講稿動物微生物學-第20講

1、動物微生物學 24馬有智20第七節(jié) 布氏桿菌屬馬耳他布魯氏菌 流產(chǎn)布魯氏菌豬布魯氏菌綿羊布魯氏菌 沙林鼠布魯氏菌犬布魯氏菌一、形態(tài)及染色特性 球桿或短桿狀。短鏈或成堆，無運動性，無莢膜，G-，柯氏染色為紅色。 二、培養(yǎng)特性需氧菌，生長緩慢。培養(yǎng)基常用： 胰酶消化大豆瓊脂肝血瓊脂：表面光滑隆起、濕潤、光澤，邊緣整齊的圓形，不溶血，呈灰白色菌落。肝湯肉湯：輕度渾濁，久后可形成粘稠，灰白色的沉淀物。三、生化特性分解葡萄糖，木糖等，吲哚陰性，接觸酶及氧化酶陽性，M.R和V-P均陰性。G+C含量：55mol%58mol%。四、抗原結(jié)構(gòu)光滑型菌落： A、M A 、M抗原為脂多糖蛋白復合物，位于細胞壁表層。

2、 A/M=1/20，馬耳他布氏菌 A/M=20/1，流產(chǎn)布氏菌 A/M=2/1， 豬布氏菌粗糙型菌落：含R抗原 屬外抗原：光滑型布氏菌表面抗原與下列菌有共同抗原，可產(chǎn)生交叉反應。 小腸結(jié)腸炎耶爾新氏菌0：9型 土拉熱弗朗西絲菌 沙門氏菌0：30 霍亂弧菌 大腸埃希氏菌0：157五、致病性產(chǎn)生較強的內(nèi)毒素。馬耳他布氏菌毒力最強，豬布氏菌次之，流產(chǎn)布氏菌最弱。引起全身性網(wǎng)狀內(nèi)皮細胞增生，以骨關節(jié)為甚。母畜主要表現(xiàn)為流產(chǎn)，公畜主要發(fā)生附睪炎。主要表現(xiàn)為發(fā)熱和關節(jié)腫痛，特稱“波浪熱”或“馬耳他弛張熱”。六、抵抗力對濕熱抵抗力不強，60，30min，煮沸立即殺死。對各種消毒劑抵抗力也不強。七、微生物學診

3、斷（一）細菌學檢查 病料：流產(chǎn)胎兒及胎兒胃內(nèi)充物、脾、骨髓、淋巴結(jié)、陰道分泌物等。 1、涂片鏡檢 柯氏染色：紅色、球桿狀、較小，雜菌染為綠色或藍色。2、分離培養(yǎng) 培養(yǎng)時注意事項培養(yǎng)基選擇抑制雜菌加結(jié)晶紫、硫堇、桿菌肽等一份有氧培養(yǎng)，一份置5%-10%CO2下培養(yǎng)。培養(yǎng)時間足夠長。 菌落：細小，針尖大，半透明的菌落3、動物實驗 豚鼠：皮下或腹腔接種病料，30天可產(chǎn)生全身病變。 做凝集試驗測效價，如1：50為布菌感染。（二）血清學檢查 1、虎紅平板凝集試驗 初步篩選，大群檢疫。 方法：玻片上加0.03ml的待檢血清,然后加入虎紅酸性抗原懸液0.03ml,充分混勻,4-7分觀察結(jié)果，凝集為陽性。 優(yōu)

4、點：簡單、快潔，檢出率、敏感性高。2、試管凝集試驗 判定標準： 牛、馬、駱駝：1：100 + 1：50 可疑 豬、狗、羊： 1：50 + 1：25 可疑3、全乳環(huán)狀反應 方法：待測牛乳（1ml）+布氏環(huán)狀抗原（0.05ml）37,1h乳脂層帶顏色的環(huán)為陽性。4、熒光抗體技術 快速簡便，敏感性和特異性較強。（三）變態(tài)反應檢查 用于綿羊、山羊、豬。 方法：布氏桿菌水解素0.2ml注于羊尾根皺襞或豬耳根皮內(nèi)，24h及48h后觀察一次。注射部位紅腫，為陽性。八、免疫防治 1、布氏桿菌19號弱毒活疫苗、羊布氏桿菌Rev.弱毒活疫苗。 2、羊布氏桿菌53H38號滅活佐劑菌、牛布氏桿菌45/20滅活佐劑菌。

5、 3、國內(nèi)使用的有： 羊布氏菌5號弱毒活疫苗（M5） 豬布氏菌2號苗（S2） 第七章 分支菌屬形態(tài)結(jié)構(gòu)致病性結(jié)核分枝桿菌 主要特性 抵抗力一、分支桿菌屬的形態(tài)結(jié)構(gòu) G+ 抗酸菌 快生長和慢生長兩類 致病多為慢性 結(jié)核分支桿菌菌體細長，牛分支桿菌菌體 較短粗，禽分支桿菌短小并具有多形性，副結(jié)核分支桿菌菌體以細長為主，常排列成叢或成堆。 二、分枝桿菌屬的致病性結(jié)核分支桿菌、牛分支桿菌和禽分支桿菌能引起人和畜禽的結(jié)核病副結(jié)核分支桿菌能引起牛、羊等反芻動物的副結(jié)核?。韵男詡魅静。?三、結(jié)核分枝桿菌主要特性抗酸染色陽性：抗酸染色法，染成紅色。培養(yǎng)特性：專性需氧，營養(yǎng)要求高，生長緩慢，一般需24周長

6、成肉眼可見的菌落 結(jié)核桿菌抗酸染色抗酸菌：能抵抗3%鹽酸酒精的脫色作用而呈紅色抗酸菌 非抗酸菌 結(jié)核桿菌培養(yǎng)四、抵抗力四怕對乙醇敏感對濕熱敏感對紫外線敏感對鏈霉素、異煙肼、利福平、環(huán)絲氨酸、乙胺丁醇、卡那霉素、對氨基水楊酸等抗癆藥物敏感，但長期用藥容易出現(xiàn)耐藥性四不怕對干燥的抵抗力特別強結(jié)核分枝桿菌對酸（3% HCl或6% H2SO4) 或堿（4% NaOH) 有抵抗力，15min不受影響對堿性染料有抵抗力對青霉素等抗生素耐藥 糖脂： 阿拉伯半乳糖脂復合物 分支菌酸 糖脂的含量超過菌體總量的10%。糖脂成分有效地刺激哺乳動物的免疫系統(tǒng)。五、結(jié)構(gòu)特點六、致病機理細胞內(nèi)寄生和形成局部病灶為特點。細

7、菌被巨噬細胞吞噬在其內(nèi)繁殖，形成病灶，產(chǎn)生干酪樣壞死。壞死灶被吞噬細胞、T細胞與B細胞等包圍，形成結(jié)核結(jié)節(jié)。 卡氏(Glmette)和介氏(Guerin)： 將牛分支桿菌在培養(yǎng)基上經(jīng)13年230次傳代，便有毒菌株變?yōu)槎玖p弱菌株，對人、牛無致病性，成為卡介苗（BCG）。七、免疫性與變態(tài)反應主要產(chǎn)生細胞免疫。重癥動物的細胞免疫反應低下，甚至消失，血清中特異性抗體顯著增加。遲發(fā)性變態(tài)反應八、微生物學診斷1、顯微鏡檢查2、分離培養(yǎng)3、動物接種 禽分支桿菌可使雞致病;結(jié)核桿菌對琢鼠有較強的致病性，皮下注射35周可引起明顯病變;牛分支桿菌對免有致病性，接種后3周至3個月死亡。 4、變態(tài)反應 PPD皮內(nèi)注射法：牛頸部皮內(nèi)注射0.lml(10萬lU/m1)72h后局部炎癥反應明顯，皮腫脹厚度差4mm為陽性;如局部炎癥不明顯，皮腫脹厚度差在24mm間，為疑似;如無炎癥反應，皮膚腫脹厚度差在2mm以下，為陰性。5、血清學檢查 結(jié)核病細胞免疫與體液