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1、病毒學(xué)1.23000BC,埃及孟非思壁畫中長(zhǎng)老患小兒麻痹癥。3病毒virus最微小,可通過(guò)除菌濾器,結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單,無(wú)完整的細(xì)胞結(jié)構(gòu),電子顯微鏡下觀察;一種核酸(RNA或DNA)在活細(xì)胞內(nèi)存活,以復(fù)制方式繁殖4Virus:體積小,結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單,只有一種類型的核酸,只能在活的、敏感細(xì)胞內(nèi)以復(fù)制方式增殖的非細(xì)胞型微生物。5病毒與其它微生物的區(qū)別 敏感性微生物種類 結(jié)構(gòu)在無(wú)活細(xì)胞的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)二等分裂繁殖核酸類型 核糖體抗生素 干擾素細(xì)菌原核細(xì)胞型+D N A , R N A+-支原體原核細(xì)胞型+D N A , R N A+-立克次體 原核細(xì)胞型-+D N A , R N A+-衣原體原核細(xì)胞型-+D N A
2、 , R N A+-螺旋體原核細(xì)胞型-( +)+D N A , R N A+-真菌真核細(xì)胞型+出 芽 、 產(chǎn) 生 孢 子 D N A , R N A+-病毒非細(xì)胞型-D N A或R N A-+6病毒引起疾病的特點(diǎn)傳播性病死率持續(xù)感染腫瘤的形成關(guān)系7第23章 病毒的基本性狀第一節(jié) 病毒的大小與形態(tài)8病毒體(virion)完整的成熟病毒顆粒,具有典型的形態(tài)結(jié)構(gòu),并有感染性。測(cè)量單位為納米(nm,為1/1000m) 150nm 大型病毒(最大300 nm)多數(shù)病毒呈球形或近似球形,桿狀,絲狀,少數(shù)可為子彈狀、磚塊狀,噬菌體可呈蝌蚪狀。微生物的大小比較葡萄球菌(1000nm) 牛痘病毒300250nm
3、ABCDEFG立克次體450nm衣原體390nmA、大腸桿菌噬菌體、大腸桿菌噬菌體 ( 65 95nm )B、腺病毒、腺病毒 (70nm )C、脊髓灰質(zhì)炎病毒、脊髓灰質(zhì)炎病毒 (30nm )D、乙腦病毒、乙腦病毒 ( 40nm )E、蛋白分子、蛋白分子 (10nm )F、流感病毒、流感病毒 ( 100nm )G、煙草花葉病毒、煙草花葉病毒9.10111213病毒的結(jié)構(gòu)和組成14病毒體結(jié)構(gòu)模式圖病毒體結(jié)構(gòu)模式圖殼粒殼粒衣殼衣殼核心(核樣物)核心(核樣物)核衣殼核衣殼包膜包膜包膜病毒包膜病毒包膜子粒包膜子粒15核心:核酸 基因組genome 決定病毒遺傳、變異 和復(fù)制殼粒capsomere 衣殼c
4、apsid 保護(hù)、介導(dǎo)、抗原性包膜envelope,包膜子粒peplomere(刺突spike) 保 護(hù)、介導(dǎo)、抗原性16核衣殼的對(duì)稱形式核衣殼的對(duì)稱形式Symmetry of Nucleocapsid螺旋對(duì)稱型(螺旋對(duì)稱型(Helical Symmetry)二十面體立體對(duì)稱型(二十面體立體對(duì)稱型( Icosahedral Symmetry ) 復(fù)合對(duì)稱復(fù)合對(duì)稱 型(型(Complex Symmetry )1718五鄰體六鄰體192021RNA殼粒2223Enveloped VirusEnveloped VirusNaked VirusNaked VirusCubicHelical24第二節(jié)
5、病毒的核酸與蛋白質(zhì)25一、病毒核酸多樣性多樣性DNA dsDNA ssDNA dsRNARNA ssRNA 分節(jié)段RNA線狀、環(huán)狀大小懸殊復(fù)制方式多樣存在形式多樣262728有內(nèi)含子,ORF間有重疊克隆和表達(dá)較大的遺傳不穩(wěn)定性感染性2930二、病毒蛋白質(zhì)由病毒核酸編碼結(jié)構(gòu)蛋白 組成病毒體的成分 衣殼蛋白 包膜蛋白 基質(zhì)蛋白連接衣殼蛋白與包膜蛋白的部分, 有跨膜及錨定功能區(qū)非結(jié)構(gòu)蛋白 病毒內(nèi)酶 感染細(xì)胞內(nèi)特殊作用蛋白第三節(jié) 病毒的培養(yǎng)和增殖(Culture and Replication of Viruses)31.32一、病毒的培養(yǎng)動(dòng)物(Animals)雞胚(Embryonated eggs)
6、組織培養(yǎng)(Organ and tissue culture)Organ culture胚胎Embryo cultureCell culture:原代細(xì)胞 傳代細(xì)胞 雙倍體細(xì)胞3334常用的細(xì)胞培養(yǎng)類型名稱原代細(xì)胞培養(yǎng)恒河猴腎細(xì)胞培養(yǎng), 人胚腎、 肺等細(xì)胞培養(yǎng),雞胚成纖維細(xì)胞培養(yǎng)二倍體細(xì)胞株WI-38(人胚肺細(xì)胞株) ,HL-8(恒河猴胚細(xì)胞株)傳代細(xì)胞系Hela 細(xì)胞,Detroit 細(xì)胞(胸骨髓細(xì)胞系) ,Chang C/I/L/K(人結(jié)膜 C,腸 I,肝 L 與腎K 細(xì)胞系) ,Vero(綠猴腎細(xì)胞系) ,BHK-21(幼地鼠腎細(xì)胞系)35細(xì)胞病變(Cytopathic effect, C
7、PE)包涵體(Inclusion Bodies)36正常細(xì)胞正常細(xì)胞37CPE38狂犬病毒包涵體(Negri body)39巨細(xì)胞病毒包涵體40病毒數(shù)量和感染性測(cè)定病毒數(shù)量和感染性測(cè)定1、蝕斑試驗(yàn)斑試驗(yàn)2、ID50 或或 TCID50 病毒感染雞胚、動(dòng)物或細(xì)胞后,引起 50% 發(fā)生死亡或病變的最小量。 病毒感染單層細(xì)胞后,產(chǎn)生的局限性病灶,稱蝕斑,蝕斑是由一個(gè)感染性病毒體復(fù)制形成的,稱蝕斑形成單位,病毒懸液中的感染性病毒量以每毫升的蝕斑形成單位PFU來(lái)表示。41病毒的增殖病毒的增殖活細(xì)胞活細(xì)胞敏感細(xì)胞敏感細(xì)胞復(fù)制復(fù)制( replication)病毒復(fù)制周期病毒復(fù)制周期病毒基因?yàn)槟0?,籍DNA多
8、聚酶或RNA多聚酶等,使細(xì)胞轉(zhuǎn)為復(fù)制病毒的基因組,轉(zhuǎn)錄、轉(zhuǎn)譯出相應(yīng)的病毒蛋白,最終釋放出子代病毒。42吸附和穿入adsorption and penetration脫殼uncoating生物合成biosynthesis組裝成熟與釋放assembly and release434445病毒病毒的復(fù)的復(fù)制過(guò)制過(guò)程程46病毒病毒的復(fù)的復(fù)制過(guò)制過(guò)程程47ADSORPTIONbuddingHIV 復(fù)制過(guò)程48接觸結(jié)合特異性吸附(病毒配體位點(diǎn)與細(xì)胞膜特異受體結(jié)合)穿入Adsorption and Penetration融合-有包膜病毒胞飲-無(wú)包膜病毒49HIV 50influenza virus 51un
9、coating52Biosynthesis53.54隱蔽期6大類型:雙鏈DNA病毒 單鏈DNA病毒 單正鏈RNA病毒 單負(fù)鏈RNA病毒 雙鏈RNA病毒 逆轉(zhuǎn)錄病毒區(qū)域:DNA病毒 核內(nèi)(除痘病毒) RNA病毒 胞質(zhì)(除流感病毒及 部分副粘病毒) assembly and release 55.56裝配(裝配(assemblyassembly)The stage of replication during which all the structural components come together at one site in the cell and the basic structur
10、e of the virus particle is formed.57裝配(裝配(assemblyassembly)58釋放(釋放(release)裂解(Disintegration) : naked virus cause the host cell lysis出芽(Budding): enveloped viruses59皰疹病毒的復(fù)制過(guò)程60三、病毒增殖的細(xì)胞效應(yīng)干擾現(xiàn)象interference 當(dāng)兩種病毒同時(shí)感染同一細(xì)胞時(shí),可發(fā)生一種病毒的增殖抑制了 另一種病毒增殖的現(xiàn)象。產(chǎn)生原因 干擾素interferon,IFN 第一種病毒改變了細(xì)胞表面受體結(jié)構(gòu)或細(xì)胞代謝途徑;或抑制第二種病毒m
11、RNA的轉(zhuǎn)譯61四、病毒的異常增殖缺陷病毒(缺陷病毒( defective virus ):): 基因組不完整的病毒體基因組不完整的病毒體缺陷干擾顆粒(缺陷干擾顆粒(defective interfering particles, DIP) 缺陷病毒不能復(fù)制,但卻能干擾同種成熟病毒體進(jìn)入細(xì)胞。天然缺陷病毒天然缺陷病毒 腺病毒伴隨病毒 頓挫感染(頓挫感染(流產(chǎn)性感染)()(abortive infection):細(xì)胞條件不合適,病毒進(jìn)入細(xì)胞但不):細(xì)胞條件不合適,病毒進(jìn)入細(xì)胞但不能復(fù)制能復(fù)制容許性細(xì)胞非容許性細(xì)胞62第四節(jié)第四節(jié) 病毒的遺傳與變異病毒的遺傳與變異傳統(tǒng)遺傳學(xué)傳統(tǒng)遺傳學(xué)分子遺傳學(xué)分子
12、遺傳學(xué) 63突變株突變株mutant溫度敏感突變株(temperature sensitive,ts) 2835可以復(fù)制, 3740不能復(fù)制 脊髓灰質(zhì)炎減毒活疫苗宿主范圍突變株,抗原性突變株等變異株variant 突變株能穩(wěn)定地存在,可在相應(yīng)的宿主或細(xì)胞中傳代與存活。64重組與重配(基因間相互作用)重組recombination65重配reassortment66基因復(fù)活交叉復(fù)活多重復(fù)活67表型混合(基因產(chǎn)物間相互作用)兩株病毒混合感染時(shí),裝配過(guò)程發(fā)生錯(cuò)誤形成主要表現(xiàn)為耐藥性,抗原性等改變,基因并未改變,改變的生物學(xué)性狀不能遺傳68virus Avirus Bphenotypemixing v
13、irus Avirus B69分子遺傳學(xué)病毒基因組分析病毒保護(hù)性表位的確定病毒抗原高變區(qū)分析毒力相關(guān)基因編碼區(qū)分析耐藥性變異分析作用于病毒蛋白質(zhì)的某些細(xì)胞蛋白的研究70第五節(jié) 病毒的分類 (Classification of Viruses)71分類原則分類原則Basis of Classification核酸類型和結(jié)構(gòu)(RNA/DNA, ds/ss, linear/circular, fragment /no-fragment)病毒體形狀和大小病毒體形態(tài)結(jié)構(gòu)對(duì)脂溶劑敏感性72DNA病毒RNA病毒DNA 和RNA 逆轉(zhuǎn)錄病毒73DNA virusesdsDNA, Presence of an
14、envelope Poxviridae (痘病毒科)(痘病毒科)dsDNA, Presence of an envelope Herpesviridae (皰疹病毒科)(皰疹病毒科)dsDNA, absence of an envelope Adenoviridae (腺病毒科(腺病毒科) Paproavairidae (乳多空病毒科(乳多空病毒科)ssDNA, absence of an envelope Paraoviridae (細(xì)小病毒科)(細(xì)小病毒科) 74dsRNA,fragments,absence envelope Reoviridae(呼腸病毒科)(呼腸病毒科) Birnav
15、iridae(雙(雙RNA病毒科)病毒科)-ssRNA, no fragment , Presence envelope Paramyxoviridae (副粘病毒科)(副粘病毒科) Rhabdoviridae (彈狀病毒科)(彈狀病毒科)- ssRNA,fragments, Presence envelope Orthomyxoviridae (正粘病毒科)(正粘病毒科) Bunyaviridae (布尼亞病毒科)(布尼亞病毒科) Arenaviridae (沙粒病毒科)(沙粒病毒科)+ssRNA, no fragments, absence envelope Picornaviridae(?。ㄐNA病毒科)病毒科) Caliciviridae (杯狀病毒科)(杯狀病毒科) Astroviridae (星狀病毒科)(星狀病毒科)+ssRNA,no fragments , presence envelope Coronaviridae(冠狀病毒科)(冠狀病毒科) Flaviviridae (黃病毒科)(黃病毒科) Togavirida
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