紫外可見分光光度法

1、 紫外紫外- -可見分光光度法可見分光光度法 基本原理基本原理1 基本概念基本概念2 定性分析方法定性分析方法3 定量分析方法定量分析方法4主要內(nèi)容引言 顏色的產(chǎn)生1，cchhEE，注：電磁波譜：電磁輻射按波長順序排列電磁波譜：電磁輻射按波長順序排列發(fā)射光譜、吸收光譜光基態(tài)激發(fā)態(tài)釋放能量發(fā)光hMM*發(fā)射光譜激發(fā)態(tài)光基態(tài)吸收輻射能量*MhM吸收光譜轉(zhuǎn)振電分EEEEchhE能級差激發(fā)態(tài)光基態(tài)吸收輻射能量*MhM吸收光譜預(yù)備知識：預(yù)備知識： 1. *躍遷：躍遷： 飽和烴（甲烷，乙烷）飽和烴（甲烷，乙烷） E很高，很高， n n * * * * n n * *四、UV-VIS的特點和應(yīng)用u特點：特點：

2、通用性強，用途廣泛通用性強，用途廣泛靈敏度高（靈敏度高（1010-7 -71010-4 -4g gml），準(zhǔn)確度較好），準(zhǔn)確度較好儀器設(shè)備和操作都比較簡單，費用少，分析速度快儀器設(shè)備和操作都比較簡單，費用少，分析速度快; ; u應(yīng)用：應(yīng)用：定性分析：定性鑒別、純度檢測定性分析：定性鑒別、純度檢測定量分析：單組分、多組分（計算分光光度法）定量分析：單組分、多組分（計算分光光度法）五、相關(guān)基本術(shù)語1、吸收光譜示意圖2、光的互補能復(fù)合成白光的兩種顏色的光叫互補色光。物質(zhì)所顯示的顏色是吸收光的互補色。示例KMnO4的顏色及吸收光譜 五、相關(guān)基本術(shù)語五、相關(guān)基本術(shù)語 由于化合物結(jié)構(gòu)變化（共軛、引入助色團(tuán)

3、取代基）由于化合物結(jié)構(gòu)變化（共軛、引入助色團(tuán)取代基）或采用不同溶劑后或采用不同溶劑后 吸收峰位置向長波方向的移動，叫紅移（長移）吸收峰位置向長波方向的移動，叫紅移（長移） 吸收峰位置向短波方向移動，叫藍(lán)移（紫移，短移）吸收峰位置向短波方向移動，叫藍(lán)移（紫移，短移） 增色效應(yīng)：吸收強度增強的效應(yīng)增色效應(yīng)：吸收強度增強的效應(yīng)減色效應(yīng)：吸收強度減小的效應(yīng)減色效應(yīng)：吸收強度減小的效應(yīng) max105 max105 強帶強帶min103 min103 弱帶弱帶示例n生色團(tuán)（生色團(tuán)（chromophorechromophore）：）： * *、 n n * *n助色團(tuán)（助色團(tuán)（auxochromeauxoc

4、hrome）：）： n n * *max max255nm 215264nm 240280nm 1430紅移長移增色效應(yīng)濃色效應(yīng)六、吸收帶類型和影響因素六、吸收帶類型和影響因素示例苯的紫外吸收光譜苯的B帶吸收光譜示例 生色團(tuán) 共軛某些常見生色團(tuán)的UV吸收光譜影響吸收帶的因素n位阻影響： 共軛系統(tǒng)共平面性共軛系統(tǒng)共平面性 共軛效應(yīng)共軛效應(yīng) max max （藍(lán)移），（藍(lán)移）， n共軛體系： 電子共軛體系增大，電子共軛體系增大，max max 紅移，紅移，maxn溶劑效應(yīng)npH影響：位阻影響共軛效應(yīng)溶劑效應(yīng)不同溶劑對苯酚吸收光譜的影響七、分光光度計 1. 1.光源：光源： 鎢燈或鹵鎢燈鎢燈或鹵鎢燈

5、可見光源可見光源 3501000nm3501000nm 氫燈或氘燈氫燈或氘燈紫外光源紫外光源 200360nm200360nm2. 2.單色器單色器：包括狹縫、準(zhǔn)直鏡、色散元件：包括狹縫、準(zhǔn)直鏡、色散元件 棱鏡棱鏡對不同波長的光折射率不同對不同波長的光折射率不同色散元件色散元件: : 分出光波長不等距分出光波長不等距 光柵光柵衍射和干涉衍射和干涉 分出光波長等距分出光波長等距七、分光光度計5 5記錄裝置：記錄裝置：訊號處理和顯示系統(tǒng)訊號處理和顯示系統(tǒng)3 3吸收池：吸收池： 玻璃玻璃能吸收能吸收UVUV光，僅適用于可見光區(qū)光，僅適用于可見光區(qū) 石英石英不能吸收紫外光，適用于紫外和可見光區(qū)不能吸收

6、紫外光，適用于紫外和可見光區(qū)4 4檢測器：檢測器：將光信號轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘柕难b置將光信號轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘柕难b置 光電池光電池 光電管光電管 光電倍增管光電倍增管 二極管陣列檢測器二極管陣列檢測器分光光度計類型721型分光光度計UV4802雙光束紫外可見分光光度計八、應(yīng)用：1、有機物定性分析min%11maxmax，shcmE示例與標(biāo)準(zhǔn)對照譜圖進(jìn)行對照比較醋酸潑尼松醋酸潑尼松醋酸氫化可的松醋酸氫化可的松醋酸可的松醋酸可的松示例-對比吸收光譜的特征值min%11maxmax，shcmE描述物質(zhì)對單色光吸收強弱與液層厚度和待測物濃度的關(guān)系描述物質(zhì)對單色光吸收強弱與液層厚度和待測物濃度的關(guān)系CABeerlAL

7、amber定律：定律：cbaAAAA總lCTAIITKlg0吸光度透光率吸光系數(shù)兩種表示法%1110cmEM 1%1cmE偏離朗伯比耳定律的因素lCA K透光率的測量誤差T適宜測量范圍7 . 02 . 0%20%65：AT測定結(jié)果相對誤差較小八、應(yīng)用：2、有機物定量分析LCK定量依據(jù)：吸光系數(shù)法（絕對法）mLgmLglEAC/0 .20100/00200. 01207414. 0標(biāo)準(zhǔn)曲線法-蘆丁含量測定對照法：外標(biāo)一點法mLgCCii/1 .98518. 0508. 01000100000.25105 . 2%1 .98%100%12標(biāo)示量標(biāo)示量iCBUVVIS重點內(nèi)容小結(jié)掌握基本概念基本概念: : 生色團(tuán)、助色團(tuán)、透光率、吸光度等生色團(tuán)、助色團(tuán)、透光率、吸光度等基本理論：基本理