空氣微生物采樣器

空氣微生物采樣器四川省疾病預(yù)防控制中心四川大學(xué)一、特點OPM2.5肆虐，當今空氣微生物污染所造成的嚴重傷害，己越來越受到重視，因而對各種空氣污染采樣污染采樣監(jiān)測的需求就更加迫切，空氣微生物的數(shù)量及其大小分布乃是評價起危害的兩個不可缺少的指標。oJWL-6型六級篩孔撞擊式空氣微生物采樣器能夠測定空氣微生物的數(shù)量之外，它獨有的特性是還能測出這些粒子的大小，而后者是判定空氣微生物危害的重要指標之_。二、用途OJWL-6型六級篩孔撞擊式空氣微生物采樣器可廣泛用于疾病預(yù)防控制、環(huán)境保護、制藥、發(fā)酵工業(yè)、食品工業(yè)、生物潔凈等環(huán)境的空氣微生物數(shù)蠆及其大小分布的采樣監(jiān)測，以及有關(guān)科研、教學(xué)部門作空氣微生物的采樣研究，為評價環(huán)境空氣微生物污染的危害及其治理措施提供科學(xué)依據(jù)三、組成?整套儀器由六級撞擊器、主機（流量計）、器、三角架組成。定時!1!工作原理OJWL-6型六級篩孔撞擊式空氣微生物采樣器模似人體呼吸道的解剖結(jié)構(gòu)及其空氣動力學(xué)特征，采用慣用撞擊原理，將懸浮在空氣中的微生物粒子，按大小等級地分別收集在采樣介質(zhì)表面上，然后共培養(yǎng)及做逬一步微生物分析，求出空氣微生物粒子數(shù)量及其大小分布的特征。子JS38-級>7.0^1>另二級T二，入：;-：t--:.■?■r-ii：級-■丨Up弟S級I.1-2.t^i?第六級01^_Jtn五、使用方法0(-)撞擊器的清洗與消毒01.用中性洗滌劑溫水清洗撞擊器，用超聲波洗則更好，可除去噴孔的塞物。O2.若噴孔發(fā)生阻塞，用高壓氣流或配備的細針清除o3.六級撞擊器使用70%酒精擦拭消毒。O（二）采樣器的流量校正O六級篩孔撞擊式空氣微生物采樣器是28.3L/min，采樣前校正好流量。OL必須保證圓盤上孔眼通暢，然后按順序?qū)⒆矒羝餮b配好，一手從上部按住撞擊器，另一只手掛在三個彈簧掛鉤。2.用橡膠管連接撞擊器出□—主機逬氣取下撞擊器逬氣□的上蓋。3.將主機插上電源（AC220V）,按下主機上“電源開關(guān)”調(diào)節(jié)“流量調(diào)節(jié)”旋鈕，使流量計轉(zhuǎn)子穩(wěn)定在28.3L/mino（二）采樣平皿的制備01.一般需氧的空氣微生物采樣用普通瓊脂培養(yǎng)基（培養(yǎng)基1.8%-2.0%）若采集特殊微生物（如高營養(yǎng)的病原因，病毒，真菌等）可選用響音的采樣介質(zhì)。?2.平皿采用國產(chǎn)C>90x18腿玻璃培養(yǎng)皿，用高壓蒸汽滅菌后備用O?3.在無菌條件下用量杯往平皿內(nèi)倒入瓊脂24_30ml,瓊脂表面與高密CE3圈(8mm)一平，以保證采樣時噴孔與瓊脂表面之間2-3mm的最佳撞擊距離。?4.將加入采樣介質(zhì)的平皿，倒置放入37C恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24小時，無雜菌生長方可使用。Ei>3MB0（四）現(xiàn)場采樣01.連接：將三角架支開并鎖緊，把三角架頂部調(diào)至水平，主機放在三角架上，撞擊器放在桌上或地上，用橡膠管連接撞擊器出氣主機進氣口O2.順序放入采樣平皿（不要顛倒），一手打開平皿蓋，另一手迅速蓋上撞擊盤，然后按住撞擊器上部，掛上三個彈簧掛鉤。o放入和取出采樣平皿時，必須戴□罩，以防□輿排出細菌污染平皿。O3.打開撞擊器逬氣□上蓋，離幵采樣點2米之外，即可啟動采樣?？捎枚〞r器設(shè)定采樣時間。o4.采樣時間長短視所才空氣環(huán)境的污染程度而定，但最好不超過30分鐘，一面長時間的氣流沖擊致使采樣介質(zhì)脫水而影響微生物生長。5.為了保持菌落計數(shù)的準確性，每個平皿的均落在250個以下為宜，一般室外空氣環(huán)境采10分鐘,室內(nèi)空氣環(huán)境采卜5分鐘即可。o6.采樣完畢后，取出采樣平皿扣上蓋子，注意順序和編號號碼，切勿弄錯。六、培養(yǎng)計數(shù)菌落O1.將采樣后的平血倒置于37t!恒溫箱中培養(yǎng)48小時，對有特殊要求的微生物則放相應(yīng)條件下培養(yǎng)。?2.計數(shù)各級平皿上的菌落數(shù),一個菌落既是一個菌落形成單位(cfu)?Cfu:每g或mL樣品中的微生物在一定條件下培養(yǎng)后的菌落數(shù)的單位。（菌落形成單位）計算結(jié)果1.空氣口微生物數(shù)i:是以每立方米2氣中所含粒子數(shù)靈表示之?？諝庵形⑸飻?shù)重1

cfu)/V:所有平皿面落數(shù)X10C0_釆樣時間(min)X28.3(L/min)2.空氣中微生物大小分布：是以各級的菌繡占六級總菌繡百分匕表示之各級微生物粒子數(shù)心該_落數(shù)X100%六級總茴落數(shù)O利用微生物采樣器逬行采樣時，采樣時間為5分鐘，空氣流速為28.3L/min,若六級撞擊器從一級到六級按順序所得菌落數(shù)依次分別為：250、180、200、110、50、90cfu。o問空氣中微生物數(shù)量是多少？o求第五級微生物粒子在空氣中的分布？1.空氣中微生物數(shù)量，是以每立方米空氣中齡粒子數(shù)量表示之?？諝庵形⑸飻?shù)重tcfu/w3=

所有平皿菌落數(shù)X1C00_采樣時間(min)X28.3(L/min)2.$氣中鮏物大小分布：是以各_飜數(shù)占翎總菌_百分比表示之各級微生物粒子數(shù)％=該__X100

%_六級總菌落數(shù)餅干中菌落總數(shù)的測定O方法：平板計數(shù)法jfl〆.L___imL1:100稀釋1:1⑽0輯精1:10000稀釋食品中菌落總數(shù)測定檢驗程序ProtocalofAerobicBacterialCountinFood樣十225mL無蘭牛球鹽水||:W稀WiK體樣品悴均成解處琛1分鐘(KOOft~l0O?0rpm>用無供生理鹽水10倍系列稀鞸樣品_11mL/\CJ1:10稀杯川無術(shù)生姆鹽水W倍系列《釋樣砧◎..1;1O稀柙稀柙取若f遼當稀柙度的樣品iml,加入尤菌培科譴||，將-40TT的開弈敢砌姆注至祇弈m屮，轉(zhuǎn)動浪之3S*C*1TJ坰養(yǎng)*8峙2行后汁放&樣籽度曲落取鏞落板為3-t?-3HOfSJ的平板為腳定標________K]|L<檢樣25g(mL)樣品+225mL稀釋液，均質(zhì)10倍系列稀釋選擇2個、3個適宜樣品勻液，各取1mL分別加入尤調(diào)培芥皿內(nèi)每個培養(yǎng)皿中加入15~20mL平板計數(shù)培基，混勻|361±lT\48h士2h計算各平板菌落數(shù)計弊菌落總數(shù)」一檢驗程序報告檢樣體樣品：在電了?天平上稱取25g+225mL0.85%滅菌屮理鹽水液休樣品：直接取用刮體枰品存放罐固體樣品稱量+?。◣显嚬芗埽骸鯺有0.85%滅菌生理鹽水的錐形瓶1個■裝有9mL0.85%滅菌生理鹽水的試管3支（注：液體樣品只需2支）■從培養(yǎng)皿簡中取出培養(yǎng)皿。培養(yǎng)皿出取培養(yǎng)皿簡■在培養(yǎng)皿上編號提示：培養(yǎng)皿上的標記殆稀釋倍數(shù)固體樣品：稀釋倍數(shù)為10_\10人103液體樣品：稀釋倍數(shù)為10G、104、102■操作前，用鑷子取灑精棉消毒桌子、消毒手。?用量筒量取225mL0.85%滅菌牛理鹽水至稀釋瓶中。（注意:稀釋瓶、帶塞錐形瓶開蓋前要過火，量筒、裝有0.85%火菌生理鹽水的錐形瓶及其塞子應(yīng)放在酒精燈周圍15cm的范圍內(nèi)）■-125g+225mL牛坪鹽水101IS1體樣品?足帝：衝培蕎基時，培賽皿的開口盡量要爪：同時，開口對看?面積燈。5示播助培旅皿時，坊沴氏培養(yǎng)基濺到培養(yǎng)皿藏上?！鲈谂囵B(yǎng)皿中加入平板計數(shù)瓊脂培養(yǎng)基(15~20mL),輕搖培養(yǎng)皿，使試樣與培養(yǎng)基混勻。■待培養(yǎng)芘凝固后，將培養(yǎng)皿放入恒溫培養(yǎng)箱?，q示：培兼皿玟入培犛箱時要倒篁。?注意選擇設(shè)置為36"C土rc的培養(yǎng)箱。+關(guān)于實測結(jié)果的填寫■若只有一個稀釋度平板上的菌落數(shù)在適宜計數(shù)范圍內(nèi)（3（卜300），計算兩個平板菌落數(shù)的平均值，再將平均值乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)，作為毎克（毫升〉中菌落總數(shù)結(jié)果?！鋈粲袃蓚€連續(xù)稀釋度的平板菌落數(shù)在適宜計數(shù)范圍內(nèi)時，按下式計算：檢驗_果記錄稀釋度IO-1l?-2~~IO21(H~~1(H空白位II23落k多小名小756422160_\~Q____可計|可計|______________平均值多不可汁70190培養(yǎng)條件溫度：36aC±1&C時閌：48h±2h實測結(jié)果7.0Xl(FCFU/g(7.0Xl(HCFV/mLJ標準值查看“產(chǎn)品標準值”表，填寫吊項檢符合(或不符合)驗結(jié)論備注(n}+0An2)d其中：N：樣品中菌落數(shù);平板（含適宜范圍菌落數(shù)的平板）菌落數(shù)之和;n（：第一個適宜稀稈度平板的個數(shù);n2：第二個適亢稀釋度平板的個數(shù):d：稀釋因子（第一稀釋度）（低稀釋倍數(shù)）（髙稀釋倍數(shù)）■在培養(yǎng)皿上編號漶示：培眾皿上的標記殆褅釋倍鉸。]固體樣品:稀釋倍數(shù)為1(H、10<103液體樣品：稀釋倍數(shù)為10Q、10102樸么守南奔矜矽