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流式細(xì)胞儀的使用與維護(hù)滄州醫(yī)學(xué)高等??茖W(xué)校劉玉枝一、流式細(xì)胞儀使用(一)流式細(xì)胞儀的分析流程1.檢測(cè)樣品制備:測(cè)定標(biāo)本要保證是單細(xì)胞懸液。2.熒光染色:選擇熒光染料和標(biāo)記方法是保證結(jié)果的關(guān)鍵。3.上機(jī)檢測(cè):4.結(jié)果分析:流式細(xì)胞儀的使用與維護(hù)一、流式細(xì)胞儀使用(二)流式細(xì)胞儀的使用方法1.開(kāi)機(jī)程序:打開(kāi)穩(wěn)壓器電源,進(jìn)行儲(chǔ)液箱和鞘液桶處理,檢查所有管路。然后打開(kāi)儀器開(kāi)關(guān),預(yù)熱5~10分鐘,排出過(guò)濾器內(nèi)的氣泡,沖洗管道。2.預(yù)設(shè)模式文件:從視窗中選取圖形資料來(lái)源,并確定適當(dāng)?shù)膞軸和y軸參數(shù)。選取繪圖工具繪出直方圖,儲(chǔ)存于文件夾中,下次進(jìn)行相同實(shí)驗(yàn)時(shí)可直接調(diào)用。流式細(xì)胞儀的使用與維護(hù)一、流式細(xì)胞儀使用(二)流式細(xì)胞儀的使用方法3.儀器的設(shè)定和調(diào)整:為每個(gè)參數(shù)選擇適當(dāng)?shù)谋对瞿J?。放上待檢測(cè)的樣品,選擇運(yùn)行程序和流速,調(diào)整FSC和SSC探測(cè)器中的信號(hào)倍增度。在靶細(xì)胞周圍設(shè)定區(qū)域線,調(diào)整熒光檢測(cè)器的倍增程度,同時(shí)調(diào)整熒光染色所需的熒光補(bǔ)償。4.樣品分析:打開(kāi)預(yù)設(shè)的模式文件,選擇決定儲(chǔ)存的細(xì)胞數(shù)、參數(shù)、信號(hào)道數(shù)。決定文件存儲(chǔ)位置、文件名稱、樣品代號(hào)以及各種參數(shù)的標(biāo)記,然后開(kāi)始分析測(cè)定。當(dāng)一定數(shù)目的細(xì)胞被測(cè)定后,獲取會(huì)自動(dòng)停止,并會(huì)自動(dòng)存儲(chǔ)數(shù)據(jù)。
流式細(xì)胞儀的使用與維護(hù)一、流式細(xì)胞儀使用(二)流式細(xì)胞儀的使用方法5.關(guān)機(jī)程序:當(dāng)所有樣品分析完畢,換上純化水,保護(hù)激光管。選擇“Quit”退出軟件,用稀釋的漂白水和純化水依次進(jìn)行沖洗,在儀器處于“STANDBY”狀態(tài)10分鐘后再依次關(guān)掉計(jì)算機(jī)、打印機(jī)、主機(jī)、穩(wěn)壓電源。流式細(xì)胞儀的使用與維護(hù)流式細(xì)胞儀的使用與維護(hù)流式細(xì)胞儀操作流程
1.日常維護(hù):(1)使用不間斷電源(UPS),或加用過(guò)保護(hù)裝置,并用穩(wěn)壓器,使激光電源的電壓波動(dòng)范圍應(yīng)小于±10%;(2)冷卻水必須使用過(guò)濾器,并保證壓力和流量,以避免水道阻塞造成激光源的損壞;(3)環(huán)境溫度應(yīng)保持室溫在18~24℃,相對(duì)濕度小于85%;(4)安裝可靠地線等。二、流式細(xì)胞儀的維護(hù)流式細(xì)胞儀的使用與維護(hù)
2.定期維護(hù):(1)主要是樣品管和鞘液管道每周應(yīng)用漂白粉液清洗,避免一些微生物生長(zhǎng);(2)流式細(xì)胞儀的室內(nèi)應(yīng)注意避光、防塵、除濕等,還包括人員的培訓(xùn)與管理。二、流式細(xì)胞儀的維護(hù)流式細(xì)胞儀的使用與維護(hù)故障信息引起故障的原因解決方法樣品壓力錯(cuò)誤因?yàn)闃悠饭軌牧?,樣品不能被壓入流?dòng)室換一個(gè)樣品管建立樣品壓力錯(cuò)誤流式細(xì)胞儀連接錯(cuò)誤檢查連接,開(kāi)關(guān)機(jī)重試鞘液高度錯(cuò)誤鞘液太少補(bǔ)充鞘液三、常見(jiàn)故障及排除流式細(xì)胞儀的使用與維護(hù)故障信息引起故障的原因解決方法激光器開(kāi)啟錯(cuò)誤激光器門打開(kāi)關(guān)激光器門參數(shù)太多選擇的參數(shù)應(yīng)小于8個(gè)取消某些參數(shù),重新選擇參數(shù)不存在程序中無(wú)此參數(shù)重新建立程序三、常見(jiàn)故障及排除流式細(xì)胞儀的使用與維護(hù)故障信息引起故障的原因解決方法存取數(shù)據(jù)時(shí)發(fā)生錯(cuò)誤流式細(xì)胞儀不能存取數(shù)據(jù)關(guān)開(kāi)計(jì)算機(jī)重試程序錯(cuò)誤軟件不能執(zhí)行該程序選擇主菜單上的重建項(xiàng)程序號(hào)太大程序號(hào)不能大于32取消一些程序,再輸入相應(yīng)號(hào)碼沒(méi)有激光束激光器關(guān)閉檢查電源,開(kāi)激光器三、常見(jiàn)故障及排除流式細(xì)胞儀的使用與維護(hù)故障信息引起故障的原因解決方法清洗液高度錯(cuò)誤清洗液少了加清洗液清洗液高度警示清洗液傳感器失靈與公司聯(lián)系
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