抗體 免疫球蛋白課件

免疫學(xué)檢驗(yàn)ExperimentalImmunology

第四版什么是免疫？思考一：定義：機(jī)體免疫系統(tǒng)識(shí)別、清除抗原性異物（“自己”和“非己”）維持自身內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定的一種生理功能?？乖贵w

80%復(fù)習(xí)：抗原一、概念二、特性最佳免疫途徑抗原決定基/表位三、抗原分類(lèi)異嗜性抗原四、腫瘤抗原腫瘤特異性抗原TSA腫瘤相關(guān)抗原TAA（肝癌AFP）概述抗體的結(jié)構(gòu)抗體分子的抗原表位抗體的生物學(xué)作用五類(lèi)抗體的特性與功能單克隆抗體基因工程抗體抗體(Antibody)

抗體(antibody，Ab):

是B細(xì)胞接受抗原刺激后增殖分化為漿細(xì)胞所產(chǎn)生能與抗原特異性結(jié)合的具有免疫功能的球蛋白?；靖拍?

免疫球蛋白(Ig)：具有抗體活性或化學(xué)

結(jié)構(gòu)與抗體相似的球蛋白。不特別說(shuō)明，本書(shū)中Ig指抗體。生物學(xué)和功能上的定義

結(jié)構(gòu)和化學(xué)上的定義所有抗體都是免疫球蛋白，但免疫球蛋白不都是抗體!正常人血清電泳分離圖Antigen丙種球蛋白/γ球蛋白

+-2白蛋白（Albumin）球蛋白（globulin）1IgGIgAIgMIgDIg存在形式：分泌型(SecretedIg,SIg)：

分泌入體液中，介導(dǎo)體液免疫應(yīng)答。膜型(MembraneIg,MIg)：

構(gòu)成B細(xì)胞膜上的抗原受體BCR一級(jí)結(jié)構(gòu)：氨基酸殘基在蛋白質(zhì)肽鏈中的排列順序二級(jí)結(jié)構(gòu)：氨基酸脫水縮合成肽鏈，按一定的規(guī)律卷曲（α-螺旋）或折疊（β-折疊）形成特定的空間結(jié)構(gòu)三級(jí)結(jié)構(gòu)：在二級(jí)結(jié)構(gòu)的基礎(chǔ)上，肽鏈還按照一定的空間結(jié)構(gòu)進(jìn)一步形成更復(fù)雜的三級(jí)結(jié)構(gòu)。四級(jí)結(jié)構(gòu)：具有三級(jí)結(jié)構(gòu)的多肽鏈按一定空間排列方式結(jié)合在一起形成的聚集體結(jié)構(gòu)回顧--蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)：

二、功能區(qū)1.可變區(qū)（variableregion,V

）：

110個(gè)Aa，位于Ig的N端，占輕鏈的1/2和重鏈的1/4或1/5。該區(qū)的Aa的組成和排列順序有較大變異，這種變異決定了抗原與抗體結(jié)合的特異性。2.恒定區(qū)（constantregion,C）：位于Ig分子的C端，占輕鏈的1/2和重鏈的3/4或4/5。該區(qū)的Aa組成和排列在同一動(dòng)物種屬中比較恒定。不同抗體長(zhǎng)度不同，IgA，IgG，IgD有3個(gè)CH，而IgM，IgE有4個(gè)CH1.1超變區(qū)（hypervariableregion,HVR）：重鏈和輕鏈V區(qū)（分別稱(chēng)為VH和VL）各有3個(gè)區(qū)域的氨基酸組成和排列順序高度可變的區(qū)域。即Ab與Ag特異性結(jié)合的位置。又稱(chēng)互補(bǔ)決定區(qū)（complementaritydeterminingregion,CDR）。分別為CDR1、CDR2和CDR31.2.骨架區(qū)（frameworkregion,FR）：

CDR以外區(qū)域的氨基酸組成和排列順序相對(duì)不易變化的區(qū)域。免疫球蛋白V區(qū)和C區(qū)結(jié)構(gòu)示意圖

免疫球蛋白重鏈和輕鏈折疊形成的環(huán)形功能區(qū)為結(jié)構(gòu)域，CDR為互補(bǔ)決定區(qū)，F(xiàn)R為骨架區(qū)3.結(jié)構(gòu)域（功能區(qū)，domain）輕鏈:VL，CL重鏈:VH，CH1，CH2，CH3(IgG、IgA和IgD)，CH4(IgM和IgE)1.分類(lèi)3.結(jié)構(gòu)域（功能區(qū)，domain）

各功能區(qū)的功能:(1)VH和VL—抗原結(jié)合部位；(2)CH1～3和CL—Ig遺傳標(biāo)志所在；(3)CH2(IgG)、CH3(IgM)—C1q結(jié)合部位；(4)CH3(IgG)—FcγR結(jié)合部位；(5)CH4(IgE)—FcεR結(jié)合部位。各類(lèi)Ig的特點(diǎn)三、抗體的其他結(jié)構(gòu)（一）連接鏈（joiningchain，J鏈）

是一富含半胱氨酸的多肽鏈，由漿細(xì)胞合成，主要功能是將單體Ig分子連接為多聚體。IgA二聚體和IgM五聚體均含J鏈；IgG、IgD和IgE常為單體，無(wú)J鏈。（二）分泌片（secretorypiece，SP）

為一含糖肽鏈，由黏膜上皮細(xì)胞合成和分泌，以非共價(jià)形式結(jié)合于IgA二聚體上，使其成為分泌型IgA（SIgA）。SP的作用是：使IgA分泌到黏膜表面，發(fā)揮黏膜免疫作用；可保護(hù)SIgA絞鏈區(qū)，使其免遭蛋白水解酶降解。四、抗體的水解片段（一）木瓜蛋白酶水解片段水解部位：二硫鍵近N端木瓜蛋白酶IgG2Fab+Fc（二）胃蛋白酶水解片段水解部位：二硫鍵近C端胃蛋白酶IgGF(ab’)2+pFc’

同種型Ig的類(lèi)型（一）類(lèi)（class）

在同一種屬的所有個(gè)體內(nèi)，Ig重鏈C區(qū)所含抗原表位不同，據(jù)此將重鏈分為γ、α、μ、δ、ε鏈5種，與此對(duì)應(yīng)的Ig為5類(lèi)：IgG、IgA、IgM、IgD、IgE。（二）亞類(lèi)（subclass）

依同一類(lèi)Ig重鏈的抗原性及二硫鍵數(shù)目和位置不同，將Ig分為亞類(lèi)。人IgG：IgG1，IgG2，

IgG3，

IgG4,IgA：IgA1，IgA2,IgM：IgM1，IgM2,IgD和IgE尚未發(fā)現(xiàn)亞類(lèi)。（三）型（type）

根據(jù)Ig輕鏈C區(qū)所含抗原表位不同將Ig分為λ和κ2型。（四）亞型（subtype）第三節(jié)抗體的生物學(xué)作用一、IgV區(qū)的功能——識(shí)別并特異性結(jié)合抗原1.抗體的結(jié)合價(jià)單體(IgG,IgE)—2價(jià)二聚體(分泌型IgA)—4價(jià)五聚體(IgM)—10價(jià)（5價(jià)）中和效應(yīng)—中和毒素和病毒與Ag結(jié)合—促吞噬細(xì)胞吞噬2.實(shí)際意義二、IgC區(qū)的功能（一）激活補(bǔ)體

IgM、IgG1-3與抗原結(jié)合活化補(bǔ)體的經(jīng)典途徑；

IgA、IgE和IgG4的聚合物可活化補(bǔ)體的旁路途徑。（二）結(jié)合Fc受體

調(diào)理作用：

IgG+抗原(顆粒性)→FcγR（單核、巨噬細(xì)胞及中性粒細(xì)胞）→促吞噬細(xì)胞吞噬；抗體依賴(lài)的細(xì)胞介導(dǎo)的的細(xì)胞毒作用（ADCC)：

IgG+抗原(靶細(xì)胞)→FcγR（NK

細(xì)胞）→

殺傷靶細(xì)胞

介導(dǎo)Ⅰ型超敏反應(yīng)：IgE為親細(xì)胞抗體。二、IgC區(qū)的功能（四）穿過(guò)胎盤(pán)和黏膜（三）結(jié)合細(xì)菌蛋白SPA第四節(jié)抗體的特性和功能一、IgG單體，血清和細(xì)胞外液中含量最高75%-80%四個(gè)亞類(lèi):IgG1

IgG2

IgG3

IgG4

半衰期長(zhǎng)，約20～23天臨床應(yīng)用以2～3W重復(fù)為宜是治療用丙球的主要成分（人工被動(dòng)免疫）主要的抗感染抗體唯一通過(guò)胎盤(pán)的抗體（自然自動(dòng)免疫）1.五聚體，分子量最大，又稱(chēng)巨球蛋白；2.人類(lèi)發(fā)育過(guò)程中最早合成的Ig；3.體液免疫應(yīng)答最先產(chǎn)生的Ig—感染早期免疫；4.占血清Ig含量的5～10%；5.半衰期5天—血清中特異性IgM

水平增高提示有近期感染；6.激活補(bǔ)體；7.IgM

不能通過(guò)胎盤(pán)→臍帶血或新生兒血清中IgM水平升高表明胎兒有宮內(nèi)感染；8.膜表面IgM是BCR的主要成分，也是B細(xì)胞發(fā)育成熟的標(biāo)志。二、IgM1.兩種類(lèi)型

2.半衰期：6天；3.占血清Ig含量的5～15%；4.粘膜局部抗感染免疫；血清型：IgA1，單體；分泌型：IgA2，二聚體,

粘膜局部漿細(xì)胞合成；分泌片由粘膜上皮細(xì)胞合成；三、IgA1.單體分子2.存在形式分泌型—血清中，功能不清；膜結(jié)合型—B細(xì)胞表面,3.意義（1）是B細(xì)胞成熟的重要標(biāo)志；（2）抗原受體；4.占血清Ig含量的1%；5.半衰期3天。四、IgD1.單體分子；2.血清中含量最低(占Ig的0.002%)；3.半衰期：3天；4.呼吸道和胃腸道漿細(xì)胞產(chǎn)生；5.親細(xì)胞抗體，介導(dǎo)Ⅰ型超敏反應(yīng)；6.過(guò)敏性疾病和某些寄生蟲(chóng)感染患者血清中特異性IgE水平增高。五、IgE

單克隆抗體（monoclonalantibody，McAb)

第二代人工抗體；由一個(gè)B細(xì)胞克隆產(chǎn)生的、只作用于單一抗原表位的高度特異性抗體，稱(chēng)為單克隆抗體。第五節(jié)單克隆抗體

第一代人工抗體多克隆抗體（pollyclonalantibody,pAb）用抗原免疫動(dòng)物，獲得