藥物的鑒別試驗(yàn)

藥物的鑒別試驗(yàn)（Identificationtest）教學(xué)目的和規(guī)定1．理解藥物鑒別試驗(yàn)是為了鑒別藥物的真?zhèn)?。熟悉我?guó)藥典鑒別的項(xiàng)目、鑒別試驗(yàn)的條件及敏捷度的意義2．掌握我國(guó)藥典藥物的一般鑒別措施3．掌握各類有機(jī)物、無機(jī)物的鑒別試驗(yàn)措施及原理一、概述根據(jù)藥典進(jìn)行的藥物分析重要有三大項(xiàng)：鑒別、檢查和含量測(cè)定。藥物的鑒別試驗(yàn)（identificationtest）是用于鑒別藥物的真?zhèn)?，在藥物分析中屬首?xiàng)工作，只有證明被分析的藥物是真的，才有必要接著進(jìn)行檢查、含量測(cè)定。藥典所收載的藥物項(xiàng)下的鑒別試驗(yàn)措施，僅合用于貯藏在有標(biāo)簽容器中的藥物，用以證明與否為其所標(biāo)示的藥物。它與分析化學(xué)中的定性鑒別有所區(qū)別。這些試驗(yàn)措施不能賴以鑒別未知物。二、鑒別試驗(yàn)的項(xiàng)目1、性狀:藥物的性狀反應(yīng)了藥物特有的物理性質(zhì)。包括外觀,嗅味,溶解度及物理常數(shù)等。物理常數(shù)：熔點(diǎn)、比旋度、吸取系數(shù)。比旋度：在一定波長(zhǎng)與溫度下，偏振光透過長(zhǎng)1dm且每1ml中具有旋光性物質(zhì)1g的溶液時(shí)測(cè)得的旋光度稱為比旋度。它是反應(yīng)手性藥物特性及其純度的重要指標(biāo)。吸取系數(shù)：在給定波長(zhǎng)、溶劑和溫度等條件下，吸光物質(zhì)在單位濃度、單位液層厚度時(shí)的吸取度稱為吸取系數(shù)。有兩種表達(dá)方式：摩爾吸取系數(shù)和百分吸取系數(shù)。百分吸取系數(shù)：在一定波長(zhǎng)下，溶液濃度為1%（W/V），厚度為1cm時(shí)的吸取度，用表達(dá)，是吸光物質(zhì)的重要物理常數(shù)。2、一般鑒別試驗(yàn)(generalidentificationtest)。一般鑒別試驗(yàn)是以藥物的化學(xué)構(gòu)造及其物理化學(xué)性質(zhì)為根據(jù),通過化學(xué)反應(yīng)鑒別藥物的真?zhèn)巍Ｒ话汨b別試驗(yàn)僅供確認(rèn)單一的化學(xué)藥物，如為數(shù)種化學(xué)藥物的混合物或有干擾物質(zhì)存在時(shí)，除另有規(guī)定外，應(yīng)不合用。*通過一般鑒別試驗(yàn)只能證明是某一類藥物，而不能證明是哪一種藥物。例如，經(jīng)一般鑒別反應(yīng)的鈉鹽試驗(yàn)，證明某一藥物為鈉鹽，但不能識(shí)別是氯化鈉、苯甲酸鈉或者是其他某一種鈉鹽藥物。要想最終證明被鑒別的物質(zhì)究竟是哪一種藥物，必須在一般鑒別試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，再進(jìn)行專屬鑒別試驗(yàn)，方可確認(rèn)。通過一般鑒別反應(yīng)只能證明是某一類藥物,不能證明是哪一類藥物。無機(jī)物:陰,陽離子的特殊反應(yīng)。有機(jī)物:采用藥典的官能團(tuán)反應(yīng)。一般鑒別試驗(yàn)的項(xiàng)目：丙二酰脲類、托烷生物堿類、芳香第一胺類、有機(jī)氟化物類、無機(jī)金屬鹽類（鈉鹽、鉀鹽、鋰鹽、鈣鹽、鋇鹽、銨鹽、鎂鹽、鐵鹽、鋁鹽、鋅鹽、銅鹽、銀鹽、汞鹽、鉍鹽、銻鹽、亞錫鹽）、有機(jī)酸鹽（水楊酸鹽、枸櫞酸鹽、乳酸鹽、苯甲酸鹽、酒石酸鹽）、無機(jī)酸鹽（亞硫酸鹽或亞硫酸氫鹽、硫酸鹽、硝酸鹽、硼酸鹽、碳酸鹽與碳酸氫鹽、醋酸鹽、磷酸鹽、氯化物、溴化物、碘化物）。（一）有機(jī)氟化物1．鑒別試驗(yàn)取供試品約7mg，照氧瓶燃燒法（附錄VIIC）進(jìn)行有機(jī)破壞，用水20ml與0.01mol/L氫氧化鈉溶液6.5ml為吸取液，俟燃燒完全后，充足振搖；取吸取液2ml，加茜素氟藍(lán)試液0.5ml，再加12%醋酸鈉的稀醋酸溶液0.2ml，用水稀釋至4ml，加硝酸亞鈰試液0.5ml，即顯藍(lán)紫色；同步做空白對(duì)照試驗(yàn)。2．試驗(yàn)原理有機(jī)氟化物經(jīng)氧瓶燃燒法破壞，為堿性溶液吸取成為無機(jī)氟化物后，與茜素氟藍(lán)、硝酸亞鈰形成藍(lán)紫色絡(luò)合物。（二）有機(jī)酸鹽1．水楊酸鹽鑒別試驗(yàn)一取供試品的稀溶液，加三氯化鐵試液1滴，即顯紫色。原理本品在中性或弱酸性條件下，和三氯化鐵試液生成配位化合物，在中性時(shí)呈紅色，弱酸性時(shí)呈紫色；若在強(qiáng)酸性中，配位化合物分解生成游離水楊酸。本反應(yīng)極為敏捷，只需取稀溶液進(jìn)行試驗(yàn)，如取用量大，產(chǎn)生顏色過深時(shí)，可加水稀釋后觀測(cè)。鑒別試驗(yàn)二取供試品溶液，加稀鹽酸，即析出白色水楊酸沉淀；分離，沉淀在醋酸銨試液中溶解。原理水楊酸不溶于水（0℃時(shí)溶解度為1g/1500L），故供試液加酸即析出游離水楊酸。由于水楊酸的酸性（K＝1.06×10-3，25℃）不小于醋酸（K＝1.85×10-5，25℃），故能與醋酸銨作用釋出醋酸，而自身形成銨鹽溶解。析出的水楊酸亦可經(jīng)冷水洗滌、干燥后測(cè)定熔點(diǎn)（158℃-161℃）。2．苯甲酸鹽3．乳酸鹽4．枸櫞酸鹽5．酒石酸鹽6．醋酸鹽鑒別試驗(yàn)取供試品，加硫酸和乙醇后加熱，即產(chǎn)生乙酸乙酯的香氣。（三）無機(jī)金屬鹽1．鈉鹽鑒別試驗(yàn)一取鉑絲，用鹽酸濕潤(rùn)后，蘸取供試品，在無色火焰中燃燒，火焰即顯鮮黃色。原理鈉的火焰光譜在可見光區(qū)，有589.0nm、589.6nm重要譜線，故其燃燒火焰顯黃色。本焰色反應(yīng)極為敏捷（最低檢出限量為0.1ng鈉離子）。因此，對(duì)所用儀器和試劑規(guī)定必須很嚴(yán)格。在檢測(cè)前應(yīng)將鉑絲燒紅，趁熱浸入鹽酸中，如此反復(fù)多次，直至火焰不染黃色后，再蘸取供試品進(jìn)行測(cè)定。只有當(dāng)強(qiáng)烈的黃色火焰持續(xù)數(shù)秒鐘不退，才能確認(rèn)為鈉鹽。鑒別試驗(yàn)二取供試品的中性溶液，加醋酸氧鈾鋅試液，即生成黃色沉淀。原理其反應(yīng)式為：本試驗(yàn)中，供試品溶液應(yīng)為中性；有些有機(jī)酸鹽（如水楊酸鈉）遇醋酸氧鈾鋅試液能生成有色配位化合物，故在試驗(yàn)前應(yīng)對(duì)供試液進(jìn)行預(yù)處理。其處理措施是，在供試液中加入稀鹽酸，濾過，取濾液蒸干，加水溶解后，再供試驗(yàn)用；試驗(yàn)中，醋酸氧鈾鋅試液要加多過量；必要時(shí)，還需用玻璃棒摩擦試管壁，以增進(jìn)黃色沉淀的析出。2．鉀鹽鑒別試液一焰色反應(yīng)顯紫色，但有少許鈉鹽混存時(shí)，須隔色玻璃透視，方能識(shí)別。原理鉀的火焰光譜在可見光區(qū)有766.49nm、769.90nm與404.4nm幾條譜線，其中以766.49nm與769.90nm兩條譜線最強(qiáng)。由于人眼在此波長(zhǎng)附近敏感度較差，故鉀鹽的燃燒火焰顯紫色。如有鈉鹽混存，因鈉焰敏捷度很高，需透過藍(lán)色鈷玻璃將鈉焰黃色濾去，此時(shí)火焰顯粉紅色。鑒別試驗(yàn)二取供試品，加熱熾灼，除去也許具有的銨鹽，放冷后，加水溶解，再加0.1%四苯硼鈉溶液與醋酸，即生成白色沉淀。原理其反應(yīng)式為：若有NH4+存在，顯相似反應(yīng)，故必須預(yù)先加熱熾灼除去，以免干擾試驗(yàn)成果的識(shí)別。3．銨鹽鑒別試驗(yàn)一取供試品，加過量氫氧化鈉試液后，加熱，即分解，發(fā)生氨臭；遇濕潤(rùn)的紅色石蕊試紙，能使之變藍(lán)，并能使硝酸亞汞試液濕潤(rùn)的濾紙顯黑色。原理其反應(yīng)式為：試驗(yàn)原理其反應(yīng)式為：4．鈣鹽鑒別試驗(yàn)一焰色反應(yīng)顯磚紅色（622nm）。鑒別試驗(yàn)二取供試品溶液（1→20），加甲基紅指示液2滴，用氨試液中和，再滴加鹽酸至呈酸性，加草酸銨試液，即生成白色沉淀；分離，沉淀不溶于醋酸，但可溶于鹽酸。試驗(yàn)原理其反應(yīng)式為：（白色）5．鎂鹽鑒別試驗(yàn)一取供試品溶液，加氨試液，即生成白色沉淀；滴加氯化銨試液，沉淀溶解；再加磷酸氫二鈉試液1滴，振搖，即生成白色沉淀。沉淀在氨試液中不溶。試驗(yàn)原理其反應(yīng)式為：6，鋰鹽鑒別試驗(yàn)一焰色試驗(yàn)顯黃綠色（553.56nm，500nm），通過綠色玻璃透視，火焰顯藍(lán)色（488nm）。鑒別試驗(yàn)二取供試品溶液，加稀硫酸，即生成白色沉淀；分離，沉淀在鹽酸或硝酸中均不溶解。7，鍶鹽鑒別試驗(yàn)一取供試品溶液，加氫氧化鈉試液堿化后，加入碳酸鈉試液，煮沸，即生成白色沉淀（Li2O）；分離，沉淀能在氯化銨試液中溶解(NH3)。鑒別試驗(yàn)二焰色試驗(yàn)顯胭脂紅色。（670.78nm）鑒別試驗(yàn)三取供試品適量，加入稀硫酸或可溶性硫酸鹽溶液，不生成沉淀（與鍶鹽區(qū)別）試驗(yàn)原理鋰鹽和稀硫酸或可溶性硫酸鹽溶液不發(fā)生沉淀反應(yīng)，而鍶鹽則相反，以此可區(qū)別鋰鹽和鍶鹽。8．鐵鹽（1）亞鐵鹽：鑒別試驗(yàn)一取供試品溶液，加鐵氰化鉀試液，即生成深藍(lán)色沉淀，分離，沉淀在稀鹽酸中不溶，但加氫氧化鈉試液，即分解成棕色沉淀。試驗(yàn)原理其反應(yīng)式為：（深藍(lán)色藤氏藍(lán)）（棕色）試驗(yàn)原理其反應(yīng)式為：(深紅色)鑒別試驗(yàn)一取供試品溶液，加亞鐵氰化鉀試液，即生成深藍(lán)色沉淀，分離，沉淀在稀鹽酸中不溶，但加氫氧化鈉試液，即分解成棕色沉淀。試驗(yàn)原理其反應(yīng)式為：（深藍(lán)色普魯士藍(lán)）試驗(yàn)原理其反應(yīng)式為：（血紅色）本試驗(yàn)一般應(yīng)在鹽酸溶液中進(jìn)行；不能用硝酸，因硝酸中也許具有亞硝酸，干擾試驗(yàn)成果。（紅色）9，汞鹽（1）亞汞鹽鑒別試驗(yàn)一取供試品，加氨試液或氫氧化鈉試液，即變?yōu)楹谏Ｔ囼?yàn)原理其反應(yīng)式為：（黑色）（黑色）試驗(yàn)原理其反應(yīng)式為：（黃色）（黑色）鑒別試驗(yàn)一取供試品溶液，加氫氧化鈉試液，即生成黃色沉淀(HgO)。鑒別試驗(yàn)二取供試品的中性溶液，加碘化鉀試液，即生成猩紅色沉淀，能在過量碘化鉀試液中溶解；再以氫氧化鈉堿化，加銨鹽即生成紅棕色沉淀。試驗(yàn)原理其反應(yīng)式為：（猩紅色）10,銀鹽鑒別試驗(yàn)一取供試品溶液，加稀鹽酸，即生成凝乳狀沉淀，分離，沉淀能在氨試液中溶解，加硝酸沉淀又重新出現(xiàn)。試驗(yàn)原理其反應(yīng)式為：鉻酸銀沉淀能溶于硝酸中，也可和氨試液作用生成[Ag(NH3)2]+而溶解，但不溶于酸性較弱的醋酸中。11．銅鹽鑒別試驗(yàn)一取供試品溶液，滴加氨試液，即生成淡藍(lán)色沉淀，再加過量氨試液，沉淀即溶解，生成深藍(lán)色溶液。試驗(yàn)原理其反應(yīng)式為：試驗(yàn)原理其反應(yīng)式為：（紅棕色）12，鉍鹽鑒別試驗(yàn)一取供試品溶液，加碘化鉀試液，即生成紅棕色溶液或暗棕色沉淀，分離，沉淀能在過量碘化鉀試液中溶解成黃棕色的溶液，再加水稀釋，又生成橙色沉淀。試驗(yàn)原理其反應(yīng)式為：鉍鹽量少時(shí)，則形成紅棕色溶液。（紅棕色溶液）加水稀釋，即形成橙色的碘化氧鉍沉淀。（橙色）如鉍鹽濃度較小時(shí)，這一反應(yīng)現(xiàn)象不明顯。鑒別試驗(yàn)二取供試品溶液，用稀硫酸酸化，加10%硫脲溶液，即顯深黃色。試驗(yàn)原理鉍鹽和硫脲在酸性條件下，具有尤其敏捷的顏色反應(yīng)（1），其顏色取決于生成沉淀的構(gòu)成，沉淀的構(gòu)成取決于反應(yīng)的條件，Bi3+與SC(NH2)2的比例為1∶1時(shí)為黃褐色；1∶2時(shí)為黃色；1∶3時(shí)為黃褐色。硫脲和多數(shù)金屬離子都可發(fā)生顏色反應(yīng)。13．鋅鹽鑒別試驗(yàn)一取供試品溶液，加亞鐵氰化鉀試液，即生成白色沉淀，分離，沉淀在稀鹽酸中不溶解。試驗(yàn)原理其反應(yīng)式為：（白色）亞鐵氰化鉀試劑過量時(shí)則生成溶解度更小的亞鐵氰化鋅鉀白色沉淀。（白色）沉淀不溶于稀酸或氨試液，但可溶于強(qiáng)堿。鑒別試驗(yàn)二取供試品溶液，以稀硫酸酸化，加0.1%硫酸銅試液1滴及硫氰酸汞銨試液數(shù)滴，即生成紫色沉淀。試驗(yàn)原理鋅鹽和硫氰酸汞銨于酸性條件下反應(yīng)，生成白色硫氰酸汞鋅沉淀，當(dāng)有銅鹽存在時(shí)，則生成混晶而顯色。若[Zn2+]/[Cu2+]不一樣，則所產(chǎn)生沉淀的顏色也不一樣。14．銻鹽鑒別試驗(yàn)一供試品溶液，加醋酸成酸性后，置水浴上加熱，趁熱加硫代硫酸鈉試液數(shù)滴，逐漸生成橙紅色沉淀。試驗(yàn)原理其反應(yīng)式為：（橙紅色）酸化溶液時(shí)，可用鹽酸，然后再加水稀釋至恰有白色沉淀渾濁發(fā)生（SbOCl），即為所需酸度。由于不易控制，因此一般采用醋酸。鑒別試驗(yàn)二取供試品溶液，加鹽酸成酸性后，通硫化氫氣，即生成橙色沉淀，分離，沉淀在硫化銨試液或硫化鈉試液中溶解。試驗(yàn)原理其反應(yīng)式為：（橙色）（橙色）沉淀可和硫化銨或硫化鈉作用，生成硫銻酸鹽[SbS4]3-和亞硫銻酸鹽[SbS3]3-而溶解。其反應(yīng)式為：15．鋁鹽鑒別試驗(yàn)一取供試品溶液，加氫氧化鈉試液，即生成白色膠狀氫氧化鋁沉淀；分離，沉淀能溶于過量氫氧化鈉試液中。試驗(yàn)原理其反應(yīng)式為：（白色膠狀）當(dāng)pH值超過10時(shí)，則氫氧化鋁沉淀溶解。鑒別試驗(yàn)二取供試品溶液，加氨試液至生成白色膠狀沉淀，滴加茜素磺酸鈉指示液數(shù)滴，沉淀即顯櫻紅色。試驗(yàn)原理其反應(yīng)式為：16．亞錫鹽鑒別試驗(yàn)取供試品水溶液1滴，點(diǎn)于磷鉬酸銨試紙上，試紙應(yīng)顯藍(lán)色。試驗(yàn)原理亞錫鹽和三氯化銻同樣不僅能將可溶性的磷鉬酸銨鹽還原,并且也能使不溶性的磷鉬酸鹽還原,生成一種鉬的低價(jià)氧化物的膠體分散混合物即鉬藍(lán)，其重要成分大概是2MoO3·Mo2O5。3、專屬鑒別反應(yīng)(specificidentificationtest)。藥物的專屬鑒別反應(yīng)是證明某一種藥物的根據(jù).它是根據(jù)每一種藥物化學(xué)構(gòu)造的差異及其所引起的物理化學(xué)性質(zhì)的不一樣,選用某些特有的敏捷定性反應(yīng),鑒別藥物的真?zhèn)?。綜上所述，一般鑒別試驗(yàn)是以某些類別藥物的共同化學(xué)構(gòu)造為根據(jù)，根據(jù)其相似的物理化學(xué)性質(zhì)進(jìn)行藥物真?zhèn)蔚蔫b別，以區(qū)別不一樣類別的藥物。而專屬鑒別試驗(yàn)，則是在一般鑒別試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，運(yùn)用多種藥物的化學(xué)構(gòu)造差異，來鑒別藥物，以區(qū)別同類藥物或具有相似化學(xué)構(gòu)造部分的各個(gè)藥物單體，到達(dá)最終確證藥物真?zhèn)蔚哪康?。一般鑒別反應(yīng):以某些類別藥物的共同化學(xué)構(gòu)造為根據(jù),進(jìn)行鑒別.以區(qū)別不一樣類別的藥物。專屬鑒別反應(yīng):運(yùn)用多種藥物的化學(xué)構(gòu)造差異，來鑒別藥物，區(qū)別同類藥物。三、鑒別措施化學(xué)鑒別：干法：火焰（鹽類藥物）；濕法光譜鑒別色譜鑒別生物學(xué)法規(guī)定：專屬性強(qiáng)、再現(xiàn)性好、敏捷度高、操作簡(jiǎn)樸、迅速?；瘜W(xué)鑒別法1、干法：將供試品加合適試劑在規(guī)定的溫度條件下（一般是高溫）進(jìn)行試驗(yàn)，觀測(cè)此時(shí)所發(fā)生的特異現(xiàn)象。①焰色反應(yīng):運(yùn)用某些元素所具有的特異焰色，可鑒別它們?yōu)槟囊活慃}類藥物。取鉑絲，用HCL濕后，取供試品在無色火焰中燃燒→特殊顏色。②加熱分解:在合適的溫度條件下，加熱使供試品分解，生成有特殊氣味的氣體。2、濕法：系指將供試品和試劑在合適的溶劑中，于一定條件下進(jìn)行反應(yīng)，發(fā)生易于觀測(cè)的化學(xué)變化，如顏色、沉淀、氣體、熒光等。供試品試劑+溶劑→化學(xué)變化（顏色，沉淀，氣體）(1)呈色反應(yīng)鑒別法：系指供試品溶液中加入合適的試劑溶液，在一定條件下進(jìn)行反應(yīng)，生成易于觀測(cè)的有色產(chǎn)物。在鑒別試驗(yàn)中最為常用的反應(yīng)類型有：1)三氯化鐵呈色反應(yīng)---酚羥基或水解后產(chǎn)生酚羥基；2)異羥肟酸鐵反應(yīng)---多為芳酸及其酯類、酰胺類；3)茚三酮呈色反應(yīng)---脂肪氨基；4)重氮化-偶合顯色反應(yīng)---芳伯氨基或能產(chǎn)生芳伯氨基；5)氧化還原顯色反應(yīng)及其他顏色反應(yīng)。（2）沉淀生成反應(yīng)鑒別法：常用的此類反應(yīng)有：１)與重金屬離子的沉淀反應(yīng)在一定條件下，藥物和重金屬離子反應(yīng)，生成不一樣形式的沉淀；2)與硫氰化鉻銨（雷氏鹽）的沉淀反應(yīng)多為生物堿及其鹽，具有芳香環(huán)的有機(jī)堿及其鹽；3)其他沉淀反應(yīng)。（3）熒光反應(yīng)鑒別法：常用的熒光發(fā)射形式有如下類型：1)藥物自身可在可見光下發(fā)射熒光；2)藥物溶液加硫酸使呈酸性后，在可見光下發(fā)射熒光；3)藥物和溴反應(yīng)后，于可見光下發(fā)射出熒光；4)藥物和間苯二酚反應(yīng)后，發(fā)射出熒光及藥物經(jīng)其他反應(yīng)后，發(fā)射熒光。(4)氣體生成反應(yīng)鑒別法：1)大多數(shù)的胺（銨）類藥物、酰脲類藥物以及某些酰胺類藥物，可經(jīng)強(qiáng)堿處理后，加熱，產(chǎn)生氨（胺）氣；2)化學(xué)構(gòu)造中含硫的藥物，可經(jīng)強(qiáng)酸處理后，加熱，發(fā)生硫化氫氣體；3)含碘有機(jī)藥物經(jīng)直火加熱，可生成紫色碘蒸氣；含醋酸酯和乙酰胺類藥物，經(jīng)硫酸水解后，加乙醇可產(chǎn)生乙酸乙酯的香味。光譜鑒別法1、UV法原則品對(duì)照法；規(guī)定吸取波長(zhǎng)法；規(guī)定吸取波長(zhǎng)和對(duì)應(yīng)的吸取度法；規(guī)定吸取波長(zhǎng)和吸取系數(shù)法；規(guī)定吸取波長(zhǎng)和吸取度比值法。2、IR法：紅外光譜法是一種專屬性很強(qiáng)、應(yīng)用較廣（固體、液體、氣體樣品）的鑒別措施。原則圖譜對(duì)照法：中國(guó)藥典和BP對(duì)照品法：USP專屬性很強(qiáng)，新藥的鑒別。色譜法運(yùn)用不一樣物質(zhì)在不一樣色譜條件下，產(chǎn)生各自的特性色譜行為（Rf值或保留時(shí)間）進(jìn)行鑒別試驗(yàn)。常用的措施有：1、TLC:Rf值（原則品與供試品）一致。在實(shí)際工作中，一般采用對(duì)照品（或原則品）比較法，規(guī)定供試品斑點(diǎn)的Rf值應(yīng)與對(duì)照品斑點(diǎn)一致。2、HPLC：峰值tR一致（原則品與供試品）一般規(guī)定按供試品含量測(cè)定項(xiàng)下的高效液相色譜條件進(jìn)行試驗(yàn)。規(guī)定供試品和對(duì)照品色譜峰的保留時(shí)間應(yīng)一致。含量測(cè)定措施為內(nèi)標(biāo)法時(shí)，可規(guī)定供試品溶液和對(duì)照品溶液色譜圖中藥物峰保留時(shí)間與內(nèi)標(biāo)物峰的保留時(shí)間比值應(yīng)相似。3、GC法：同上4、(PC)紙色譜法：分離效能低，分析時(shí)間長(zhǎng)，以被TLC或其他色譜法所取代（正相分派色譜法）。生物學(xué)法運(yùn)用微生物或試驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行鑒別的措施藥物鑒別措施新動(dòng)向1，儀器措施大大增長(zhǎng)，尤其是紅外光譜和高效液相色譜。2，制劑廣泛采用紅外法鑒別。3，鑒別條目簡(jiǎn)潔，選擇專屬的措施進(jìn)行鑒別，平均每個(gè)品種收載2條左右。四、鑒別試驗(yàn)條件鑒別試驗(yàn)是以所采用的化學(xué)反應(yīng)或物理特性產(chǎn)生的明顯的易于察覺的特性變化為根據(jù)。在規(guī)定的條件下完畢。否則鑒別試驗(yàn)的成果是不可信的。影響鑒別反應(yīng)的原因重要有：被測(cè)物濃度，試劑的用量、溶液的溫度、pH、反應(yīng)時(shí)間和共存的干擾物質(zhì)等。（一）溶液的濃度。重要指被鑒別藥物的濃度，及所用試劑的濃度。由于鑒別試驗(yàn)多采用觀測(cè)沉淀、顏色或多種光學(xué)參數(shù)（、、A、等）的變化，來鑒定成果，而藥物和有關(guān)試劑的濃度會(huì)直接影響上述的多種變化，必須嚴(yán)格規(guī)定溶液的濃度。觀測(cè)沉淀,顏色或光學(xué)參數(shù)(入max,入min,A,E1%1cm)變化,鑒定成果。藥物的濃度或試劑的濃度影響上述的條件變化。（二）溶液的溫度:每升高10℃,反應(yīng)速度升高2～4倍。（三）溶液的酸堿度許多鑒別反應(yīng)都需要在一定酸堿度的條件下才能進(jìn)行。溶液酸堿度的作用，在于能使各反應(yīng)物有足夠的濃度處在反應(yīng)活化狀態(tài)，使反應(yīng)生成物處在穩(wěn)定和易于觀測(cè)的狀態(tài)。H+,OH-條件,使反應(yīng)處在穩(wěn)定的狀態(tài)。（四）干擾成分的存在。在鑒別試驗(yàn)中，如藥物構(gòu)造中的其他部分或藥物制劑中的其他組分也可參與鑒別反應(yīng)，產(chǎn)生干擾，應(yīng)選擇專屬性更高的鑒別反應(yīng)將其消除或?qū)⑵浞蛛x,消除干擾成分的存在。（五）試驗(yàn)時(shí)間有機(jī)化合物的化學(xué)反應(yīng)和無機(jī)化合物不一樣，一般反應(yīng)速度較慢，到達(dá)預(yù)期試驗(yàn)成果需要較長(zhǎng)的時(shí)間。這是由于有機(jī)化合物是以共價(jià)鍵相結(jié)合，化學(xué)反應(yīng)能否進(jìn)行，依賴于共價(jià)鍵的斷裂和新價(jià)鍵形成的難易，這些價(jià)鍵的更替需要一定的反應(yīng)時(shí)間和條件。同步在化學(xué)反應(yīng)過程中，有時(shí)存在著許多中間階段，甚至需加入催化劑才能啟動(dòng)反應(yīng)。因此，使鑒別反應(yīng)完畢，需要一定期間。有機(jī)化合物:反應(yīng)速度慢,加入催化劑。無機(jī)化合物:反應(yīng)速度快。五、鑒別試驗(yàn)的敏捷度（一）反應(yīng)敏捷度和空白試驗(yàn)在一定條件下能在盡量稀的溶液中觀測(cè)出盡量少許的供試品.反應(yīng)對(duì)這一規(guī)定所能滿足的程度稱為反應(yīng)的敏捷度(sensitivity)。以兩個(gè)互相有關(guān)的量來表達(dá):最低檢出量，最低檢出濃度。最低檢出量(minimumdetectalbequantity，又稱檢出限量)(以m表達(dá))單位一般用μg表達(dá)。1μg=10-6g最低檢出量愈小，反應(yīng)愈敏捷。但最低檢出量不能充足表達(dá)反應(yīng)的敏捷度，由于沒有闡明溶液的濃度。最低檢出濃度(minimumdetectableconcentration，又稱界線濃度)應(yīng)用某一反應(yīng)，在一定條件下，可以觀測(cè)出供試品的最低濃度，常以1∶G(1∶V)來表達(dá)。G和V表達(dá)具有1g重某供試品的溶液的克(ml)數(shù)。最低檢出量和最低檢出濃度之間的關(guān)系用下式表達(dá) ， ν表達(dá)所取供試液的最小體積(ml)G單位g/g。在選用敏捷度很高的反應(yīng)時(shí)，必須采用高純度的試劑和非常潔凈的器皿，才能保證鑒別試驗(yàn)的成果可靠性。為了消除試劑和器皿也許帶來的影響，應(yīng)同步進(jìn)行空白試驗(yàn)（blanktest）以供對(duì)照。空白試驗(yàn)：在與供試品鑒別試驗(yàn)完全相似的條件下，除不加供試品外，其他試劑均同樣加入而進(jìn)行試驗(yàn)。反應(yīng)的敏捷度與分析措施、觀測(cè)方式、反應(yīng)條件、人的觀測(cè)能力等原因有關(guān)。（二）提高敏捷度的措施在實(shí)際工作中，常采用下列措施提高反應(yīng)的敏捷度1、加入與水互不相溶的有機(jī)溶劑.濃集有色生成物，使有機(jī)溶劑中顏色變深，易于觀測(cè)。2、改善觀測(cè)措施例如，將目視觀測(cè)溶液的顏色，改為可見