果蠅相關(guān)遺傳性狀分析課件

實(shí)驗(yàn)性質(zhì)：設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)時(shí)間：10月中旬～11月中旬實(shí)驗(yàn)分組：3～4有關(guān)要求：10月20日前提交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方案，12月10日前提交提高實(shí)驗(yàn)報(bào)告。果蠅等生物有關(guān)性狀的遺傳學(xué)分析一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康募耙?/p>

1、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模赫莆沼写硇詫?shí)驗(yàn)材料的選取方法；掌握果蠅的性狀遺傳分析方法了解由性染色體上基因所控制的性狀分離規(guī)律；要求能獨(dú)立查閱相關(guān)資料，掌握實(shí)驗(yàn)結(jié)果的統(tǒng)計(jì)分析方法，理解孟德爾自由組合定律的基本內(nèi)容；初步掌握設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)的方法步驟。

2、實(shí)驗(yàn)要求：

3～4人一組，每組任意選擇2種類型的突變型，分析這兩種突變型之間的遺傳關(guān)系。要求每組做正反交，并進(jìn)行預(yù)假設(shè)和適合度檢驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)前要寫好設(shè)計(jì)方案，涉及原理、實(shí)驗(yàn)流程、預(yù)期結(jié)果、參考文獻(xiàn)等。

實(shí)驗(yàn)過程中：1、處女蠅的選擇要準(zhǔn)確。2、麻醉深度適當(dāng)；3、若F1性狀混雜，暫停；4、培養(yǎng)基不夠用，自行配制，注意配方和數(shù)量；5、安排人員值班，每人2d，早、晚各1h。鑰匙不得轉(zhuǎn)手。同時(shí)督促各組做好開放實(shí)驗(yàn)登記和清潔衛(wèi)生。三、實(shí)驗(yàn)用品材料：八種果蠅類型：野生型(+)、黑檀體(e)、殘翅(vg)、白眼(w)、黑體(b)、短（?。┏?m)、白眼小翅（wm）、小翅黑體（mb）藥品用具：相關(guān)試劑、用具果蠅屬節(jié)肢動(dòng)物門、昆蟲綱、雙翅目、果蠅

科、果蠅屬。

果蠅的生活史果蠅的雌雄鑒別

♀♂個(gè)體大小腹紋53腹部末端尖圓性梳無有腹片64果蠅轉(zhuǎn)入麻醉瓶方法果蠅常見突變型殘翅野生型棒眼小翅黑檀體白眼果蠅的轉(zhuǎn)移轉(zhuǎn)移果蠅至新培養(yǎng)瓶或麻醉瓶：取一新培養(yǎng)瓶，略為松動(dòng)棉塞，放置于右手側(cè)，取欲轉(zhuǎn)移果蠅培養(yǎng)瓶于左手側(cè)，以左手握住瓶頸，兩指輕扣棉塞頂部，以右手輕拍瓶底使果蠅掉落于培養(yǎng)基表面，左手拔起棉塞以兩指夾住，右手兩指夾住棉塞新培養(yǎng)瓶棉塞，并將新培養(yǎng)瓶倒扣于舊培養(yǎng)瓶上，再以左手握住兩瓶口相接處，翻轉(zhuǎn)使新培養(yǎng)瓶位于下方，然后以右手掌心輕拍舊培養(yǎng)瓶瓶底，使果蠅掉落于新培養(yǎng)瓶內(nèi)，迅速蓋上各瓶棉塞。轉(zhuǎn)移果蠅時(shí)，為避免麻醉的果蠅直接掉落于培養(yǎng)基表面而粘著于培養(yǎng)基表面致死，可將培養(yǎng)瓶橫放，將麻醉的果蠅倒于瓶壁，待其蘇醒后再將培養(yǎng)瓶正立。四、實(shí)驗(yàn)操作流程1、根據(jù)設(shè)計(jì)分取突變體2、果蠅飼養(yǎng)3、收集處女蠅。雌蠅羽化后8～12h不交配。親本和F1雌蠅都必需是處女蠅。4、按組合收集雌雄蠅雜交，貼上標(biāo)簽（組合名稱、雜交日期、小組名稱）5、6～7d后，幼蟲出現(xiàn)后，放去成蠅（記日期），種蠅要放干凈。6、3～4d后，連續(xù)觀察記錄F1性狀，并統(tǒng)計(jì)數(shù)字（麻醉后倒在白瓷板上進(jìn)行統(tǒng)計(jì)）。F1性狀若不符合設(shè)計(jì)要求，終止實(shí)驗(yàn)。7、選出5-6對F1雌雄蠅做兄妹交。8、6～7d后放飛F1代親本（記錄日期）。9、3～4d后，F(xiàn)2代成蠅出現(xiàn)，連續(xù)觀察統(tǒng)計(jì)各種性狀，F(xiàn)3代出來后停止記錄。五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析1、每組根據(jù)自己的設(shè)計(jì)將各代正反交的結(jié)果填入表格。2、將記錄結(jié)果整理，分別做X2測驗(yàn)，看其是否符合遺傳規(guī)律。F1代要多于30只，F(xiàn)2代要多于50只。記錄好放飛時(shí)間（親代和F1代）。3、對結(jié)果進(jìn)行分析。

六、注意事項(xiàng)麻醉劑的使用：乙醚有毒,揮發(fā)性強(qiáng)，使用時(shí)，要注意隨時(shí)蓋好瓶蓋，防止乙醚揮發(fā)。麻醉深度：麻醉果蠅時(shí)，要防止麻醉過度，影響繼代培養(yǎng)。

做好標(biāo)記：新轉(zhuǎn)移的培養(yǎng)瓶上需貼好標(biāo)簽，注明繼代培養(yǎng)日期及實(shí)驗(yàn)者姓名。

誘變實(shí)驗(yàn)（設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)）實(shí)驗(yàn)條件：野生型果蠅實(shí)驗(yàn)?zāi)康模翰捎梦锢矸ā⒒瘜W(xué)法、生物法等多種實(shí)驗(yàn)手段，使果蠅發(fā)生誘發(fā)突變，通過其遺傳現(xiàn)象找出突變的規(guī)律和特點(diǎn)。物理誘變劑的種類常見的物理誘變劑是各種射線，如X射線，r射線和中子，此外還有紫外線和β射線。X射線：波長為1000－100埃的電離射線，最早的誘變射線。r射線：一種波長更短的電離射線，波長0.1－1埃，60CO和137CS是目前應(yīng)用最廣的r射線源。中子：不帶電粒子，在加速器或核反應(yīng)堆中得到能量范圍極廣的中子。β射線：電子或正電子射線束，由32P和35S等放射性同位素直接發(fā)生。透過植物組織能力弱，但電離密度大。當(dāng)同位素溶液進(jìn)入組織和細(xì)胞后作為內(nèi)照射產(chǎn)生誘變作用。基本知識：誘變方法一般采用r圃，以60CO源為中心放置處理材料，以材料與60CO源中心距離和照射時(shí)間來控制輻射量。這種r圃對于誘變育種的應(yīng)用不是十分合適的，一般設(shè)置小的60CO室進(jìn)行處理。可處理植株、植株的局部、處理種子或花粉。處理花粉的優(yōu)點(diǎn)是產(chǎn)生突變不至于形成嵌合體，但花粉的存活時(shí)間短暫不易進(jìn)行處理。但花粉離體培養(yǎng)結(jié)果表明，玉米新鮮花粉可在常溫下儲(chǔ)存在液體石蠟油中2.5h，對花粉活力沒有影響。化學(xué)誘變劑種類早在1948年，Gustafsson等曾用芥子氣處理大麥獲得突變體。1967年Nilan用硫酸二乙酯處理大麥種子育成了矮稈、高產(chǎn)品種Luther。此后化學(xué)誘變劑的應(yīng)用逐漸發(fā)展起來。目前較公認(rèn)的最有效和應(yīng)用較多的是烷化劑和疊氮化物兩類。烷化劑中仍以甲基磺酸乙酯(EMS)、硫酸二乙酯(DES)和乙烯亞胺(EI)等類型的化合物應(yīng)用較多，疊氮化合物則以疊氮化鈉(NaN3)研究和應(yīng)用較多?；瘜W(xué)誘變劑的處理方法利用化學(xué)誘變劑處理種子較為普遍，其方法是直接把種子浸泡在含有化學(xué)試劑的溶液中，可以誘發(fā)各類體細(xì)胞突變。一般來說，玉米種子的處理效果較差，因?yàn)槌墒斓挠衩鬃蚜Ｅ咧芯哂蟹珠_的、已定型的雄花和雌穗原基細(xì)胞，并且在突變發(fā)生過程中容易產(chǎn)生細(xì)胞間的競爭，使突變細(xì)胞受到抑制或消亡，被排斥在生殖過程之外。化學(xué)誘變劑的處理方法用含有化學(xué)藥劑的石蠟油處理玉米花粉是目前已知的最有效的方法。以EMS為例，具體的處理方法步驟如下：用EMS與輕質(zhì)石蠟油混合，制備成濃度為0.1-0.2%EMS處理液；在適當(dāng)?shù)臅r(shí)間，收集玉米新鮮花粉，在一個(gè)帶蓋的瓶中，把花粉與EMS處理液混合；最后用一把小號毛刷，把被處理花粉涂到選好的雌穗花絲上。化學(xué)誘變劑的特點(diǎn)有：誘發(fā)突變率較高，而染色體畸變較少，并且誘變范圍廣。對處理材料損傷輕，有的化學(xué)誘變劑只限于DNA的某些特定部位發(fā)生變異。大部分有效的化學(xué)誘變劑較物理誘變劑的生物損傷大，容易引起生活力和可育性下降。生科0801-02班遺傳設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)值日安排課外開放時(shí)間：每天早上6