實訓(xùn)四液體、半固體、平板、斜面等培養(yǎng)基的制備

1、實驗四實驗四 液體、半固體、平板、液體、半固體、平板、斜面等培養(yǎng)基的制備斜面等培養(yǎng)基的制備一、目的一、目的v1 1、掌握各類培養(yǎng)基制備方法及注意事項；、掌握各類培養(yǎng)基制備方法及注意事項；v2 2、掌握各類培養(yǎng)基的主要成分及各成分含量。、掌握各類培養(yǎng)基的主要成分及各成分含量。二、內(nèi)容二、內(nèi)容v1 1、液體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基 1.21.2組組200ml200ml； v2 2、半固體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基 3.43.4組組200ml200ml；v3 3、斜面培養(yǎng)基（固體）、斜面培養(yǎng)基（固體） 5.65.6組組200ml200ml；v4 4、固體培養(yǎng)基、固體培養(yǎng)基 1616組組400ml400ml。三、

2、步驟三、步驟v1 1、稱量、稱量 （注意：（注意：3 35g5g應(yīng)取應(yīng)取5g5g；稱量后瓶塞；稱量后瓶塞蓋好，防止粉劑潮解；稱量要準(zhǔn)確，熟練使蓋好，防止粉劑潮解；稱量要準(zhǔn)確，熟練使用砝碼天平）；用砝碼天平）；v 2 2、溶化、溶化 電爐電爐100100充分完全溶化（注意：溶充分完全溶化（注意：溶化前記號筆畫好水線作標(biāo)記；反復(fù)化前記號筆畫好水線作標(biāo)記；反復(fù)4 45 5次沸次沸騰達(dá)到完全溶化，看不到大的顆粒物質(zhì)，呈騰達(dá)到完全溶化，看不到大的顆粒物質(zhì)，呈澄清透明狀態(tài)）；澄清透明狀態(tài)）；v3 3、調(diào)整、調(diào)整pHpH到到7.4 7.4 培養(yǎng)基若偏酸，加入培養(yǎng)基若偏酸，加入1d NaOH1d NaOH，若

3、偏堿，加入若偏堿，加入1d HCl1d HCl；pHpH試紙滴加試樣后立即試紙滴加試樣后立即觀察，不可長時間等待；觀察，不可長時間等待；v 4 4、分裝、分裝 液體、半固體和固體培養(yǎng)基需要先液體、半固體和固體培養(yǎng)基需要先分裝入試管后高壓滅菌，量約在試管分裝入試管后高壓滅菌，量約在試管1/31/3高度高度為準(zhǔn)，選好合適的塞子塞好，塞子大小要合為準(zhǔn)，選好合適的塞子塞好，塞子大小要合適，忌大忌小。適，忌大忌小。v 5 5、高壓滅菌、高壓滅菌 15 15磅磅20min20min（15 15磅壓力下溫度為磅壓力下溫度為121.3121.3）；）；v 6 6、倒板、倒板 固體培養(yǎng)基高壓滅菌后倒板，嚴(yán)格固體

4、培養(yǎng)基高壓滅菌后倒板，嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作技術(shù)操作，防止培養(yǎng)基被污染；遵守?zé)o菌操作技術(shù)操作，防止培養(yǎng)基被污染；v 7 7、鑒定、鑒定 3724h3724h，如培養(yǎng)后隨即選中平板無，如培養(yǎng)后隨即選中平板無細(xì)菌生長則實驗成功；細(xì)菌生長則實驗成功；v8 8、保存、保存 44冰箱保存。冰箱保存。四、各培養(yǎng)基成分四、各培養(yǎng)基成分v 1 1、液體培養(yǎng)基（肉膏湯）、液體培養(yǎng)基（肉膏湯）v 成分：牛肉膏成分：牛肉膏3 35g5g，蛋白胨，蛋白胨10g10g，NaCl 5gNaCl 5g，蒸餾水蒸餾水1000ml1000ml；v 2 2、半固體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基v 成分：牛肉膏成分：牛肉膏3 35g5g，蛋白胨，

5、蛋白胨10g10g，NaCl 5gNaCl 5g，0.30.30.50.5瓊脂粉，蒸餾水瓊脂粉，蒸餾水1000ml 1000ml v3 3、斜面培養(yǎng)基、斜面培養(yǎng)基v 成分：牛肉膏成分：牛肉膏3 35g5g，蛋白胨，蛋白胨10g10g，NaCl 5gNaCl 5g，2 23 3瓊脂粉，蒸餾水瓊脂粉，蒸餾水1000ml1000ml；v4 4、固體培養(yǎng)基（營養(yǎng)瓊脂或普通瓊脂）、固體培養(yǎng)基（營養(yǎng)瓊脂或普通瓊脂）v 成分：牛肉膏成分：牛肉膏3 35g5g，蛋白胨，蛋白胨10g10g，NaCl 5gNaCl 5g，2 23 3瓊脂粉（瓊脂粉（202025g25g較好），蒸餾水較好），蒸餾水1000ml1000ml； 5 5、血液瓊脂（血平板）、血液瓊脂（血平板）v 成分：普通瓊脂成分：普通瓊脂100ml100ml，加入無菌脫纖維羊，加入無菌脫纖維羊血血8 81