有機化學基礎(chǔ)實驗操作

1、Spanning Drug Development & the Globe BioDuro C實驗技能（一）實驗技能（一） 純化、薄層色譜純化、薄層色譜Spanning Drug Development & the Globe BioDuro C第一部分第一部分 實驗技能實驗技能 這部分針對保諾的實際情況介紹一些實這部分針對保諾的實際情況介紹一些實用的實驗技能，主要包括產(chǎn)品純化、薄用的實驗技能，主要包括產(chǎn)品純化、薄層色譜、柱層析、無水無氧操作、催化層色譜、柱層析、無水無氧操作、催化氫化和色譜分析六個部分。這部分內(nèi)容氫化和色譜分析六個部分。這部分內(nèi)容是做是做Reference Standard項

2、目的基礎(chǔ)，項目的基礎(chǔ)，應(yīng)認真掌握。應(yīng)認真掌握。Spanning Drug Development & the Globe BioDuro C1-1 產(chǎn)品純化產(chǎn)品純化 當有機合成反應(yīng)完成后，如何將產(chǎn)物從當有機合成反應(yīng)完成后，如何將產(chǎn)物從反應(yīng)體系中分離出來就成了最重要的事反應(yīng)體系中分離出來就成了最重要的事情了，也就是說需要進行產(chǎn)品純化，產(chǎn)情了，也就是說需要進行產(chǎn)品純化，產(chǎn)品純化是有機合成工作中非常重要的一品純化是有機合成工作中非常重要的一環(huán)。環(huán)。Spanning Drug Development & the Globe BioDuro C一、一、 柱色譜柱色譜 柱色譜的分離原理是利用混合物中各個柱

3、色譜的分離原理是利用混合物中各個成分的物理化學性質(zhì)的差別，當選擇某一成分的物理化學性質(zhì)的差別，當選擇某一個條件使各個成分流過支持劑或吸附劑時，個條件使各個成分流過支持劑或吸附劑時，各成分可由于其物理性質(zhì)的不同而得到分各成分可由于其物理性質(zhì)的不同而得到分離。離。它可用于小量（和微量）的物質(zhì)的分離、它可用于小量（和微量）的物質(zhì)的分離、純化處理。純化處理。Spanning Drug Development & the Globe BioDuro C二、二、 重結(jié)晶重結(jié)晶 重結(jié)晶的原理是利用混合物中各組分在某種重結(jié)晶的原理是利用混合物中各組分在某種溶劑中的溶解度不同，而使它們互相分離。溶劑中的溶解度不

4、同，而使它們互相分離。它可用于固體物質(zhì)（一般它可用于固體物質(zhì)（一般1 1克以上）的分離、克以上）的分離、純化處理。純化處理。Spanning Drug Development & the Globe BioDuro C1.重結(jié)晶提純法的一般過程為重結(jié)晶提純法的一般過程為 選擇適宜的溶劑；選擇適宜的溶劑； 將粗產(chǎn)品溶于適宜的熱的溶液中制成飽和溶液；將粗產(chǎn)品溶于適宜的熱的溶液中制成飽和溶液； 乘熱過濾除去不溶性雜質(zhì)。如溶液的顏色深，則應(yīng)先脫乘熱過濾除去不溶性雜質(zhì)。如溶液的顏色深，則應(yīng)先脫色，后過濾；色，后過濾； 冷卻溶液，使之慢慢析出結(jié)晶而雜質(zhì)則留在母液中，冷卻溶液，使之慢慢析出結(jié)晶而雜質(zhì)則留在母

5、液中，或者雜質(zhì)析出，而欲提純的化合物則留在溶液中；或者雜質(zhì)析出，而欲提純的化合物則留在溶液中； 抽氣過濾分離母液，分出結(jié)晶體或雜質(zhì)；抽氣過濾分離母液，分出結(jié)晶體或雜質(zhì)； 洗滌結(jié)晶，除去附著的母液；洗滌結(jié)晶，除去附著的母液； 干燥結(jié)晶。干燥結(jié)晶。Spanning Drug Development & the Globe BioDuro C2. 溶劑的選擇溶劑的選擇 與被提純的有機物不起化學反應(yīng)，對被提純的有機物應(yīng)在熱與被提純的有機物不起化學反應(yīng)，對被提純的有機物應(yīng)在熱溶液中易溶，而在冷溶液中幾乎不溶，如果雜質(zhì)在熱溶液中不溶液中易溶，而在冷溶液中幾乎不溶，如果雜質(zhì)在熱溶液中不溶的，宜乘熱過濾去雜質(zhì)

6、，溶劑的沸點，不宜太低，也不宜過溶的，宜乘熱過濾去雜質(zhì)，溶劑的沸點，不宜太低，也不宜過高。太低，溶解度改變不大；過高，附于晶體表面的溶劑不易高。太低，溶解度改變不大；過高，附于晶體表面的溶劑不易除去。除去。常用的溶劑有苯、乙酸乙酯、石油醚、丙酮、乙醇等。常用的溶劑有苯、乙酸乙酯、石油醚、丙酮、乙醇等。混合溶劑也經(jīng)常被采用，如乙醇與水，乙醇與乙醚，乙醇與混合溶劑也經(jīng)常被采用，如乙醇與水，乙醇與乙醚，乙醇與丙酮，石油醚與乙醚，苯與石油醚等。丙酮，石油醚與乙醚，苯與石油醚等。溶劑的用量一般是溶質(zhì)用量的溶劑的用量一般是溶質(zhì)用量的10-30倍量。倍量。Spanning Drug Development

7、& the Globe BioDuro C3.晶體的析出晶體的析出 過濾得到的濾液冷卻后，晶體就會析出。用冷水或冰水迅速冷卻過濾得到的濾液冷卻后，晶體就會析出。用冷水或冰水迅速冷卻并劇烈攪動溶液時，可得到顆粒很小的晶體，將熱溶液在室溫條件并劇烈攪動溶液時，可得到顆粒很小的晶體，將熱溶液在室溫條件下靜置使之緩緩冷卻，則可得到均勻而較大的品體。下靜置使之緩緩冷卻，則可得到均勻而較大的品體。 如果溶液冷卻后晶體仍不析出，可用玻璃抹摩控液面下的容器壁，如果溶液冷卻后晶體仍不析出，可用玻璃抹摩控液面下的容器壁，也可加入品種，或進一步降低溶液溫度也可加入品種，或進一步降低溶液溫度(用冰水或其它冷凍溶液冷用

8、冰水或其它冷凍溶液冷卻卻)。 如果溶液冷卻后不析出晶體而得到油狀物時，可重新加熱，至形如果溶液冷卻后不析出晶體而得到油狀物時，可重新加熱，至形成澄清的熱溶液后，任其自行冷卻，并不斷用玻璃棒攪拌溶液，摩成澄清的熱溶液后，任其自行冷卻，并不斷用玻璃棒攪拌溶液，摩擦器壁或投人品種，以加速品體的析出。若仍有油狀物開始忻出，擦器壁或投人品種，以加速品體的析出。若仍有油狀物開始忻出，應(yīng)立即劇烈攪拌使油滴分散。應(yīng)立即劇烈攪拌使油滴分散。Spanning Drug Development & the Globe BioDuro C三、蒸餾三、蒸餾 首先了解一些常用有機溶劑的沸點數(shù)據(jù)：二首先了解一些常用有機溶劑

9、的沸點數(shù)據(jù)：二氯甲烷、丙酮、甲醇、苯、乙酸乙酯、乙醇、氯甲烷、丙酮、甲醇、苯、乙酸乙酯、乙醇、甲苯等甲苯等Spanning Drug Development & the Globe BioDuro C1.1. 蒸餾蒸餾就是將液態(tài)物質(zhì)加熱到沸騰變?yōu)檎魵?，又將就是將液態(tài)物質(zhì)加熱到沸騰變?yōu)檎魵?，又將蒸氣冷凝為液體這個過程的聯(lián)合操作。它可蒸氣冷凝為液體這個過程的聯(lián)合操作。它可以分離液體混合物。以分離液體混合物。2.2. 減壓蒸餾減壓蒸餾可分離或提純沸點教高或性質(zhì)比較不穩(wěn)定的可分離或提純沸點教高或性質(zhì)比較不穩(wěn)定的液態(tài)有機化合物。液態(tài)有機化合物。Spanning Drug Development & th

10、e Globe BioDuro CSpanning Drug Development & the Globe BioDuro CSpanning Drug Development & the Globe BioDuro C四、萃取四、萃取 萃取也是分離和提純有機化合物常用的操作之一。萃取也是分離和提純有機化合物常用的操作之一。萃取的原理：設(shè)溶液由有機化合物萃取的原理：設(shè)溶液由有機化合物X X溶解于溶劑溶解于溶劑A A而成，而成，現(xiàn)如要從其中萃取現(xiàn)如要從其中萃取X X，可選擇一種對，可選擇一種對X X溶解度極好，而與溶解度極好，而與溶劑溶劑A A不相混溶和不起化學反應(yīng)的溶劑不相混溶和不起化學反應(yīng)

11、的溶劑B B。儀器的選擇儀器的選擇液體萃取最通常的儀器是分液漏斗，液體萃取最通常的儀器是分液漏斗，一般選擇容積較被一般選擇容積較被萃取液大萃取液大1-21-2倍的分液漏斗倍的分液漏斗Spanning Drug Development & the Globe BioDuro C 萃取溶劑的選擇萃取溶劑的選擇 根據(jù)被萃取化合物的溶解度而定，同時要易于和溶質(zhì)分開，根據(jù)被萃取化合物的溶解度而定，同時要易于和溶質(zhì)分開，所以最好用低沸點溶劑。一般難溶于水的物質(zhì)用石油醚等萃取；所以最好用低沸點溶劑。一般難溶于水的物質(zhì)用石油醚等萃??；較易溶者，用乙醚萃??；易溶于水的物質(zhì)用乙酸乙酯等萃取。較易溶者，用乙醚萃??；

12、易溶于水的物質(zhì)用乙酸乙酯等萃取。 每次使用萃取溶劑的體積一般是被萃取液體的每次使用萃取溶劑的體積一般是被萃取液體的1/51/3，兩者，兩者的總體積的總體積不應(yīng)超過不應(yīng)超過分液漏斗總體積的分液漏斗總體積的2/3。乳化現(xiàn)象解決的方法乳化現(xiàn)象解決的方法 較長時間靜置；較長時間靜置； 若因堿性而產(chǎn)生乳化，可加入少量酸破壞或采用過濾方法除去若因堿性而產(chǎn)生乳化，可加入少量酸破壞或采用過濾方法除去 若由于兩種溶劑（水與有機溶劑）能部分互溶而發(fā)生乳化，可加若由于兩種溶劑（水與有機溶劑）能部分互溶而發(fā)生乳化，可加入少量電解質(zhì)（如氯化鈉等），利用鹽析作用加以破壞。另外，入少量電解質(zhì)（如氯化鈉等），利用鹽析作用加以

13、破壞。另外，加入食鹽，可增加水相的比重，有利于兩相比重相差很小時的分加入食鹽，可增加水相的比重，有利于兩相比重相差很小時的分離；離；Spanning Drug Development & the Globe BioDuro C 1-2 薄層色譜薄層色譜 薄層色譜（薄層色譜（TLCTLC）是快速分離和定性分析少）是快速分離和定性分析少量物質(zhì)的一種很重要的實驗技術(shù)。最典型的量物質(zhì)的一種很重要的實驗技術(shù)。最典型的在玻璃板上均勻鋪上一薄層吸附劑，制成薄在玻璃板上均勻鋪上一薄層吸附劑，制成薄層板，用毛細管將樣品溶液點在起點處，把層板，用毛細管將樣品溶液點在起點處，把此薄層板置于盛有溶劑的容器中，等溶液到

14、此薄層板置于盛有溶劑的容器中，等溶液到達前沿后取出，晾干，噴以顯色劑，測定色達前沿后取出，晾干，噴以顯色劑，測定色斑的位置。斑的位置。Spanning Drug Development & the Globe BioDuro CSpanning Drug Development & the Globe BioDuro C一、吸附劑一、吸附劑 一般常用的是：硅膠一般常用的是：硅膠H/H/GFGF254 254 （含熒光物（含熒光物質(zhì)）質(zhì)） ，這是一種含熒光物質(zhì)的層析用硅，這是一種含熒光物質(zhì)的層析用硅膠，可在膠，可在254 nm254 nm的紫外光下觀察熒光。的紫外光下觀察熒光。Spanning

15、Drug Development & the Globe BioDuro C二、二、 點樣點樣在距薄層板（在距薄層板（2x5cm, 2x5cm, 自制）下端自制）下端5 mm5 mm處，處，劃一條線，作為起點線。用毛細管劃一條線，作為起點線。用毛細管( (內(nèi)徑內(nèi)徑0.3 0.3 mm) mm) 吸取樣品溶液（一般以乙酸乙酯、二氯吸取樣品溶液（一般以乙酸乙酯、二氯甲烷等作溶劑，配成甲烷等作溶劑，配成0.0.1%1%溶液），垂直地輕溶液），垂直地輕輕接觸到薄層的起點線上。輕接觸到薄層的起點線上。Spanning Drug Development & the Globe BioDuro C三、展開劑

16、的選擇三、展開劑的選擇 極性小的及中等的一般采用石油醚和乙酸乙酯作展開劑，通極性小的及中等的一般采用石油醚和乙酸乙酯作展開劑，通過調(diào)整其配比，使過調(diào)整其配比，使R Rf f值調(diào)到值調(diào)到0.3-0.60.3-0.6為佳。為佳。 極性大的一般采用二氯甲烷和甲醇作展開劑，通過調(diào)整其配極性大的一般采用二氯甲烷和甲醇作展開劑，通過調(diào)整其配比，使比，使R Rf f值調(diào)到值調(diào)到0.3-0.60.3-0.6為佳。為佳。如上述系統(tǒng)不適合可嘗試使用石油醚和丙酮、三氯甲烷和甲醇如上述系統(tǒng)不適合可嘗試使用石油醚和丙酮、三氯甲烷和甲醇等展開體系。等展開體系。 酸或堿性物質(zhì)由于在薄層板拖尾嚴重，所以分別在展開體系酸或堿性

17、物質(zhì)由于在薄層板拖尾嚴重，所以分別在展開體系中加入中加入0.1%0.1%乙酸或氨水。乙酸或氨水。 如反應(yīng)物與生成物如反應(yīng)物與生成物R Rf f值接近，可點交叉點加以區(qū)別。值接近，可點交叉點加以區(qū)別。Spanning Drug Development & the Globe BioDuro C 化合物的吸附能力（親和力）化合物的吸附能力（親和力）:化合物的吸附能力（親和力）與分子極性有關(guān)。分子極性越強，化合物的吸附能力（親和力）與分子極性有關(guān)。分子極性越強，其吸附能力也就越大。分子中所含極性較大的基團，其吸附能其吸附能力也就越大。分子中所含極性較大的基團，其吸附能力也較強。通常吸附能力按下列排列

18、次序遞增：力也較強。通常吸附能力按下列排列次序遞增： -Cl,-Br,-IC=C-OCH3CO2RC=O-CHO-SH-NH2-OH-CO2H 色譜常用的洗脫劑及其洗脫能力（按次序遞增）：色譜常用的洗脫劑及其洗脫能力（按次序遞增）： 己烷、石油醚環(huán)己烷四氯化碳二硫化碳甲苯苯己烷、石油醚環(huán)己烷四氯化碳二硫化碳甲苯苯二氯甲烷三氯甲烷乙醚乙酸乙酯丙酮丙醇乙醇二氯甲烷三氯甲烷乙醚乙酸乙酯丙酮丙醇乙醇甲醇水吡啶乙酸。甲醇水吡啶乙酸。Spanning Drug Development & the Globe BioDuro C四、顯色劑 紫外燈：多環(huán)芳烴基團等多環(huán)芳烴基團等碘蒸氣：很多有機物顯黃棕色很多有

19、機物顯黃棕色茚三酮、濃硫酸等特殊顯色劑等特殊顯色劑Spanning Drug Development & the Globe BioDuro C柱層析Spanning Drug Development & the Globe BioDuro C柱層析柱層析概述概述層析柱的選擇層析柱的選擇吸附劑吸附劑洗脫劑洗脫劑裝柱裝柱上樣上樣洗脫分離洗脫分離快速柱層析快速柱層析反相硅膠板和反相硅膠柱反相硅膠板和反相硅膠柱 Spanning Drug Development & the Globe BioDuro C一、概述概述 柱層析，又叫柱色譜(Column Chromatography)，通常在玻璃管中填

20、入表面積很大、經(jīng)過活化的多孔性或粉狀固定吸附劑（如硅膠和氧化鋁）。當待分離的混合物從柱頂加入，流經(jīng)吸附劑（固定相）時就被吸附在柱的上端，然后從柱頂加入洗脫劑（流動相）。當洗脫劑流經(jīng)吸附劑時，便發(fā)生了吸附和解吸吸附和解吸過程，即混合物的各組分在固定相和流動相之間發(fā)生無數(shù)次的交換。由于各組分對吸附劑的吸附能力（或稱親和力）不同，便以不同的速度隨流動相下移，形成若干色帶。吸附能力最弱的組分隨洗脫劑首先流出。分別收集各組分，進行逐個鑒定，從而達到分離純化的目的。 作為一種十分高效的分離提純方法，柱色譜有著相當廣的應(yīng)用范圍，適用于大量、少量甚至微量物質(zhì)的分離。關(guān)鍵詞：吸附和解吸、吸附能力、物理過程。Sp

21、anning Drug Development & the Globe BioDuro CSpanning Drug Development & the Globe BioDuro C二、層析柱二、層析柱.任何細頸玻璃管或帶旋塞的滴定管均可用作層析柱。. 專門定制各種尺寸規(guī)格的帶有特氟瓏旋塞和底部配備砂芯（以代替玻璃棉）的層析柱。 . 層析柱的選擇。 Column Size (ml) Fraction Size (ml) Sample Size (g) 200 10 12 400 20 35 600 30 58 1000 50 10 2000 100 2030 4000 150200 50 8

22、000 250400 100 Spanning Drug Development & the Globe BioDuro CSpanning Drug Development & the Globe BioDuro C三、吸附劑三、吸附劑常用的吸附劑有硅膠、氧化鋁等，顆粒大小一般以通過200目左右篩孔為宜。顆粒太大，洗脫時溶劑推進太快，分離效果不好，反之如果顆粒太小，展開慢而造成拖尾不集中，分離效果也不好。1、硅膠硅膠一般分為硅膠G(摻入13%的粘合劑煅石膏)、硅膠H（不含粘合劑，層析用）和硅膠H/GF254（含熒光物質(zhì)）。柱層析一般用比表面積300-400 米2/克，顆粒度在300目以下的硅

23、膠H做吸附劑。 2、氧化鋁色譜用氧化鋁一般可分為酸性、中性和堿性三種。酸性氧化鋁是用1%鹽酸浸泡后用蒸餾水洗至懸浮液PH=44.5，用于分離酸性物質(zhì)。中性氧化鋁PH=7.5,用于分離中性物質(zhì)，其應(yīng)用最廣。堿性氧化鋁PH=910，一般用于分離生物堿等化合物。 Spanning Drug Development & the Globe BioDuro C3、吸附劑的選擇 選擇吸附劑的首要條件是與被吸附物無化學作用。選擇吸附劑的首要條件是與被吸附物無化學作用。氧化鋁的極性比硅膠大，比較適合用于分離極性較小的化合物如烴、醚、醛、酮、鹵代烴等。因為極性化合物被氧化鋁較強烈地吸附，分離較差。相反，硅膠適合

24、用于分離極性較大的化合物如羧酸、醇、胺等，而非極性化合物在硅膠上吸附較弱，分離較差。 4、吸附劑的活性 吸附劑的活性與其含水量有關(guān)。含水量越低，活性越高。將氧化鋁放在高溫爐（350-400）烘3小時得無水氧化鋁，加入不同量水分得不同程度活性氧化鋁。一般常用-級（硅膠也可如法處理）。 Activity Alumina(% water) Silica gel(% water) 0 0 3 5 6 15 10 25 15 38 Spanning Drug Development & the Globe BioDuro C5、化合物的吸附能力（親和力）化合物的吸附能力（親和力）與分子極性有關(guān)。分子極性

25、越強，其吸附能力也就越大。分子中所含極性較大的基團，其吸附能力也較強。通常吸附能力按下列排列次序遞增：-Cl,-Br,-IC=C-OCH3CO2RC=O-CHO-SH-NH2-OH0.2 Rf0.1 ml 1 100 100 40 5 2 200 400 160 10 3 400 900 360 20 4 600 1600 600 30 5 1000 2500 1000 50The height of the column normally ranges 1525cm depending on the resolution.Operation Dry pack adsorbent(silica

26、 gel) into the appropriate column. Gently tap vertically to pack the gel. Clamp and assemble. Fill with solvent, pressure slightly to compress the silica gel and force solvent and air through the column. The top of the column should not be allowedSpanning Drug Development & the Globe BioDuro Cto run

27、 dry. Apply the samples as a 20 - 25% solution and elute at a flow rate of 5cm/min. Generally, it takes about 510 minutes to run the column. Gram quantities are expected toacquired, typically 0.5 - 2.0g. Can be increased to 10g if less resolution is required and/or larger columns are used.SummaryFla

28、sh Chromatography is a fast, cost efficient Prep LC approach. Separations are based upon traditionally obtained TLC results which are simply extrapolated to prep scale. Best of all, elaborate equipment and the purchase of expensive equipment is not necessary.Spanning Drug Development & the Globe Bio

29、Duro C九、九、反相硅膠板和硅膠柱反相硅膠板和硅膠柱 當被分離的樣品為極性很大的化合物（如氨，酸等），用普通的以硅膠為填充料的柱子可能很難有效分離，這時就可以選擇反相硅膠板和硅膠柱。其主要的區(qū)別在于吸附劑的不同，主要以硅膠作基質(zhì)，在其表面鍵合十八烷基官能團（ODS）的非極性填料，（其他還可鍵合C8、C4、C2、苯等）。洗脫劑一般用甲醇（乙睛）和水的混合物。 Spanning Drug Development & the Globe BioDuro CChromatography Pre-TLC Column ChromatograghySpanning Drug Development &

30、 the Globe BioDuro C 分離時間短，效率高分離時間短，效率高 操作簡便操作簡便 分離樣品少分離樣品少特點特點Spanning Drug Development & the Globe BioDuro C原理原理各組分對吸附劑吸附能力不同各組分對吸附劑吸附能力不同 吸附能力弱（即極性較弱的）隨流動相移動快吸附能力弱（即極性較弱的）隨流動相移動快 吸附能力強（即極性較強的）隨流動相移動慢吸附能力強（即極性較強的）隨流動相移動慢Spanning Drug Development & the Globe BioDuro C展開缸展開缸PTLC 板板點板點板展板展板顯色顯色刮板與洗脫刮

31、板與洗脫PTLC過程過程Spanning Drug Development & the Globe BioDuro C展開缸展開缸 24 24 7cm 使用混合溶劑時使用混合溶劑時, 可能會發(fā)生邊緣效應(yīng)可能會發(fā)生邊緣效應(yīng) 預(yù)防措施預(yù)防措施: 在四壁放上濾紙有助于蒸氣飽和，防止邊緣效應(yīng)在四壁放上濾紙有助于蒸氣飽和，防止邊緣效應(yīng) 流動相液面高度一般為流動相液面高度一般為 10-15mm. 使用混合溶劑體系，應(yīng)在每次爬板后清潔展缸使用混合溶劑體系，應(yīng)在每次爬板后清潔展缸 每次只準備一天的溶劑每次只準備一天的溶劑 在爬板時保持展缸密閉在爬板時保持展缸密閉Spanning Drug Developmen

32、t & the Globe BioDuro CPTLC 板板 吸附劑吸附劑 最常用的吸附劑是硅膠最常用的吸附劑是硅膠 硅膠是無定型多孔物質(zhì)，略具酸性硅膠是無定型多孔物質(zhì)，略具酸性 適用于中性或酸性物質(zhì)的分離。適用于中性或酸性物質(zhì)的分離。 制備和活化制備和活化 負載量負載量 1.0mm， 5mg/cm2 e.g. 20 20cm, 10100mg Spanning Drug Development & the Globe BioDuro C點樣點樣-A key step工具工具 自動自動 TLC 取樣器取樣器 自制的玻璃滴管自制的玻璃滴管 溶劑溶劑 推薦揮發(fā)性溶劑推薦揮發(fā)性溶劑乙酸乙酯乙酸乙酯,

33、己烷己烷, 二氯甲烷二氯甲烷 避免使用不揮發(fā)溶劑避免使用不揮發(fā)溶劑 甲醇甲醇, 水水. 引起問題引起問題: 擴散擴散樣品的濃度樣品的濃度 PTLC-510% Spanning Drug Development & the Globe BioDuro CSpanning Drug Development & the Globe BioDuro C 用滴管吸取樣品溶劑，緩慢并且勻速地在板上劃一條直線用滴管吸取樣品溶劑，緩慢并且勻速地在板上劃一條直線 如果點樣太寬，可用大極性溶劑將其展開至如果點樣太寬，可用大極性溶劑將其展開至24cm，再吹干，再吹干 不要污染板不要污染板 線條盡可能細線條盡可能細

34、如果可能，點樣后先在如果可能，點樣后先在 UV下檢查下檢查 小心小心: UV 光線直接照射進眼里是有害的光線直接照射進眼里是有害的,最好帶上眼鏡，并用鑷子夾住板最好帶上眼鏡，并用鑷子夾住板 樣品不能太多，否則會過載樣品不能太多，否則會過載 由于邊緣厚度不均勻及邊緣效應(yīng)由于邊緣厚度不均勻及邊緣效應(yīng),應(yīng)留應(yīng)留 58mm.Spanning Drug Development & the Globe BioDuro C展板展板 在展在展PTLC板之前，必須先用板之前，必須先用TLC 選用溶劑條件選用溶劑條件. PTLC可以直接使用可以直接使用TLC條件條件 將準備好的將準備好的PTLC 板放入展開缸板放

35、入展開缸,蓋上蓋子蓋上蓋子. 溶劑前沿離板上端大約溶劑前沿離板上端大約0.5cm1cm即可取出即可取出Spanning Drug Development & the Globe BioDuro C幾個常用的溶劑體系：幾個常用的溶劑體系： 己烷（石油醚）己烷（石油醚）/乙酸乙酯乙酸乙酯 己烷（石油醚）己烷（石油醚） / 丙酮丙酮 氯仿氯仿/甲醇甲醇 Spanning Drug Development & the Globe BioDuro C選擇溶劑系統(tǒng)，必須經(jīng)過多次的嘗試，不斷改變?nèi)軇O性，根據(jù)板層情況，選擇溶劑系統(tǒng)，必須經(jīng)過多次的嘗試，不斷改變?nèi)軇O性，根據(jù)板層情況，選擇最佳的溶劑體系選擇最

36、佳的溶劑體系一般來講，提高溶劑極性，化合物爬的越高一般來講，提高溶劑極性，化合物爬的越高 （反之則相反（反之則相反).溶劑溶劑 （展開劑）（展開劑）烷烴烷烴 (己烷己烷,石油醚石油醚)甲苯甲苯二氯甲烷二氯甲烷,氯仿氯仿乙醚乙醚乙酸乙酯乙酸乙酯丙酮丙酮醇醇醋酸醋酸極性極性Spanning Drug Development & the Globe BioDuro CPTLC中的問題：中的問題：板上的化合物是一片板上的化合物是一片 樣品過載樣品過載 . 或者是由于你的樣品十分不純或者是由于你的樣品十分不純. 板上的化合物拖尾板上的化合物拖尾. 樣品有酸性或堿性基團樣品有酸性或堿性基團 (胺或羧酸胺或

37、羧酸) 有時在有時在PTLC板會有嚴板會有嚴重的拖尾。加入幾滴氨水或重的拖尾。加入幾滴氨水或TEA(胺胺) 或醋酸或醋酸 (羧酸羧酸) Spanning Drug Development & the Globe BioDuro C顯色顯色 如果樣品是有顏色的如果樣品是有顏色的,用鉛筆輕輕標出用鉛筆輕輕標出 如果樣品需在紫外燈下看如果樣品需在紫外燈下看,則在紫外燈下用鉛筆標出則在紫外燈下用鉛筆標出 從板上割下一條或用玻璃蓋住大部分板，然后從板上割下一條或用玻璃蓋住大部分板，然后 如果樣品無色，且在紫外下也不顯色如果樣品無色，且在紫外下也不顯色,那么試一試碘那么試一試碘 你也可選擇在板上噴灑事先準

38、備好的顯色劑你也可選擇在板上噴灑事先準備好的顯色劑Spanning Drug Development & the Globe BioDuro C刮板及洗脫刮板及洗脫在確定好所要的帶后，可用刮刀將其刮下，碾細在確定好所要的帶后，可用刮刀將其刮下，碾細 以玻璃漏斗洗脫以玻璃漏斗洗脫 通過柱層析洗脫通過柱層析洗脫Spanning Drug Development & the Globe BioDuro C操作過程請注意操作過程請注意: 盡快處理你的化合物盡快處理你的化合物,長時間與吸附劑接觸會增加你的樣品變壞的可能性長時間與吸附劑接觸會增加你的樣品變壞的可能性 小心選擇溶劑小心選擇溶劑, 甲醇可能會

39、溶劑硅膠板里的融解黏合劑及熒光物質(zhì)甲醇可能會溶劑硅膠板里的融解黏合劑及熒光物質(zhì), 選擇氯選擇氯 仿，丙酮和乙醇會好一些仿，丙酮和乙醇會好一些; 如果可能的話，盡量選擇低極性的溶劑如果可能的話，盡量選擇低極性的溶劑 1g吸附劑需用大約吸附劑需用大約5ml溶劑溶劑 柱層析有助于除去黏合劑和熒光物質(zhì)柱層析有助于除去黏合劑和熒光物質(zhì)Spanning Drug Development & the Globe BioDuro C無水無氧操作無水無氧操作Spanning Drug Development & the Globe BioDuro C1-4 無水無氧操作無水無氧操作 一、一、 常用溶劑的純化常用

40、溶劑的純化二、敏感化合物的實驗操作裝置二、敏感化合物的實驗操作裝置 三、敏感化合物的實驗操作技術(shù)三、敏感化合物的實驗操作技術(shù) 四、敏感化合物的儲存四、敏感化合物的儲存 Spanning Drug Development & the Globe BioDuro C 常用溶劑的純化常用溶劑的純化 化學供應(yīng)商提供的常用試劑僅可滿足一般化學反應(yīng)的需要。為了確保一些有機合成反應(yīng)的順利進行，常常要對試劑進行進一步的純化處理。常用的溶劑處理方法是蒸餾。如果反應(yīng)要求僅僅是無水，可在冷凝管上加干燥管，油封或充氮氣球即可，如果需要達到無水無氧的條件，溶劑則需要脫氧處理。一般在氮氣氛下進行。Spanning Dru

41、g Development & the Globe BioDuro C 1. 試劑級溶劑的純化試劑級溶劑的純化 無水的試劑級溶劑常有足夠的純度，有時可以不用蒸餾。 為保證充分的干燥度，可在儲藏時向其加入活性分子篩。 欲使溶劑脫氧，可利用注射器或玻璃管向其中鼓入氮氣約五分鐘。2. 一般溶劑的純化一般溶劑的純化 大多數(shù)溶劑，只要在惰性氣氛中將其從干燥劑中蒸餾出來， 就可以達到足夠的純度。（1） 烷烴烷烴 如己烷、戊烷等。首先用濃硫酸洗滌幾次以除去烯烴，水洗， CaCl2干燥，必要時用鈉絲或P2O5干燥，蒸餾。存放于帶塞的 試劑瓶中。（2）芳香烴類芳香烴類 如苯、甲苯、二甲苯等。CaCl2干燥，必要

42、時用鈉絲或P2O5干燥， 蒸餾。存放于帶塞的試劑瓶中。 常用溶劑的純化常用溶劑的純化Spanning Drug Development & the Globe BioDuro C （3） 氯代烷烴類氯代烷烴類 如二氯甲烷、氯仿、四氯化碳、二氯乙烷等。水洗除去醇等， CaCl2干燥，在P2O5，或CaH2中回流蒸出。絕對不能用鈉絲干燥， 否則會發(fā)生爆炸。長期儲藏應(yīng)放于密閉的瓶中，并保存于黑暗中。（4） 醚類及呋喃類醚類及呋喃類 如乙醚、四氫呋喃等。許多醚類在和空氣接觸下會慢慢生成 不易揮發(fā)且結(jié)構(gòu)不明的過氧化物。過氧化物在加熱下容易分解而爆炸。 因此貯藏過久的醚類和呋喃類化合物在使用前，尤其是在貯

43、藏過久的醚類和呋喃類化合物在使用前，尤其是在蒸餾前應(yīng)當檢驗是否有過氧化物的存在蒸餾前應(yīng)當檢驗是否有過氧化物的存在。檢驗的方法：用包含一滴淀粉指示劑的1 mL 10% KI 溶液和10 mL 醚液混合，沒有顏色變化， 則沒有過氧化物?；蛘哂?%硫酸亞鐵銨溶液，硫酸亞鐵和硫氰化鉀 溶液測試。若有，則加入5% FeSO4 或偏亞硫酸氫鈉溶液于醚中 并搖動，使過氧化物分解。CaCl2預(yù)干燥，在鈉絲或LiAlH4中回流 蒸出。儲藏于密閉的瓶中，并保存于陰涼黑暗中。 常用溶劑的純化常用溶劑的純化Spanning Drug Development & the Globe BioDuro C（5）酰胺類酰胺類

44、 如二甲基甲酰胺，二甲基乙酰胺，HMPT等。加入CaH2回流， 減壓蒸出，否則其容易分解。加入新活化的分子篩儲藏于瓶中， 并注明日期。（6）二甲基亞砜二甲基亞砜 加入CaH2攪拌過夜，然后減壓分餾。加入新活化的分子篩 儲藏于小瓶中，并注明日期。（7） 吡啶吡啶 可以用KOH，NaOH, CaO, BaO 或鈉，然后蒸出。加入新活化的 5分子篩密閉保存，并注明日期。 常用溶劑的純化常用溶劑的純化Spanning Drug Development & the Globe BioDuro C（8）乙醇乙醇 主要雜質(zhì)為雜醇油，醛，醇，酮和水?？捎玫募兓椒殒V屑 和碘回流，與CaO一同回流并蒸出。加入

45、新活化的3A分子篩 儲藏于小瓶中。注意：在應(yīng)用金屬化合物作為純化劑時，蒸餾時蒸餾瓶中注意：在應(yīng)用金屬化合物作為純化劑時，蒸餾時蒸餾瓶中 的溶劑應(yīng)最少保持在四分之一的體積，絕不允許蒸干，的溶劑應(yīng)最少保持在四分之一的體積，絕不允許蒸干， 否則會發(fā)生危險。否則會發(fā)生危險。這里介紹的僅僅是部分溶劑的處理方法，其它溶劑的純化見有關(guān)參考書（如Purification of laboratory chemicals, fourth edition, 世界圖書出版社 2000.6.）。 常用溶劑的純化常用溶劑的純化Spanning Drug Development & the Globe BioDuro C

46、所謂敏感化合物，這里指在空氣中的氧或水汽的作用下會迅速發(fā)生明顯變化的那些物質(zhì)。涉及這類物質(zhì)的反應(yīng)，可在普通的磨口儀器中進行，也可在專門的玻璃儀器中進行。所需的附件包括：一個惰氣源，真空泵和雙排管。敏感化合物的實驗操作裝敏感化合物的實驗操作裝置置Spanning Drug Development & the Globe BioDuro C1. 反應(yīng)裝置反應(yīng)裝置 1）普通裝置）普通裝置一般用二口瓶或三口瓶。敏感化合物反應(yīng)的普通裝置敏感化合物反應(yīng)的普通裝置敏感化合物的實驗操作裝置敏感化合物的實驗操作裝置Spanning Drug Development & the Globe BioDuro C2）

47、實驗室常用的其它專門反應(yīng)儀器）實驗室常用的其它專門反應(yīng)儀器 敏感化合物反應(yīng)的其它專門裝置敏感化合物反應(yīng)的其它專門裝置 敏感化合物的實驗操作裝置敏感化合物的實驗操作裝置Spanning Drug Development & the Globe BioDuro C2. 雙排管雙排管雙排管的一端接惰性氣體，另一端接真空泵。向下的接口通向反應(yīng)裝置。(圖7)圖圖7 雙排管雙排管 敏感化合物的實驗操作裝置敏感化合物的實驗操作裝置Spanning Drug Development & the Globe BioDuro C3. 惰性氣體和真空泵惰性氣體和真空泵常用的惰性氣體是氮氣，氬氣和氦氣。由于氮氣價廉易

48、得，大多數(shù)有機金屬試劑在其中均能保持穩(wěn)定，因此最為常用。它還有密氮氣度與空氣相近的優(yōu)點，所以再其中稱量物質(zhì)時無須校正。一般來說，含量在99.998%的氮氣即能保護大多數(shù)空氣敏感化合物。實驗室存放氮氣一般用氮氣鋼瓶。為了防止發(fā)生意外，氮氣鋼瓶一般存放于實驗室內(nèi)的固定位置，并用鐵鏈固定。打開或關(guān)閉氮氣鋼瓶都是首先要擰動鋼瓶開關(guān)，然后再旋動減壓閥和調(diào)節(jié)旋鈕。為了純化氣體，在惰性氣體進入反應(yīng)器之前，通常需要用氧化銀柱，分子篩柱等進行干燥和純化。 在雙排管的一端連接惰性氣體，另一端則連接真空泵。之所以連接 真空泵，是為了節(jié)約惰性氣體。對于很大的反應(yīng)器，若僅靠以惰性 氣體沖洗來置換空氣，則不但費時，也頗浪

49、費。一般先將反應(yīng)器 抽成真空，然后再充以惰性氣體。如此重復(fù)幾次，即可將氧氣除凈。 期間若以小火烘烤，效果更佳。為了保護真空泵，要在真空管道上 裝干燥塔。敏感化合物的實驗操作裝置敏感化合物的實驗操作裝置Spanning Drug Development & the Globe BioDuro C1. 反應(yīng)器的除水除氧反應(yīng)器的除水除氧 一般先將反應(yīng)器抽成真空，然后再充以惰性氣體。如此重復(fù)幾次， 即可將氧氣除凈。期間最好小火烘烤，效果更佳。2. 液體的轉(zhuǎn)移液體的轉(zhuǎn)移 1） 注射器注射器將洗凈烘干的注射器裝好后，通過吸入和擠出氮氣將針管沖洗幾次。用注射器從惰性氣體沖洗裝置中，吸取相當于總?cè)萘克姆种牡獨?，將針筒推至總行程的一半處，借此對針筒進行最后一次清洗。然后刺入儲器，將針筒內(nèi)的氮氣全部推出。將針頭深入液面下，利用儲器中液面上的壓力