實時熒光定量PCR法檢測乙肝病毒DNA的價值分析與研究

實時熒光定量PCR法檢測乙肝病毒DNA的價值分析與研究〔〕:

摘要：目的研究分析實時熒光定量PCR法檢測乙肝病毒DNA的價值分析與研究。方法選擇2022年7月到2022年12月我院治療的乙型肝炎患者200例，采用血清標(biāo)志物方法施行疾病檢驗最后確診，對所有乙型肝炎患者采用熒光定量PCR法進(jìn)展檢測，分析最終的檢測結(jié)果。結(jié)果選擇熒光PCR方法對乙肝病毒DNA進(jìn)展檢測，同時選擇普通血清學(xué)標(biāo)志物檢測乙肝病毒DNA數(shù)據(jù)進(jìn)展比擬，結(jié)果較一致，但選擇熒光PCR方法檢測結(jié)果更為準(zhǔn)確。在臨床大三陽檢測中檢出率大96%，小三陽檢測中檢出率為69%，對乙型肝炎外表抗體、乙型肝炎E抗原、的監(jiān)護(hù)率為2%。結(jié)論硬性肝炎患者采用實時熒光定量PCR法檢測乙肝病毒DNA可以獲得乙型肝炎病毒準(zhǔn)確結(jié)果，可以得到理想結(jié)果值得在對臨床中廣泛推廣。

關(guān)鍵詞：熒光定量PCR法檢測；乙肝病毒DNA；臨床價值

本文引用格式：楊秀麗,李振勤,劉曉榮,等.實時熒光定量PCR法檢測乙肝病毒DNA的價值分析與研究[J].世界最新醫(yī)學(xué)信息文摘,2022,19(101):217+220.

0引言

乙型肝炎為常見的感染性疾病，主要因為患者在感染乙型肝炎病毒后發(fā)生的肝臟炎性病變，最后會導(dǎo)致肝硬化、肝癌等嚴(yán)重并發(fā)癥，直接威脅患者生命【1】。傳統(tǒng)臨床對于乙型肝炎病毒攜帶者的檢測多項選擇用血清血標(biāo)志物法，主要檢測樣本為患者血液。在臨床血清學(xué)檢測過程中會因操作失誤導(dǎo)致檢測人員感染的情況【2】。為了保證乙肝患者檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性，本次研究采用實時熒光定量PCR法對乙肝病毒DNA進(jìn)展檢測評價該方法在臨床檢查中的應(yīng)用價值，現(xiàn)進(jìn)展報道。

1資料和方法

1.1臨床資料。選擇我院2022年7月到2022年12月治療的乙型肝炎患者200例為本次研究對象，患者年齡在26-54歲之間，平均年齡36.4歲，其中男性125例，女性75例。

1.2納入與排除標(biāo)準(zhǔn)。納入標(biāo)準(zhǔn)：患者經(jīng)診斷確診為乙型肝炎患者，在入組治療前未進(jìn)展抗病毒治療，自愿承受承受本次研究，簽訂知情同意書【3】。排除標(biāo)準(zhǔn)：患有其他類型肝炎患者，患有精神疾病神志不清患者，存在惡性腫瘤或嚴(yán)重心血管疾病患者。

1.3檢測方法。所有患者在晨起空腹抽取靜脈血5mL，在進(jìn)展高速離心后進(jìn)展進(jìn)展血清血標(biāo)志物法檢測，采用ELISA定量檢測方法，測定乙肝E抗體、乙肝核心抗體、乙肝外表抗原、乙肝外表抗體、乙肝e抗原；采用標(biāo)準(zhǔn)RT-PCR檢測乙肝病毒DNA〔HBV-DNA〕，取血清樣本混合450ulDNA提取液，在恒溫水浴中預(yù)熱10min，再冰凍性，將上清液放置到PCR管內(nèi)，儀器設(shè)定程序后再進(jìn)展檢測，檢測完畢后以Ct值為標(biāo)準(zhǔn)做熒光線，根據(jù)Ct值計算出DNA含量，所有操作均按照說明書嚴(yán)格執(zhí)行。

1.4療效評價。顯效：選擇熒光定量PCR法對乙肝病毒完成檢測，與血清血標(biāo)志物法檢測結(jié)果比擬，結(jié)果一致并且在PCR檢測發(fā)后可以確定乙肝病毒數(shù)據(jù)，可以得到較高的拷貝數(shù)【4】；效果不明顯：臨床采用熒光定量RCP方法進(jìn)展檢測后與血清學(xué)標(biāo)志物檢測結(jié)果比擬，準(zhǔn)確度無為突出表現(xiàn)；無效：采用兩種方法對乙肝病毒進(jìn)展檢測后，熒光定量PCR法檢測數(shù)據(jù)結(jié)果更為準(zhǔn)確。

2結(jié)果

選擇熒光PCR方法對乙肝病毒DNA進(jìn)展檢測，同時選擇普通血清學(xué)標(biāo)志物檢測乙肝病毒DNA數(shù)據(jù)進(jìn)展比擬，結(jié)果較一致，但選擇熒光PCR方法檢測結(jié)果更為準(zhǔn)確。在臨床大三陽檢測中檢出率大96%，小三陽檢測中檢出率為69%，對乙型肝炎外表抗體、乙型肝炎E抗原檢出率為2%，證明事實乙肝病毒DNA檢測采用熒光定量PCR法具有顯著療效。

3討論

乙型肝炎在消化內(nèi)科中屬于較為常見的感染性疾病，主要發(fā)病部位在肝臟，乙肝直接威脅患者的安康和生命平安[5-8]。乙肝作為傳染性疾病以學(xué)業(yè)傳染為主，預(yù)防主要途徑預(yù)防與患者血液接觸。根據(jù)乙肝病程長短可分為慢性乙型感染和急性乙型肝炎，與慢性乙型感染比擬急性肝炎對患者影響較大，并且相關(guān)并發(fā)癥可以直接威脅患者生命平安。根據(jù)患者病情的嚴(yán)重程度可分為活動性乙型肝炎、乙肝攜帶、重型肝炎患者、肝炎肝硬化患者等。在對血清檢測過程中采用熒光定量PCR法檢測可以獲得較好的檢測效果，并且可重復(fù)性較好，可以有效觀察抗病毒藥物在治療過程中的效果。通過自動檢出儀器，對熒光信號的積累，對PCR開展施行監(jiān)控，從而測定患者微量HBV-DNA。

對于血清乙肝DNA檢測可選擇熒光定量PCR法獲得較好檢測效果，并且該方法具有較好的重復(fù)性，可作為乙肝在臨床治療過程中療效觀察的有效檢測方法。實時熒光定量PCR檢測法包括普通PCR的引物、熒光基團(tuán)、熒光染料等，對于此類熒光物質(zhì)在特定波長下可以作為熒光探針。在PCR檢測過程中儀器通過對熒光信號積累的檢測，可對PCR進(jìn)展實時監(jiān)測，可作為熒光閾值的坐標(biāo)，并且方便微量乙肝DNA病毒的檢測，獲得準(zhǔn)確的臨床檢驗結(jié)果。

綜上所述，對于乙肝患者乙肝病毒DNA檢測與血清血標(biāo)志物法檢測結(jié)果比擬，可以獲得較為準(zhǔn)確的檢測結(jié)果，并且綜合信息較全面，為患者臨床乙型肝炎患者臨床研究方案提供臨床數(shù)據(jù)根據(jù)，證實乙型肝炎患者選擇熒光定量PCR法可以準(zhǔn)確檢測乙肝MNA病毒并保證有效的臨床檢測準(zhǔn)確性。

參考文獻(xiàn)

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【3】張衛(wèi)云,任廣立,伍令燦,等,乙肝患者HDSAG定量與乙肝病毒DNA定量及谷丙轉(zhuǎn)氨酶程度的相關(guān)性研究[J],生物技術(shù)通訊,2022,26(6):846-848.

【4】賴新華,呂娜,彭艷輝,等,實時熒光PCR檢測乙肝病毒DNA和乙肝病毒標(biāo)志物檢測的臨床價值分析[J],國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志,2022,18(16):2216-2217.

【5】汪圣強(qiáng),耿合員,殷鵬飛.實時熒光PCR在乙肝病毒DNA檢測中的臨床意義[J].中國醫(yī)學(xué)工程,2022(3):29-30.

【6】石伍華,王海清,許艾明.熒光定量PCR檢測HBV-DNA與ELISA方法測定乙肝五項指標(biāo)相關(guān)性分析[J].臨床和實驗醫(yī)學(xué)雜志,2022,8(1):87-88.

【7】姚兆基.實時熒光定量PCR法檢測乙肝病毒DNA和乙肝病