氣相色譜的定性和定量分析概況培訓(xùn)資料

氣相色譜的定性和定量分析概況二.方法原理對一個混合試樣成功的分離，是氣相色譜法完成定性及定量分析的前提和基礎(chǔ)。衡量一對色譜峰分離的程度可用分離度R表示：tR,2tR,1R=------------------1\2(Y1+Y2)式中tR,2，Y2和tR,1，Y2分別是兩個組分的保留時間和峰底寬，如圖所示。當(dāng)R=1.5時，兩峰完全分離；當(dāng)R=1.0時，98%的分離。在實(shí)際應(yīng)用中，R=1.0一般可以滿足。一般可以滿足。

用色譜法進(jìn)行定性分析的任務(wù)是確定色譜圖上每一各峰所代表的物質(zhì)。在色譜條件一致時，任何一種物質(zhì)都有確定的保留值、保留時間、保留體積、保留指數(shù)及相對保留值等保留參數(shù)。因此，在相同的色譜操作條件下，通過比較已知試樣和未知物的保留參數(shù)或在固定相上的位置，即可確定未知物為何種物質(zhì)。當(dāng)手頭上有待測組分的式樣時，用與已知物對照進(jìn)行定性極為簡單。實(shí)驗時可采用單柱比較法，峰高加入法或雙柱比較法。

單柱比較法是在相同色譜條件下，分別對已知純樣及待測式樣進(jìn)行色譜分析，得到兩張色譜圖，然后比較其保留參數(shù)。當(dāng)兩者的數(shù)值相同時，即可認(rèn)為待測式樣中有純樣組分存在。雙柱比較法是在兩個極性完全不同的色譜柱上，在各自確定的條件下測定純樣在和待測組分在其上的保留參數(shù)，如果都相同，則可準(zhǔn)確的地判斷式樣中有與此純樣相同的物質(zhì)存在。由于有些不同的化合物會在某一固定相上表現(xiàn)相同的熱力學(xué)性質(zhì)，故雙柱法比單柱法更為可靠。在一定的色譜條件下，組分í的質(zhì)量mí或其在流動相中的濃度，與檢測器的響應(yīng)訊號峰面積Aí或峰高h(yuǎn)í成正比：mí=f.Ai（13-10）或mí=fhi.Hi（13-11）式中和稱為絕對校正因子。式（13-10）和（13-11）是色譜定量的依據(jù)。不難看出，響應(yīng)信號A,h及校正因子的正確測量直接影響定量分析的正確度。

由于峰面積的大小不易受操作條件如柱溫，流動相的流速，進(jìn)樣速度等因素影響，故峰面積更適定量分析的參數(shù)。測量峰面積的方法分為手工測量和自動測量兩大類?，F(xiàn)代色譜儀中一般都配有準(zhǔn)確測量色譜峰面積的電學(xué)積分儀。手工測量則首先測量峰高h(yuǎn)和半峰寬Y1\2，然后按下式計算：Aí=1.065hí.Y1\2式中的可用質(zhì)量,物質(zhì)的量及體積等物理量表示三.儀器和試劑1.有記錄的氣相色譜儀,GC—14B氣相色譜儀，氫火焰檢出器2.帶減壓閥的氮?dú)狻錃怃撈?.秒表4.色譜柱:DB-1石英彈性毛細(xì)管色譜柱,柱長30m,內(nèi)徑0.53mm5.注射器:5μL，10μL,100μL.6.帶磨口試管若干.7.正己烷,環(huán)己烷,苯,甲苯(均為A,R)8.未知的混和試樣

GC—14B氣相色譜儀四.實(shí)驗步驟1.認(rèn)真閱讀氣相色譜儀操作說明;在教師指導(dǎo)下,按照下列色譜條件開啟色譜儀:柱溫:85-95℃檢測器溫度:120℃氣化室溫度:120℃載氣流速:30ml/min2.準(zhǔn)確配置正己烷:環(huán)己烷:苯:甲苯為1:1:1.5:2.5(質(zhì)量比)的標(biāo)準(zhǔn)溶液,以備測量校正因子.載氣流速:10ml/min，進(jìn)未知混合試樣約1.4μL-2μL和空氣20μL-40μL.各2-3次,記錄色譜圖上各峰的保留時間tR和死時間tm

3.分別注射正己烷,苯,環(huán)己烷,甲苯等純試劑0.2μL,各2-3次,記錄色譜圖上各峰的保留時間tR。4.載氣流速(如30ml/min),每次進(jìn)已經(jīng)配置好的標(biāo)準(zhǔn)溶液,2-3次,記錄色譜圖上各峰的保留時間tR5.在與操作6完全相同的條件下,每次進(jìn)未知混合試樣,2-3次,記錄色譜圖上各峰的保留時間tR五.結(jié)果處理用步驟六所得數(shù)據(jù),計算前3個峰中,每兩個峰間的分辨率.比較步驟4和5所得色譜圖及保留時間,指出未知混合試樣中各色譜對應(yīng)的物質(zhì)用步驟六所得數(shù)據(jù),以苯為基準(zhǔn)物,用式(13-15)計算各組分的質(zhì)量校正因子用步驟7所得色譜,根據(jù)式(13-16)計算未知混合試樣中各組分的質(zhì)量分?jǐn)?shù)六.問題討論1.本實(shí)驗中進(jìn)樣量是否需要非常準(zhǔn)確?為什么?2.本實(shí)驗中進(jìn)樣量是否需要非常準(zhǔn)確?為什么?3將測得的質(zhì)量校正因子與文獻(xiàn)值比較.4.試說明3種不同單位校正因子的關(guān)系和聯(lián)系.5