脾虛模型的制作以及評(píng)價(jià)

1、脾虛模型的制作以及評(píng)價(jià)為了探討動(dòng)物脾虛的臨床癥狀、病理變化以及通過對(duì)脾虛動(dòng)物進(jìn)行相關(guān)研究 來評(píng)價(jià)脾虛模型的制作是否成功，我們進(jìn)行了此次綜合大實(shí)驗(yàn)。脾位于腹內(nèi)，其主要功能為主運(yùn)化，統(tǒng)血，主肌肉四肢。脾開竅于口，在液 為涎。脾的經(jīng)脈絡(luò)于胃，與胃相表里。脾主運(yùn)化，運(yùn)指運(yùn)輸，化，即消化吸收， 或者指轉(zhuǎn)化，主要是指它有消化、吸收、運(yùn)輸營養(yǎng)物質(zhì)及水濕的功能；脾主統(tǒng)血， 是指脾有統(tǒng)攝血液在脈中正常運(yùn)行，不致溢出脈外的功能；脾主肌肉四肢指脾可 為肌肉四肢提供營養(yǎng)，肌肉四肢的生長發(fā)育及豐滿有力，主要依賴脾所運(yùn)化水谷 精微的濡養(yǎng)。脾氣通于口，脾和則能知五谷，若脾失鍵運(yùn)，則動(dòng)物食欲減退。若 脾虛則運(yùn)化功能失調(diào)，食欲

2、不振，貧血，四肢無力，精神不振，脾虛泄瀉，因此 可以得知長時(shí)間的腹瀉必然引起脾的虛弱。大承氣湯的組成是大黃、芒硝、枳實(shí)、 厚樸，大黃是攻下藥，芒硝是瀉下藥，枳實(shí)、厚樸都是理氣藥，其中芒硝藥效更 強(qiáng)為破氣藥，可以導(dǎo)致腹瀉；番瀉葉也是一種瀉下藥但效力于大承氣湯不同，因 此試驗(yàn)中決定設(shè)立兩組實(shí)驗(yàn)組，一組小鼠灌服大承氣湯，另一組小鼠灌服番瀉葉， 為了增加實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性，還要設(shè)立一個(gè)空白對(duì)照組，灌服生理鹽水。每組有 五只小鼠。作為一個(gè)綜合大實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)過程所需時(shí)間長，而且是脾虛病理模型的制作， 要導(dǎo)致脾虛也需要時(shí)間。因此決定試驗(yàn)時(shí)間設(shè)定為五天，第一組小鼠每天灌服生 理鹽水1ml，第二組小鼠每天灌服大承氣

3、湯0.5ml，第三組小鼠每只灌服番瀉葉 浸出液1ml，每天觀察小鼠的體溫，精神狀態(tài)，背毛的狀況，食欲，飲水，糞便 情況。等到第五天灌藥之后可以簡單的通過一些實(shí)驗(yàn)來評(píng)價(jià)模型的制作是否成 功。脾虛之后會(huì)影響到小鼠的體力、抵抗力、免疫力?？紤]到現(xiàn)有的實(shí)驗(yàn)條件決 定用耐疲勞試驗(yàn)（游泳試驗(yàn)）、耐缺氧試驗(yàn)（在密閉空間存活時(shí)間X耐寒冷試驗(yàn) （環(huán)境低溫存活時(shí)間）三個(gè)實(shí)驗(yàn)來評(píng)價(jià)脾虛模型是否成功。一、藥液的制備1、大承氣湯的制備：其中大黃、芒硝、枳實(shí)、厚樸的成分比例為1； 2； 1： 1，生藥的含量要求是1g/ml，根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求，以及實(shí)驗(yàn)過程中所需要的用量，稱 取大黃、枳實(shí)、厚樸各40g，芒硝80g，加入五倍量的

4、水煎熬45分鐘后將藥液過 濾進(jìn)燒杯中，再加入適量的水在藥渣中加熱煮沸30分鐘，將兩次的藥液混合在 一起，過濾。如果不足200ml，加水至200ml，若超過200ml，濃縮至200ml。 冷卻全室溫備用。2、番瀉葉浸出液：浸出液的濃度為0.3g/ml，取60g番瀉葉加入大燒杯中， 然后加入200ml沸水浸泡8小時(shí)。過濾出浸出液，棄去廢渣，備用。二、脾虛模型的制備1、第一天將小鼠分組，每組五只一共三組，分別將每組小鼠稱重計(jì)算出平均體重，測 量每組小鼠的體溫，記錄，觀察小鼠的精神狀態(tài)以及皮毛狀態(tài)。第一組小鼠每只 灌服1ml的生理鹽水，第二組小鼠每只灌服0.5ml的大承氣湯，第三組小鼠每只 灌服1ml

5、番瀉葉浸出液。灌好藥之后給予鼠糧和飲水第二天繼續(xù)觀察。小鼠精神狀態(tài)良好，食欲及飲水量均正常，被毛光滑有光澤，糞便干硬呈顆 粒狀。三組小鼠的平均體重分別為22.9g、20.8g、20.9g，平均體溫分別為37.7C、37.8C、37.3。其中第三組小鼠的水壺漏水，墊料被濕透可能造成體溫測量值 較真實(shí)值稍低。2、第二天第一組小鼠死亡一只，第二組小鼠死亡兩只。第一組四只小鼠，第二組三只 小鼠，第三組五只小鼠。早上在給小鼠灌藥之前發(fā)現(xiàn)鼠糧全部被吃光，水量也都有所減少，測量體溫 三組小鼠分別為37.3C、37.4C、37.4C；平均體重分別為20.3g、17.0g、19.6g； 第三組中有一只小鼠糞便較

6、軟，但依然呈顆粒狀，其余小鼠糞便無明顯變化；三 組小鼠精神狀態(tài)依然良好，被毛依然順滑有光澤，第三組小鼠偶爾可見到有聚堆 并有微微發(fā)抖現(xiàn)象；在觀察期間發(fā)現(xiàn)第二組小鼠經(jīng)常喝水，第三組小鼠經(jīng)常吃鼠 糧。灌藥結(jié)束后放置足夠鼠糧及飲水。根據(jù)兩天的體重與體溫變化可以看出三組小鼠的體重與體溫均下降，理論上 來講第一組小鼠不應(yīng)該有明顯變化，體重下降可能是鼠糧不充分造成。理論上講 第三組小鼠的變化應(yīng)該最明顯，但是第二組小鼠平均體重下降最明顯，可能是因 為死亡的兩只小鼠體重比較大。3、第三天三組小鼠各死亡一只。第一組三只小鼠，第二組兩只小鼠，第三組四只小鼠。灌藥之前為小鼠稱重，測量體溫，小鼠平均體重分別為22.4

7、g、19.1g、19.5g； 平均體溫分別為37.3C、37.3C、37.2C。三組小鼠精神狀態(tài)依然良好，被毛順 滑有光澤，第三組中前一天糞便較稀軟的小鼠糞便更加稀軟。第一組和第三組前 一天放置的鼠糧被吃光，第二組由于小鼠數(shù)量少剩余有少量鼠糧。第一組小鼠的體重有所回升可能是因?yàn)閿?shù)量充分，之前鼠糧不足；第二組小 鼠體重也有所回升，理論上大承氣湯可使其體重下降，可能是由于第一天鼠糧不 足導(dǎo)致體重下降明顯，第二天給予鼠糧充分，使其增加的體重大于減輕的體重而 導(dǎo)致總體上體重有所回升；第三組小鼠體重變化不大，可能是因?yàn)榉瑸a葉的泄瀉 作用更明顯，但是有充分的鼠糧補(bǔ)充，減輕的體重于增加的體重差不多導(dǎo)致。第

8、一組小鼠體溫?zé)o變化，與理論相符；第二組小鼠體溫下降0.1C，第三組小鼠體 溫下降0.2C，可以推斷番瀉葉的泄瀉作用比大承氣湯明顯。4、第四天第一組小鼠死亡一只。第一組兩只小鼠，第二組兩只小鼠，第三組四只小鼠。灌藥前為小鼠稱重測量體溫，三組小鼠平均體重分別為23.5g、20.5g、18.5g； 三組小鼠平均體溫分別為37.3C、C37.5、37.4C。第三組小鼠精神狀態(tài)最差， 聚集在一起不怎么活動(dòng)；第一組小鼠精神狀態(tài)最好，活躍；第二組小鼠精神狀態(tài) 介于第一組和第三組之間。三組小鼠被毛順滑有光澤，第三組小鼠拉稀便，尾部 周圍毛被污染。三組小鼠鼠糧充分，第一組無剩余，其余兩組小鼠鼠糧有少量剩 余。第

9、一組小鼠體重繼續(xù)回升，跟充分的鼠糧有關(guān)系；第二組小鼠體重?zé)o明顯變 化；第三組小鼠體重又下降，說明番瀉葉有較明顯的泄瀉作用。第一組小鼠體溫 無變化，第二組跟第三組小鼠的體溫卻有所升高。5、第五天第三組小鼠死亡一只。第一組兩只小鼠，第二組兩只小鼠，第三組三只小鼠。灌藥之前為小鼠稱重測量體溫。三組小鼠平均體重分別為24g、19g、17.6g； 平均體溫分別為37.2C、37.1C、36.7C。三組小鼠精神狀態(tài)第一組較第二組活 潑，第二組較第三組活潑。第三組小鼠拉稀便污染尾根部周圍皮毛，第二組小鼠的糞便稀軟但不至于呈液態(tài)。第一組小鼠的體重不下降，第二組小鼠與第三組小鼠的體重都有所下降，而 且第三組小鼠

10、體重下降比第二組小鼠更明顯；第一組小鼠的體溫沒有明顯變化， 第二組小鼠與第三組小鼠體溫下降且的三組小鼠體溫下降非常明顯，由此推斷番 瀉葉的泄瀉作用比大承氣湯更加明顯。三、脾虛模型制作的評(píng)價(jià)第五天下午分別通過耐寒冷試驗(yàn)、耐疲勞試驗(yàn)和耐缺氧試驗(yàn)來評(píng)價(jià)脾虛模型 的制作是否成功。1、耐寒冷試驗(yàn)分別將三組小鼠各取出一只做好標(biāo)記放入放有冰塊的盆中，開始計(jì)時(shí)并觀察 三只小鼠的表現(xiàn)并記錄小鼠的死亡時(shí)間。當(dāng)放入盆中5min之后發(fā)現(xiàn)第三組的小 鼠四肢蜷縮發(fā)抖，呼吸加快；8min時(shí)第二組的小鼠活動(dòng)減弱，不怎么活動(dòng)；10min 時(shí)第三組的小鼠不再活動(dòng)；第一組的小鼠因?yàn)楹渌奶幾邉?dòng)，并試圖跳出盆子； 28min時(shí)第三組

11、的小鼠死亡，35min時(shí)第二組的小鼠死亡，10min后第一組的小 鼠仍然具有生命活動(dòng)。2、耐疲勞試驗(yàn)分別將三組小鼠各取出一只做好標(biāo)記放入裝水的盆子中，水深要使小鼠不能 蹬到盆底。剛開始時(shí)三只小鼠都奮力游泳，三組小鼠游泳致死亡時(shí)間分別為 8min、10min、12min。3、耐缺氧試驗(yàn)分別將三組小鼠各取出一只做好標(biāo)記放在三個(gè)試劑瓶中，然后將三個(gè)試劑瓶 倒置于水盆中以確保試劑瓶的密閉性良好。剛開始時(shí)三只小鼠無明顯變化隨后因 為空氣稀薄出現(xiàn)呼吸加快的現(xiàn)象。最后三只小鼠均窒息而死，死亡時(shí)間分別為為 10min、16min、20min。4、評(píng)價(jià)結(jié)果由前面三個(gè)試驗(yàn)可以看出三組小鼠的體力、耐寒冷能力、與耐缺

12、氧能力都是 第一組小鼠強(qiáng)于第二組小鼠，第二組小鼠又強(qiáng)于第三組小鼠。由此可以判斷出番 瀉葉導(dǎo)致脾虛的效果要比大承氣湯導(dǎo)致脾虛的效果明顯，與理論和預(yù)期的試驗(yàn)結(jié) 果相符合，根據(jù)所做的實(shí)驗(yàn)和驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)可以初步判斷脾虛模型的制作基本上比 較成功。五、實(shí)驗(yàn)總結(jié)整個(gè)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行了五天，簡單總結(jié)灌藥期間各組小鼠的各項(xiàng)指標(biāo)如下:第一天第二天第三天第四天第五天體 重 （g）第一組22.920.322.423.524第二組20.817.019.120.519第三組20.919.619.518.517.6體溫(C)第一組37.737.337.337.337.2第二組37.837.437.337.537.1第三組37.33

13、7.437.237.436.7精 神 狀第一組良好良好良好良好良好第二組良好良好良好活動(dòng)減少活動(dòng)減少態(tài)第三組良好良好不太喜歡活動(dòng)不活動(dòng)稍有萎靡糞便第一組干硬，顆粒狀干硬，顆粒狀干硬，顆粒狀干硬，顆粒狀干硬，顆粒狀第二組干硬，顆粒狀干硬，顆粒狀變軟，顆粒狀變軟，顆粒狀不太明顯稀軟第三組干硬，顆粒狀變軟，顆粒狀稀軟水樣稀便水樣稀便，污染皮毛被毛第一組順滑有光澤第二組順滑有光澤第三組順滑有光澤皮毛被糞便污染，不是很光滑，光澤度減弱由以上結(jié)果可以看出，第一組小鼠的各項(xiàng)指標(biāo)基本上都很穩(wěn)定，只是第一天 體溫偏高，可能是應(yīng)激引起的。第三組小鼠的試驗(yàn)指標(biāo)的變化趨勢很穩(wěn)定，體溫 和體重一直都在下降，與理論狀況相符合。第二組的體溫和體重?cái)?shù)據(jù)的變化卻顯 得稍有混亂，可能與大承氣湯的作用效果不是很明顯有關(guān)。評(píng)價(jià)試驗(yàn)結(jié)果總結(jié)如下：穴驗(yàn)名稱 別 間(min)耐寒冷試驗(yàn)?zāi)推谠囼?yàn)?zāi)腿毖踉囼?yàn)第一組451220第二組351016第三組28810由評(píng)