人感染H7N9禽流感病毒病原學(xué)特點(diǎn)及標(biāo)本采集實(shí)驗(yàn)室檢測

人感染H7N9禽流感病毒病原學(xué)特點(diǎn)及標(biāo)本采集實(shí)驗(yàn)室檢測第一頁，共37頁。目錄人感染H7N9禽流感病毒病原學(xué)特點(diǎn)人感染H7N9禽流感病毒標(biāo)本采集及實(shí)驗(yàn)室檢測策略人感染H7N9禽流感病例診斷程序人感染H7N9禽流感診療方案（2013年第2版）

病原學(xué)檢測的解析第二頁，共37頁。人感染H7N9禽流感病毒病原學(xué)特點(diǎn)

第三頁，共37頁。流感病毒株H1N1H2N2H3N2流感大流行造成的死亡人數(shù)第一次世界大流行

2000－4000萬

（第一次世界大戰(zhàn)戰(zhàn)亡人數(shù)<1000萬）第二次世界大流行200萬第三次世界大流行70-100萬200919571968191839Years11Years41Years流感大流行和流感病毒的變異CNIC甲型H1N1第四次世界大流行2010年2月28日，至少16455人第四頁，共37頁。流感病毒EMImage:fromLindaStannardDeptofMedicalMicrobiologyUniversityofCapeTownSketchmap:fromPaulDigardDeptPathologyUniversityofCambridgeNIC第五頁，共37頁。第六頁，共37頁。神經(jīng)氨酸酶血凝素RNAM2蛋白(onlyontypeA）)流感病毒表面蛋白第七頁，共37頁。分類和命名

根據(jù)分類學(xué)分類流感病毒屬正粘病毒科流感病毒屬。根據(jù)宿主分類為人流感病毒,禽流感?。ˋIV）,豬流感等根據(jù)流感病毒核蛋白（NP）和基質(zhì)蛋白（MS）抗原性的不同，將其分為A、B、C三個(gè)血清型

第八頁，共37頁。根據(jù)流感病毒血凝素HA和神經(jīng)氨酸酶NA抗原性的差異，又可將其分為不同的亞型。目前，A型流感病毒有16種特異的HA和9種特異的NA。人A型流感病毒：H1N1、H2N2、H3N2人禽流感病毒：H1N1、H5N1、H9N2、H7N2、H7N7、H7N3、H7N9、H9N2、H10N7禽流感病毒：H5N1、H5N2、H5N8、H5N9、H7N3、H7N4、H7N7、H7N9豬流感病毒：H1N1、H1N2、H3N2..第九頁，共37頁。第十頁，共37頁。第十一頁，共37頁。第十二頁，共37頁。病例1病例2病例3第十三頁，共37頁。HPAIH7N7、H7N3、H7N1LPAIH7Nx、H7N2、H7N3、H7N1、H7N9HPAIH7N7、H7N3、H7N4HPAIH7N3（Pakistan）

HPAIH7N3LPAIH7N9HPAIH7N3LPAIH7N9禽中暴發(fā)的H72006年前暴發(fā)的均為HPAIH7歐洲：意大利、英國、德國、比利時(shí)、荷蘭、丹麥、挪威、捷克、西班牙、瑞典LPAIH7N8、H7N9（Korea）LPAIH7N9第十四頁，共37頁。近年來人感染禽流感病毒病例病毒亞型病原來源時(shí)間/國家病例數(shù)/臨床表現(xiàn)A/H7N7鷗1980/美國3/結(jié)膜炎A/H7N7鴨1996/英國1/結(jié)膜炎A/H5N1禽1997/香港18/ILI，肺炎A/H9N2雞1998/中國廣東5/ILI，肺炎A/H9N2禽1999/香港2/ILIA/H7N2禽2002/北美（Virginia）1/ILI，血清學(xué)診斷A/H9N2禽2003/香港1/ILIA/H5N1禽2003/香港2/ILI，肺炎A/H7N7禽2003/荷蘭89/結(jié)膜炎、ILI、肺炎;1名死亡病例A/H5N1禽2003至今,15個(gè)國家602/ILI,肺炎A/H7N2(NY/107)來源不清2003/北美(NewYork)，1/肺炎A/H7N3禽2004/加拿大2/結(jié)膜炎、ILI;1名LPAI；1名HPAIA/H5N2禽2005/日本(Ibaraki)13/無臨床癥狀，血清學(xué)診斷A/H7N2禽2007/英國(Wales)1/結(jié)膜炎、ILIA/H9N2來源不清2007/香港1/ILIA/H10N7鴨2004/埃及(Ismaillia)2/ILIA/H10N7來源于疫區(qū)的鳥2010/悉尼(NewSouthWales)7/上呼吸道感染癥狀、結(jié)膜炎CDC.AvianInfluenzaAVirusInfectionsofHumans..血清學(xué)證據(jù)：人感染H4,H5,H6,H7,H9,H10,H11AIVs.第十五頁，共37頁。H7感染人（>100人）美國、英國、意大利、荷蘭、加拿大HPAILPAI19591/USAH7N719771/USAH7N71979-19804/USAH7N719961/EnglandH7N720021/USAH7N220031/USAH7N27/ItalyH7N389/NetherlandsH7N71died20041/CanadaH7N31/CanadaH7N320061/NorfolkH7N320074/WalesH7N22/MexicoH7N3第十六頁，共37頁。H7N9病毒共25株均為LPAI無感染人病例亞洲：7株均來自野禽5株—韓國2株—蒙古第十七頁，共37頁。中國地區(qū)H7AIVA/Baer'spochard/HuNan/414/2010(H7N1)A/chicken/Hebei/1/2002(H7N2)A/duck/Guangdong/1/1996(H7N3)A/duck/Hubei/126/1985(H7N8)A/duck/Jiangxi/1742/03(H7N7)A/duck/Jiangxi/1760/03(H7N7)A/duck/Jiangxi/1786/03(H7N7)A/duck/Jiangxi/1814/03(H7N7)A/duck/Nanchang/1904/1992(H7N1)A/duck/Nanchang/1944/92(H7N1)A/duck/Zhejiang/10/2011(H7N3)A/duck/Zhejiang/12/2011(H7N3)A/duck/Zhejiang/2/2011(H7N3)A/magpie-robin/China/28710/93(H7)亞型：H7N1,H7N2,H7N3,H7N7,H7N8野禽居多LPAI第十八頁，共37頁。核酸檢測第十九頁，共37頁。從3個(gè)病例中分離到3株病毒A/Shanghai/1/2013(H7N9)A/Shanghai/2/2013(H7N9)A/Anhui/1/2013(H7N9)病毒分離第二十頁，共37頁。三株H7N9病毒為同一基因類型PB2PB1HANPNAMPNSPA6個(gè)內(nèi)部片段來源于H9N2序列測定第二十一頁，共37頁。序列特點(diǎn)耐藥性分析

對烷胺類藥物是耐藥的，即M2蛋白25-42位氨基酸發(fā)生S31N突變。HA連接肽分析

HA蛋白339位連接肽由單個(gè)（PKGRGLFG）堿性氨基酸組成，根據(jù)既往研究，具有這種序列特點(diǎn)的病毒對禽類呈低致病性。受體結(jié)合位點(diǎn)及其它重要位點(diǎn)分析

Shanghai/1/2013的HA蛋白226-228位氨基酸屬于禽源受體結(jié)合位點(diǎn)（為QSG）。Shanghai/2/2013和Anhui/1/2013的HA蛋白226-228位氨基酸受體結(jié)合位點(diǎn)（為LSG）PB2蛋白627位氨基酸為K，提示致病性增強(qiáng)。NS1蛋白92位氨基酸為D，與禽流感病毒一致，而與人流感病毒不同。第二十二頁，共37頁。一、標(biāo)本采集、轉(zhuǎn)送和檢測

（一）病例標(biāo)本采集采集人：醫(yī)療機(jī)構(gòu)應(yīng)當(dāng)及時(shí)采集病例的相關(guān)臨床標(biāo)本。標(biāo)本類型：包括病人的上呼吸道標(biāo)本（包括咽拭子、鼻拭子、鼻咽抽取物、咽漱液和鼻洗液）、下呼吸道標(biāo)本（如氣管吸取物、肺洗液、肺組織標(biāo)本）和血清標(biāo)本等。如病人死亡，應(yīng)當(dāng)盡可能說服家屬同意尸檢，及時(shí)進(jìn)行尸體解剖，采集組織（如肺組織、氣管、支氣管組織）標(biāo)本。第二十三頁，共37頁。

人感染H7N9禽流感病毒標(biāo)本采集及實(shí)驗(yàn)室檢測策略第二十四頁，共37頁。采集時(shí)間：應(yīng)當(dāng)盡量采集病例發(fā)病早期的呼吸道標(biāo)本（尤其是下呼吸道標(biāo)本）和發(fā)病7天內(nèi)急性期血清以及間隔2-4周的恢復(fù)期血清。標(biāo)本分裝：為避免標(biāo)本反復(fù)凍融，保證標(biāo)本檢測質(zhì)量。采集的呼吸道標(biāo)本每份分為3管，每管不少于1ml血清標(biāo)本每份分為2管，每管不少于0.5ml。并填寫不明原因肺炎病例/聚集性病例標(biāo)本送檢表第二十五頁，共37頁。

（二）密切接觸者標(biāo)本采集

采集人：疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)負(fù)責(zé)標(biāo)本采集和實(shí)驗(yàn)室檢測工作。標(biāo)本類型：應(yīng)當(dāng)采集病例的所有密切接觸者的雙份血清標(biāo)本（開始實(shí)施醫(yī)學(xué)觀察時(shí)和間隔2-4周后）；當(dāng)密切接觸者出現(xiàn)急性呼吸道癥狀時(shí)還要采集咽拭子，送當(dāng)?shù)貒壹壛鞲芯W(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行檢測。第二十六頁，共37頁。（二）標(biāo)本轉(zhuǎn)送和檢測

1.H7N9禽流感病毒實(shí)驗(yàn)室活動(dòng)和樣本運(yùn)輸按照《人間傳染的病原微生物名錄》中高致病性禽流感病毒進(jìn)行管理。病例的臨床標(biāo)本采集后，縣級疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)和病例收治的醫(yī)療機(jī)構(gòu)要密切配合，按照生物安全的相關(guān)規(guī)定進(jìn)行包裝，在24小時(shí)內(nèi)送到當(dāng)?shù)亓鞲斜O(jiān)測網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行檢測。第二十七頁，共37頁。2.當(dāng)?shù)亓鞲斜O(jiān)測網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室收到標(biāo)本后24小時(shí)內(nèi)，立即對呼吸道標(biāo)本開展甲、乙型流感病毒通用引物H5、H7亞型的檢測。若當(dāng)?shù)亓鞲斜O(jiān)測網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室檢測結(jié)果為H5、H7核酸檢測陽性時(shí)，應(yīng)當(dāng)于24小時(shí)內(nèi)將其中2管呼吸道相關(guān)原始標(biāo)本分別送省級疾控中心流感網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室和國家流感中心。具備相應(yīng)生物安全條件的網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室可開展病毒分離，并將分離的毒株按要求及時(shí)送國家流感中心。第二十八頁，共37頁。3.若當(dāng)?shù)亓鞲斜O(jiān)測網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室檢測結(jié)果為甲型流感和乙型流感通用引物均陰性時(shí)，應(yīng)當(dāng)立即將1管原始呼吸道標(biāo)本送省級疾控中心。省級疾控中心收到標(biāo)本后，應(yīng)當(dāng)立即對其中1管進(jìn)行SARS、新型冠狀病毒等相關(guān)病原體的檢測，另1管送國家流感中心。4.當(dāng)?shù)亓鞲斜O(jiān)測網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室將采集的血清標(biāo)本分別送省級疾控中心和國家流感中心開展病原體的抗體檢測。第二十九頁，共37頁。二、標(biāo)本檢測結(jié)果反饋和報(bào)告開展實(shí)驗(yàn)室檢測的疾控中心要及時(shí)將標(biāo)本信息和檢測結(jié)果信息報(bào)送國家流感中心，并在24小時(shí)內(nèi)由網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室所在疾控中心逐級反饋到病例所在醫(yī)院。當(dāng)標(biāo)本為SARS、禽流感（H5、H7）、新型冠狀病毒或其他新型病原體檢測陽性時(shí)，檢測結(jié)果應(yīng)當(dāng)及時(shí)報(bào)告給同級衛(wèi)生行政部門。第三十頁，共37頁。

人感染H7N9禽流感病例診斷程序第三十一頁，共37頁。一、診斷程序

各省首例人感染H7N9禽流感病例由發(fā)生地省級衛(wèi)生行政部門組織省級臨床專家組結(jié)合病例的流行病學(xué)史、臨床表現(xiàn)、省級疾病預(yù)防控制中心檢測結(jié)果及中國疾病預(yù)防控制中心實(shí)驗(yàn)室復(fù)核檢測結(jié)果等，按照診療方案進(jìn)行診斷，由省級衛(wèi)生行政部門報(bào)告國家衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會(huì)。各省后續(xù)病例的診斷仍按上述程序進(jìn)行，但實(shí)驗(yàn)室診斷依據(jù)可不需要中國疾病預(yù)防控制中心實(shí)驗(yàn)室的復(fù)核檢測結(jié)果。第三十二頁，共37頁。二、實(shí)驗(yàn)室檢測程序

人感染H7N9禽流感疑似病例先由各省（區(qū)、市）的國家流感監(jiān)測網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室和具備PCR實(shí)驗(yàn)室檢測條件的醫(yī)療機(jī)構(gòu)進(jìn)行標(biāo)本的檢測。不具備檢測條件的地區(qū)，在確保生物安全的情況下，按照規(guī)定將標(biāo)本送鄰近具備相應(yīng)條件和資格認(rèn)證的國家流感監(jiān)測網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室和具備PCR實(shí)驗(yàn)室檢測條件的醫(yī)療機(jī)構(gòu)進(jìn)行檢測。第三十三頁，共37頁。各?。▍^(qū)、市）首例人感染H7N9禽流感疑似病例的原始標(biāo)本應(yīng)在確保生物安全的情況下，送中國疾病預(yù)防控制中心進(jìn)行復(fù)檢確認(rèn)。后續(xù)發(fā)生的病例，各地應(yīng)當(dāng)將其原始標(biāo)本和病毒分離物，在確保生物安全的情況下，按照規(guī)定及時(shí)送中國疾病預(yù)防控制中心。各省（區(qū)、市）衛(wèi)生行政部門應(yīng)當(dāng)將具備PCR實(shí)驗(yàn)室檢測條件的醫(yī)療機(jī)構(gòu)納入人感染H7N9禽流感檢測機(jī)構(gòu)，開展標(biāo)本檢測工作，并作為診斷的實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。第三十四頁，共37頁。人感染H7N9禽流感診療方案（2013年第2版）

病原學(xué)檢測的解析第三十五頁，共37頁。病原學(xué)及相關(guān)檢測

抗病毒治療之前必須采集呼吸