第08章++胺類藥物的分析

第八章胺類藥物的分析

AnalysisofAromaticAmineDrugs第一節(jié)芳胺類藥物的分析AromaticAmineDrugs常見的芳胺類藥物

對(duì)氨基苯甲酸酯類藥物的基本結(jié)構(gòu)酰胺類藥物的基本結(jié)構(gòu)非那西丁（對(duì)乙酰氨基苯乙醚）對(duì)乙酰氨基酚（撲熱息痛）醋氨苯砜鹽酸利多卡因鹽酸布比卡因芳伯氨基酯鍵,易水解脂烴胺Cl－反應(yīng)鹽酸普魯卡因?qū)σ阴０被吁０锋I，易水解雜質(zhì)對(duì)氨基酚潛在芳伯氨基酚羥基一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)（一）具有芳伯氨基或潛在的芳伯氨基，可用重氮化—偶合反應(yīng)鑒別或亞硝酸鈉滴定法測(cè)定含量，可與芳醛發(fā)生縮合反應(yīng)，易氧化變色。

（二）酯鍵或酰胺鍵易水解（三）具脂烴胺側(cè)鏈，弱堿性，可與生物堿沉淀試劑發(fā)生沉淀反應(yīng)進(jìn)行鑒別或非水堿量法測(cè)定含量。（四）游離堿易溶于有機(jī)溶劑，其鹽可溶于水。（六）UV（七）IR（五）某些特征取代基（如酚羥基）的反應(yīng)二、鑒別試驗(yàn)

（一）重氮化—偶合反應(yīng)

芳香第一胺類鑒別反應(yīng)

鹽酸普魯卡因ChP（2010）[鑒別]（1）本品顯芳香第一胺類的鑒別反應(yīng)（附錄Ⅲ）取供試品約50mg，加稀鹽酸1m1，必要時(shí)緩緩煮沸使溶解，放冷，加0.1mo1/L亞硝酸鈉溶液數(shù)滴，滴加堿性β-萘酚試液數(shù)滴，視供試品不同，生成由橙黃到猩紅色沉淀。

對(duì)乙酰氨基酚ChP（2010）[鑒別]（2）取本品約0.1g，加稀鹽酸5m1，置水浴中加熱40分鐘，放冷；取0.5m1，滴加亞硝酸鈉試液5滴，搖勻，用水3ml稀釋后，加堿性β-萘酚試液2m1，振搖，即顯紅色。

（二）三氯化鐵反應(yīng)對(duì)乙酰氨基酚（三）與重金屬離子反應(yīng)1.與銅和鈷離子反應(yīng)

2．羥肟酸鐵鹽反應(yīng)

3．與汞離子的反應(yīng)

（四）水解產(chǎn)物的反應(yīng)

1.鹽酸普魯卡因ChP（2010）[鑒別]（2）取本品約0.1g，加水2ml溶解后，加10％氫氧化鈉溶液1ml，即生成白色沉淀；加熱，變?yōu)橛蜖钗?；繼續(xù)加熱，產(chǎn)生的蒸氣，能使?jié)駶?rùn)的紅色石蕊試紙變?yōu)樗{(lán)色；熱至油狀物消失后，放冷，加鹽酸酸化，即析出白色沉淀。

二乙氨基乙醇↑紅石蕊試紙變藍(lán)HCl+△使?jié)駶?rùn)的紅色石蕊試紙變藍(lán)HCl2.苯佐卡因ChP（2010）[鑒別]（2）取本品約0.1g，加氫氧化鈉試液5m1，煮沸，即有乙醇生成；加碘試液，加熱，即生成黃色沉淀，并發(fā)生碘仿的臭氣。

（五）制備衍生物測(cè)熔點(diǎn)1．三硝基苯酚衍生物

鹽酸利多卡因ChP（2010）[鑒別]取本品0.2g，加水20ml溶解。（1）取溶液10ml，加三硝基苯酚試液10ml，即生成沉淀；濾過(guò)，沉淀用水洗滌后，干燥，依法測(cè)定（附錄ⅥC），熔點(diǎn)為228～232℃，熔融時(shí)同時(shí)分解。鹽酸布比卡因ChP（2010）2.硫氰酸鹽衍生物

鹽酸丁卡因ChP（2010）[鑒別]（1）取本品約0.1g，加5%醋酸鈉溶液10ml溶解后，加25%硫氰酸銨溶液1ml，即析出白色結(jié)晶；濾過(guò)，結(jié)晶用水洗滌，在80℃干燥，依法測(cè)定（附錄ⅥC），熔點(diǎn)約為131℃。3500~3100cm-1

N-H2645cm-1

N-H+1600cm-11511cm-1

C=C1640cm-1

C=O1280cm-1三、雜質(zhì)檢查（一）對(duì)乙酰氨基酚

1.有關(guān)物質(zhì)

雜質(zhì)來(lái)源中間體、副產(chǎn)物及分解產(chǎn)物

對(duì)氯乙酰苯胺雜質(zhì)對(duì)照品法

檢查方法TLC

其他雜質(zhì)參比雜質(zhì)對(duì)照品法

副反應(yīng)副副反應(yīng)2.對(duì)氨基酚

雜質(zhì)來(lái)源中間體、水解產(chǎn)物反應(yīng)原理

檢查方法對(duì)照法取本品1.0g，加甲醇溶液（1→2）20ml溶解后，加堿性亞硝基鐵氰化鈉試液1m1，搖勻，放置30min；如顯色，與對(duì)乙酰氨基酚對(duì)照品1.0g加對(duì)氨基酚50

g用同一方法制成的對(duì)照液比較，不得更深（0.005％）。

（二）鹽酸普魯卡因注射液中對(duì)氨基苯甲酸的檢查

雜質(zhì)來(lái)源水解產(chǎn)生-CO2[O]有色溶血檢查方法TLC雜質(zhì)對(duì)照品法

精密量取本品，加乙醇稀釋使成為每1ml中含鹽酸普魯卡因2.5mg的溶液，作為供試品溶液。取對(duì)氨基苯甲酸對(duì)照品，加乙醇制成每1ml中含30

g的溶液，作為對(duì)照品溶液。取上述兩種溶液各10

l，分別點(diǎn)于含有羧甲基纖維素鈉為粘合劑的硅膠H薄層板上，用苯-冰醋酸-丙酮-甲醇（14∶1∶1∶4）為展開劑，展開后，取出晾干，用對(duì)二甲氨基苯甲醛溶液噴霧顯色。供試品溶液如顯與對(duì)照品溶液相應(yīng)的雜質(zhì)斑點(diǎn)，其顏色與對(duì)照品溶液主斑點(diǎn)比較，不得更深。（一）亞硝酸鈉滴定法1.原理具芳伯氨基的藥物四、含量測(cè)定

具游離芳伯氨基的藥物可用本法直接測(cè)定。具潛在芳伯氨基的藥物，如具酰胺基藥物（對(duì)乙酰氨基酚等）經(jīng)水解，芳香族硝基化合物（如無(wú)味氯霉素）經(jīng)還原，也可用本法測(cè)定。

2.主要測(cè)定條件（1）加入適量KBr加速反應(yīng)KBr為催化劑NaNO2+HCl→HNO2+NaClHNO2+HCl→NOCl+H2O在鹽酸存在下，重氮化反應(yīng)的機(jī)理為：（1）K1（2）K2

∵K1≈300K2加入KBr，可增大被測(cè)溶液中NO+的濃度，所以能加快重氮化反應(yīng)速度（2）酸的種類及其濃度在不同酸中重氮化反應(yīng)的速度為：HBr＞HCl＞H2SO4＞HNO3鹽酸1:2.5～6；加入鹽酸：①重氮化反應(yīng)速度加快；②重氮鹽在酸性溶液中穩(wěn)定；③防止生成偶氮氨基化合物，而影響測(cè)定結(jié)果（3）室溫條件下滴定10～30℃（4）滴定速度：先快后慢滴定管尖端插入液面下2/3處，滴定液一次大部分放下，近終點(diǎn)時(shí)方改為慢速滴定(5)反應(yīng)速度與藥物化學(xué)結(jié)構(gòu)的關(guān)系苯環(huán)上有吸電基團(tuán)或供電基團(tuán)時(shí)a.當(dāng)苯環(huán)上特別是氨基鄰位或?qū)ξ簧嫌形娀鶗r(shí),如吸電基通過(guò)誘導(dǎo)效應(yīng)使氨基上電子云密度降低，從而堿性降低，游離芳伯胺濃度增大，所以反應(yīng)速度就快。等可使氨基的堿性降低，重氮化反應(yīng)速度加快。b.

當(dāng)在苯環(huán)上有供電基時(shí)，則使反應(yīng)速度降低。如等。供電基能使氨基堿性增強(qiáng)，這樣氨基成鹽的機(jī)會(huì)就增大，游離芳伯胺的濃度就減小，所以反應(yīng)速度就慢。3.指示終點(diǎn)的方法（1）永停滴定法ChP（2005）、BP（2005）陽(yáng)極：陰極：導(dǎo)致在兩電極間有電子流動(dòng)，從而回路中有電流產(chǎn)生，使得電流計(jì)指針發(fā)生偏轉(zhuǎn)并且不再返回零點(diǎn)。（2）電位法USP（24）（3）外指示劑法KI—淀粉糊劑或試紙2NaNO2+2KI+4HCl→2NO+I2+2KCl+2NaCl+2H2O

（4）內(nèi)指示劑法中性紅不可逆指示劑外指示劑法的缺點(diǎn)：

由于滴定的溶液是強(qiáng)酸性，KI遇光能被空氣氧化析出碘，所以，在沒有達(dá)到終點(diǎn)時(shí)，就有可能呈現(xiàn)藍(lán)色，而造成誤判。

由于經(jīng)常蘸取溶液進(jìn)行試驗(yàn)，可造成滴定液的損失而帶來(lái)誤差。

方法難掌握。4.測(cè)定方法

鹽酸普魯卡因ChP（2010）取本品約0.6g，精密稱定，照永停滴定法（附錄ⅦA），在15～25℃，用亞硝酸鈉滴定液（0.1mol/L）滴定。每1ml亞硝酸鈉滴定液（0.1mol/L）相當(dāng)于27.28mg的C13H20N2O2·HCl（三）紫外分光光度法

對(duì)乙酰氨基酚在0.4％氫氧化鈉溶液中，于257nm波長(zhǎng)處有最大吸收，其紫外吸收光譜特征，可用于其原料及其制劑的含量測(cè)定。

（二）非水溶液滴定法

脂烴胺側(cè)鏈，具弱堿性對(duì)乙酰氨基酚ChP（2010）取本品約40mg，精密稱定，置25ml量瓶中，加0.4％氫氧化鈉溶液50ml溶解后，加水至刻度，搖勻，精密量取5m1，置100ml量瓶中，加0.4％氫氧化鈉溶液10m1，加水至刻度，搖勻，在257nm的波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度，按C8H9NO2的吸收系數(shù)為715計(jì)算，即得。（四）比色法

中性條件下的重氮化反應(yīng)（五）熒光法——熒光探針技術(shù)

使熒光衍生化試劑與本身無(wú)熒光或熒光效率低的化合物反應(yīng)，其產(chǎn)物具有強(qiáng)熒光，從而使檢測(cè)靈敏度大大提高。λex400nm（激發(fā)波長(zhǎng)）、λem485nm（發(fā)射波長(zhǎng)）處測(cè)定熒光強(qiáng)度，標(biāo)準(zhǔn)曲線法定量。（六）HPLC法

鹽酸普魯卡因注射液ChP（2010）可同時(shí)測(cè)定鹽酸普魯卡因及其降解產(chǎn)物對(duì)氨基苯甲酸離子抑制色譜法內(nèi)標(biāo)法定量例1．鹽酸普魯卡因胺常用的鑒別反應(yīng)有A.重氮化—偶合反應(yīng)B.羥肟酸鐵鹽反應(yīng)C.氧化反應(yīng)D.磺化反應(yīng)E.碘化反應(yīng)

例2．采用亞硝酸鈉法測(cè)定含量的藥物有A.苯巴比妥B.鹽酸丁卡因C．苯佐卡因D.醋氨苯砜E.鹽酸去氧腎上腺素

例3．下列藥物中不能用亞硝酸鈉滴定法測(cè)定含量者A.乙酰水楊酸B.對(duì)氨基水楊酸鈉C.對(duì)乙酰氨基酚D.普魯卡因E.苯佐卡因

例4.亞硝酸鈉滴定法中，加KBr的作用是A.添加Br

B.生成NO+·Br

C．生成HBrD.生成Br2E.抑制反應(yīng)進(jìn)行

例5．中國(guó)藥典（2010年版）所收載的亞硝酸鈉滴定法中指示終點(diǎn)的方法為A.電位法B.永停法C.外指示劑法D.內(nèi)指示劑法E.自身指示劑法

例6．亞硝酸鈉滴定法中，可用于指示終點(diǎn)的方法有A.自身指示劑法B.內(nèi)指示劑法C.永停法D.外指示劑法E.電位法

例7.ChP（2010）亞硝酸鈉滴定法測(cè)定對(duì)氨基水楊酸鈉的含量時(shí)，指示滴定終點(diǎn)的方法為A.自身指示終點(diǎn)法B.電位法指示終點(diǎn)C.永停滴定法D.氧化還原指示劑法E.酸堿指示劑法

例8.以下那種藥物中應(yīng)檢查對(duì)氨基苯甲酸A.鹽酸普魯卡因B.鹽酸普魯卡因胺C.注射用鹽酸普魯卡因D.鹽酸普魯卡因胺片E.鹽酸普魯卡因注射液

例9.鹽酸普魯卡因采用亞硝酸鈉滴定法測(cè)定含量時(shí)的反應(yīng)條件是A.強(qiáng)酸B.加入適量溴化鉀C.室溫（10～30℃）下滴定D.滴定管尖端深入液面E.永停法指示終點(diǎn)

例10.檢查對(duì)乙酰氨基酚中的對(duì)氨基酚雜質(zhì)，使用的試劑是A.三氯化鐵

B.硫酸銅

C.硫酸鐵銨

D.亞硝基鐵氰化鈉

E.三硝基苯酚例[11-14]A．對(duì)氨基苯甲酸

B．對(duì)氨基酚C．對(duì)苯二酚D．腎上腺酮E．游離水楊酸

下列藥物中應(yīng)檢查的雜質(zhì)是

11．藥典規(guī)定阿司匹林

12．藥典規(guī)定鹽酸普魯卡因注射液13．藥典規(guī)定對(duì)乙酰氨基酚

14．藥典規(guī)定腎上腺素

EABD練習(xí)題：1．簡(jiǎn)述亞硝酸鈉滴定法的原理及KBr的作用。2．試從對(duì)乙酰氨基酚和鹽酸普魯卡因的結(jié)構(gòu)出發(fā)，分析其可能具有哪些鑒別反應(yīng)和含量測(cè)定方法？3.精密稱取對(duì)乙酰氨基酚0.0420g，置250ml量瓶中，加0.4％氫氧化鈉溶液50ml溶解后，加水至刻度，搖勻，精密量取5m1，置100ml量瓶中，加0.4％氫氧化鈉溶液10m1，加水至刻度，搖勻，在257nm的波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度為0.594，按C8H9NO2的吸收系數(shù)為715計(jì)算本品百分含量。第二節(jié)苯乙胺類藥物的分析

苯乙胺類藥物的基本結(jié)構(gòu)*具有烴胺側(cè)鏈，屬于芳烴胺類藥物。多數(shù)在苯環(huán)上有1~2個(gè)羥基取代基。如在苯環(huán)3、4位上有羥基取代，則為兒茶酚胺類藥物。常見的苯乙胺類藥物鹽酸克侖特羅硫酸沙丁胺醇一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)

1.脂烴胺基側(cè)鏈，顯弱堿性2.酚羥基，易氧化變色，可發(fā)生三氯化鐵反應(yīng)3.具手性碳原子，具旋光性

4.溶解性游離堿難溶于水，易溶于有機(jī)溶劑，其鹽可溶于水5.UV6.IR7.取代基：具芳伯氨基的鹽酸克侖特羅可用重氮化—偶合反應(yīng)鑒別、亞硝酸鈉滴定法測(cè)定含量。（三）氧化反應(yīng)區(qū)別腎上腺素和去甲腎上腺素。（五）與亞硝基鐵氰化鈉反應(yīng)（Rimini反應(yīng)）脂肪族伯胺的專屬反應(yīng)三、雜質(zhì)檢查

雜質(zhì)來(lái)源原料殘存

檢查方法比較法（含量測(cè)定法）

（一）酮體的檢查

檢查原理利用酮體在310nm波長(zhǎng)處有最大吸收，而藥物本身在此波長(zhǎng)處幾乎沒有吸收，規(guī)定一定濃度溶液在310nm波長(zhǎng)處的吸收度限制酮體的量。（二）有關(guān)物質(zhì)檢查鹽酸去氧腎上腺素、硫酸沙丁胺醇等藥物

檢查方法：TLC中高低濃度對(duì)比法HPLC中不加校正因子的主成分自身對(duì)照法（三）鹽酸苯乙雙胍中有關(guān)雙胍的檢查