江蘇恒瑞醫(yī)藥股份有限公司無菌相關無菌生產工藝內容及風險控制

無菌生產工藝內容與風險控制無菌生產工藝內容與風險控制藥品及藥品的風險無菌生產工藝驗證原則與申報資料要求無菌生產工藝驗證的內容和方法無菌生產工藝的再驗證小結前言

藥品的風險取決于其給藥途徑1類注射劑（注射液，凍干粉針劑，大容量注射劑，預灌注）2類口服制劑（口服片劑，膠囊劑，口服溶液等）3類局部給藥（局部）4類含動物組織的口服制劑5類兼用途徑藥品的組成構成藥品組成的部件，生產工藝，以及藥品生命周期內（貯存運輸）的影響因素，是一個全生命鏈的組成。相應的GMP（ICHQ7，API，IPQC-輔料的控制），無菌生產工藝，GSP等法規(guī)的符合。組成：原輔料，設備，工藝介質，容器密封件（膠塞，西林瓶，鋁蓋），工藝（配制，灌裝，凍干，軋蓋）等等貯存，運輸條件使用方法（藥液的配制，）產品生命周期研發(fā)申報階段產品上市階段持續(xù)監(jiān)測階段產品退市如果縮短到單位產品原輔料，包材選擇（廠家選擇，標準設定）產品生產，貯存（生產工藝及環(huán)境控制）運輸上市（運輸及條件控制）消費者使用（貯存條件，使用方法）注射劑的風險微生物污染熱原的污染不溶性微粒純度其他風險安全性（組織的刺激性，毒性反應）滲透壓pH注射劑風險控制手段微生物污染風險-----注射劑必須是無菌（概率性時間）熱原污染------控制限度（原輔料限度，去除工藝）不溶性微粒-----控制限度（工藝去除，生產）純度-----原料，生產工藝其他風險控制手段安全性臨床實驗等滲，等張，pH調節(jié)無菌藥品的制造工藝類別最終滅菌工藝先將藥品的各個部件（產品，容器和密封件）在符合要求的環(huán)境下組成最終的包裝形式，最后讓產品在其最終容器中進行滅菌處理（通常使用熱力學滅菌或輻射滅菌）無菌生產工藝藥品的各個部件（產品，容器和密封件）分別經過滅菌處理，再在高潔凈度的環(huán)境中組裝最終產品，但產品裝入其最終容器后不再進行滅菌處理。如何制造出高質量的無菌藥品對工藝的深刻理解識別，評估各工藝步驟對無菌性，熱原，微粒等質量因素及其影響程度在工藝過程中采取有效控制手段對這些手段的有效性進行驗證遵循相關法規(guī)的要求無菌生產工藝驗證原則與申報資料要求無菌生產工藝驗證原則以無菌保證為核心，在充分評估工藝各步驟微生物污染風險的基礎上，利用現(xiàn)有的科學技術，對風險控制手段的有效性進行確認。關鍵：風險措施：風險評估工具無菌粉針劑針劑生產工藝流程配料原料，輔料，配料器具，環(huán)境，操作配液容器，WFI，配液器具，環(huán)境操作無菌過濾過濾器及安裝操作，過濾前溶液含菌量氣體保護條件下儲存待灌裝氣體，容器管道物料準備----膠塞，過濾器，灌裝部件，清潔工具，滅菌柜，清潔接滅菌過程洗瓶西林瓶，WFI，洗瓶機，干熱滅菌設備灌裝環(huán)境，人員操作，轉移冷凍干燥，壓膠塞凍干機密封性軋蓋軋蓋前儲存時間，轉移，膠塞密封性，軋蓋后的密封性無菌粉針劑針劑生產工藝流程配料工序：

污染交叉污染評估原料，輔料，配料器具，環(huán)境，設備，操作原輔料傳入，傳出，配料工器具清潔存放環(huán)境確認，及凈化操作（避免敞口，人員操作方位）物料包裝及標識無菌粉針劑針劑生產工藝流程配液工序容器，WFI，配液器具，環(huán)境操作原輔料傳出（清潔消毒方式）環(huán)境確認，及凈化配液工器具清潔存放設備清潔滅菌（holdingtime）操作（避免敞口，人員操作方位）無菌粉針劑針劑生產工藝流程無菌過濾過濾器及安裝操作，過濾前溶液含菌量過濾器（在線或離線滅菌？？）過濾器驗證過濾壓力過濾前藥液微生物負荷（取樣部位，過濾濾芯前）無菌粉針劑針劑生產工藝流程氣體保護條件下儲存待灌裝氣體，容器管道，過濾濾芯氣體制備，及控制標準氣體傳輸管道濾芯的使用條件濾芯的確認無菌粉針劑針劑生產工藝流程物料準備----膠塞，過濾器，灌裝部件，清潔工具，滅菌柜，清潔接滅菌過程無菌粉針劑針劑生產工藝流程洗瓶西林瓶，WFI，洗瓶機，干熱滅菌設備不溶性微粒（清洗挑戰(zhàn)）殘留物（清洗挑戰(zhàn)，及干熱去熱原挑戰(zhàn)）干熱滅菌及去熱原（滅菌行程，及計算）高效過濾器（壓差，層流保護）無菌粉針劑針劑生產工藝流程灌裝環(huán)境，人員操作，轉移無菌粉針劑針劑生產工藝流程冷凍干燥，壓膠塞物料轉移，下料操作，凍干機密封性無菌操作設備驗證無菌粉針劑針劑生產工藝流程軋蓋物料，環(huán)境，工藝軋蓋前儲存時間，轉移，膠塞密封性，軋蓋后的密封性無菌粉針劑針劑生產工藝流程燈檢人員資質，燈檢工序，設備，人員培訓，次品樣品燈檢設備校驗無菌工藝無菌性的保證因素原材料生產過程產品水原料藥輔料，氣體容器、密封件設施容器。設備的清洗滅菌配料、配液。過濾、灌裝全過程人員環(huán)境及培養(yǎng)基灌裝無菌檢查無菌包裝遵循的法規(guī)要求GMP2010有關無菌生產工藝的有關規(guī)定以及潔凈室懸浮粒子、沉降菌和浮游菌的國家標準《藥品生產質量管理規(guī)范實施指南》中有關無菌生產的指導原則《藥品生產驗證指南》FDA《無菌生產工藝指南》FDA《工藝驗證一般原則》《新藥申報資料對滅菌工藝驗證的要求》歐盟GMP附錄1《無菌藥品生產》美國FDA要求的新藥申報資料適應癥藥學和毒理學研究化合物研究生產工藝標準和控制微生物學研究現(xiàn)場檢查樣品測試動物試驗臨床研究生物利用申報資料對無菌藥品工藝的要求原則：只有當藥品的檢驗方法、生產設施、工藝流程、包裝等能確保藥品的性質、含量、質量和純度時，新藥申請才會被批準資料要求：無菌藥品的工藝驗證必須包含在申報資料中兩級責任制CDER負責資料的審核地方藥監(jiān)負責現(xiàn)場審核目的1申報資料的真實性目的2GMP符合性檢查NDA/ANDA申報資料對無菌藥品工藝內容要求A.廠房和設施布局圖包括潔凈區(qū)劃分設備分布圖(包含房間設計原則，及氣流，壓差控制設計原理）B.總體生產流程介紹產品過濾(過濾方式，參數(shù)）溶液儲存時間（holdingtime）關鍵操作（工藝描述，培養(yǎng)基信息）C.容器、密封件、設備和器具的滅菌去熱原過程分別滅菌溶液的工藝過程完整的批生產記錄NDA/ANDA申報資料對無菌藥品工藝內容要求C培養(yǎng)基灌裝的程序和標準灌裝房間密封容器類型和尺寸每個容器灌裝體積培養(yǎng)基類型灌裝數(shù)量培養(yǎng)數(shù)量陽性數(shù)量培養(yǎng)條件灌裝日期挑戰(zhàn)條件敘述環(huán)境監(jiān)測產品正常同意和培養(yǎng)基灌裝工藝的工藝參數(shù)內部文件：PR-383培養(yǎng)基模擬灌裝程序NDA/ANDA申報資料對無菌藥品工藝內容要求E培養(yǎng)基灌裝失敗時的措施F環(huán)境監(jiān)測應用的微生物方法檢測酵母菌、霉菌和厭氧菌的方法和頻率超標時的措施G容器密封完整性H無菌檢查方法和放行標準I內毒檢查方法J有關上述所有內容的文件列表無菌生產工藝的具體內容廠房和設施（布局，空氣凈化系統(tǒng)包括HEPA，WFI系統(tǒng)）器具、容器的滅菌除熱原過程灌裝部件、膠塞的滅菌過程洗瓶、干熱去熱原過程配液罐、儲液罐及管道、凍干機滅菌過程過濾除菌過程灌裝過程（環(huán)境、人員監(jiān)測）容器密封性綜合驗證：培養(yǎng)基模擬灌裝試驗（工藝模擬實驗）實驗室控制（微生物測試標準方法、無菌檢查）原輔料的控制無菌原料藥其本身的生產工藝應按照無菌生產工藝驗證原則進行包裝盒運輸應是考察重點非無菌原料或輔料盡可能減降低微生物負荷50CFU/g生產的潔凈環(huán)境設備與其他物料及人員生產用水非無菌原料或輔料關鍵控制點精烘包階段環(huán)境至少十萬級以上人員著裝、人流物流控制，環(huán)境清潔規(guī)程設備清潔規(guī)程，設定內控限度預先采取高溫或過濾以降低微生物污染生產用水達到純化水要求，并控制內毒素對除菌、滅菌或去內毒素步驟需評估Udine產品理化性能的影響生產環(huán)境驗證和控制范圍包括所有生產工藝步驟遵守相關的GMP規(guī)范驗證時考察靜態(tài)和動態(tài)時的環(huán)境質量生產時實施動態(tài)監(jiān)測環(huán)境驗證的范圍空氣凈化系統(tǒng)的驗證（溫濕度，壓差，空氣流向，風俗，高效過濾器泄露測試）環(huán)境性能測試（靜態(tài)+動態(tài)）懸浮粒子和自凈速率測試微生物測試：空氣浮游菌，沉降菌，表面微生物日常監(jiān)控：環(huán)境監(jiān)測的重要性在無菌工藝中，產品、容器和密封件分別經過滅菌后在進行灌封。由于產品裝入最終容器后不再作進一步滅菌處理，容器在高潔凈度環(huán)境下進行灌封是至關重要的。FDA《無菌生產工藝指南》第五頁制定環(huán)境監(jiān)控方案的原則明確監(jiān)控的關鍵控制點給產品構成最大風險的位置，如產品暴露位置，直接接觸表面人員科學建立控制標準和方案標準應滿足無菌生產微生物控制要求，并結合取樣點位置和生產操作的相互關系建立警戒和糾偏標準進行數(shù)據(jù)分析全面監(jiān)控、動態(tài)監(jiān)控定期的環(huán)境再驗證無菌灌裝區(qū)環(huán)境監(jiān)控頻率QC-775潔凈室（區(qū)）環(huán)境監(jiān)測程序其余各車間具體的監(jiān)測程序：QC-776QC-840QC-850微生物檢測方法的特點空氣浮游菌定量、準確、取樣量大，但易干擾氣流沉降菌取樣時間長，不干擾氣流，但非定量、檢出率低接觸碟光滑表面，方便，但需特殊的培養(yǎng)基（微生物修復，以降低消毒劑的影響）棉簽法不規(guī)則表面，操作稍復雜監(jiān)測取樣的實施在生產過程中，無菌灌裝線上沉降碟的放置應在所有操作開始前完成空氣浮游菌的測試應根據(jù)生產情況開空氣取樣儀灌裝線上的表面微生物測試應在灌裝結束后進行檢測人員根據(jù)生產和人員操作的情況，可隨時要求進行操作人員手套的微生物測試，操作人員在測試前不應噴灑無菌酒精，在測試后應更換手套。對于無菌服的微生物測試一般在操作人員推出B級區(qū)之前進行所有的樣品在測試后都應裝入滅菌袋中適當包裹以避免樣品在轉移途中受到污染。人員無菌資質控制無菌服、頭套、眼罩、人員操作行為無菌灌裝人數(shù)控制人員資格認定體檢，操作培訓，著裝培訓，著裝測試

更衣測試方法年度資格再確認制度GR-046無菌潔凈區(qū)人員資格確認規(guī)程年度的人員趨勢分析，及車間主任、QA及相關偏差趨勢評價取樣點的分布：部分車間采用非全部取樣點取樣，對于取樣采用排班循環(huán)制，循環(huán)實施。環(huán)境監(jiān)測數(shù)據(jù)的分析微生物菌種鑒定確定污染源，為制定整改措施提供幫助提供放行、報廢依據(jù)用于培養(yǎng)基灌裝用于消毒劑的效率測試關鍵功能區(qū)入口（無菌區(qū)域物流及人流通道的監(jiān)測）微生物監(jiān)測趨勢分析QC-774微生物鑒別程序、QC-779微生物API鑒別程序QC-837消毒劑的質量監(jiān)控微生物鑒別的趨勢分析及對目前消毒方法及種類的評估；過濾系統(tǒng)的驗證無菌過濾截留微生物

過濾器的本身缺陷風險：一定的風險

制造過程的不均一性對過濾介質的化學腐蝕機械缺陷過高的壓力過濾器的選擇工藝特性所要求的的流量所要求的壓差可使用的滅菌方法過濾介質的壽命過濾器結構筒式，平板式過濾器的選擇化學相容性證明過濾介質不會把外來物質帶進產品證明無菌過濾介質不收產品的影響，削弱它的強度和完整性測試包括可氧化物質容積系統(tǒng)中的重量變化析出物分析，吸附分析完整性試驗流量變化外觀物理變化生物截留能力過濾器的完整性測試無菌過濾器微生物挑戰(zhàn)試驗目的：證實過濾器是有能力截獲微生物，而且超過了工藝物流自身最大的生物負荷模擬實際工藝的壓力流量等參數(shù)菌種：缺陷型假單胞菌數(shù)量：按過濾器面積107CFU/cm2步驟確認過濾器的完整性用含一定數(shù)量的培養(yǎng)基過濾濾過液進行培養(yǎng)（取樣或膜過濾），37度14天過濾后進行完整性測試連續(xù)驗證3次，都應無菌生長過濾器驗證關鍵點起泡點標準的建立與截留率的相關性過濾器的微生物截留驗證必須在藥液中進行在實際的生產參數(shù)下進行驗證，如壓力最高值包含：過濾體積，過濾壓力，過濾溫度，藥液的性質過濾器的選擇應符合工藝和產品的特性過濾器的驗證是一個技術復雜的過程委托過濾器生產廠家進行選擇和驗證關鍵工藝設備的驗證1.配制過濾系統(tǒng)清潔滅菌的驗證2.灌裝系統(tǒng)清潔滅菌的驗證3.灌裝，下料，上料的工器具的滅菌的驗證4.凍干機的清潔滅菌的驗證5.容器密封系統(tǒng)的驗證6.容器密封組件的處理設備的驗證（膠塞處理機，西林瓶清洗滅菌）關鍵工藝設備的驗證1.配制過濾系統(tǒng)清潔滅菌的驗證2.灌裝系統(tǒng)清潔滅菌的驗證3.灌裝，下料，上料的工器具的滅菌的驗證4.凍干機的清潔滅菌的驗證5.容器密封系統(tǒng)的驗證6.容器密封組件的處理設備的驗證（膠塞處理機，西林瓶清洗滅菌）培養(yǎng)基模擬灌裝試驗采用正常的生產工藝，用培養(yǎng)基替代產品進行灌裝，以考察生產過程、設備和包裝形式、人員操作等整個體系能始終如一地生產出符合要求的無菌產品使用范圍初次驗證：新的無菌生產工藝，連續(xù)3次合格的無菌工藝模擬有足夠的時間模擬實際生產時的操作，最差狀況模擬年度再驗證對象：現(xiàn)行工藝每年進行兩次再驗證有足夠的時間模擬實際生產時的操作最差狀況模擬培養(yǎng)基灌裝流程確認設施設備和各滅菌工藝驗證的完成確認培養(yǎng)基灌裝的范圍制定培養(yǎng)基灌裝方案培養(yǎng)基選擇灌裝數(shù)量和灌裝總時間挑戰(zhàn)試驗的最差條件設計人員環(huán)境監(jiān)測計劃培養(yǎng)條件、時間和設備培養(yǎng)基靈敏度試驗總結和失敗原因調查適用范圍計劃外的驗證：如工藝重大變更，設備實施改造等偏差原因無菌試驗失敗，根據(jù)偏差調查結果的要求環(huán)境監(jiān)測結果明顯反常，根據(jù)偏差調查結果的要求某個區(qū)域的空調關閉時間超過驗證的時間段培養(yǎng)基灌裝試驗應考慮的因素培養(yǎng)基的選擇培養(yǎng)基促生長能力灌裝數(shù)量環(huán)境監(jiān)測方案手機和培養(yǎng)最差條件的挑戰(zhàn)培養(yǎng)基的選擇適應廣譜微生物生長，較好的澄明度，較小的粘度可除菌過濾，常用的培養(yǎng)基：TSB大豆胰蛋白肉湯粉針劑聚乙二醇，乳糖和或肉湯粘稠的乳膏劑混于肉湯中的瓊脂和羧甲基纖維素培養(yǎng)基促生長能力靈敏度試驗取灌裝前、中、后各階段的培養(yǎng)基樣品枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌、白色念珠球菌、綠膿桿菌、黑曲霉菌、環(huán)境菌每個菌種接種2支，計數(shù)＜100cfu/瓶20-25℃、30-35℃培養(yǎng)5天內生長灌裝數(shù)量批次量足夠大灌裝量一般5000~10000瓶批量小的（低于5000瓶）以全批數(shù)量灌裝首次確認和后續(xù)維護環(huán)境監(jiān)測全面，全過程檢測對無菌生產區(qū)環(huán)境的評估對人員資格的確認（所有無菌區(qū)工作人員）環(huán)境的清潔：灌裝結束4小時內收集和培養(yǎng)按灌裝的先后順序軋蓋翻轉接觸所有表面培養(yǎng)：20-25度7天，30-35度7天在中間轉換溫度和培養(yǎng)結束時100%燈檢記錄污染瓶數(shù)記錄丟棄的數(shù)量和原因，不得隨意丟棄最差條件挑戰(zhàn)儲存時間：灌裝設備、灌裝部件、儲罐、無菌物料、藥液在實際灌裝前能夠放置的最長時間例1：用需要再滅菌前的灌裝設備、灌裝部件、儲罐、無菌物料參與培養(yǎng)基灌裝例2：無菌過濾后存放在儲罐內的培養(yǎng)基到實際生產時產品的最大儲存時間后再灌裝最差條件挑戰(zhàn)無菌灌裝時間在培養(yǎng)基灌裝中模擬用時最長的瓶子滿批量生產需要的時間，其中包括正常的干擾時間（換班，設備維修）灌裝速度和瓶子規(guī)格灌裝速度和瓶子規(guī)格的關系最慢的速度，最大的瓶子規(guī)格最小的瓶子規(guī)格，最快的速度最差條件挑戰(zhàn)人員：培養(yǎng)基灌裝是模擬物君區(qū)可能容納最多的人數(shù)無菌區(qū)工作人員至少每年參與一次培養(yǎng)基灌裝操作干擾正常的（灌裝線無菌組裝，稱量調節(jié)，加加塞，處理倒瓶，取樣，環(huán)境監(jiān)測）非正常的（設備故障，灌裝線堵塞，軌道調節(jié)，拆卸、替換破損的部件）干擾的次數(shù)應該不少于正常生產時發(fā)生的次數(shù)工藝氣體：使用氮氣的，因考慮其不利于微生物生長，以壓縮空氣代替培養(yǎng)基灌裝失敗后的調查不管批次量有多大，只要培養(yǎng)基灌裝中存在污染就意味著無菌保證有問題設計合理、操作適當?shù)臒o菌灌裝污染水平應為零灌裝數(shù)量結果判定小于5000如有1瓶污染，調查并再驗證5000~10000如有1瓶污染，調查并重復培養(yǎng)基灌裝

如有2瓶污染，調查并考慮再驗證＞10000如有1瓶污染，進行調查

如有2瓶污染，調查并考慮再驗證培養(yǎng)基灌裝失敗后的調查環(huán)境和人員監(jiān)測數(shù)據(jù)滅菌記錄和設備校驗記錄灌裝區(qū)域清潔消毒記錄人員培訓記