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文檔簡介
1、?醫(yī)學(xué)形態(tài)學(xué)實(shí)驗(yàn)?課程教學(xué)大綱山東大學(xué)醫(yī)學(xué)院?醫(yī)學(xué)形態(tài)學(xué)實(shí)驗(yàn)?課程教學(xué)大綱課程名稱:醫(yī)學(xué)形態(tài)學(xué)實(shí)驗(yàn)英文名稱:MedicalmorphologicalExperiment課程編實(shí)驗(yàn)課性質(zhì):融合創(chuàng)新性實(shí)驗(yàn)課程負(fù)責(zé)人:開放實(shí)驗(yàn)工程數(shù):8大綱主撰人:武玉玲、張慶慧、郝晶等人大綱審核人:一、學(xué)時(shí)、學(xué)分課程總學(xué)時(shí):32實(shí)驗(yàn)學(xué)時(shí):32課程總學(xué)分:實(shí)驗(yàn)學(xué)分:二、適用專業(yè)及年級(jí)供根底、臨床醫(yī)學(xué)、預(yù)防、口腔醫(yī)學(xué)、護(hù)理學(xué)5、6、7年制專業(yè)用三、實(shí)驗(yàn)教學(xué)目的與根本要求通過醫(yī)學(xué)形態(tài)學(xué)融合性實(shí)驗(yàn)教學(xué),將人體解剖學(xué)、組織胚胎學(xué)和病理解剖學(xué)三個(gè)相關(guān)學(xué)科的交叉內(nèi)容進(jìn)行有機(jī)整合,形成系統(tǒng)化的知識(shí).通過創(chuàng)新實(shí)驗(yàn)的學(xué)習(xí),使學(xué)生學(xué)會(huì)使
2、用醫(yī)學(xué)形態(tài)學(xué)實(shí)驗(yàn)常用的儀器,熟悉科研常用的技術(shù)方法,培養(yǎng)學(xué)生動(dòng)手水平、提升學(xué)生利用所學(xué)知識(shí)解決實(shí)際問題的能力,啟迪學(xué)生的科研思維和創(chuàng)新精神,以適應(yīng)研究型大學(xué)培養(yǎng)人才的要求.四、主要儀器設(shè)備1.動(dòng)物:Wistar大鼠,昆明小鼠2.儀器設(shè)備:顯微圖像觀察系統(tǒng)、恒溫培養(yǎng)箱,手術(shù)器械、微量注射器、常用染料.五、實(shí)驗(yàn)課程內(nèi)容和學(xué)時(shí)分配序號(hào)實(shí)驗(yàn)工程名稱實(shí)驗(yàn)內(nèi)容學(xué)時(shí)分配實(shí)驗(yàn)要求指導(dǎo)教師已開/未開1淋巴系統(tǒng)的組成1.第1、2趾蹊間隙之下注射0.2mlPatentblue,10分鐘后在月國窩及腹股溝處切開皮膚,尋找藍(lán)染的淋巴管及淋巴結(jié)可追蹤至腹膜后隙.觀察淋巴管及淋巴結(jié)的形態(tài)和分布.2 .將一段小腸系膜平鋪于透
3、明的載物臺(tái)上,用顯微圖像觀察系統(tǒng)觀察小腸系膜內(nèi)淋巴管的運(yùn)動(dòng).注意尋找淋巴管的瓣膜.3 .小腸漿所注射適量Patentblue.觀察淋巴管的吸收功能及引流.4 .追蹤腹膜后隙染色的淋巴結(jié).5 .在腹股溝處結(jié)扎、切斷腹股溝淋巴結(jié)和淋巴管,造成淋巴引流障礙,觀察淋巴淤滯和淋巴水腫的形成.6 .觀察淋巴引流注射標(biāo)本,淋巴結(jié)和淋巴管組織切片.總結(jié)淋巴系統(tǒng)的組成和功能.4分小組進(jìn)行丁兆習(xí)未開2脊髓半切損傷的手術(shù)試驗(yàn)觀察1、將Wista大鼠麻醉固定于手術(shù)臺(tái).2、切開背部皮膚,暴露脊柱,翻開椎管,剪斷T脊髓.3、縫合背部肌及皮膚.4、待大鼠清醒后,觀察大鼠損傷后的臨床表現(xiàn).5、討論并寫出試驗(yàn)4分小組進(jìn)行邢子英
4、未開3肥大細(xì)胞的制作與觀察1 .肥大細(xì)胞的制作與觀察:取健康大鼠一只,脫臼處死.隨后剪取皮下組織,平鋪置于載玻片上.用95%乙醇溶液固定、甲苯胺藍(lán)染色,最后樹膠封片.鐐下觀察肥大細(xì)胞形態(tài)、顆粒染色特點(diǎn)及肥大細(xì)胞走形分布特點(diǎn).2 .大鼠I型超敏反響動(dòng)物模型的建立取馬血清用生理鹽水按一定的比例稀釋,然后給大鼠腹腔注射進(jìn)行被動(dòng)致敏.致敏后14日再用馬血清進(jìn)行腹腔注射進(jìn)行大鼠致敏實(shí)驗(yàn).隨后剪取皮下組織,觀察肥大細(xì)胞脫顆粒情況.4分小組進(jìn)行張艷敏未開小鼠活精子標(biāo)本的制作與精子低滲月中脹試驗(yàn)1 .活精于標(biāo)本的制備與觀察取育齡期雄鼠附睪,將其剪成小塊,制作小鼠活精子懸液.將懸液滴于載玻片上,低倍鏡觀察精子的
5、活動(dòng)情況.另取精子懸液涂片,用0.3%甲苯胺藍(lán)液染色,光鏡觀察精子的形態(tài)結(jié)構(gòu).2 .體外抑精子實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)分組:1實(shí)驗(yàn)組:在37恒溫條件下,取50M精子懸液與等量一定濃度的抑精子藥液充分混合,分別于混合后30sec、5min、10min和30min時(shí),取一滴混合液清于載玻片上,顯微值T計(jì)數(shù)10個(gè)視野,記錄活動(dòng)精子百分率或用伊紅染料染色,計(jì)算精子存活率.2對(duì)照組:取50d精子懸液與等量生理鹽水混合,其余操作方法同上.比擬在處理后不同時(shí)間內(nèi)兩組活動(dòng)精子的百分率.同時(shí),分別取處理10min分鐘后的實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組的精子懸液,以10001500r/min離心5min,棄上精液,取沉淀菅底的精子涂片,用0.3
6、%甲苯胺藍(lán)液染色,光鏡觀察兩組精4分小組進(jìn)行武玉玲未開45小鼠體外受精實(shí)驗(yàn)1 .精子獲能實(shí)驗(yàn)取12-16周齡ICR雄鼠的附睪尾放在石蠟油中,用眼科剪在其頂端剪一小口,然后用眼科鐐子擠壓附睪尾部精子,將其挑到200ul平衡過夜的HTF受精獲能液滴中,置于37C、5%CO2飽和濕度條件下培養(yǎng)ih使精亍獲能,顯微鐐r觀察精亍的形態(tài)和運(yùn)動(dòng).2 .超排卵及收集卵細(xì)胞:取6-8周齡ICR雌鼠,腹腔注射7.5IU/只PMSG,間隔48h后再注射7.5IU/只HCG進(jìn)行超排處理實(shí)驗(yàn)老師課前準(zhǔn)備.注射HCG14h后,頸椎脫臼處死雌鼠,取出輸卵管在濾紙上除去血跡,放入培養(yǎng)皿中,用解剖針刺破輸卵管的膨大部,將流出的
7、卵子團(tuán)引入到HTF培養(yǎng)液滴中,顯微鏡卜觀察卵丘復(fù)合體的形態(tài).3 .觀察受精過程:在卵子HTF培養(yǎng)液滴中,參加51Oul獲能精子200個(gè)精子/u1,顯微鏡卜觀察精子向卵細(xì)胞周圍集聚.放入CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng).4 .觀察精、卵原核:精卵共同孵育12-16h后,將受精卵移至玻片上多聚賴氨酸預(yù)處理,空氣枯燥5min,向玻片上滴加數(shù)滴甲醇-冰醋酸溶液3:1室溫25C卜固定5min,滴加1%美藍(lán)染色液室溫5min,水洗,90%、95%和純酒精脫水各2分鐘,二甲苯透明,樹膠封片,高倍顯微鐐下觀察受精卵的卵原核和精原核.4分小組進(jìn)行郝晶未開6結(jié)締組織增生與肝硬化1 .肉眼及鐐下觀察正常肝臟的大體形態(tài)特點(diǎn)及正常組織
8、結(jié)構(gòu).2 .鐐下觀察固有結(jié)締組織的形態(tài)特點(diǎn).3 .肉眼及鏡卜觀察肝硬化的標(biāo)本及病理切片,對(duì)照肝臟正常結(jié)構(gòu)找出肝硬化的病理組織學(xué)特點(diǎn).4 .互動(dòng)式討論:肝臟結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系,固有結(jié)締組織的功能以及在創(chuàng)傷愈合中的作用,結(jié)締組織增生與肝硬化的關(guān)系,肝硬化時(shí)肝臟多種功能降低的結(jié)構(gòu)根底以及如何預(yù)防肝硬化的發(fā)生.4分小組進(jìn)行張慶慧,甄軍暉未開7巨噬細(xì)胞與矽肺、塵肺的發(fā)生1 .肉眼觀察矽肺、塵肺的病理標(biāo)本;2 .顯微鏡觀察活體染色的疏松結(jié)締組織鋪片,重點(diǎn)觀察吞噬了染料顆粒的巨噬細(xì)胞,成纖維細(xì)胞和膠原纖維;3 .顯微鏡觀察正常肺切片,熟悉肺組織的正常結(jié)構(gòu),觀察肺問質(zhì)中的塵細(xì)胞;4 .顯微鏡觀察矽肺、塵肺的病理
9、切片,匕止常肺切片對(duì)照比較,以理解巨噬細(xì)胞與矽肺、塵肺發(fā)病的關(guān)系;5 .學(xué)生自己動(dòng)手,給小鼠腹腔注射或W注射臺(tái)盼藍(lán),2小時(shí)后取腹腔液制作涂片,或取皮卜組織制作鋪片,伊紅染色,顯微鏡觀察吞噬了染料顆粒的巨噬細(xì)胞;6 .教師和學(xué)生互動(dòng)式討論巨噬細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)和生理功能,矽肺、塵肺的病理過程,巨噬細(xì)胞與矽肺、塵肺病理過程的相關(guān)關(guān)系,吸煙的危害;7 .教師和學(xué)生互動(dòng)式討論巨噬細(xì)胞在特異性免疫和非特異性免疫中的作用,討論巨噬細(xì)胞在矽肺、塵肺、結(jié)核病、動(dòng)脈粥樣硬化等疾病發(fā)生、開展和歸宿中的意義;4分小組進(jìn)行甄軍暉未開8肺組織結(jié)構(gòu)特點(diǎn)與急性肺淤血、肺水月中的觀察1. 取大鼠稱重.一組腹腔注射腎上腺素22.5mg/kg體重,另一組腹腔注射相同量的生理鹽水做對(duì)照,注射后觀察記錄兩只大鼠的一般情況和呼吸等臨床表現(xiàn).15min20min后處死動(dòng)物注意結(jié)扎氣管以免液體外溢,取出肺和心臟.2. 用濾紙吸去肺外表的液體,用天平稱兩肺的重量,計(jì)算肺重系數(shù)肺重量g/體重kg*100%,假設(shè)肺重系數(shù)1%,比擬兩組大鼠的肺重余數(shù).假設(shè)肺重系數(shù)1%,說明肺水月中已形成.3. 比照觀察2組大鼠肺的外觀,記錄包括人小、顏色、質(zhì)地、及切向外觀,將2組大鼠的肺臟用10%的甲醛固定.4. 鏡卜觀察
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