物實驗,但其清洗、高壓滅菌、倉庫等設(shè)施并不連成一體。常見于動物實驗規(guī)模較小的研究所或醫(yī)院。2022/12/12542.屏障單元2022/12/11193.局部屏障設(shè)備:

層流架獨立通氣籠盒(IVC)層流架獨立通氣籠盒(IndividuallyVentilatedCages,IVC)2022/12/12553.局部屏障設(shè)備:層流架獨立通氣籠盒(Individuall56屏障系統(tǒng)與IVC設(shè)備在通風(fēng)換氣上的差異進氣孔出氣孔2022/12/1221屏障系統(tǒng)與IVC設(shè)備在通風(fēng)換氣上的差異進氣孔出氣孔202三、隔離設(shè)施隔離設(shè)施是采用特制的隔離裝置以營造與外界隔離的環(huán)境,用于無菌動物的制備、無菌動物和悉生動物的維持和動物實驗。亦可用于SPF動物的保種和一般的感染性試驗??芍糜谑覂?nèi)普通環(huán)境中運轉(zhuǎn)。無菌隔離器可用硬質(zhì)或軟質(zhì)材料制成。硬質(zhì)材料采用PVC塑料或不銹鋼,軟質(zhì)材料通常采用聚乙烯透明塑料,通氣后鼓脹成型。目前全世界應(yīng)用最廣泛的是聚氯乙烯全透明薄膜隔離器。2022/12/1257三、隔離設(shè)施2022/12/1122隔離器的基本構(gòu)造示意圖2022/12/1258隔離器的基本構(gòu)造示意圖2022/12/1123第三節(jié)特殊動物實驗設(shè)施感染性動物實驗設(shè)施放射性動物實驗設(shè)施特殊化學(xué)物質(zhì)動物實驗設(shè)施2022/12/1259第三節(jié)特殊動物實驗設(shè)施感染性動物實驗設(shè)施2022/12/1危險度1級(無或極低的個體和群體危險)

不太可能引起人或動物致病的微生物。如大腸桿菌、乳酸桿菌等危險度2級(個體危險中等,群體危險低)

病原體能夠?qū)θ嘶騽游镏虏?,但對實驗室工作人員、社區(qū)、牲畜或環(huán)境不易導(dǎo)致嚴重危害。實驗室暴露也許會引起嚴重感染,但對感染有有效的預(yù)防和治療措施,并且疾病傳播的危險有限。如傷寒桿菌、沙門氏菌、致病性大腸桿菌等危險度3級(個體危險高,群體危險低)

病原體通常能引起人或動物的嚴重疾病,但一般不會發(fā)生感染個體向其他個體的傳播,并且對感染有有效的預(yù)防和治療措施。如霍亂弧菌、炭疽桿菌等危險度4級(個體和群體的危險均高)

病原體通常能引起人或動物的嚴重疾病,并且很容易發(fā)生個體之間的直接或間接傳播,對感染一般沒有有效的預(yù)防和治療措施。如SARS病毒、甲流病毒等WHO《實驗室生物安全手冊》第三版中文版感染性微生物的危險度等級分類2022/12/1260危險度1級(無或極低的個體和群體危險)WHO《實驗室生

感染性動物實驗設(shè)施設(shè)計理念防護措施二段封閉防護:病原體和人隔離開,感染性實驗室和外界環(huán)境隔離開。感染性動物實驗室的等級

ABSL-1(Animalfacility-BiosafetyLevel-1,P1)ABSL-2(Animalfacility-BiosafetyLevel-2,P2)

ABSL-3(Animalfacility-BiosafetyLevel-3,P3)

ABSL-4(Animalfacility-BiosafetyLevel-4,P4)

2022/12/1261感染性動物實驗設(shè)施2022/12/1126不同級別感染性動物實驗室的要求ABSL-1適用:危險度1級(無或極低的個體和群體危險)動物飼育室要求:①飼育籠具應(yīng)有防逃出裝置;②感染實驗區(qū)應(yīng)與其他區(qū)域分開,有防昆蟲和嚙齒類動物侵入的裝置;③靠近出口處設(shè)洗手池;④地面、墻壁應(yīng)使用耐水耐消毒藥的材料。2022/12/1262不同級別感染性動物實驗室的要求2022/12/1127ABSL-2適用:危險度2級(個體危險中等,群體危險低)

ABSL-2是在ABSL-1的操作規(guī)范、處理方法、安全設(shè)備和實驗室要求的基礎(chǔ)上建立起來的。飼養(yǎng)室門應(yīng)保持關(guān)閉,有明顯的“生物危害”標志牌。動物飼育室要求:(1)應(yīng)分別設(shè)置動物飼育室和實驗操作室、檢疫觀察室。動物實驗宜在隔離器、IVC和生物安全柜內(nèi)進行。(2)門應(yīng)帶鎖、可自動關(guān)閉。實驗室的門應(yīng)具有可視窗。動物實驗室不宜設(shè)下水地漏。(3)應(yīng)設(shè)置恒溫恒濕空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)和空氣凈化機組,一般宜采用全新風(fēng)。2022/12/1263ABSL-22022/12/1128(4)應(yīng)配備高壓蒸汽滅菌器。(5)污物處理應(yīng)保證滿足實驗室運轉(zhuǎn)和控制污染的要求。固體廢棄物經(jīng)高壓蒸汽滅菌后交環(huán)保部門統(tǒng)一處理;污染的廢水必須經(jīng)過有效消毒。有害污染廢棄物要與一般廢棄物分開放置。(6)應(yīng)有可靠的電力供應(yīng)和應(yīng)急照明。保證緊急情況下基本設(shè)備的用電需要。(7)應(yīng)按規(guī)定設(shè)置火災(zāi)報警、消防器材以及洗眼設(shè)施。2022/12/1264(4)應(yīng)配備高壓蒸汽滅菌器。2022/12/1129ABSL-3適用:

危險度3級(個體危險高,群體危險低)三級實驗動物生物安全實驗室(ABSL-3)適用于飼養(yǎng)接種了危險度3級微生物的動物。這種病原微生物對人體、動植物或環(huán)境具有高度危險性,主要通過氣溶膠使人傳染上嚴重的甚至是致命疾病,或?qū)又参锖铜h(huán)境具有高度危害的致病因子。實驗人員需接受過專門操作訓(xùn)練,并由具有上述工作經(jīng)驗的能勝任的科學(xué)人員監(jiān)督管理。ABSL-3要有雙重密封門或氣閘室(緩沖隔離室)和外界隔離的實驗區(qū)。外部空氣通過高效過濾器送入室內(nèi),排出的空氣亦需經(jīng)高效過濾器過

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