鉤吻的研究進(jìn)展

1、鉤吻的研究進(jìn)展         10-11-16 10:22:00     作者：劉浩, 俞昌喜    編輯：studa20【關(guān)鍵詞】  鉤吻 中藥化學(xué)成分 藥理學(xué) 急性毒性試驗(yàn)鉤吻是馬錢(qián)科植物葫蔓藤（Gelsemium elegans Benth.）的全草。藥用鉤吻分為兩種,一種是北美鉤吻（G. sempervirens Ait）,產(chǎn)于美洲；另一種是中國(guó)鉤吻（Gelsemium elegans Benth.）,產(chǎn)于亞洲,主要

2、分布在我國(guó)浙江、福建、廣東、廣西、湖南、貴州、云南等地1。    中國(guó)鉤吻又名斷腸草、野葛、毒根、大茶藥等,味苦、微辛,性熱,有大毒。由于鉤吻有劇毒,民間一直以外用為主,忌內(nèi)服,多為搗碎或研磨后調(diào)敷患處,也可以煎水洗或煙熏,具有祛風(fēng)散寮、消腫止痛、攻毒殺蟲(chóng)的功能。近年來(lái),我國(guó)對(duì)鉤吻的應(yīng)用有了進(jìn)一步發(fā)展,已從過(guò)去的僅供外用發(fā)展為酊劑、浸膏、合劑、注射劑等多種劑型,臨床上用于惡性腫瘤、神經(jīng)痛等治療；局部滴眼給藥用于擴(kuò)瞳；此外,還用于促進(jìn)畜禽生長(zhǎng)。    中國(guó)鉤吻的主要有效化學(xué)成分為吲哚類(lèi)生物堿,包括鉤吻素子、甲、寅、卯、辰、丙、丁、戊、己

3、、庚以及胡蔓藤堿甲、乙、丙、丁等40多種單體,其毒性大小不同,鉤吻總生物堿或粗提物具有抗腫瘤、鎮(zhèn)痛、抗銀屑病等作用。近年對(duì)其研發(fā)日趨活躍,開(kāi)始瞄準(zhǔn)生物堿單體,如鉤吻素子抗腫瘤、抗銀屑病的研發(fā)?，F(xiàn)對(duì)其化學(xué)成分以及藥理毒理作用研究進(jìn)展綜述如下。1  鉤吻的化學(xué)成分    趙承嘏等曾從國(guó)產(chǎn)鉤吻中分離得到鉤吻素子、鉤吻素甲、鉤吻素寅、鉤吻素卯、鉤吻素辰、鉤吻素丙、鉤吻素丁和鉤吻素戊等八個(gè)生物堿24,其中鉤吻素子含量最高,鉤吻素寅具劇毒。楊峻山等從廣西鉤吻中分離得到7個(gè)生物堿,其中有4個(gè)新的氧化吲哚生物堿,分別是胡蔓藤甲、胡蔓藤乙、胡蔓藤丙、胡蔓藤丁5。不同產(chǎn)地的

4、鉤吻中生物堿含量略有差異,如福建產(chǎn)鉤吻根中含鉤吻素甲、子、卯、丁、戊,廣東產(chǎn)鉤吻根中含鉤吻素子、卯、丁、戊,各生物堿的含量還隨著采集時(shí)間、采集地點(diǎn)的不同而有很大差異。國(guó)外鉤吻與國(guó)產(chǎn)鉤吻所含成分存在差異,如北美鉤吻以鉤吻素甲為主要成分,含量最高,北美鉤吻分離到的成分還有14羥基鉤吻素乙、21羥基鉤吻素綠堿、NMethoxyanhydrovobasinediol、Gelsegine、11Methoxy19Rhydroxygelselegine、19R羥基二氫鉤吻綠堿、19R乙酰二氫鉤吻綠堿、19R羥基二氫鉤吻素甲、20Hydroxydihydrorankinidine、N脫甲氫基胡蔓藤堿乙、15羥

5、基胡蔓藤堿乙等6。   幾種主要鉤吻毒素的化學(xué)結(jié)構(gòu)研究進(jìn)展：（1）鉤吻素甲（Gelsemine）：Wormley在1870年全面研究了美洲鉤吻的活性成分,得到了無(wú)定形的鉤吻素甲。1883年Gerrad得到了鉤吻素甲的結(jié)晶。1959年Lovell等人通過(guò)X衍射、Conroy等人利用核磁共振譜才最后確定了它的復(fù)雜結(jié)構(gòu)為氧化吲哚型生物堿1,分子式為C20H22O2N2。陳忠良等用丙酮重結(jié)晶得到鉤吻素甲白色針狀結(jié)晶,測(cè)得熔點(diǎn)為1787。（2）鉤吻素子（Koumine）：鉤吻素子是中國(guó)鉤吻中含量最高的成分,其分子式確定為C20H22ON2,為一種假吲哚型生物堿,用丙酮重結(jié)晶得到白色柱

6、狀結(jié)晶,測(cè)得熔點(diǎn)為168170 79。（3）鉤吻素丙（Sempervirine）：鉤吻素丙是在1915年由Stevenson和Sayre首次從美洲鉤吻中分離得到,我國(guó)由趙承嘏亦從植物中分離得到,1959年Janot等人又從中國(guó)鉤吻中得到,統(tǒng)稱(chēng)為Sempervirine,有兩種互變異構(gòu)體1。分子式為C19H16N2,熔點(diǎn)為258260 1011。（4）鉤吻素?。↘oumicine）：劉鑄晉等從廣東鉤吻的根和福建鉤吻的葉中提取獲得鉤吻素丁4；金浩侖等確定其結(jié)構(gòu),其晶體為無(wú)色片晶,分子式為C21H24O3N2,熔點(diǎn)為248249 12, 后杜秀寶等修正為252254 （分解）13。（5）鉤吻素戊（K

7、oumidine）：晶體為無(wú)色片狀結(jié)晶,分子式為C19H22ON2,熔點(diǎn)為202204 12。（6）鉤吻素己（Gelsenicine）：丙酮重結(jié)晶得白色塊狀結(jié)晶,熔點(diǎn)171173 9,分子式為C19H22ON13,毒性為已知國(guó)產(chǎn)鉤吻生物堿中最強(qiáng)。（7）鉤吻素乙（Golsemicine）：由Thompson最早提取出來(lái)14,最后確定其分子式為C20H26O4N,熔點(diǎn)為171 ,毒性在已知北美鉤吻生物堿中最強(qiáng)1。（8）鉤吻素寅（Kouminicine）：為一種不純的無(wú)定形產(chǎn)物,是鉤吻中活性較強(qiáng)的有毒成分,毒性僅次于鉤吻素乙1。（9）鉤吻素庚（Gelsenidine）：由杜秀寶等從廣西鉤吻中提取獲得

8、,分子式為C21H26O3N,熔點(diǎn)為143145 13。(10)鉤吻素丑（Kouminine）：鉤吻素丑為不純的鉤吻素甲4。(11)鉤吻素卯（Kouminidine）：紀(jì)育澧等將鉤吻素卯的分子式定為C19H25O4N,劉鑄晉等改為C20H26O4N,熔點(diǎn)為299 （分解）,可溶于水4。（12）鉤吻定（Gelsedine）：最初由Schwarz等從美洲鉤吻中提取獲得,后金浩侖等從廣西鉤吻中分離得到,熔點(diǎn)172174 ,分子式為C19H24O3N12。（13）葫蔓藤堿甲（Humantenmine）：楊峻山等從廣西葫蔓藤根中分離得到葫蔓藤堿甲,丙酮重結(jié)晶得到的是無(wú)色塊狀結(jié)晶體,分子式為C19H22O

9、3N,熔點(diǎn)166168 ；其鹽酸鹽丙酮結(jié)晶為無(wú)色粗針晶,熔點(diǎn)182184 ；其氫溴酸鹽在丙酮中結(jié)晶為無(wú)色粗針晶,熔點(diǎn)208210 5。（14）葫蔓藤堿乙（Humantenine）：丙酮中重結(jié)晶為無(wú)色透明樹(shù)膠狀物,性質(zhì)不穩(wěn)定,分子式為C21H20O3N15。（15）葫蔓藤堿丙（Humantenidine）：為無(wú)色透明的樹(shù)膠狀物,分子式為C19H22O4N。催化加氫后丙酮結(jié)晶得到塊狀結(jié)晶,熔點(diǎn)216219 16。（16）葫蔓藤堿?。℉umantenirine）：為無(wú)色塊狀結(jié)晶體,分子式為C21H26O4N,熔點(diǎn)為168169 17。    人們?nèi)栽噲D從鉤吻中發(fā)現(xiàn)新的生

10、物堿單體,2006年岳建民課題組從云南產(chǎn)的鉤吻中分離出3種新生物堿：Gelsebanine,14hydroxyelegansamine,14hydroxygelsemydine。Gelsebanine是一種白色無(wú)定形粉末,分子式為C30H36O5N2；14hydroxyelegansamine分子式為C29H36O7N2；14hydroxygelsemydine為無(wú)色針狀結(jié)晶,分子式為C29H36N2O7,與14hydroxyelegansamine是同分異構(gòu)體18。2  鉤吻的藥理作用2.1  抗腫瘤作用  有關(guān)鉤吻抗腫瘤作用及其臨床應(yīng)用已有大量報(bào)道。早在上世紀(jì)

11、70年代,廣西腫瘤研究所采用了鉤吻治療原發(fā)性肝癌,總有效率達(dá)到60,平均生存期延長(zhǎng)4月,腫塊縮小1/2,腹水明顯減輕；其毒副反應(yīng)遠(yuǎn)較臨床常用的化療藥物低,對(duì)造血系統(tǒng)不僅沒(méi)有損害,反而促進(jìn)紅細(xì)胞、血紅蛋白升高19。福建省同安縣人民醫(yī)院、海軍416醫(yī)院曾先后用鉤吻總堿注射液治療肝、肺、食管癌等，取得一定療效,不僅緩解癌癥癥狀,還有很好的鎮(zhèn)痛效果2021。90年代陸建敏等報(bào)道,鉤吻總堿注射液對(duì)腫瘤細(xì)胞具有一定的抑制作用,并能提高腫瘤細(xì)胞對(duì)60Co 射線的敏感性,提示鉤吻可作為放射增敏劑與放療合用于腫瘤的治療22。近來(lái)王寅等報(bào)道,鉤吻總堿對(duì)HepG2細(xì)胞生長(zhǎng)具有明顯的抑制作用,可能與其誘發(fā)細(xì)胞凋亡有關(guān)

12、23。丁建農(nóng)等研究了鉤吻總堿對(duì)Hela細(xì)胞生長(zhǎng)增殖和細(xì)胞周期的影響,發(fā)現(xiàn)鉤吻能明顯抑制Hela細(xì)胞增殖并可誘導(dǎo)其凋亡,存在著明顯的劑量和時(shí)間-效應(yīng)關(guān)系24；細(xì)胞周期發(fā)生明顯變化,鉤吻主要阻止細(xì)胞由G1期向S期轉(zhuǎn)化,并在此階段誘發(fā)調(diào)亡。因此,誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡可能是鉤吻抗腫瘤作用機(jī)制之一。近年來(lái)人們開(kāi)始關(guān)注鉤吻生物堿單體的抗腫瘤作用及其機(jī)制,如遲德彪等發(fā)現(xiàn)鉤吻素子對(duì)人大腸癌細(xì)胞具有明顯的殺傷作用,并可以阻止細(xì)胞由G1期向S期轉(zhuǎn)化,誘導(dǎo)其凋亡25；2007年又報(bào)道了鉤吻素子體外誘導(dǎo)人結(jié)腸腺癌LoVo細(xì)胞凋亡的細(xì)胞生物學(xué)機(jī)制可能與鉤吻素子可降低LoVo細(xì)胞跨膜電位、線粒體跨膜電位, 能降低細(xì)胞內(nèi)游離鈣

13、濃度、加入EDTA可使游離鈣升高, 能增高LoVo細(xì)胞的活性氧及細(xì)胞間通訊有關(guān)26。吳達(dá)榮等則證實(shí)鉤吻素子在體內(nèi)外均對(duì)腫瘤有明顯的抑制作用27。2.2  鎮(zhèn)痛鎮(zhèn)靜作用  我國(guó)民間一直用鉤吻原植物治療各類(lèi)疼痛,尤其慢性神經(jīng)性疼痛與癌性疼痛。20世紀(jì)60年代,海軍422醫(yī)院和416醫(yī)院用鉤吻總堿配制成“止痛靈”注射液院內(nèi)用藥,發(fā)現(xiàn)其對(duì)多種疼痛均有良好療效。1970年代有學(xué)者報(bào)道了嗎啡、漢防己、延胡索等6種生物堿鎮(zhèn)痛作用強(qiáng)度的對(duì)比研究,發(fā)現(xiàn)鉤吻總堿提高痛閾的作用強(qiáng)度僅弱于嗎啡,而強(qiáng)于其他生物堿。譚建權(quán)等的研究發(fā)現(xiàn),鉤吻總堿不僅可提高動(dòng)物痛閾,而且能增強(qiáng)戊巴比妥鈉與水合氯醛的催眠作

14、用,其鎮(zhèn)痛作用不產(chǎn)生耐受性,也無(wú)明顯解熱作用,提示鉤吻的鎮(zhèn)痛作用機(jī)制可能既不同于阿片類(lèi)鎮(zhèn)痛藥物,也不同于阿司匹林類(lèi)解熱鎮(zhèn)痛抗炎藥28。鉤吻總堿除有肯定的鎮(zhèn)痛作用外,較之常用藥物嗎啡、度冷丁有更多的優(yōu)勢(shì),具體表現(xiàn)在：（1）無(wú)成癮性及耐藥性（2）鎮(zhèn)痛有效劑量?。唬?）鉤吻總堿口服或注射均無(wú)抑制消化功能的副作用,而且可增進(jìn)食欲21；（4）鉤吻無(wú)嗎啡及度冷丁的便秘、尿潴留等副作用；（5）鉤吻堿在治療劑量時(shí),對(duì)瞳孔無(wú)影響29。因此,鉤吻可能作為鎮(zhèn)痛藥具有廣闊的開(kāi)發(fā)應(yīng)用前景。2.3  對(duì)免疫功能的影響  在整體動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中,周利元等研究顯示,鉤吻乙醇粗提物可顯著提高環(huán)磷酰胺免疫抑制小鼠的

15、腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能,對(duì)環(huán)磷酰胺免疫抑制小鼠產(chǎn)生抗山羊紅細(xì)胞抗體的功能具有顯著促進(jìn)作用,對(duì)環(huán)磷酰胺免疫抑制小鼠體內(nèi)淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率也可顯著提高,提示鉤吻乙醇粗提物可能具有對(duì)抗環(huán)磷酰胺對(duì)小鼠免疫抑制作用30；但鉤吻總堿除可顯著促進(jìn)正常小鼠巨噬細(xì)胞吞噬功能外,對(duì)正常小鼠其他免疫功能無(wú)明顯影響。在體外實(shí)驗(yàn)中,雷林生等觀察到鉤吻粗提物對(duì)小鼠脾細(xì)胞增殖反應(yīng)有著不同程度的抑制作用31。孫莉莎等研究則提示鉤吻總堿中的主要免疫抑制成分可能是鉤吻素子32。王志睿等研究表明,鉤吻素子能顯著抑制小鼠CD4T淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng),此抑制作用可能與鉤吻素子抑制小鼠CD4T細(xì)胞IL2的分泌相關(guān)33。這種整體實(shí)驗(yàn)和體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果不

16、一致的現(xiàn)象可能提示,鉤吻對(duì)免疫功能可能具有雙向調(diào)節(jié)作用,或者鉤吻整體給藥情況下對(duì)免疫功能的影響可能是間接作用,如可能是通過(guò)保護(hù)骨髓造血功能而發(fā)揮作用。2.4  促進(jìn)造血功能作用  王友順等研究表明,鉤吻總堿對(duì)受到放射性損傷的大鼠具有造血保護(hù)作用34。黃蘭青等發(fā)現(xiàn)鉤吻提取物對(duì)環(huán)磷酰胺化療小鼠的造血功能有顯著的保護(hù)作用35。王坤等的實(shí)驗(yàn)中,鉤吻提取物對(duì)受到射線照射的小鼠30天存活率和死亡動(dòng)物平均存活天數(shù)、內(nèi)源性脾結(jié)節(jié)的形成和骨髓有核細(xì)胞含量的影響均顯著高于對(duì)照組,說(shuō)明鉤吻對(duì)急性輻射損傷有保護(hù)作用,對(duì)機(jī)體造血干祖細(xì)胞有刺激增殖作用36。2.5  心血管作用 

17、羅開(kāi)國(guó)等研究發(fā)現(xiàn),鉤吻總堿能對(duì)抗氯仿誘發(fā)的小鼠室顫和氯化鋇引起的家兔室性心律失常,其抗心律失常作用可能與降低蒲氏纖維四期除極速度有關(guān)37。黃仲林等報(bào)道,鉤吻總堿對(duì)狗血壓具有顯著降壓效應(yīng),其特點(diǎn)是降壓效應(yīng)快,維持時(shí)間長(zhǎng),其降壓機(jī)理可能與興奮心血管中樞的膽堿能神經(jīng)以及興奮外周M受體有關(guān)38。2.6  擴(kuò)瞳作用  鉤吻在大劑量時(shí)可引起散瞳這一特性早在50年代黃幕哲等在用鉤吻浸出液進(jìn)行家兔擴(kuò)瞳試驗(yàn)時(shí)就觀察到。王友順等用1鹽酸鉤吻總堿眼藥水對(duì)69例志愿者126只眼進(jìn)行了散瞳和調(diào)節(jié)麻痹作用的臨床觀察,結(jié)果表明鹽酸鉤吻眼藥水對(duì)人眼具有顯著的散瞳作用,其特點(diǎn)是散瞳起效快、作用強(qiáng),而且恢復(fù)快

18、,在給藥后6 h內(nèi)瞳孔直徑、遠(yuǎn)視力、近視力等幾乎全部恢復(fù)到給藥前水平29。就其散瞳后瞳孔調(diào)節(jié)的恢復(fù)時(shí)間而論,明顯優(yōu)于現(xiàn)行使用的后馬托品,甚至優(yōu)于托品酰胺,提示鉤吻制成眼藥水可為臨床提供一種新的擴(kuò)瞳劑。2.7  對(duì)皮膚病的作用  Calarasu等用北美鉤吻的水提取物制成口服液及注射劑治療神經(jīng)性皮炎和銀屑病,尤其是注射劑對(duì)神經(jīng)性皮炎療效顯著39。鉤吻的傳統(tǒng)功用是“ 攻毒拔毒,殺蟲(chóng)止癢；用治濕疹、體癬、麻風(fēng),并可殺蛆蟲(chóng),滅孑孓”。我國(guó)民間一直應(yīng)用鉤吻生物堿治療皮膚病。近期的基礎(chǔ)研究和臨床觀察提示,鉤吻生物堿治療銀屑病作用顯著,可能具有重要的開(kāi)發(fā)應(yīng)用價(jià)值40。2.8  畜禽復(fù)壯作用  鉤吻作為一種獸藥在我國(guó)民間應(yīng)用已久。唐本草云“人或畜食其葉皆死,羊食則大肥,豬食之能治熱性病”。廣西中藥志記載“當(dāng)豬胃納不良時(shí),用以飼喂,能增進(jìn)食欲”。廣東中獸醫(yī)常用草藥中有“鉤吻,常定期對(duì)豬羊服本藥,有殺蟲(chóng)、健胃、肥之效”。 香港植物園前園長(zhǎng)格林氏(H.Green)曾將鉤吻葉少許,加于豬的飼料中,非獨(dú)食之不曾中毒,且豬的皮毛反增加光澤而呈現(xiàn)一種滋補(bǔ)