分光光度計(jì)使用注意事項(xiàng)剖析

1、分光光度計(jì)的使用一使用及維護(hù)1. 安裝環(huán)境1.1 溫度要求：裝在不受陽(yáng)光直接曝曬的房間； 最好裝空調(diào)， 使室溫維持 在（20土2C）；儀器附近不應(yīng)有高溫的暖氣管或其它電熱器具；儀器 后面板與墻之間應(yīng)留一定空間。1.2 濕度要求：水蒸氣在（1 3501 450）門口和（1 8001 950） nm兩個(gè) 波長(zhǎng)區(qū)域內(nèi)有光吸收，會(huì)嚴(yán)重干擾測(cè)定。潮濕會(huì)導(dǎo)致分光器反射膜層 斑剝、脫落等。故相對(duì)濕度最好保持在（ 40 75）。高檔紫外可 見(jiàn)近紅外分光光度計(jì)要用高純氮?dú)鉀_洗。干燥筒內(nèi)的變色硅膠應(yīng)及 時(shí)更換。1.3 防震、防塵、防腐和防電磁干擾：2. 光源燈2.1 拿燈時(shí)不要碰窗口，以免手上的油污經(jīng)紫外照射后，

2、形成結(jié)痕難以 去掉 . 倘若不小心而碰觸，應(yīng)及時(shí)用無(wú)水乙醇抹擦干凈。2.2 燈有壽命，要節(jié)約使用 . 但工作間歇時(shí)間短，不要關(guān)燈和停機(jī) .2.3 在燈雖然能點(diǎn)亮， 但不穩(wěn)定或強(qiáng)度大大減弱而影響測(cè)量時(shí)， 就應(yīng)更換 新燈.2.4 應(yīng)待燈冷卻后，再重新啟動(dòng) . 啟動(dòng)后預(yù)熱 15-30min 才能讀數(shù) .2.5 不要用眼睛直視燈，因?yàn)樽贤廨椛鋾?huì)損傷人的眼睛。3. 單色器3.1 單色器是儀器的心臟部分 . 不要輕易裝、拆，也不要去摸觸鏡面 .3.2 平時(shí)要保持內(nèi)部干燥， 及時(shí)更換干燥劑， 以防止色散元件和反射鏡受 潮而發(fā)霉，測(cè)定揮發(fā)樣品必須使用密封吸收池， 以免樣品蒸氣進(jìn)入單色器， 腐蝕反射鏡、透鏡及色

3、散元件的鏡面 .3.3 如果選定波長(zhǎng)和狹縫寬度是用旋鈕， 則要按說(shuō)明書(shū)規(guī)定的方向轉(zhuǎn)動(dòng)到 欲測(cè)的位置，切勿來(lái)回轉(zhuǎn)動(dòng)，以防回衡誤差 .4. 樣品室4.1 樣品室是存放吸收池的地方， 防止樣品的交叉污染， 決不可將樣品留 在樣品室中過(guò)夜 .4.2 吸收池的光學(xué)面一定要維護(hù)好，不能用刷子刷 . 否則光學(xué)面發(fā)毛會(huì)增 加散射而影響測(cè)定準(zhǔn)確度 . 保護(hù)吸收池最重要的一條是使用后及時(shí)清洗， 否則留下液痕，日后再洗，事倍功半 . 用完的吸收池可放在中性肥皂水中 （將十二烷基硫酸鈉用蒸餾水配制成透明的稀溶液 ），或放在 8 moll 鹽 酸加 45乙醇的等量混合液中浸泡，然后用自來(lái)水沖洗，再用蒸餾水洗 凈，放在無(wú)

4、灰塵的地方?jīng)龈蓚溆?.如果急于使用，可在真空中抽干 .但不要 用熱吹風(fēng)吹干。4.3 對(duì)于盛過(guò)蛋白質(zhì)和核酸的樣品池最好不要用市售的烷基磺化型的清 洗劑，因?yàn)樗鼈冇蓄愃频鞍踪|(zhì)的吸收光譜， 清洗不慎會(huì)引入誤差， 所以此 時(shí)最好使用非離子型清洗劑 （ 如 triton） 浸泡. 如果吸收池實(shí)在太臟， 質(zhì)量 好的吸收池可放在洗液中稍加處理， 但要隨即取出沖洗， 不宜浸泡過(guò)長(zhǎng)的時(shí)間。洗液必須沖洗干凈，因?yàn)樗灿蓄愃频鞍踪|(zhì)和核酸的吸收光譜。4.4 為了精確的定量測(cè)定，吸收池應(yīng)事先進(jìn)行校正 . 校正的辦法是在池中 加入欲測(cè)濃度的溶液，讀出各吸收池的吸光度 . 以一個(gè)池為標(biāo)準(zhǔn)讀出其他 各池的吸光度 .然后在讀取

5、樣品吸光度后， 再予校正.市售常規(guī)光徑 （10mm） 的吸收池一般匹配到O.OImm.為了某種工作的需要（如差示光譜測(cè)定）必須尋找匹配池時(shí)， 可在池中裝入高吸收的樣品， 讀數(shù)后加以挑選。 一臺(tái)儀 器上的比色皿不得與其它儀器上的比色皿單個(gè)調(diào)換。 比色皿每次用完后應(yīng) 立即用蒸餾水洗凈，用軟布或擦鏡紙擦干，放于比色皿盒內(nèi)。5. 傾注溶液時(shí)要小心， 不要弄濕外壁 . 如不慎弄濕，可用濾紙輕輕吸干后， 再用綢布或擦鏡紙擦凈 （最好用白綢，擦鏡紙常有紙毛 ）。6. 檢測(cè)器：檢測(cè)器室要保持干燥，以保證絕緣良好 .在使用光電倍增管時(shí)，最重要的一點(diǎn)是通電后避免不必要的曝光。在儀器的光電倍增管的前面 （通常在樣品

6、室的上方 ）常有暗閘（微動(dòng)開(kāi)關(guān) ） ，這是光電倍增管的保護(hù)裝 置，用來(lái)保護(hù)其在開(kāi)啟樣品室蓋時(shí)，不受日光照射 . 否則通電后的光電倍 增管，受強(qiáng)光照射，會(huì)造成永久性的損壞，或至少因“疲勞 而降低靈敏度。7. 硫化鉛光電池忌受紫外線照射，否則會(huì)降低其靈敏度。8. 儀器用完后應(yīng)用罩布蓋好，以防落入灰塵。9. 儀器應(yīng)每半年左右或搬動(dòng)后應(yīng)檢查波長(zhǎng)精度等，以確保儀器性能正常。 二分光光度計(jì)的性能檢查1 波長(zhǎng)范圍 指分光光度計(jì)上限波長(zhǎng)和下限波長(zhǎng)之間的工作范圍，在這個(gè)范圍內(nèi)的 所有波長(zhǎng)應(yīng)具有足夠的能量進(jìn)行工作 . 這種檢測(cè)波長(zhǎng)極限是與光源、單色 器及檢測(cè)器的光譜響應(yīng)特性有關(guān)的 . 如波長(zhǎng)范圍為 19O-9OO

7、nm 的紫外 -可 見(jiàn)分光光度計(jì)必須具備氘燈和碘鎢燈兩個(gè)光源， 而只有碘鎢燈的分光光度 計(jì)的工作范圍，在短波側(cè)不能低于 340nm.有時(shí)在說(shuō)明書(shū)規(guī)定的工作波長(zhǎng) 范圍的兩端由于缺乏足夠的能量， 不能正常工作 . 如在兩端表現(xiàn)為 1OOT 或A設(shè)定困難，或基線在兩端不平直等，就需要檢查可能發(fā)生的原因，如 光源位置需要調(diào)整、 光源需要更換、 樣品室窗口有溶液污染、 光路需要調(diào) 試、檢測(cè)器疲勞等等。2 波長(zhǎng)準(zhǔn)確度波長(zhǎng)準(zhǔn)確度 （有時(shí)被誤稱為波長(zhǎng)精度 ）是指儀器波長(zhǎng)指示器上所指示 的波長(zhǎng)值與儀器給出的實(shí)際波長(zhǎng)值之間的符合程度，可用二者之差 （即波 長(zhǎng)誤差）來(lái)衡量其準(zhǔn)確性.如某分光光度計(jì)的波長(zhǎng)準(zhǔn)確度為土 1

8、.Onm,那么 測(cè)定253.65nm汞燈輝線的最大能量應(yīng)落在 252.65nm和254.65nm之間.波長(zhǎng)準(zhǔn)確度對(duì)分光光度測(cè)定是有很大影響的， 因?yàn)槿魏畏止夤舛榷?分析工作都是依靠在一定波長(zhǎng)下測(cè)量吸光度值 （ 此波長(zhǎng)大都選在樣品的 吸收峰位 ）來(lái)完成的 . 如波長(zhǎng)有誤差， 則由于峰兩旁陡坡處吸光度值隨波長(zhǎng) 的變化極為迅速，會(huì)造成明顯的吸光度誤差 . 如在定性分析時(shí)單純依靠樣 品的吸收峰來(lái)確定波長(zhǎng)，可能會(huì)造成錯(cuò)誤的判斷 . 在有機(jī)物質(zhì)的結(jié)構(gòu)分析 中，需要研究吸收峰波長(zhǎng)位置與物質(zhì)結(jié)構(gòu)的關(guān)系 . 如儀器的波長(zhǎng)誤差較大， 顯然會(huì)影響結(jié)構(gòu)分析的正確性 . 波長(zhǎng)準(zhǔn)確度對(duì)于窄帶分析是非常重要的， 但對(duì)于寬

9、吸收帶則影響不大 . 常用的檢查方法如下：21.用氘燈（或氫燈）的輝線檢查氘燈（ 或氫燈） 為紫外 -可見(jiàn)分光光度計(jì)必備的光源，因此用它來(lái)標(biāo)定波長(zhǎng) 最為方便 . 氘燈雖然在紫外區(qū)發(fā)射連續(xù)光諧，但在可見(jiàn)區(qū)有一條輝線，656.1 nm（氫燈有兩條：656.3nm和 486.1 nm）.待儀器和氘燈穩(wěn)定后， 選擇合適的測(cè)定條件： 單光束、 縱坐標(biāo)用能量 表示、狹縫盡可能小、響應(yīng)盡可能快、掃描速度慢、圖紙速度快 . 在上述 波長(zhǎng)附近掃描， 或按說(shuō)明書(shū)規(guī)定的波長(zhǎng)旋轉(zhuǎn)方向慢慢旋轉(zhuǎn)波長(zhǎng)鈕， 讀出結(jié) 果顯示最大能量的波長(zhǎng) . 如果超出允許波長(zhǎng)誤差，就需進(jìn)行校正 .2.2 用汞燈的輝線檢查 上述用氘燈檢查波長(zhǎng)只

10、能在少數(shù)波長(zhǎng)點(diǎn)進(jìn)行， 但對(duì)儀器作精密的波長(zhǎng)校正， 應(yīng)在整個(gè)波長(zhǎng)范圍的不同區(qū)域進(jìn)行 . 在紫外 -可見(jiàn)區(qū)，理想的波長(zhǎng)校正基準(zhǔn) 工具是低壓汞燈 .低壓汞燈發(fā)射不連續(xù)光諧 （線光諧 ）. 在紫外 -可見(jiàn)區(qū)有很多輝線可供 儀器波長(zhǎng)校正 . 方法與用氘燈檢查相同 .作為紫外 -可見(jiàn)分光光度計(jì)任選附件的汞筆燈是進(jìn)行波長(zhǎng)準(zhǔn)確度檢查 的最合適的工具 . 汞筆燈體積小，攜帶方便，便于在分光光度計(jì)中安放 . 2 3 用標(biāo)準(zhǔn)玻璃濾光片檢查對(duì)于低檔分光光度計(jì)（譜帶半寬度在10nm左右）只需用標(biāo)準(zhǔn)玻璃濾光 片來(lái)檢查.如釹濾光片，它的最大吸收峰在585nm.只要把濾光片放在樣品 室中，按操作程序掃描吸收光譜即可 .如果用

11、氧化鈥濾光片來(lái)檢查，則效果會(huì)更好 . 氧化鈥濾光片最大吸收 波長(zhǎng) 241.5nm、360.8nm、536.4nm.2.4 用樣品溶液的吸收光譜檢查- 些樣品的吸收光諧，如氯化鈥溶液 （最大吸收波長(zhǎng)為 241.1nm、 333.4nm、361.5nm）、硫酸鉆、硫酸銅、鉻酸鉀、重鉻酸鉀溶液都可用作 波長(zhǎng)校正的參比 . 但用樣品溶液校正不及用光源的譜線校正精確 .儀器引起波長(zhǎng)誤差的原因大致如下： 工作環(huán)境溫度變化太大、 單色器 受震后引起色散元件移位、 波長(zhǎng)掃描系統(tǒng)機(jī)械零件磨損、 儀器積塵太多使 轉(zhuǎn)動(dòng)受阻、光譜記錄紙受潮伸縮變形等 .3. 波長(zhǎng)重復(fù)性波長(zhǎng)重復(fù)性是定性分析的重要因素， 由于波長(zhǎng)位置不

12、能準(zhǔn)確重復(fù)， 就 不能準(zhǔn)確判定吸收峰的位置，甚至引起判斷錯(cuò)誤 .用一個(gè)已知樣品吸收峰或燈的輝線作標(biāo)準(zhǔn)， 在相同條件下多次重復(fù)讀 取峰位 . 計(jì)算每次觀察的波長(zhǎng)對(duì)平均值的偏差，這些偏差的平均值就是此 分光光度計(jì)的波長(zhǎng)重復(fù)性 .引起波長(zhǎng)重復(fù)性下降的原因與引起波長(zhǎng)誤差的原因相似， 當(dāng)然電子系 統(tǒng)工作不穩(wěn)定也是原因之 - 。4. 譜帶半寬度譜帶半寬度又稱有效帶寬， 這里是指離開(kāi)單色器的出射狹縫的輻射光 譜的峰高的一半處的譜帶寬度 . 光源輝線或銳的吸收光譜都可用于分光光 度計(jì)譜帶半寬度的檢查 .譜帶半寬度這個(gè)性能指標(biāo)直接影響樣品測(cè)量的準(zhǔn)確度.使用2nm譜帶 半寬度的檢測(cè)效果顯然要比20nm好得多.如使

13、用微量池，必須使用譜帶半寬 度小的分光光度計(jì)，否則從出射狹縫來(lái)的光斑會(huì)超過(guò)樣品池的寬度，而給測(cè) 定帶來(lái)誤差 .分光光度計(jì)譜帶半寬度不符合性能指標(biāo)常常是由于單色器中狹縫系統(tǒng) 或狹縫伺服系統(tǒng)的故障，應(yīng)請(qǐng)專業(yè)人員協(xié)助修理。5. 雜散光 雜散光是指由檢測(cè)器接收到的任何由儀器單色器分離的光譜范圍以外 的輻射.雜散光可以分成兩種形式， 一種是雜散光波長(zhǎng)與測(cè)定波長(zhǎng)相同 . 它是由于 測(cè)定波長(zhǎng)因種種原因偏離正常光路， 在不通過(guò)樣品的情況下， 直接射到檢測(cè) 器上.引起這種雜散光的原因是由于光學(xué)、 機(jī)械零件 （包括吸收池或樣品本身 ） 的反射和散射所引起的 . 這種雜散光可以通過(guò)一個(gè)不透明的樣品來(lái)檢查 . 當(dāng) 發(fā)

14、現(xiàn)放在樣品池中的不透明樣品的透光度不為零時(shí)， 說(shuō)明儀器中有上述雜散 光存在. 但必須注意不要與光度刻尺的零位誤差混淆 .第二種雜散光是指測(cè)定波長(zhǎng)以外的偏離正常光路到達(dá)檢測(cè)器的光線， 通 常由光學(xué)系統(tǒng)中的缺陷所引起， 如不必要的反射面、 光束孔徑不匹配、 灰塵 的散射、光學(xué)元件表面被擦傷、 不均勻色散等都會(huì)降低光線的單色性， 使雜 散光增加. 儀器光學(xué)系統(tǒng)設(shè)計(jì)不良、零件加工不良、位置錯(cuò)移等也是造成雜 散光的原因 . 通常指的是第二種雜散光 .雜散光的影響使測(cè)量結(jié)果偏離比爾定律 . 當(dāng)雜散光被樣品吸收時(shí)，偏離 是正的，即觀察值大于真實(shí)值 . 當(dāng)雜散光不被吸收時(shí)，偏離是負(fù)的、觀察值 小于真實(shí)值 .

15、雜散光對(duì)吸光度的影響是在吸光度愈大時(shí)愈明顯 . 如 1的雜 散光強(qiáng)度可以使吸光度從1.000降到0.9629,但可使吸光度從3降到1.963.由于雜散光強(qiáng)度在邊緣波段比較大，因此在波長(zhǎng)小于220nm進(jìn)行光譜掃描時(shí),必須小心有無(wú)“假吸收峰 出現(xiàn) . 原來(lái)樣品隨波長(zhǎng)變短而吸收增大, 可是由于雜散光在短波時(shí)急劇增大，因而使原來(lái)逐漸增大的吸光度反而變 小，就會(huì)出現(xiàn)不應(yīng)有的“假吸收峰 .當(dāng)被測(cè)定的波長(zhǎng)的能量降低時(shí)， 雜散光比例就相應(yīng)增加 . 對(duì)儀器輸出的 邊緣波長(zhǎng)來(lái)說(shuō)，單色器的透光度、光源強(qiáng)度和檢測(cè)器的靈敏度都是比較低的， 這時(shí)雜散光影響就更為明顯 . 所以在紫外 - 可見(jiàn)分光光度計(jì)中應(yīng)該先檢查 200

16、-220nm 340nm處的雜散光.簡(jiǎn)便的雜散光測(cè)試方法是測(cè)定在規(guī)定波長(zhǎng)下幾乎完全不透明的溶液或 濾光片的透光度 . 選擇一種材料，它對(duì)于邊緣波長(zhǎng)的光能是完全吸收的，而 對(duì)中間波長(zhǎng)的透光度卻相當(dāng)高 . 測(cè)定這種材料在邊緣波長(zhǎng)的透光度，直接就 反映了雜散光的強(qiáng)度 . 這種材料稱為長(zhǎng)、短波截止材料 . 截止材料的截止性能 應(yīng)盡可能尖銳，溶液截止的尖銳程度比固體好 .在測(cè)定雜散光時(shí)，注意不要把試樣室的漏光與儀器的雜散光相混淆 .由 于漏光而引起的雜光將會(huì)隨著狹縫寬度的增加而迅速下降 . 而儀器本身的雜 散光并不會(huì)因?yàn)楠M縫的開(kāi)閉而產(chǎn)生明顯的變化 .6. 分辨率分辨率是指儀器對(duì)于緊密相鄰的峰可分辨的最小

17、波長(zhǎng)間隔， 是衡量分光 光度計(jì)性能的重要指標(biāo)之一 . 單色器輸出的單色光的光譜純度、強(qiáng)度及檢測(cè) 器的光譜靈敏度等是影響儀器分辨率的主要因素 .分辨率的實(shí)際測(cè)試方法有許多種， 這些方法的原理都是觀察可分辨的最 小波長(zhǎng)間隔，在不同波長(zhǎng)范圍使用的材料及方法皆不同 . 造成分辨率下降的 原因可能有如下 -些。測(cè)定條件選擇不當(dāng) （狹縫寬度太寬、 記錄速度太快、 響 應(yīng)速度太慢等 ）、光學(xué)系統(tǒng)失調(diào) （ 光源、反射鏡、檢測(cè)器移位 ） 、電子系統(tǒng)故障等等. 發(fā)現(xiàn)儀器分辨率下降應(yīng)仔細(xì)檢查， 進(jìn)行調(diào)整 . 如調(diào)整單色器， 一定要 請(qǐng)專業(yè)人員，千萬(wàn)不可隨意亂動(dòng) .7. 光度準(zhǔn)確度光度準(zhǔn)確度是指儀器在吸收峰值上讀出的

18、透光度 (或吸光度 )與已知真 實(shí)透光度之間的偏差 . 該偏差越小，說(shuō)明光度準(zhǔn)確度越好 .要測(cè)得正確可靠的數(shù)據(jù)取決于以下幾方面 (1) 樣品來(lái)源， (2) 制樣技術(shù)， (3) 儀器的性能和操作條件的選擇， (4) 吸收池的質(zhì)量 . 由此可見(jiàn)，光度誤差 是一個(gè)綜合性的誤差 . 決定儀器讀數(shù)準(zhǔn)確性的因素主要有如下幾個(gè)方面： (1) 顯示系統(tǒng)的性能， (2) 放大器的穩(wěn)定性和線性， (3) 檢測(cè)器的線性及噪聲 .檢定光度準(zhǔn)確性，必須有一定的標(biāo)準(zhǔn)樣品，現(xiàn)已有許多測(cè)試方法和參比 標(biāo)準(zhǔn)供參比，一類是標(biāo)準(zhǔn)溶液法，另 - 類是濾光片法 .7.1 標(biāo)準(zhǔn)溶液法(1) 硫酸銅溶液 溶液制備：硫酸銅(CuSQ 514

19、0 含量 99.7 %) 20.000g 硫酸(比重 1.835)10.0ml用蒸餾水稀釋到1000m1測(cè)量溫度25C吸收池光徑 10.00mm650、700、750nm時(shí)的吸光度分別為 0.224、0.527、0.817A(2) 硫酸鈷銨溶液 溶液制備：硫酸鉆銨(CqSO (NH4 ) 2SQ.6 H 20)(鉆(加鎳)的含量為100%,鎳和鉆的 比為 l：200)14.481g硫酸(比重 1.835)10.0ml用蒸餾水稀釋到1000ml測(cè)量溫度吸收池光徑25C10.00mm510nm 處有最大吸收,吸光度為 0.1742A(3) 鉻酸鉀溶液 溶液制備：氫氧化鉀溶液：3.3gKQH(85%

20、 KQH溶解后，用蒸餾水稀釋到1000ml Q.0400g/1鉻酸鉀(K2CP4)溶在0.05mol /1氫氧化鉀溶液中 275nm 吸光度為0.7620, 370nm吸光度為0.9914 ,7.2 濾光片法用標(biāo)準(zhǔn)濾光片來(lái)檢查光度標(biāo)尺的正確性,頗為方便 . 濾光片又可分為有色 玻璃和中性玻璃 (又稱灰色玻璃 )兩種,中性濾光片由于在不同波長(zhǎng)處的吸光度 相對(duì)恒定,因而對(duì)儀器的波長(zhǎng)設(shè)定、狹縫寬度、雜散光等要求不嚴(yán),比有色玻 璃優(yōu)越,且有較好的重復(fù)性 . 使用濾光片作標(biāo)準(zhǔn)時(shí),要嚴(yán)格清潔濾光片,避免 手指印、灰塵、硬物擦碰 . 隨著玻璃表面空氣接觸或清洗時(shí)摩擦等影響,透光 度會(huì)逐漸發(fā)生變化 . 因此,

21、在精確的標(biāo)定工作中,還必須對(duì)這些標(biāo)準(zhǔn)濾光片的 透光度作經(jīng)常性的光度標(biāo)定 (通常為半年 -次).造成儀器光度準(zhǔn)確度下降的主要原因往往是電子系統(tǒng)由于光源供電電源 不穩(wěn)定,引起光源發(fā)光特性的變化； 光檢測(cè)器工作電壓波動(dòng), 使光電信號(hào)變化,放大器工作點(diǎn)漂移或信噪比下降等因素 .8. 光度線性優(yōu)質(zhì)的光度線性是用這個(gè)分光光度計(jì)測(cè)量時(shí)， 對(duì)遵守比爾定律的溶液能給出 一個(gè)吸光度對(duì)濃度（A對(duì)c）的線性曲線.這個(gè)參數(shù)對(duì)定量測(cè)定是非常重要的檢查 光度線性可用溶液稀釋法、吸收池光徑法、中性濾光片疊加法 .8.1 溶液稀釋法重鉻酸鉀的吸收峰在350nm和257nm稱重鉻酸鉀0.200g，用0.005mol /1 硫酸溶

22、解， 在 1000ml 容量瓶中稀釋至刻度 . 這個(gè)溶液的讀數(shù)大約為 3.（ 重鉻酸鉀 的線性范圍約為 0-3A）. 用此溶液作為母液，然后進(jìn)一步稀釋 . 樣品配制后，立即 讀數(shù)，因?yàn)橹劂t酸鉀遇光容易光解，所以最好使用棕色容量瓶 8.2 吸收池光徑法使用不同光徑的吸收池測(cè)定同一濃度的溶液來(lái)檢查光度線性， 可以避免稀釋 時(shí)容量誤差 . 但吸收池的光徑必須事先用長(zhǎng)度計(jì)量方法精確測(cè)定8.3 中性濾光片疊加法現(xiàn)在有很多生產(chǎn)廠用這種方法檢查光度線性 . 測(cè)試方法是將三塊中性濾光片 分別疊加后，比較測(cè)定值與計(jì)算值之差，具體方法如下 .先測(cè)出單片濾光片的吸光度 A1、A2、A3. 再分別把濾光片疊加起來(lái)，

23、測(cè)定疊加 后的吸光度（Ai+A）、（Ai+ A3）、等.當(dāng)A+A=（Ai+A）、A+A=（Ai+A）時(shí)，說(shuō)明光度系統(tǒng)在這個(gè)測(cè)量點(diǎn)上是線性的.當(dāng)a+Am（Ai+A）時(shí),則光度系統(tǒng)在這個(gè)測(cè)量點(diǎn)上是非線性的.線性偏差&=A1+A2-（A 1+A2）用這種方法找出各個(gè)位置的線性偏差 ,通過(guò)&對(duì)測(cè)定結(jié)果進(jìn)行修正：為了避免濾光片多次反射的影響， 必須把濾光片傾斜放置， 傾斜角度要足夠 大，-般為土 100,以保證其反射光不進(jìn)入檢測(cè)器.除了上述三種方法外， 還可采用光疊加法和旋轉(zhuǎn)扇形板法等， 影響光度線性 的原因與光度準(zhǔn)確性下降的原因是相似的。9. 光度重復(fù)性光度重復(fù)性是在相同的儀器上， 相同條件下， 對(duì)同

24、一樣品進(jìn)行多次重復(fù)測(cè)定 吸光度（或透光度）. 計(jì)算每次讀數(shù)對(duì)平均值的偏差和這些偏差的平均值 .影響光度重復(fù)性的原因同樣與影響光度準(zhǔn)確度和線性的原因相似 .在樣品吸 收增加時(shí)，由于比較低的信號(hào)水平時(shí)，儀器噪音增加，光度重復(fù)性可能不佳 .10. 噪音噪音（100 %線噪音和0%線噪音）是信號(hào)隨時(shí)間而無(wú)規(guī)則的變化（由外線電 壓突然變化引起的記錄筆或表頭的突然變化所形成的噪音是無(wú)常的 ） 噪音測(cè)量的方法是在儀器預(yù)熱穩(wěn)定后，在一定波長(zhǎng)和一定縫寬下，掃描 100%線和 0 A 線數(shù)分鐘，并量取峰 -峰之間的值作為絕對(duì)噪音水平 . 但在實(shí)際應(yīng) 用中，常用信噪比來(lái)描述儀器的性能 . 例如：在100%時(shí)如噪音是

25、 1%，則信噪比 是 100:1. 如果電子系統(tǒng)質(zhì)量良好， 噪音主要取決于檢測(cè)器 . 但如果電子系統(tǒng)設(shè)計(jì) 不良、元件質(zhì)量低劣、儀器接地不良、光源不穩(wěn)、工作環(huán)境潮濕、外界電磁干擾 嚴(yán)重等，也會(huì)使噪音增大，應(yīng)設(shè)法排除 .由于噪音對(duì)光度準(zhǔn)確度的影響比較大， -般分光光度計(jì)都設(shè)有響應(yīng)時(shí)間選擇 鈕，可以根據(jù)具體測(cè)定情況選用適當(dāng)?shù)臏y(cè)定系統(tǒng)響應(yīng)時(shí)間 . 增加響應(yīng)時(shí)間可以改 善信噪比 .11. 基線穩(wěn)定性基線穩(wěn)定性是指雙光束分光光度計(jì)在掃描 100%線或0A線時(shí)（樣品室中不放 任何東西 ），讀數(shù)偏離的程度 . 如果基線穩(wěn)定性不好，當(dāng)然會(huì)影響光度準(zhǔn)確度 . 引 起基線不穩(wěn)定的原因與引起噪音的原因相似 .12 基

26、線平直性基線平直性是指雙光束分光光度計(jì)掃描基線（100 %線或oA線，空氣對(duì)空氣） 時(shí)，基線傾斜彎曲的程度，它是儀器的重要性能指標(biāo)之一 .基線平直性不良通常說(shuō)明光路不平衡、 光學(xué)元件位置不準(zhǔn)確或反射鏡質(zhì)量下 降，電子和機(jī)械系統(tǒng)不良也會(huì)影響基線的平直性 . 基線的平直性還可用來(lái)考察噪 音和光源或色散元件切換時(shí)的譜線銜接情況等 . 基線平直性不良會(huì)對(duì)各個(gè)吸收峰 之間的比值產(chǎn)生影響，給物質(zhì)結(jié)構(gòu)的定性分析帶來(lái)困難 . 過(guò)去用多點(diǎn)電位器來(lái)補(bǔ) 償光束不平衡， 使基線平直 . 現(xiàn)在則用微處理機(jī)來(lái)補(bǔ)償， 效果大大改善 .采用單光 束分光光度計(jì)加計(jì)算機(jī)的方法來(lái)掃描基線就不存在光束不平衡的問(wèn)題了 .雙光束分光光度

27、計(jì)使用日久或搬動(dòng)、受震后，其基線會(huì)彎曲 . 引起基線不平 直的原因主要是光學(xué)系統(tǒng)失調(diào)，兩個(gè)光束不能很好平衡 . 有時(shí)電子系統(tǒng)工作失調(diào) 也會(huì)使基線彎曲或傾斜 .基線不平直應(yīng)首先檢查光源部分是否移位松動(dòng) . 若肯定光源部分無(wú)故障后， 可用白紙片在入射狹縫前檢查光斑 . 如有散焦、偏位、切割、不對(duì)稱等情況，應(yīng) 請(qǐng)專業(yè)人員檢查和調(diào)整光學(xué)系統(tǒng) .注意事項(xiàng)1. 空白溶液與供試品溶液必須澄清， 不得有渾濁。如有渾濁， 應(yīng)預(yù)先過(guò)濾，并棄去初濾 液。2. 測(cè)定時(shí)， 除另有規(guī)定外， 應(yīng)以配制供試品溶液的同瓶溶劑為空白對(duì)照， 采用 1cm 的石 英吸收池。3. 在規(guī)定的吸收峰波長(zhǎng) 2nm 以內(nèi)測(cè)試幾個(gè)點(diǎn)的吸收度，

28、以核對(duì)供試品的吸收峰波長(zhǎng)位置是否正確，除另有規(guī)定外，吸收峰波長(zhǎng)應(yīng)在該品種項(xiàng)下規(guī)定的波長(zhǎng)土2nm以內(nèi)；否則應(yīng)考慮該試樣的真?zhèn)?、純度以及儀器波長(zhǎng)的準(zhǔn)確度，并以吸收度最大的波長(zhǎng)作為測(cè)定波長(zhǎng)。4. 一般供試品溶液的吸收度讀數(shù)，以在 0.30.7之間的誤差較小。5. 吸收池應(yīng)選擇配對(duì)， 否則要引入測(cè)定誤差。 在規(guī)定波長(zhǎng)下兩個(gè)吸收池的透光率相差小 于 0.5 %的吸收池作配對(duì)，在必要的情況時(shí)，須在最終測(cè)量扣除吸收池間的誤差修正值。6. 由于吸收池和溶劑本身可能有空白吸收，因此測(cè)定供試品的吸收度后應(yīng)減去空白讀 數(shù)，再計(jì)算含量。7. 儀器的接地必須良好，一切裸露的零件對(duì)地電位不得超過(guò) 24伏（測(cè)電筆的氖管不得

29、 發(fā)亮）。8. 在使用過(guò)程中， 如需開(kāi)啟試樣室蓋時(shí)或暫時(shí)停止測(cè)試時(shí)， 必須及時(shí)推入光門鈕桿 （使 光電管前光門關(guān)閉） ，保護(hù)光電管，以防止光電管受強(qiáng)光或長(zhǎng)時(shí)間照射而損壞。9. 在測(cè)定時(shí)或改測(cè)其它檢品時(shí)，應(yīng)用待測(cè)溶液沖洗吸收池 34次，用干凈綢布或擦鏡紙擦凈吸收池的透光面至不留斑痕（切忌把透光面磨損）10. 取吸收池時(shí)，應(yīng)拿毛玻璃兩面，切忌用手拿捏透光面，以免粘上油污。使用完后及 時(shí)用測(cè)定溶劑沖凈， 再用純化水沖凈， 用干凈綢布或擦鏡紙擦干， 晾干后， 放入吸收池盒中， 防塵保存。11. 若吸收池內(nèi)外壁沾污，兩池差較大的處理。（ 1）可用綢布纏在扁竹條外或用脫脂棉纏在細(xì)玻璃棒上蘸上乙醇，輕輕摩擦

30、，再用純 化水沖凈。（2）如上述方法處理不好，必要時(shí)可用重鉻酸鉀-硫酸洗液泡洗12分鐘，用自來(lái)水沖凈，再用純化水沖凈。（ 3）不得用毛刷刷洗或硬物拭擦，以防止表面光潔度受損影響正常使用。12. 請(qǐng)務(wù)必注意經(jīng)常保持硅膠的干燥，目的是保護(hù)光學(xué)元件和光電放大器系統(tǒng)不致受潮 損壞而影響儀器的正常工作， 如發(fā)現(xiàn)有的硅膠由藍(lán)色變?yōu)榉奂t色， 應(yīng)立即更換。 該儀器干燥 劑筒有兩個(gè)：一個(gè)是裝在放大器暗盒上，另一個(gè)裝在單色光器暗盒上。13. 在更換硅膠干燥劑時(shí)，應(yīng)關(guān)閉切斷電源。14. 在停止工作期間，主機(jī)試樣室內(nèi)應(yīng)放入袋裝或筒裝硅膠干燥劑。用防塵罩罩住整個(gè) 儀器，并在防塵罩內(nèi)放數(shù)袋防潮硅膠。15. 儀器在操作中，

31、狹縫的寬度應(yīng)從小逐漸開(kāi)大。若狹縫過(guò)大，由于進(jìn)入光電管的光能 量強(qiáng)度過(guò)大，將會(huì)使放大器輸出信號(hào)達(dá)到飽和，以至數(shù)字顯示出溢出（即數(shù)字閃爍或示 1 不變）。這不是儀器有故障。16. 將波長(zhǎng)旋轉(zhuǎn)放在 625nm鋏縫關(guān)閉在0.02nm附近，選擇按鍵恢復(fù)在停止工作部位 （即 三個(gè)鍵均彈出） 。17. 搬動(dòng)儀器時(shí)應(yīng)搬在主體端，不要搬在試樣室和光電管盒端以及光源燈室部位，以防 止儀器狹縫或光路部件受力而發(fā)生變形。 并在搬動(dòng)或運(yùn)輸時(shí)， 應(yīng)將可動(dòng)部分固定， 如各旋鈕 可用膠布貼住， 狹縫位置開(kāi)大些，然后固定， 不要關(guān)小狹縫， 以免運(yùn)輸時(shí)振動(dòng)使狹縫刀口受 損壞。18. 儀器的光柵、反射鏡絕對(duì)不能擦拭，否則將損壞儀器

32、光學(xué)表面，增加雜散光。19. 儀器經(jīng)過(guò)搬動(dòng)請(qǐng)及時(shí)檢查并糾正波長(zhǎng)精度，為保證測(cè)定的準(zhǔn)確性請(qǐng)經(jīng)常校準(zhǔn)波長(zhǎng)精 度。如有異常，應(yīng)立即報(bào)告質(zhì)量保證部，但不得擅自調(diào)整，并及時(shí)做好記錄。附紫外、可見(jiàn)、近紅外分光光度計(jì)檢定規(guī)程本規(guī)程適用于新制造、使用中和修理后的、波長(zhǎng)范圍為1902500nm或以此為主要光譜區(qū) ） 的紫外、可見(jiàn)、近紅外分光光度計(jì)的檢定。一概述紫外、可見(jiàn)、近紅外分光光度計(jì) （以下簡(jiǎn)稱儀器 ），是依據(jù)物質(zhì)在紫外、可 見(jiàn)、近紅外區(qū)吸收光譜的特性及朗伯 - 比爾定律的原理對(duì)物質(zhì)進(jìn)行定性鑒別和定 量分析的儀器。朗伯-比爾(LambertBeer)定律的數(shù)學(xué)表達(dá)式為疋：.：認(rèn)：.=一：二(1) A 物質(zhì)的

33、吸光度； 0入射輻射(光)通量(W)；-透射輻射(光)通最(W)；物質(zhì)的透射比；物質(zhì)的摩爾吸收系數(shù)(L/cm.mol)； 光路長(zhǎng)度(cm或mm)物質(zhì)的摩爾濃度(mol / L)；式中:0 tr T - bC本類儀器主要由光源、單色器、樣品室、檢測(cè)器和顯示系統(tǒng)等5部分組成.二檢定項(xiàng)目和技術(shù)要求l 外觀1.1儀器應(yīng)具有銘牌，并注明儀器名稱、型號(hào)、編號(hào)、制造廠名及電源電壓1.2 儀器應(yīng)具有使用說(shuō)明書(shū).新制造的儀器應(yīng)具有出廠檢驗(yàn)合格證；已檢定過(guò)的儀器應(yīng)附有上一次的檢定證書(shū).1.3儀器應(yīng)能平穩(wěn)地置于工作臺(tái)上，各緊固件應(yīng)無(wú)松動(dòng)，接插件應(yīng)緊密配合, 接觸良好。l.4儀器所有刻字、刻線應(yīng)均勻、清晰，數(shù)字顯示不

34、得有缺點(diǎn)、缺畫(huà)現(xiàn)象。 儀器上各開(kāi)關(guān)、調(diào)節(jié)器和按鍵應(yīng)能正常工作；熒光屏圖象應(yīng)清晰、亮度可調(diào)。1.5樣品室應(yīng)無(wú)漏光現(xiàn)象1.6儀器啟動(dòng)后應(yīng)無(wú)異常的雜音，預(yù)熱 30 min后應(yīng)能正常工作。2波長(zhǎng)準(zhǔn)確度與波長(zhǎng)重復(fù)性 儀器的波長(zhǎng)準(zhǔn)確度與波長(zhǎng)重復(fù)性應(yīng)符合表l的規(guī)定.表 1(nm)儀器級(jí)別波長(zhǎng)范圍準(zhǔn)確度重復(fù)性A紫外-可見(jiàn) O.30.2近紅外 1.51.OB紫外-可見(jiàn) O.5O.3近紅外 2.O1.OC棱鏡式光柵式棱鏡式:光柵式350 O.7 0.50.3O.3600 2.OP 0.51.O0.3700 4.8 O.52.5O.3IOOO 8.O 2.O4.01.O2500IO.0 2.O5.O1.O3分辨率或

35、最小光譜帶寬3.1分辨率應(yīng)符合表2的規(guī)定.表2儀器級(jí)別T ( % )A20B15C棱鏡式光柵式12103.2 最小光譜帶寬；儀器的最小實(shí)際帶寬不應(yīng)大于實(shí)際設(shè)置帶寬的1.2倍4雜散輻射率儀器雜散輻射與主輻射之比例，即雜散輻射率應(yīng)符合表3的規(guī)定。表3儀器級(jí)別波長(zhǎng)(nm)雜散輻射率k( %)A2200.0013400.0016200.011 6900.1B2200.013400.016200.116900.5C2200.63400.65透射比準(zhǔn)確度與透射比重復(fù)性儀器透射比準(zhǔn)確度與透射比重復(fù)性應(yīng)符合表4的規(guī)定.儀器級(jí)別準(zhǔn)確重復(fù)性A士 0.50.2B 0.60.3C 0.80.46基線平直度儀器的基線平

36、直度應(yīng)符合表5的規(guī)定.表5儀器級(jí)別波長(zhǎng)范圍(nm)吸光度A紫外一可見(jiàn) 士 0.002近紅外 0.003B紫外一可見(jiàn) 0.003近紅外 0.005C紫外可見(jiàn) 0.005近紅外 0.0087漂移儀器的漂移量應(yīng)符合表6的規(guī)定.表6儀器級(jí)別測(cè)定波長(zhǎng)(nm)測(cè)定時(shí)間(min)漂移量(A)A500300.001B5003OO.002C50030O.0058噪聲儀器噪聲應(yīng)符合表7的規(guī)定.9絕緣電阻絕緣電阻不低手20MQ .表7儀器級(jí)別測(cè)定波長(zhǎng)（nm）100 %線（A）0 %線（% t ）A230（或340）O.02/5000.001O.01l0000.001/B230（或 340）O.003/ 5000.0

37、020.031000O.O02/C230（或 340）0.006 丁/500O.005O.081OOOO.005/二檢定條件10 電源及環(huán)境條件10.1 電源：電壓變化不大于220土 22V;頻率變化不踅過(guò)50 1H z.10.2 室溫 15 30C.10.3 環(huán)境相對(duì)濕度小于85%.10.4 儀器不受陽(yáng)光直射.10.5 室內(nèi)應(yīng)無(wú)強(qiáng)氣流及腐蝕性氣體.10.6 周圍不應(yīng)有影響檢定的強(qiáng)烈振動(dòng)和強(qiáng)電場(chǎng)、強(qiáng)磁場(chǎng)的干擾11 主要檢定設(shè)備及材料11.1 天平（稱量200g,分度值O.1mg）11.2 兆歐表（500V）11.3 擋光板（12 X 12X4 5mm勺不透光矩形塊）11.4 衰減片（1/100

38、 , 10/100）.12 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（國(guó)家批準(zhǔn)頒布相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)后，應(yīng)立即采用）及化學(xué)試劑12.1 低壓汞燈；氧化欽玻璃（厚度22.5 mm）苯（二級(jí)）;1, 2, 4 一三氯 苯（三級(jí)）。12.2 透射比的標(biāo)稱值為10%、20%、30%左右的中性濾光片（標(biāo)準(zhǔn)值的不確 定度優(yōu)于0.2 % t ）。12.3 質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.06000/1000的重鉻酸鉀紫外分光光度標(biāo)準(zhǔn)溶液（標(biāo)準(zhǔn)值 的不確定度優(yōu)于0.3% t ）;紫外可見(jiàn)分光光度標(biāo)準(zhǔn)溶液。12.4 標(biāo)準(zhǔn)石英吸收池（標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)編號(hào)GBW 13304）12.5 碘化鈉及亞硝酸鈉（二級(jí)）;亞甲基藍(lán)及二溴甲烷（三級(jí)）.四檢定方法13外觀按第1條要求進(jìn)行，儀

39、器開(kāi)機(jī)預(yù)熱30 min后檢定以下各項(xiàng)。14 波長(zhǎng)準(zhǔn)確度與重復(fù)性14.1 用低壓汞燈檢定.關(guān)閉儀器光源，將汞燈放置于入射狹縫處.采用波長(zhǎng) 掃描（或重復(fù)掃描）方式、掃描速度慢（如15 nm/min）、響應(yīng)快、最小帶寬（如0.1 nm）、置程0100%（或參照儀器說(shuō)明書(shū)設(shè)定條件），在2002 500 nm范圍內(nèi)單 方向重復(fù)掃描3次，由儀器識(shí)別記錄各峰值（儀器無(wú)“峰檢測(cè)”功能，應(yīng)對(duì)指定 波長(zhǎng)進(jìn)行“單峰”掃描.）.分別測(cè)量出譜圖上紫外、可見(jiàn)、近紅外三個(gè)波段范圍 的各二條譜線波長(zhǎng)（棱鏡式儀器應(yīng)按表I要求進(jìn)行），與附錄I表1比較，按公式 （2）計(jì)算波長(zhǎng)準(zhǔn)確度厶入：入=X -入 r （2）式中：亍一一波長(zhǎng)測(cè)量

40、的平均值；入r波長(zhǎng)標(biāo)準(zhǔn)值.按公式（3）計(jì)算波長(zhǎng)重復(fù)性S x:= X max- X min （3）式中： X max X min三次測(cè)量波長(zhǎng)的最大值與最小值。14.2 若儀器不能放置低壓汞燈時(shí)，采用下述辦法分區(qū)檢定。14.2.1 紫外和可見(jiàn)區(qū)（1）用儀器固有的氘燈檢定.取單光束能量方式，測(cè)量條件接1.4.1款（或參照儀器說(shuō)明書(shū)設(shè)定條件）對(duì)486.02及656.10nm二單峰進(jìn)行單方向重復(fù)掃描三次， 測(cè)量出譜圖上的二條譜線波長(zhǎng)，與附錄1表2比較，并按公式（2）、（3）計(jì)算 x及S X o（2）采用氧化欽玻璃檢定.測(cè)量條件同14.1款，量程O(píng)2（A）.將氧化鈦玻璃 放置于樣品室內(nèi)，以空氣作參比，在

41、220660 nm范圍內(nèi)掃描，測(cè)量出譜圖上紫 外區(qū)二條譜線的波長(zhǎng)，并與附錄I表3比較，按公式、計(jì)算 x及S X。14.2.2 近紅外區(qū)采用1, 2, 4-三氯苯檢定.測(cè)量條件同14.1款，帶寬由儀器自動(dòng)調(diào)節(jié)，正 常掃描速度（如120 nm/min），量程O(píng)2（A），在1 5002 600nm范圍內(nèi)掃描， 測(cè)量出譜圖上二條譜線的波長(zhǎng)，并與附錄1表4比較，按公式（2）、（3）計(jì)算 x及S X15分辨率或最小光譜帶寬15.1 分辨率儀器取波長(zhǎng)掃描方式、測(cè)量條件為：掃描速度慢（如15nn/min）、響應(yīng)快（或 中）、量程O(píng)100%、最小帶寬。將2滴苯液滴入干燥的石英吸收池底部，加蓋。當(dāng)苯蒸氣充滿吸收池

42、空間后.放入樣品光速。在258.9 nm處調(diào)節(jié)透射比100%， 在255265nm范圍內(nèi)掃描。按附錄2圖I所示，計(jì)算以分辨深度D表示的分辨 率（% t ）.15.2 最小光譜帶寬當(dāng)按15.1款方法檢測(cè)儀器分辨率有困難對(duì)，采用本法.儀器取單光束能量方式.測(cè)量條件為：最小帶寬、掃描速度慢、響應(yīng)快、合 適的負(fù)高壓（或參照說(shuō)明書(shū)設(shè)定條件），在655657nm范圍內(nèi)掃描，然后在能量- 波長(zhǎng)圖上按附錄2圖2所示，測(cè)量出儀器固有氘燈特征譜線的半寬變， 此即為儀 器的最小光譜帶寬。16雜散輻射率16.1 取儀器帶寬2 nm在220 nm波長(zhǎng)處以空氣為參比，在樣品光束插入I %（或10%）的衰減片（若儀器均雜散

43、輻射率大于0.1 %時(shí)，不應(yīng)采用衰減片），測(cè) 量出衰減片的實(shí)際值t 1,再將衰減片移至參比光束，并用配對(duì)誤差小于土0.2 %t的10 mm石吸收池，分別裝入蒸餾水及含量為 10g/ L的碘化鈉水溶液，放入 參比及樣品光束，測(cè)量出透射比T 2，按公式（4）計(jì)算雜散輻射率T RT F= T 1 X T 2（4）16.2 在340nm 620nm 1690nm處用含量為 50 g / L的亞硝酸鈉水溶液，0.005 %亞甲基藍(lán)水溶液及二溴甲苯，按上述方法分別檢測(cè)各t 1、t 2,并接公式計(jì)算t R17 透射比準(zhǔn)確度與透射比重復(fù)性17.1 紫外區(qū)儀器帶寬取2nm,用I套標(biāo)準(zhǔn)石英吸收池分別盛裝空白溶液及

44、外分光光度標(biāo) 準(zhǔn)溶液，在235nm 257nm 313nm和350 nm四個(gè)波長(zhǎng)處連續(xù)三次測(cè)量其透射比， 與附錄3表1比較，并按公式（5）算透射比準(zhǔn)確度厶r r= t - t r （5）式中：t透射比測(cè)量的平均值t r透射比標(biāo)準(zhǔn)值按公式（6）計(jì)算透射比重復(fù)性S x:S X = t max- t min（6）式中：t max t min一一三次測(cè)量透射比的最大值與最小值.17.2 可見(jiàn)區(qū)儀器帶寬取2nm用1組透射比為I0、20、30%的光譜中性濾光片，分別在 波長(zhǎng)440nm 546nm和635 nm處以空氣為參比，連續(xù)三次測(cè)量透射比，與中性濾 光片的透射比標(biāo)準(zhǔn)值比較，并按公式（5）、（6）計(jì)算 r，與S r.當(dāng)儀器不能采用中性濾光片檢定時(shí)， 允許采用紫外、可見(jiàn)分光光度標(biāo)準(zhǔn)溶液 檢定儀器透射比.18 基線平直度將波長(zhǎng)置于起始波長(zhǎng)，取常規(guī)掃描速度、帶寬2nm量程土 O.Ol （A）（或最靈敏擋），參比和樣品光束皆為空白，進(jìn)行全波段或分段掃描，測(cè)量譜圖中各段 的起始點(diǎn)與最大偏移量之差，即為基線的平直度（允許在等源及檢測(cè)器切換處有 瞬間跳動(dòng).）O19 漂移儀器經(jīng)熱平衡2h后，將波