骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢驗

1、骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢驗第1頁，共96頁，2022年，5月20日，16點10分，星期四2、細胞質(zhì)：（1）量由少到多（2）染色由深藍到淺藍（3）顆粒：從無有嗜天青顆粒特異性顆粒3、細胞核：（1）大小：由大到小，由規(guī)則到不規(guī)則（巨核細胞核由小到大）（2）染色質(zhì)：細致疏松粗糙成塊4、核/質(zhì) 比例：由大到小。第2頁，共96頁，2022年，5月20日，16點10分，星期四第3頁，共96頁，2022年，5月20日，16點10分，星期四二、血細胞的形態(tài)學(xué)特征 1、紅細胞系（1）原紅（normoblast）：1522um（2）早幼紅（basophilic normoblast）：11-20um（3）中幼紅（poly

2、chromatic normoblast）：8-18um（4）晚幼紅（ortho-chromatic nurmblast）：7-12um（5）網(wǎng)織紅（RC）： 7.4um（6）成熟RBC（RBC）：7.4um第4頁，共96頁，2022年，5月20日，16點10分，星期四2、粒細胞系統(tǒng)：（1）原粒細胞（myeloblast）：11-18um（2）早幼粒（promyelocyte）：12-22um（3）中幼粒（myelocyte）中性中幼粒（neutrophilic myelocyte）：10-18um嗜酸性中幼粒（eosinophilic myelocyte）：15-20um嗜鹼性中幼粒（bas

3、ophilic myelocyte）：10-15um第5頁，共96頁，2022年，5月20日，16點10分，星期四（4）晚幼粒細胞（metamyelocyte）：10-16um中性 嗜酸 嗜鹼（5）桿狀核粒細胞（stab granulocyte、 bandgranulocyte）中性 嗜酸 嗜鹼（6）分葉核粒細胞（segmented granulocyte）中性 嗜酸 嗜鹼第6頁，共96頁，2022年，5月20日，16點10分，星期四3、淋巴細胞系統(tǒng)（1）原淋巴細胞（Lymphoblast）：10-18um（2）幼淋巴細胞（prolymphocyte）：10-16um（3）淋巴細胞（lymph

4、ocyte）大淋巴細胞 小淋巴細胞 第7頁，共96頁，2022年，5月20日，16點10分，星期四4、漿細胞系統(tǒng)：（1）原漿細胞（plasmablast）：15-20um（2）幼漿細胞（proplasmacyte）：12-16um（3）漿細胞（plasmacyte）：8-20um第8頁，共96頁，2022年，5月20日，16點10分，星期四5、單核細胞系統(tǒng)：（1）原單核細胞（monoblast）：15-25um（2）幼單核細胞（promonocyte）：15-25um，核可見凹陷，切跡，扭曲或折疊（3）單核細胞（macrophage）：12-20um：核呈腎形，馬蹄形，筆架形及“S”形。（4）

5、吞噬細胞（macrophage）：單核細胞組織細胞巨噬細胞或吞噬細胞第9頁，共96頁，2022年，5月20日，16點10分，星期四6、巨核細胞學(xué)：（1）原巨核細胞（megakaryoblast）：15-30um（2）幼巨核細胞（promegakaryocyte）：30-50um（3）顆粒型巨核細胞（granular megakaryocyte）：50-70um（4）產(chǎn)板巨（thronbocytogenous megakaryocyte）。（5）巨核細胞裸核（naked nucleus）第10頁，共96頁，2022年，5月20日，16點10分，星期四7、其它細胞（1）網(wǎng)狀細胞 （3）纖維細胞（2

6、）內(nèi)皮細胞 （4）組織嗜鹼（5）成骨細胞 （6）破骨細胞第11頁，共96頁，2022年，5月20日，16點10分，星期四三、細胞化學(xué)染色概念：（1）細胞形態(tài)學(xué)為基礎(chǔ)（2）對骨髓片按一定程序染色（3）顯微鏡下觀察（細胞化學(xué)成分及其變化）第12頁，共96頁，2022年，5月20日，16點10分，星期四（一）過氧化物酶染色1、原理：細胞中的POX（peroxidase）H2O2O2氧化聯(lián)苯胺呈藍色+亞硝基鐵氰化鈉結(jié)合形成藍黑色顆粒。2、結(jié)果：（1）陰性：無顆粒（2）弱陽性：細小顆粒分散（3）強陽性：顆粒粗大而密集3、意義：（1）急粒：強陽性（2）急單；弱陽性（3）急淋：陰性第13頁，共96頁，202

7、2年，5月20日，16點10分，星期四（二）中性粒細胞堿性磷酸酶染色1、原理：NAP（neutrophil alkaline phosphatase）的顯示方法有偶氮偶聯(lián)法：NAP（）-磷酸茶酚鈉-茶酚+重氮鹽形成灰黑色沉淀（定位于酶活性處）。第14頁，共96頁，2022年，5月20日，16點10分，星期四2、結(jié)果：（1）5級分類0級陰性1級+2級+3分+4分4（+）（2）陽性率報告：計數(shù)100NC中陽性細胞分率。（3）積分報告：100NC細胞的累積分數(shù)第15頁，共96頁，2022年，5月20日，16點10分，星期四3、參考區(qū)間：NAP：陽性率：10-40%積分：40-80分4、臨床意義：（1

8、）感染性疾病的診斷：鑒別細菌或病毒感染（2）CML和類白血病鑒別（3）AA與PNH鑒別第16頁，共96頁，2022年，5月20日，16點10分，星期四第17頁，共96頁，2022年，5月20日，16點10分，星期四（三）酸性磷酸酶染色1、原理：ACP（acid phosphatase）：ACP（PH5.0）甘油磷酸鈉磷酸鈉+硝酸鉛磷酸鉛沉淀+硫化銨反應(yīng)棕黑色硫化鉛沉淀。2、結(jié)果：胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)棕黑色顆粒為陽性反應(yīng)。第18頁，共96頁，2022年，5月20日，16點10分，星期四3、意義：（1）多毛細胞白血病（hairy cell leukemia，HCE）診斷：HCL為陽性不被L-酒酶抑制（2）T

9、-B淋巴細胞鑒別：T陽性，B陰性（3）協(xié)助鑒別Gaucher病與Niemann-Pick?。篊aucher陽性，Niemann-Pick陰性（4）單核細胞、組織細胞、網(wǎng)狀細胞、巨核細胞ACP陰性。第19頁，共96頁，2022年，5月20日，16點10分，星期四第20頁，共96頁，2022年，5月20日，16點10分，星期四第21頁，共96頁，2022年，5月20日，16點10分，星期四（四）氯化醋酸AS-D茶酚酯酶染色1、原理： AS-D（SE）氯化醋酸AS-D茶酚AS-D+重氮鹽GBC偶聯(lián)紅色沉淀定位于胞漿中2、結(jié)果：粒系陽性或強陽性反應(yīng) 單核陰性或弱陰性反應(yīng) 淋巴、嗜酸細胞、漿細胞陰性反應(yīng)

10、3、意義： （1）急粒陽性或強陽性 （2）急單、急淋陰性反應(yīng)第22頁，共96頁，2022年，5月20日，16點10分，星期四第23頁，共96頁，2022年，5月20日，16點10分，星期四（五）-醋酚茶酚酯酶染色1、原理：-NAE-醋酸茶酚-茶酚+重氮鹽染料偶聯(lián)黑色沉淀定位于胞漿中。2、結(jié)果： 1、單核細胞陽性（灰黑色沉淀） 2、粒細胞弱陽性 3、淋巴細胞陰性3、意義： 1、急單強陽性反應(yīng) 2、急粒弱陽性反應(yīng)第24頁，共96頁，2022年，5月20日，16點10分，星期四第25頁，共96頁，2022年，5月20日，16點10分，星期四（六）糖原染色1、原理：PAS反應(yīng) 過典酸（糖原）醛基+無色

11、品紅紫紅色化合物2、結(jié)果：（1）陽性：顆粒狀、小塊狀或彌漫均勻紅色（2）分為：強陽性、弱陽性和陰性或陽性百分率（3）粒系：原粒陰性，早幼粒以下階段陽性反應(yīng)程度漸增強單核弱陽性，淋巴細胞陰性紅系：陰性巨核：陽性第26頁，共96頁，2022年，5月20日，16點10分，星期四3、意義： 1、紅血病與巨幼貧鑒別：前者幼紅細胞陽性，后者幼紅細胞陰性 2、白血病：急粒：陰性或弱陽性 急淋：原幼淋陽性呈粗顆粒狀或塊狀 急單：呈彌漫均勻或細顆粒狀 3、其它： Gaucher細胞陰性 Niemann-Pick陰性第27頁，共96頁，2022年，5月20日，16點10分，星期四第28頁，共96頁，2022年，5

12、月20日，16點10分，星期四第29頁，共96頁，2022年，5月20日，16點10分，星期四（七）鐵染色：1、原理：（1）鐵鐵蛋白或含血黃素單核-吞噬細胞質(zhì)內(nèi)（2）Fe3+亞鐵氰化鉀鐵氰化鐵沉淀（普魯土藍）2、結(jié)果：（1）細胞外鐵：一、1+ 4（+）（2）細胞內(nèi)鐵：含有鐵顆粒的幼紅細胞鐵粒幼紅細胞油鏡下計數(shù)100個幼紅細胞計算其陽性率I、II、和環(huán)狀鐵粒幼細胞第30頁，共96頁，2022年，5月20日，16點10分，星期四3、參考值：（1）細胞外鐵：1+ 2（+），大多為2+（2）細胞內(nèi)鐵：2090%4、意義：（1）缺鐵性貧血診斷（2）非缺鐵性貧血：如AA、鐵粒幼細胞性貧血、溶貧、巨幼貧、內(nèi)

13、外鐵增加 （3）MDS-RARS：環(huán)狀鐵粒幼細胞15%第31頁，共96頁，2022年，5月20日，16點10分，星期四第32頁，共96頁，2022年，5月20日，16點10分，星期四第33頁，共96頁，2022年，5月20日，16點10分，星期四四、細胞免疫分型：1、用單抗和免疫學(xué)技術(shù)檢測細胞表血特異性2、分化抗原細胞所屬系列、分化程度及功能狀態(tài)。（一）檢測方法： 1、免疫熒光法（immme of luoresence technique）（1）原理：熒光標記的單抗+細胞表面分化抗原結(jié)合產(chǎn)生熒光用熒光顯微鏡和流式細胞儀檢測直接熒光法、間接熒光法（2）參考值：有熒光陽性細胞 無熒光陰性細胞第34

14、頁，共96頁，2022年，5月20日，16點10分，星期四2、免疫酶染色法：（1）APAAP法（堿性磷酸酶抗堿性磷酸酶法）：一抗+CD抗原+AKP標記二抗底物顯色（2）PAP法（過氧化物酶抗過氧化物酶法）一抗+CD抗原+POX標記抗體底物顯色（3）ABC法（親和素生物素酶復(fù)合物）法：一抗+CD抗原+生物素標記二抗HRP標記親和素+底物 第35頁，共96頁，2022年，5月20日，16點10分，星期四第36頁，共96頁，2022年，5月20日，16點10分，星期四第37頁，共96頁，2022年，5月20日，16點10分，星期四第38頁，共96頁，2022年，5月20日，16點10分，星期四（二）

15、細胞免疫分型的臨床應(yīng)用1、有助于識別不同系列的細胞：髓系：CD13、CD14、CD15、CD32、CD33、CD65、CD91、CD156、CD166淋巴系：CD1、CD2、CD3、CD4、CD5、CD7、CD8、CD9、CD10、CD19、CD20、CD52、CD77巨核系：CD41、CD42、CD612、識別不同的淋巴細胞：T系統(tǒng)：CD2、CD3、CD4、CD7、CD8B系統(tǒng)：CD19、CD20、CD22NK：CD16、CD56第39頁，共96頁，2022年，5月20日，16點10分，星期四3、用于T淋巴細胞亞群檢測：T：（CD3）TH（CD4+ CD8）TS（CD4 CD8+）4、用于識

16、別不同分化階段的細胞：（1）造血干細胞CD34+、CD90+、lin（2）髓系祖細胞CD34+、CD33+（3）T淋巴細胞系祖細胞CD34+、TDT+、CD10+、CD7+（4）B淋巴細胞系祖細胞CD34+、CD19+第40頁，共96頁，2022年，5月20日，16點10分，星期四5、有助于識別不同功能狀態(tài)的細胞：記憶T細胞CD45RO高表達、CD45RA不表達活化T細胞CD45RA不表達、CD25、CD2、CD45RO、CD54、CD58均強表達。第41頁，共96頁，2022年，5月20日，16點10分，星期四6、用于不同系列和不同分化階段的細胞進行分離：分選的流式細胞儀7、白血病的免疫分型

17、8、可用于白血病微小殘留病檢測：（1）CD病人：CD19、CD22、CD10、CD7、CD5、CD13、CD37、CD34陽性并伴有TbT+則可診斷微小殘留病存在（2）敏感性：10-4水平第42頁，共96頁，2022年，5月20日，16點10分，星期四（三）急性白血病細胞免疫表型特點第43頁，共96頁，2022年，5月20日，16點10分，星期四第44頁，共96頁，2022年，5月20日，16點10分，星期四第45頁，共96頁，2022年，5月20日，16點10分，星期四五、細胞遺傳學(xué)分析1、染色體檢查方法2、染色體分析（1）染色體命名：46條，22對常染色體，1對性染色體男46XY，女：46

18、XXA-G7組ZP35表示第46頁，共96頁，2022年，5月20日，16點10分，星期四（2）核型分析及其書寫：（1）書寫順序：染色體數(shù)目、性染色體、染色體異常（2）染色體變異以小寫表示：t易位 iso或i等臂染色 inv倒位 ins插入del缺失 r環(huán)狀染色“”-丟失 “+”-增加第47頁，共96頁，2022年，5月20日，16點10分，星期四（3）第一括號內(nèi)表示染色體數(shù)目，第二括號內(nèi)表示染色體區(qū)帶（4）P表示短臂，q表示長臂（5）45，X，-Y，t（8；21），（q22，q22）表示45條染色體，丟失Y染色體，第8號與第21號染色體之間易位，斷裂點在8號染色體長臂2區(qū)2帶與21號染色體長

19、臂2區(qū)2帶。3、染色體畸變（1）二倍體（2n）（2）數(shù)目畸變：整倍體和非整倍體（3）亞二倍體：比2n少（4）超二倍體：比2n多第48頁，共96頁，2022年，5月20日，16點10分，星期四第49頁，共96頁，2022年，5月20日，16點10分，星期四第50頁，共96頁，2022年，5月20日，16點10分，星期四第51頁，共96頁，2022年，5月20日，16點10分，星期四第五節(jié)：常見血液病的血液學(xué)特征一、貧血 貧血（anemia）：指單位容積循環(huán)血液中紅細胞數(shù)，血紅蛋白量及血細胞比容（Hct）低于參考值低限，貧血是一種癥狀。第52頁，共96頁，2022年，5月20日，16點10分，星期

20、四（一）缺鐵性貧血：1、定義：IDA（iron deficiency anemia）：由于缺鐵而造成的貧血。2、血象：（1）Hb、RBC下降，Hb下降更明顯（2）血片：RBC體小、淡染、中心區(qū)擴大（MCV、MCH、MCHC均下降）（3）RC輕度增多或正常（4）WBC、PLT正常第53頁，共96頁，2022年，5月20日，16點10分，星期四 3、骨髓象： （1）增生明顯活躍 （2）紅系：明顯增生30%，以中、晚幼紅為主，胞體小胞質(zhì)少，嗜堿性，核小，固縮 （3）粒細胞等相對減少，巨核系正常第54頁，共96頁，2022年，5月20日，16點10分，星期四第55頁，共96頁，2022年，5月20日，

21、16點10分，星期四（二）溶血性貧血：1、定義：HA（hemolytic anemia）是由于各種原因使紅細胞壽命縮短，破壞增加，超過了骨髓的代償功能所致的貧血。2、血象：（1）Hb、RBC平行下降（2）血片：RBCRA不一，易見大RBC，嗜多色紅細胞及有核紅細胞，可見H-J小體，Cabot環(huán)、點彩RBC，也見特殊RBC：球形RBC、靶形RBC、橢圓RBC，裂紅細胞。（3）RC：明顯增多（4）WBC、PLT增多或正常第56頁，共96頁，2022年，5月20日，16點10分，星期四3、骨髓象：（1）增生明顯活躍（2）紅系：明顯增多，可3050%，以中晚幼紅為主，可見核畸形，H-J小體，嗜鹼性點彩

22、等。（3）粒系相對減少，形態(tài)正常。（4）巨核系正常。第57頁，共96頁，2022年，5月20日，16點10分，星期四第58頁，共96頁，2022年，5月20日，16點10分，星期四（三）巨幼細胞貧血1、巨幼貧（megaloblastic anemia）：由于葉酸及VitB12缺乏使DNA合成障礙所引起的一組貧血。2、血象：（1）Hb、RBC下降，RBC下降更明顯。（2）血片：RBC大小不等，可見嗜多色、點彩，H-J小體，Cabot環(huán)。（3）RC輕度增加。（4）WBC減少，分葉過多，在45葉以上。（5）Plt減少。第59頁，共96頁，2022年，5月20日，16點10分，星期四3、骨髓象： （1

23、）增生明顯活躍 （2）紅系：40%，巨幼變 （3）粒系：巨幼變 （4）巨核系：巨幼變及分葉第60頁，共96頁，2022年，5月20日，16點10分，星期四第61頁，共96頁，2022年，5月20日，16點10分，星期四（四）再生障礙性貧 1、再障（aplastic anemia AA）：是由于多種原因所致骨髓造血干細胞減少和功能異常導(dǎo)致三系減少。 2、癥狀為：感染、貧血和出血。 3、分型：急性和慢性。第62頁，共96頁，2022年，5月20日，16點10分，星期四1、急性型：（1）血象：Hb、RBC明顯減少RC：0.5109/L或OWBC：1.0-2.0109/L， L占60%plt：2010

24、9/L或10109/L（2）骨髓象：增生明顯減低三系明顯減少非造血細胞增多骨髓小粒以非造血細胞為主。第63頁，共96頁，2022年，5月20日，16點10分，星期四第64頁，共96頁，2022年，5月20日，16點10分，星期四第65頁，共96頁，2022年，5月20日，16點10分，星期四2、慢性型：（1）血象：Hb、RBC平行下降，為中、重度貧血RC：15109/LWBC：2.0-3.0109/L， L占50%plt：30109/L-50109/L（2）骨髓象：增生減低三系明顯減少淋巴細胞相對增多、非造血細胞增多骨髓小粒以非造血細胞為主。第66頁，共96頁，2022年，5月20日，16點1

25、0分，星期四第67頁，共96頁，2022年，5月20日，16點10分，星期四第68頁，共96頁，2022年，5月20日，16點10分，星期四二、白血病 1、白血?。╨eukemia）：白血病細胞異常增生與分化成熟障礙，并浸潤其他器官和組織，正常造血受抑制。 2、癥狀：貧血、出血感染和浸潤癥狀 3、分型：急性和慢性 4、分類：成人以急粒為主，兒童以急淋為主 慢粒比慢淋為多見第69頁，共96頁，2022年，5月20日，16點10分，星期四（一）急淋白血?。?、血象：（1）Hb、RBC下降（重度或中度下降），可見幼紅細胞（2）WBC計數(shù)：增多：10-50109/l正常減少：如APL （3）WBC分類

26、：可見白血病細胞（幼稚細胞，異常白細胞），可達30-90%。 （4）Plt計數(shù)減少：早期正常，晚期明顯減少第70頁，共96頁，2022年，5月20日，16點10分，星期四 2、骨髓象： （1）骨髓增生明顯或極度活躍 （2）一系或二系原始細胞明顯增多：30%ANC （3）其它系列受抑制或減少 （4）涂片中：急淋易見涂抹細胞，急非淋，可見Auer小體第71頁，共96頁，2022年，5月20日，16點10分，星期四3、分型（1）FAB分型：急淋和急非淋（2）AML：M1、M2、M3、M4、M5、M6、M7（3）ALL：L1、L2、L3（4）我國AML分型標準：修改為：M2M2a、M2bM3M3a M

27、3b M4M4a、 M4b、 M4c第72頁，共96頁，2022年，5月20日，16點10分，星期四第73頁，共96頁，2022年，5月20日，16點10分，星期四第74頁，共96頁，2022年，5月20日，16點10分，星期四第75頁，共96頁，2022年，5月20日，16點10分，星期四第76頁，共96頁，2022年，5月20日，16點10分，星期四第77頁，共96頁，2022年，5月20日，16點10分，星期四第78頁，共96頁，2022年，5月20日，16點10分，星期四第79頁，共96頁，2022年，5月20日，16點10分，星期四第80頁，共96頁，2022年，5月20日，16點1

28、0分，星期四（二）慢性白血?。悍譃槁粤＜毎吐粤馨图毎籽?、慢性粒細胞白血?。?）血象：Hb、RBC早期輕度貧血，晚期重度貧血WBC明顯升高：早期（20-50）109/L 晚期（100-300）109/L分類：以中、晚、桿狀核粒細胞為主，原+早10%PLT：早期升高，晚期下降第81頁，共96頁，2022年，5月20日，16點10分，星期四（2）骨髓象：增生極度活躍 粒系增生明顯占90%以上，以中、晚、桿狀核粒細胞為主，原+早10%，嗜酸、嗜鹼細胞易見 紅系增生受抑 巨核系早期增多，晚期減少 NAP積分減少 t(9;22)(q34;911)bcr-abl融合基因第82頁，共96頁，202

29、2年，5月20日，16點10分，星期四第83頁，共96頁，2022年，5月20日，16點10分，星期四2、慢性淋巴細胞白血病 （1）臨床特征：為B淋巴細胞白血病歐美國家多見老年人多見肝脾淋巴結(jié)進行性腫大病程長達10-20年。第84頁，共96頁，2022年，5月20日，16點10分，星期四（2）血象：Hb、RBC輕度下降，合并HA時明顯下降WBC升高：（15100）109/L L60-70%，以小淋巴細胞增生為主。中性粒輕度減少，PLT正常。（3）骨髓象： 增生明顯或極度活躍 淋巴系增多50%，為成熟淋、原、幼淋少見 粒系，紅系減少 晚期巨核細胞減少第85頁，共96頁，2022年，5月20日，16點10分，星期四三、骨髓增生異常綜合征1、概念：（1）MDS（myelodysplastic syndrome MDS），是二組造血干細胞克隆性疾病，出現(xiàn)病態(tài)造血。（2）外周血細胞減少，而骨髓細胞增生，成熟及幼稚細胞形態(tài)有異常。第86頁，共96頁，2022年，5月20日，16點10分，星期四2、MDS分類： RA（refractory anemia） AR-S（refractoryamemia with sideroblastosis） RAEB（refrac