膽汁淤積癥的診斷治療

膽汁淤積癥診療和治療

膽汁淤積癥的診斷治療第1頁(yè)一.膽汁淤積定義Cholestasis1970年P(guān)opper和Schaffner在提出，并定義為形態(tài)學(xué)上膽汁在肝小葉第三區(qū)肝細(xì)胞、毛細(xì)膽管、Kupffer細(xì)胞積貯。2.肝細(xì)胞內(nèi)膽汁生成障礙、膽管分泌或膽汁流動(dòng)受損

PathologicBasisofDisease,7thed,ElsevierIntracytoplasmicbilepigmentsDilatedcanaliculiApoptoticsinglehepatocytesKupffercellscontainbilepigmentsBileductularproliferationDilatedbileductsDegenerationoflimitingplatesZollnerG.MechanismsofCholestasis.ClinLiverDis;12:1

膽汁淤積癥的診斷治療第2頁(yè)二.初步診療

1.臨床表現(xiàn)：黃疸、尿色深如紅茶、大便顏色變淺甚至陶土色，以及對(duì)應(yīng)伴隨癥狀如疲勞、皮膚瘙癢等2.肝功效檢驗(yàn)血清膽紅素顯著升高，以直接膽紅素為主，可初步診療膽汁淤積。3.肝功效改變中，膽汁淤積患者血清膽汁酸、堿性磷酸酶（ALP）、谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶（GGT）顯著升高。

*在嬰兒黃疸中，當(dāng)總膽紅素<85uMol/L,直接膽紅素>17.1uMol/L；或總膽紅素>85uMol/L,直接膽紅素>20%時(shí)可定義為膽汁淤積

JPediatrGastroenterlNutr；39：115-128膽汁淤積癥的診斷治療第3頁(yè)二.初步診療1.膽汁淤積患者診療方法2.PBC診療和治療3.PBC-AIH重合綜合癥診療和治療4.PSC診療和治療5.PSC-AIH重合綜合癥診療和治療6.IgG4相關(guān)性膽管炎(IAC)診療和治療7.藥品性膽汁淤積性肝病診療和治療8.遺傳性膽汁淤積性肝病診療和治療9.妊娠期膽汁淤積性肝病診療和治療10.膽汁淤積性肝病肝外表現(xiàn)治療JHepatol;51:237-67

膽汁淤積癥的診斷治療第4頁(yè)二.初步診療陶小紅中華肝臟病雜志;16(8):574膽汁淤積癥的診斷治療第5頁(yè)三.常見(jiàn)肝內(nèi)膽汁淤積疾病

1.病毒性肝炎

肝功效檢驗(yàn)以直接膽紅素增高為主，患者凝血酶原活動(dòng)度>60％或應(yīng)用維生素K肌注后1周可升至60％上。急性黃疸型肝炎，含有上述臨床表現(xiàn)，黃疸連續(xù)3周以上，可診療為急性淤膽型肝炎；而HAV和HEV引發(fā)急性肝炎，以急性淤膽型肝炎為主。慢性肝炎基礎(chǔ)上發(fā)生上述臨床表現(xiàn)者，可診療為慢性淤膽型肝炎。HBV和HCV主要引發(fā)慢性肝炎，以慢性淤膽型肝炎為主。其它非嗜肝病毒如巨細(xì)胞病毒、皰疹病毒等在兒童也可引發(fā)淤膽型肝炎。膽汁淤積癥的診斷治療第6頁(yè)三.常見(jiàn)肝內(nèi)膽汁淤積疾病

1.病毒性肝炎JHepatol；48：494–503膽汁淤積癥的診斷治療第7頁(yè)三.常見(jiàn)肝內(nèi)膽汁淤積疾病

1.病毒性肝炎JHepatol；48：494–503死亡率孕婦死亡率膽汁淤積癥的診斷治療第8頁(yè)三.常見(jiàn)肝內(nèi)膽汁淤積疾病

2.藥品性肝內(nèi)膽汁淤積

藥品性肝病(drug—inducedliverinjury

DILI)是指在使用某種或幾個(gè)藥品后．由藥品本身或其代謝產(chǎn)物引發(fā)肝臟損害。

Criteriaofdrug-inducedliverdisorders:reportofaninternationalconsensusmeeting.JHepatol1990;11:272-6.ALTDBIL(ASTALPTBIL)FDAWorkingGroup.CDER-PhRMAAASLDConference:clinicalwhitepaperondrug-inducedhepatotoxicity,November.(AccessedJanuary20,,at/cder/livertox/clinical.pdf.)膽汁淤積癥的診斷治療第9頁(yè)三.常見(jiàn)肝內(nèi)膽汁淤積疾病

2.藥品性肝內(nèi)膽汁淤積LiverinjuryALT>3XULNorAlkphos>2XULNorTBili>2XULN+elevatedALToralk“Abnormalityoflivertests”allothersR=(ALT/(ULN))(Alk/(ULN))膽汁淤積癥的診斷治療第10頁(yè)膽汁淤積癥的診斷治療第11頁(yè)三.常見(jiàn)肝內(nèi)膽汁淤積疾病

2.藥品性肝內(nèi)膽汁淤積HyZimmerman

1917-1999“Hy’sLaw”

...fordrug-inducedhepatotoxicity假如肝細(xì)胞損傷+黃疸死亡率>10%！RobertTemple,FDA,1999膽汁淤積癥的診斷治療第12頁(yè)Hy’sruleMortalityofdrug-inducedhepatocellular

jaundice:10%

Example:

臨床藥品試驗(yàn)中5/1

000患者發(fā)生

ALT>10ULN+TBil>3ULNYoucanexpect:該藥上市后，一萬(wàn)例服藥者將有5例死于肝衰竭膽汁淤積癥的診斷治療第13頁(yè)三.常見(jiàn)肝內(nèi)膽汁淤積疾病

2.藥品性肝內(nèi)膽汁淤積Medicine;35:BilALTALP藥品類(lèi)型機(jī)理雌激素半合成類(lèi)青霉素大環(huán)酯類(lèi)抗生素單純型膽汁淤積型肝炎混合型磺胺類(lèi)膽汁淤積癥的診斷治療第14頁(yè)三.常見(jiàn)肝內(nèi)膽汁淤積疾病

2.藥品性肝內(nèi)膽汁淤積JHepatol;51:237-67

膽汁淤積癥的診斷治療第15頁(yè)三.常見(jiàn)肝內(nèi)膽汁淤積疾病

2.藥品性肝內(nèi)膽汁淤積加味逍遙散

當(dāng)歸，白朮，白芍，柴胡，茯苓，炙甘草，牡丹皮，山梔子，煨薑，薄荷龍膽瀉肝湯

龍膽，黃芩，山梔子，澤瀉，木通，車(chē)前子，當(dāng)歸，生地黃，紫胡，甘草

小柴胡湯

柴胡，半夏，生薑，黃芩，大棗，人參，甘草膽汁淤積癥的診斷治療第16頁(yè)黃芩ScutellariaeRadix黃芩ScutellariaeRadix牡丹皮

MoutanRadicisCortex

加味逍遙散HepatitisinducedbytraditionalChineseherbs:Possibletoxiccomponents.KaneJA.(Gut,1995)膽汁淤積癥的診斷治療第17頁(yè)龍膽

GentianaeRadix龍膽瀉肝湯HepatitisinducedbytraditionalChineseherbs:Possibletoxiccomponents.

KaneJA.(Gut,1995)膽汁淤積癥的診斷治療第18頁(yè)三.常見(jiàn)肝內(nèi)膽汁淤積疾病

2.藥品性肝內(nèi)膽汁淤積膽汁淤積癥的診斷治療第19頁(yè)三.常見(jiàn)肝內(nèi)膽汁淤積疾病

2.藥品性肝內(nèi)膽汁淤積7年前入讀紐紐卡斯?fàn)柎髮W(xué)工程系25歲博士王玲因腹痛服食中藥，結(jié)果不適送院，并很快陷入昏迷，肝臟和其它器官功效停頓，其后證實(shí)不治，年8月死亡。即使醫(yī)生認(rèn)可極難分析死者服食是什么藥，但醫(yī)生懷疑是含有止痛效果中藥「金不換」。紐卡斯?fàn)柺姓d驗(yàn)尸官最終止論是：不明原因造成肝臟衰竭并造成多臟器衰竭而亡，屬于意外。膽汁淤積癥的診斷治療第20頁(yè)三.常見(jiàn)肝內(nèi)膽汁淤積疾病

2.藥品性肝內(nèi)膽汁淤積NEnglJMed;349:474-85.SMZ，8月后膽汁淤積癥的診斷治療第21頁(yè)三.常見(jiàn)肝內(nèi)膽汁淤積疾病

2.藥品性肝內(nèi)膽汁淤積影象學(xué)脂肪肝包塊觀察/活檢病毒本身免疫性缺血性代謝性膽汁淤積癥的診斷治療第22頁(yè)RUCAM

1993年．Danan等將國(guó)際共識(shí)意見(jiàn)診療標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行量化評(píng)分。稱(chēng)為RUCAM(RousselUclafcausalityassessment)量化評(píng)分系統(tǒng)。JClinEpidemiol1993;46:1323-1330膽汁淤積癥的診斷治療第23頁(yè)最終判斷：>17確定；14~17可能性大10～13有可能6～9可能性小<6分除外。膽汁淤積癥的診斷治療第24頁(yè)三.常見(jiàn)肝內(nèi)膽汁淤積疾病

2.藥品性肝內(nèi)膽汁淤積膽汁淤積癥的診斷治療第25頁(yè)三.常見(jiàn)肝內(nèi)膽汁淤積疾病

2.藥品性肝內(nèi)膽汁淤積TWOGOLDENRULES1.AlwaysconsiderthepossibilityofDILI2.ImmediatelywithdrawallsuspecteddrugsinseverecasesDILI:難以避、難以預(yù)測(cè)、難以診療Avoidmostmishaps膽汁淤積癥的診斷治療第26頁(yè)三.常見(jiàn)肝內(nèi)膽汁淤積疾病

3.原發(fā)性膽汁性肝硬化（PrimaryBiliaryCirrhosis，PBC）

Hepatology;31:1005-1013影象學(xué)膽道正常Hepatology;40:291-308膽汁淤積癥的診斷治療第27頁(yè)三.常見(jiàn)肝內(nèi)膽汁淤積疾病

3.原發(fā)性膽汁性肝硬化（PrimaryBiliaryCirrhosis，PBC）臨床分四期：臨床前期、無(wú)癥狀期、癥狀期、肝功效不全期。陶小紅中華肝臟病雜志;18(8):326膽汁淤積癥的診斷治療第28頁(yè)三.常見(jiàn)肝內(nèi)膽汁淤積疾病

3.

原發(fā)性膽汁性肝硬化（PrimaryBiliaryCirrhosis，PBC）NEnglJMed1996;335:1570陶小紅中華肝臟病雜志;18(8):326膽汁淤積癥的診斷治療第29頁(yè)三.常見(jiàn)肝內(nèi)膽汁淤積疾病

3.

原發(fā)性膽汁性肝硬化（PrimaryBiliaryCirrhosis，PBC）

Hepatology;40:291-308陶小紅中華肝臟病雜志;18(5):326膽汁淤積癥的診斷治療第30頁(yè)三.常見(jiàn)肝內(nèi)膽汁淤積疾病

3.

原發(fā)性膽汁性肝硬化（PrimaryBiliaryCirrhosis，PBC）

近95%PBC患者AMA（+），特異性和敏感性達(dá)90%以上。常規(guī)體檢中一旦發(fā)覺(jué)ALP增高，檢驗(yàn)AMA，歐洲當(dāng)前對(duì)無(wú)癥狀期PBC診療已到達(dá)60%。5-10%PBC患者AMA(-)，又稱(chēng)本身免疫性膽管炎（AutoimmuneCholangitis，AIC）或本身免疫性膽管?。╝utoimmunecholangiopathy），需檢驗(yàn)ANA和病理檢驗(yàn)。當(dāng)前認(rèn)為是PBC一個(gè)變異形式。

近50%PBC患者ANA和ASMA（+）.陶小紅中華肝臟病雜志;16(8):574膽汁淤積癥的診斷治療第31頁(yè)三.常見(jiàn)肝內(nèi)膽汁淤積疾病

3.

原發(fā)性膽汁性肝硬化（PrimaryBiliaryCirrhosis，PBC）①AMA陰性；②都有ANA和/或SMA陽(yáng)性；③需活檢，組織學(xué)特征符合膽汁淤積；④本病除AMA陰性外，其它特征如年紀(jì)、性別、臨床癥狀、組織學(xué)、病程及治療轉(zhuǎn)歸與AMA陽(yáng)性PBC患者相同。

Hepatology;40:291

陶小紅中華肝臟病雜志;18(8):326膽汁淤積癥的診斷治療第32頁(yè)三.常見(jiàn)肝內(nèi)膽汁淤積疾病

4.

原發(fā)性硬化性膽管炎（Primarysclerosingcholangitis，PSC）

有遺傳易感性，好發(fā)于中年男性。PSC抗中性粒細(xì)胞抗體核周型（p-ANCA）陽(yáng)性率達(dá)80%，但特異性較差。ERCP見(jiàn)串珠樣改變?nèi)允窃\療PSC金標(biāo)準(zhǔn)，現(xiàn)多采取無(wú)創(chuàng)傷性MRI膽管成像，敏感性和特異性達(dá)80%以上。Cholangiogramshowingbeadinganddilatationoftheintraandextrahepaticbileducts-thediagnosticfeaturesofprimarysclerosingcholangitis(PSC).JHepatol;51:237-67

膽汁淤積癥的診斷治療第33頁(yè)三.常見(jiàn)肝內(nèi)膽汁淤積疾病

4.

原發(fā)性硬化性膽管炎（Primarysclerosingcholangitis，PSC）膽汁淤積癥的診斷治療第34頁(yè)三.常見(jiàn)肝內(nèi)膽汁淤積疾病

4.

原發(fā)性硬化性膽管炎（Primarysclerosingcholangitis，PSC）WorldJGastroenterol;14:3338潰瘍性結(jié)腸炎炎癥性腸病膽汁淤積癥的診斷治療第35頁(yè)AIH-PBC重合綜合癥診療標(biāo)準(zhǔn)該標(biāo)準(zhǔn)中AIH三條：①轉(zhuǎn)氨酶ALT>5倍；②IgG>2倍或抗SMA陽(yáng)性；③組織活檢有中-重度符合AIH炎癥。PBC三條：①ALP>2倍；②AMA陽(yáng)性；③組織活檢有膽管損傷。AIH三條中兩條符合，PBC三條中兩條符合即可診療AIH-PBC型重合綜合癥。

三.常見(jiàn)肝內(nèi)膽汁淤積疾病

5.

重合綜合癥（PBC-AIH型）Hepatology;40:291陶小紅中華肝臟病雜志;16(8):574JHepatol;51:237膽汁淤積癥的診斷治療第36頁(yè)Floreani等所用標(biāo)準(zhǔn)：①用1999年國(guó)際AIH組修改評(píng)分法，AIH>15分；②ANA或ASMA陽(yáng)性，滴度≥1：40；③肝組織病理有片狀壞死、玫瑰花結(jié)、中到重度匯管炎癥或小葉間炎癥。診療PSC-AIH須符合以上三條標(biāo)準(zhǔn)同時(shí)有PSC影象改變。三.常見(jiàn)肝內(nèi)膽汁淤積疾病

6.

重合綜合癥（PSC-AIH型）AmJGastroenterol;100:1516-1522JHepatol;51:237-67

Hepatology;40:291膽汁淤積癥的診斷治療第37頁(yè)三.常見(jiàn)肝內(nèi)膽汁淤積疾病

7.Ig4相關(guān)性膽管炎（IAC）

最近，相關(guān)IAC診療描述以下：假如一個(gè)患者肝內(nèi)、近端肝外和/或胰內(nèi)膽管狹窄，就可診療為IAC(1)最近接收胰腺癌/膽道外科手術(shù)或胰腺腺體活檢，發(fā)覺(jué)有本身免疫性胰腺炎特征（AIP）/IAC;或(2)含有經(jīng)典AIP影像學(xué)改變和IgG4升高;或(3)符合以下標(biāo)準(zhǔn)中兩項(xiàng)（IgG4升高；胰腺影像學(xué)表現(xiàn)；其它器官改變包含硬化性腮腺炎、后腹膜纖維化或胃腸道受累和腹部淋巴結(jié)腫大及IgG4陽(yáng)性漿細(xì)胞浸潤(rùn)；膽管活檢每高倍視野中IgG4陽(yáng)性漿細(xì)胞>10），而且予類(lèi)固醇激素治療4周后支架拆除無(wú)阻塞性膽汁淤積復(fù)發(fā)，血清肝試驗(yàn)<2×ULN及IgG4和CA19-9下降。盡管尚沒(méi)有一個(gè)獨(dú)立IAC患者隊(duì)列交叉研究驗(yàn)證，該推薦性標(biāo)準(zhǔn)仍可作為暫時(shí)性指南。膽汁淤積癥的診斷治療第38頁(yè)四.其它肝內(nèi)膽汁淤積妊娠膽汁淤積遺傳性膽汁淤積癥器官移植排異反應(yīng)性膽汁淤積毒血癥(sepsi)膽汁淤積癥酒精性膽汁淤積術(shù)后膽汁淤積胃腸外營(yíng)養(yǎng)(TPN)性膽汁淤積癥JHepatol;51:237-67

膽汁淤積癥的診斷治療第39頁(yè)四.其它肝內(nèi)膽汁淤積膽汁淤積癥的診斷治療第40頁(yè)

五.治療病因治療（病毒、藥品、AIH，酒精等）藥品治療（膽汁淤積特殊藥品）繼發(fā)癥狀治療（瘙癢、骨質(zhì)疏松、脂溶性維生素缺乏）膽汁淤積癥的診斷治療第41頁(yè)五.治療（特殊藥品）ClinLiverDis;12:53–80JHepatol;46:365–371膽汁淤積癥的診斷治療第42頁(yè)五.治療（UDCA）AmJGastroenterol;101:1529–153824m膽汁淤積癥的診斷治療第43頁(yè)五.治療（UDCA）PBC患者，包含無(wú)癥狀者，應(yīng)該長(zhǎng)久服用UDCA（15mg/kg/d）。早期PBC患者以及對(duì)UDCA應(yīng)答良好PBC患者（治療后一年評(píng)定）服用UDCA有良好長(zhǎng)久療效。UDCA治療一年后應(yīng)答良好當(dāng)前被定義為血清膽紅素≤1mg/dL(17μmol/L)、AP≤3×ULN、AST≤2×ULN（巴黎標(biāo)準(zhǔn)），或者AP降低大于40%或降至正常值（巴塞羅那標(biāo)準(zhǔn)）(II-2/B1)。當(dāng)前怎樣治療對(duì)UDCA應(yīng)答不完全PBC患者還沒(méi)有達(dá)成共識(shí)。推薦在非肝硬化PBC患者(1-3期)聯(lián)適用UDCA和布地奈德(6–9mg/d)。應(yīng)加強(qiáng)開(kāi)展關(guān)于此種或其它聯(lián)適用藥深入研究。強(qiáng)烈推薦晚期PBC行肝移植。血清膽紅素超出6mg/dL(103mol/L)，或者生活質(zhì)量下降失代償肝硬化，或者因?yàn)殡y治性腹水、自發(fā)性細(xì)菌性腹膜炎、復(fù)發(fā)性靜脈曲張破裂出血、肝性腦病、肝細(xì)胞癌預(yù)計(jì)生命不足一年均可視為晚期PBC。JHepatol;51:237-67

Hepatology;40:291膽汁淤積癥的診斷治療第44頁(yè)五.治療（SAMe）膽汁淤積癥的診斷治療第45頁(yè)五.治療（SAMe）腺苷蛋氨酸

Na+/K+/ATP酶胱硫醚半胱氨酸S-腺苷高胱氨酸谷胱甘肽牛黃酸硫酸鹽

腺苷絲氨酸腺苷蛋氨酸合成酶半胱氨酸合成酶ATP磷酸CH3轉(zhuǎn)甲基反應(yīng)轉(zhuǎn)硫化通路蛋氨酸質(zhì)膜磷脂甲基化質(zhì)膜流動(dòng)加速膽汁流動(dòng)膽汁淤積癥的診斷治療第46頁(yè)五.治療（SAMe）78例ICP患者25receivedSAMe500mgivbid26receivedUDCA3X250mgqd27receivedSAMe+UDCA

瘙癢癥狀在三組中均顯著改進(jìn)。與SAMe組相比，UDCA組和聯(lián)合治療組血轉(zhuǎn)氨酶和膽汁酸顯著改進(jìn)（P<0.01)聯(lián)合治療組和UDCA組相比，聯(lián)合治療組血轉(zhuǎn)氨酶和膽汁酸改進(jìn)約顯著(borderlinesignificance).

RandomizedprospectivecomparativestudyofursodeoxycholicacidandS-adenosyl-L-methionineinthetreatmentofintrahepaticcholestasisofpregnancyJPerinatMed.;34(5):383-91.膽汁淤積癥的診斷治療第47頁(yè)口服UDCA治療ICP12年隨訪32例ICP患者，表現(xiàn)皮膚瘙癢、BS和ALT增高，34周時(shí)口服UDCA(15mg/kg/day)最少3周，與16例對(duì)攝影比，全部病例隨訪至生產(chǎn)，新生兒隨訪3月。結(jié)果：UDCA皮膚瘙癢顯著減輕(P<0.05),膽紅素、ALT、BS顯著降低(P<0.05)。

UDCA治療組，生產(chǎn)時(shí)間(>or=37周)65.7%，對(duì)照組12.5%(P<0.01).出生嬰兒體重治療組平均多500克，(2882+/-582vs2385+/-582;P<0.01)。3個(gè)月后嬰兒間無(wú)差異。對(duì)口服UDCA母親1-12年隨訪中，均無(wú)異常。LiverInt.；25(3):467-8.

膽汁淤積癥的診斷治療第48頁(yè)膽舒膠囊含有單一有效組份

——薄荷素油薄荷作為一個(gè)傳統(tǒng)中藥，藥出《雷公炮炙論》

（南北朝，公元420。～479）近1600年19世紀(jì)早期，《英國(guó)內(nèi)科及外科辭典》中也明確描述了薄荷素油含有“緩解惡心、減輕腹痛、腹脹及腸絞痛”功效；上個(gè)世紀(jì)60年代德國(guó)將薄荷定為藥用植物：絡(luò)活可（膽道疾病用藥）1898年出版《美國(guó)金氏藥典》中記載：它有排除胃腸氣體、解除痙攣以及止吐作用；FDAgrantedtheoilaso-called‘‘generallyrecognizedassafe’’(GRAS)status(Foodanddrugs,1998).膽汁淤積癥的診斷治療第49頁(yè)Effectoffibre,antispasmodics,andpeppermintoilinthetreatmentofIBS:systematicreviewandmeta-analysisBMJ;337:a2313膽汁淤積癥的診斷治療第50頁(yè)IBSinAustraliangeneralpractice

AustralianFamilyPhysician;35(11):840膽汁淤積癥的診斷治療第51頁(yè)薄荷素油鈣通道阻滯研究——膜片鉗技術(shù)膜片鉗技術(shù)利用微玻管電極（膜片電極或膜片吸管）來(lái)測(cè)量各種通道電流,其測(cè)量值可到達(dá)皮安級(jí)(pA,10-12A)。采取膜片鉗技術(shù)，Hawthorn發(fā)覺(jué)薄荷油可有效地松弛離體胃腸道平滑肌組織(oddi)，其機(jī)理是：膽汁淤積癥的診斷治療第52頁(yè)①薄荷素油中主要成份薄荷醇有效降低電壓依賴(lài)L型鈣通道結(jié)合鍵，抑制神經(jīng)元去極化造成Ca2+離子攝取降低②能有效地阻滯Ca2+離子進(jìn)入細(xì)胞③發(fā)覺(jué)薄荷油抑制電壓依賴(lài)型Ca2+離子電流，與薄荷油濃度展現(xiàn)劑量依賴(lài)關(guān)系

薄荷素油調(diào)整Oddi括約肌藥理研究膽汁淤積癥的診斷治療第53頁(yè)JournalofEthnopharmacology;130:433–436AntispasmodiceffectofMenthapiperitaessentialoilontrachealsmoothmuscleofrats膽汁淤積癥的診斷治療第54頁(yè)Acholereticactionhastraditionallybeenascribedtopeppermintoil,inkeepingwiththeoccasionaluseofmentholinthetreatmentofgallstones(Leuschneretal.,1988).Increasesinbileproductionof1.3–2.4-foldwererecorded(MansandPentz,1987)afteroraldosesof0.1–1.0g/kginmalerats.Trabaceetal.(1993)founddose-andtime-dependentcholereticeffectsofpeppermintoilandmentholinanesthetizedratsandusedtheseasstandardsfortestingotheressentialoils.Themechanismofactionunderlyingtheobservedcholereticactivityofmentholorotherconstituentsofpeppermintoilisnotclearlyunderstood,butmayresultfromthemarkedbiliaryoutputofmetabolizedmenthol(MansandPentz,1987).膽汁淤積癥的診斷治療第55頁(yè)Effectsofpeppermintoilontotalbilesecretioninrats

（n=10）GroupBileSecretion(ml)Increaseinbilesecretion（%）Beforedrug30min60min120minPO0.24±0.050.32±0.08**0.64±0.07**0.94±0.07**33.3**##Saline0.25±0.070.22±0.060.45±0.090.66±0.08-12UDCA0.27±0.050.29±0.06**0.57±0.08*0.85±0.1*7.4膽汁淤積癥的診斷治療第56頁(yè)原料（膽固醇+LDL）①（LDLR）膽酸

CYP8B1②替換路徑27-羥膽固醇

3，7-二羥-5-膽固醇酸7-羥-3-酮-4-膽烷酸

3，7-二羥-5-膽烷酸

鵝脫氧膽酸

3HSD

CYP27A1，CYP7B13，7-二羥-5-膽烷酸

經(jīng)典路徑3，7，12-三羥-5-膽烷酸

7-4-膽固醇烯-3-酮

7-羥膽固醇

膽固醇

CYP7A13HSD③FXR①原材料攝入步驟LDLR②膽酸合成關(guān)鍵蛋白CYP7A1CYP27A1③膽酸轉(zhuǎn)運(yùn)關(guān)鍵蛋白FXR

經(jīng)過(guò)上調(diào)膽酸合成關(guān)健基因表示，促進(jìn)膽汁合成111關(guān)鍵蛋白膽汁淤積癥的診斷治療第57頁(yè)1、細(xì)胞培養(yǎng)及藥品處理…..HepG2細(xì)胞常規(guī)維持培養(yǎng)在含5%小牛血清DMEM培養(yǎng)基中，試驗(yàn)時(shí)以9×104/孔細(xì)胞密度接種到6孔細(xì)胞培養(yǎng)板，每孔加入1.5mL培養(yǎng)基，培養(yǎng)16～20h，加入不一樣濃度(50-200g/mL)薄荷素油，分別處理1、2、4、8、24h，搜集細(xì)胞用于RNA制備。2、RT-PCR分析CYP7A1基因表示水平TRIZol提取細(xì)胞總RNA，采取RT-PCR分析檢測(cè)細(xì)胞CYP7A1和FXR基因表示水平。（CYP7A1和FXR以及內(nèi)對(duì)照引物均由上海捷瑞生物有限企業(yè)合成）。采取一步法進(jìn)行RT-PCR擴(kuò)增，擴(kuò)增條件均為：50℃，30min；94℃，2min；94℃10s、55℃10s、72℃10s，大約25-30個(gè)循環(huán)；72℃，5min。擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)1.5%瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)。3、數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理結(jié)果以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（