藥理毒理研究資料

1、申請分類：新藥申請 原收審號：CXL01885注冊分類：化學(xué)藥品第二類藥品名稱：利塞膦酸鈉（三）申報生產(chǎn)藥理毒理研究資料資料項目名稱：藥理毒理研究資料綜述 資料項目編號3-16研究機構(gòu)：北京怡豐康泰醫(yī)藥生物技術(shù)開發(fā)有限公司 昆明積大制藥有限公司生產(chǎn)單位：昆明積大制藥有限公司申請聯(lián)系人：劉春霞（昆明） 馮樸純（北京）申請聯(lián)系人電話5031 010-8447639113888649728（劉春霞）(馮樸純) 聯(lián)系地址：昆明高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)區(qū)北區(qū)第M1-10-7號地塊 郵編 650106北京東城區(qū)東直門外大街48號東方銀座寫字樓9層D-E 郵編 10

2、0027藥品注冊申請人名稱：昆明積大制藥有限公司 北京怡豐康泰醫(yī)藥生物技術(shù)開發(fā)有限公司16號資料目錄16.1品種簡介16.2藥效學(xué)16.3藥代動力學(xué)16.4藥理毒理學(xué)16.4.1一般藥理16.4.2急性毒性16.4.3 長期毒性試驗16.4.4特殊毒性試驗16.4.5致突試驗16.4.6生殖毒性試驗16. 藥理毒理研究資料綜述16.1品種簡介本品通用名為利塞膦酸鈉 (Risedronate sodium) ，屬于第三代雙膦酸鹽。長期的臨床研究表明，利塞膦酸鈉具有抑制破骨細胞形成的活性，從而抑制對骨的吸收作用，是一類有效的骨吸收抑制劑。它還能與骨羥磷灰石結(jié)合，抑制其生長和溶解，從而干擾破骨細胞對

3、骨的吸收作用。利塞膦酸鈉薄膜衣片1998年首次在美國上市，劑量30mg/片，用于治療變形性骨炎（Pagets病），商品名：Actonel。1999年FDA批準利塞膦酸鈉用于激素引起的骨質(zhì)疏松癥，用法：5mg/日，同年5mg的利塞膦酸鈉薄膜衣片在美國上市。2000年4月FDA批準利塞膦酸鈉用于防治絕經(jīng)后婦女的骨質(zhì)疏松癥，用法：5mg/日?，F(xiàn)利塞膦酸鈉5mg和30mg薄膜衣片已在美國、瑞典上市，分別用于防治（激素引起及絕經(jīng)后婦女）骨質(zhì)疏松癥和變形性骨炎。經(jīng)SFDA網(wǎng)查詢，截止到2005年7月，國內(nèi)有兩家獲得利塞膦酸鈉原料及片的新藥證書和生產(chǎn)批件。常州華生制藥有限公司于2004年3月獲得新藥證書和生

4、產(chǎn)批件，河南天方藥業(yè)股份有限公司于2005年5月獲得新藥證書和生產(chǎn)批件。國內(nèi)尚無利塞膦酸鈉原料及片進口。骨質(zhì)疏松癥在歐美及亞洲各國已成為危害老年人健康最為常見的疾病之一，全世界患者人數(shù)超過2億，已成為全球第7位的常見病和多發(fā)病，僅美國、西歐、日本就有7500萬人患有該病，每年治療及住院費用高達250億美元。我國也同樣表現(xiàn)出這一趨勢，老年人的絕對數(shù)量已占世界第一位，在我國的老年人口中，5060歲人群骨質(zhì)疏松癥發(fā)病率為21%，6070歲為58%，7080歲為100%。據(jù)初步估計，我國骨質(zhì)疏松癥患者約有1億人以上。由于本品系2002年12月1日前申報的品種，根據(jù)2003年4月4日國家藥品監(jiān)督管理局頒

5、發(fā)的臨床研究批件的內(nèi)容，利塞膦酸鈉注冊分類為化學(xué)藥品第二類新藥。因此本品類別仍為原新藥審批辦法規(guī)定的第二類新藥，此次申報生產(chǎn)資料按照藥品注冊管理辦法化學(xué)藥品注冊分類第3.1類的要求整理。我司申報利塞膦酸鈉片的規(guī)格為5mg/片。適應(yīng)癥為：治療女性絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松。預(yù)防女性絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松。治療因長期應(yīng)用皮質(zhì)激素治療引起的骨量減低或骨質(zhì)疏松。變形性骨炎（Pagets?。?。用法用量：預(yù)防和治療絕經(jīng)期后婦女的骨質(zhì)疏松和長期應(yīng)用激素引起的骨質(zhì)疏松：5mg/日，每日一片；變形性骨炎：30mg/日，請嚴格遵照醫(yī)囑。服用方法：晨起后用足夠的溫水（120ml）整片沖服，不要吮吸或咀嚼。因食物和飲料可影響利塞膦酸鈉的

6、吸收，晨起后服用，在早餐前30分鐘服用。其他時候請在進食2小時后服用，服用后30分鐘內(nèi)不能平躺。如食物中無足夠的鈣及維生素D，應(yīng)同時補充鈣及維生素D，但利塞膦酸鈉與鈣不可同時服用。16.2藥效學(xué)Risedronate在動物骨質(zhì)疏松模型中抑制骨組織的再吸收。大鼠皮下注射最低有效劑量為0.006-0.015mg/kg/d。在OVX（卵巢切除）大鼠模型中，Risedronate能完全的抑制OVX導(dǎo)致的骨質(zhì)丟失和骨小梁的破壞；能防止OVX導(dǎo)致的股骨頸強度的降低；Risedronate在用藥停止后仍能長時間能抑制OVX誘導(dǎo)的骨組織丟失。這可能是由于Risedronate在骨組織中沉積，其半衰期長達數(shù)年引

7、起的。在OVX大鼠模型中，如果在OVX之后立即給予Risedronate，或者已經(jīng)發(fā)生骨組織的丟失后再給予Risedronate，均可有效防止骨組織的丟失（或進一步加重）；Risedronate的效應(yīng)與總（累積）劑量相關(guān)。在正常大鼠中，Risedronate也能抑制骨組織的再吸收，并增加BMD。在OVX白鼬模型中（為期3個月的研究），即使OVX對上述參數(shù)沒有產(chǎn)生影響，Risedronate也能增加BMD，改善骨小梁結(jié)構(gòu)，并增加脊椎骨的強度。在OVX小種豬模型中（為期8個月的研究），OVX和Risedronate對小種豬的BMD和脊椎骨的強度都沒有影響。在幾項破骨細胞引起的骨質(zhì)再吸收和骨質(zhì)丟失模

8、型的試驗中，Risedronate對骨組織的再吸收及骨質(zhì)更新產(chǎn)生劑量依賴性的抑制作用。在腫瘤模型中，主要通過抗破骨細胞作用，Risedronate減輕腫瘤引起的高血鈣癥和骨質(zhì)溶解。在關(guān)節(jié)炎模型中，Risedronate對骨質(zhì)的增生和破壞也有一些有益的作用。試驗中無論每日連續(xù)給藥或間歇給予Risedronate均可觀察到該效應(yīng)；而且，在停止給藥后，效應(yīng)還可維持相當一段時間。在骨鹽沉積、自發(fā)性骨折發(fā)生率、機械性骨強度等方面，Risedronate都顯示出良好作用。16.3藥代動力學(xué) 利塞膦酸鈉結(jié)構(gòu)中無發(fā)色基團，亦無可衍生的基團，并且由于本品抗骨吸收作用強，使用劑量低，其藥代動力學(xué)研究較困難。文獻報

9、道比較有限。在一項隨機雙盲安慰劑對照試驗中，46名健康志愿者口服利塞膦酸鈉2.5、5或30mg每天，Cmax分別為0.41、0.94和5.1ng/ml，AUC分別為1.8、3.9和21ng/ml·h，尿排泄量分別為22、63和260µg，均呈劑量依賴性，且三種劑量的Tmax和腎清除率（CLr）無明顯差異。本品口服吸收較快，達峰時間約1小時，連續(xù)給藥57天后可達到穩(wěn)態(tài)血藥濃度?？诜o藥30mg的平均生物利用度約為0.63。在一項臨床試驗中觀察飲食對藥物吸收的影響發(fā)現(xiàn)：正餐后2h和早餐前0.5h給藥，利塞膦酸鈉吸收程度相似；而飯前1或4h給藥吸收程度明顯提高。與飯后2h給藥相比

10、，飯前0.5、1或4小時給藥的峰濃度分別大2.8、3.5和4.1倍。24小時內(nèi)人體吸收的藥物中約有一半經(jīng)尿排出，靜脈給藥28天后，85%的藥物經(jīng)尿排出。平均腎清除率為105ml/min，平均總清除率為122 ml/min，這主要由藥物骨吸收造成的差異。未吸收藥物以原形由糞便排出。本品吸收后初始半衰期約1.5小時，終末半衰期約480小時，這可能是由于利塞膦酸鈉從骨組織上解離引起。利塞膦酸鈉的藥代動力學(xué)在不同性別間無顯著差異，肝功能對藥物基本無影響。在老年人和年輕人中本品的生物利用度和代謝相似，無需調(diào)整劑量。但利塞膦酸鈉的腎清除率和腎功能的降低有明顯關(guān)系，隨著肌酐清除率的降低而穩(wěn)定減少。16.4藥

11、理毒理學(xué)16.4.1一般藥理：在下列試驗中，Risedronate對動物各系統(tǒng)均未產(chǎn)生影響：對小鼠神經(jīng)藥理研究，對小鼠自發(fā)性運動的影響，戊四唑誘導(dǎo)的小鼠驚厥試驗，醋酸誘導(dǎo)的小鼠扭體實驗，巴比妥誘導(dǎo)的睡眠時間試驗，雄性小鼠胃腸推進作用的試驗，對止血功能的影響，對大鼠肝功能、膽汁排泄和利尿作用的影響（30mg/kg以下無影響），角叉膠(carrageenan)誘導(dǎo)的大鼠肢爪水腫試驗，對大鼠體溫的影響，對幽門結(jié)扎大鼠胃酸分泌功能的影響，靜脈給藥時對麻醉狗的急性血流動力學(xué)研究，對孕大鼠及未孕大鼠離體子宮的影響，對豚鼠離體右心房的影響，對豚鼠離體回腸的自發(fā)性運動的影響和對乙酰膽堿、組胺、氯化鋇的拮抗作用

12、?？傊?，Risedronate除對骨骼外，對全身其它各系統(tǒng)基本無影響。16.4.2急性毒性：小鼠禁食后口服Risedronate原料藥的LD50為1574mg/kg，主要中毒反應(yīng)為活動減少，顫抖、攝食量及體重下降、體溫降低，最后死亡。死亡動物剖檢發(fā)現(xiàn)胃腸道嚴重脹氣，死亡時間在給藥后2小時-9天不等。文獻報道大鼠、小鼠和家兔可以耐受的最大單次口服劑量為2g/kg，按劑量/體表面積計，大鼠的最大耐受劑量是人預(yù)計使用量的666倍，小鼠則達到了333倍。更高的劑量會導(dǎo)致死亡。家兔3mg/kg、狗4mg/kg、大鼠/小鼠25mg/kg單次靜脈注射均能耐受。靜脈注射的耐受劑量約為口服劑量的1%，這表明口服

13、的生物利用度僅為1%左右。在死亡的狗、大鼠和家兔中，無論靜脈注射還是口服給藥均發(fā)現(xiàn)藥物對胃的影響，大鼠靜脈給藥2天的實驗中觀察到藥物引起的胃水腫。試驗發(fā)現(xiàn)靜脈注射Risedronate也能對動物產(chǎn)生胃部刺激作用，盡管藥物和胃粘臘無直接接觸（藥代實驗沒有發(fā)現(xiàn)藥物通過膽汁分泌）。16.4.3 長期毒性試驗：1.小于6個月重復(fù)給藥毒理研究： 用狗、小鼠和大鼠進行了14項Risedronate重復(fù)給藥實驗，所有的毒性實驗結(jié)果都表現(xiàn)出與劑量和給藥時間的相關(guān)性。 8mg/kg是狗口服給藥出現(xiàn)毒性反應(yīng)的最低劑量。最敏感地反映出毒性作用的指標是AST, ALT和SGOT。這個劑量同時引起了肝臟萎縮，腎壞死和一

14、些睪丸變性現(xiàn)象（如睪丸萎縮和精子生成停止）。大鼠的毒性劑量范圍很大。在一項13周的給藥實驗中，8mg/kg是該實驗的最大安全劑量，16mg/kg時出現(xiàn)了一些毒理學(xué)變化：血尿，睪丸萎縮和進食量下降；32mg/kg劑量時，出現(xiàn)AST, ALT上升，體重下降，進食量減少，胸腺重量減輕和腎小管壞死；當劑量達到64mg/kg時，中性粒細胞、WBC、BUN和甲狀腺/甲狀旁腺的重量增加，前列腺、精囊和睪丸重量降低，伴有嚴重的腸胃炎。在13周的實驗中，低于16mg/kg的劑量是無毒的。小鼠是對藥物反應(yīng)最不敏感的實驗動物。在一項13周的毒性試驗中，32mg/kg的高劑量沒有引起毒性。但是在一個20周的毒性試驗中

15、，16mg/kg/d組有兩只小鼠死亡，并且所有組的小鼠都出現(xiàn)了體重下降和胃部膨脹。這表明，小鼠長期給藥的安全劑量應(yīng)該在16mg/kg/d以下。2.大鼠6個月和1年的經(jīng)口給藥毒性實驗：在6個月的大鼠毒性試驗中，Risedronate 16mg/kg/d和32mg/kg/d組均有動物死亡。藥物導(dǎo)致動物胸腺和淋巴結(jié)萎縮，AST和ALT上升，體重減輕和胃部損害，鼻竇和肺部損傷，以及骨骼組成的變化。8mg/kg/d和4mg/kg/d實驗組的動物骨骼出現(xiàn)與高劑量組相似的藥理作用，但是沒有出現(xiàn)毒性反映。尚未有證據(jù)表明存在性別差異。Risedronate的藥代監(jiān)測表明，8mg/kg/d的劑量使藥物排泄途徑飽和

16、，再高的劑量會導(dǎo)致血藥濃度急劇上升。這可部分解釋Risedronate的安全劑量（4-8mg/kg）和致死劑量（16mg/kg）之間范圍很小。大鼠一年毒性實驗因為劑量太低（高劑量組為2mg/kg），沒有觀察到顯著的毒性作用。實驗證明了大鼠連續(xù)給藥時間延長到6個月至1年不會增加毒性發(fā)生。3.狗6個月，1年和2年的口服藥物毒性試驗：16/mg/kg/d和32mg/kg/d實驗組的狗在一個月左右全部死亡。低血鈣癥、肝毒性、和肝功能低下引起凝血障礙所造成的廣泛 組織出血和損傷是動物死亡的主要原因。 8mg/kg/d的毒性反應(yīng)與高劑量組的相似，在本組死亡的兩只雌犬毒性反應(yīng)較輕。 但沒有證據(jù)表明動物對藥物

17、敏感性方面有性別差異。在口服Risedronate 1年的試驗中，4mg/kg/d劑量組生化效應(yīng)和藥效學(xué)效應(yīng)與高劑量組的相似，但是除了血液AST和CK升高以外沒有引起其他毒性反應(yīng)?？诜isedronate（2mg/kg/d）兩年的實驗沒有引起任何毒性作用。這也證明了長期使用藥物不會產(chǎn)生累積效應(yīng)。2mg/kg也是在所有小于6個月的試驗中沒有觀察到毒性反應(yīng)的最大劑量。4.長期毒性試驗總結(jié)：狗、小鼠和大鼠口服Risedronate的安全劑量如下表：動物種類/ 給藥時間無毒劑量（mg/kg/d）無毒劑量（mg/m2/d）毒性作用的主要靶器官按mg/kg計的倍數(shù)按mg/m2計的倍數(shù)按AUC計的倍數(shù)狗&

18、lt;6個月480胃、肝、腎睪丸84.3狗1年480胃、肝、腎睪丸84.315.3狗2年 >2>40劑量過低>4>2.1大鼠<6個月848胃、肝、腎162.67大鼠6個月848胃、肝、腎162.6大鼠1年>4>24劑量過低>8>1.3小鼠<6個月824胃、肝161.3人的使用劑量為30mg/60kg=0.5mg/kg=18.5mg/m2在所有的實驗動物，藥物都引起了肝毒性（AST, ALT上升，肝損傷和萎縮），消化道的不良反應(yīng)和由此導(dǎo)致的進食量減少；在狗和大鼠發(fā)現(xiàn)了對睪丸的損害作用，中性粒細胞計數(shù)明顯增高，腎小管損傷和壞死。在狗的實驗

19、中還發(fā)現(xiàn)從食道到大腸的消化道浸蝕，肺、胰腺和淋巴結(jié)炎癥。Risedronate與其他雙磷酸鹽相似，對消化道有直接損害作用。Risedronate對消化道的損害作用與其它雙磷酸鹽比較孰輕孰重，從上述試驗還難以得出結(jié)論。損傷的機制至今尚不明確。在豚鼠實驗中，Risedronate還能導(dǎo)致輕微的眼部和皮膚的損傷，但無抗原性。16.4.4特殊毒性試驗：使用類固醇類消炎藥制作的胃損傷模型進行試驗，結(jié)果表明雙膦酸鹽類藥物都能導(dǎo)致消化道不良反應(yīng)，其中Alendronate 造成的損害最大，Risedronate也能導(dǎo)致消化道不良反應(yīng)。上述模型與藥物造成胃腸道損害的真正生理機制的相關(guān)性尚不明確。16.4.5致

20、突試驗：實驗沒有發(fā)現(xiàn)Risedronate有導(dǎo)致突變的可能，只有在一個CHO細胞的細胞遺傳學(xué)實驗中，發(fā)現(xiàn)Risedronate在某些導(dǎo)致細胞死亡的濃度下出現(xiàn)基因毒性。1. 未禁食大鼠骨髓細胞遺傳學(xué)實驗中，大鼠一次灌胃給藥1336mg/kg或500mg/kg/day 5天，藥物沒有對骨髓細胞染色體變異情況產(chǎn)生影響。藥物沒有產(chǎn)生毒性作用，對血液檢測指標無影響，但另一個LD50實驗結(jié)果顯示，1336mg/kg只是未禁食大鼠LD50的一半。2. Ames實驗使用了TA98, TA100, TA1535, TA1537和TA1538，加入或者不加Aroclor誘導(dǎo)大鼠肝臟微粒體。突變回復(fù)頻率沒有顯著的上

21、升，直到“可能的最大濃度”8000ug/板，都沒有發(fā)現(xiàn)毒性作用。3.突變回復(fù)實驗使用了E.coli.的WP2-uvrA菌株, 分別加入和不加Aroclor誘導(dǎo)大鼠肝臟微粒體。突變頻率沒有顯著上升，直到“可能的最大濃度”5000ug/板，都沒有發(fā)現(xiàn)毒性作用。4. CHO-HGPRT實驗分別加入和不加Aroclor誘導(dǎo)大鼠肝臟微粒體。S9陰性條件一直到950ug/ml，S9陽性一直到25ug/ml，突變菌落數(shù)沒有顯著變化。S9陰性時在950ug/ml的最大濃度，復(fù)制效率（cloning efficiency）下降到12%。S9陽性時，在25ug/ml的最大濃度下，分裂細胞存活率（survival of dividing cells）低于60%。5. 在化學(xué)誘導(dǎo)大鼠原代肝細胞產(chǎn)生DNA亂序合成實驗（UDS/Unscheduled DNA Synthesis）中，Risedronate在4mg/ml時沒有增加UDS的發(fā)生率。6. CHO細胞遺傳學(xué)實驗：Risedronate在S9 +/-條件下、高濃度時出現(xiàn)陽性結(jié)果。在較低的濃度(