川芎嗪藥理作用及提取工藝

1、標(biāo)題：川芎嗪的藥理作用及其提取工藝07藥碩，李德偉【關(guān)鍵詞】川芎，生物堿，藥理作用，提取工藝中藥川芎為傘形科藁本屬植物川芎Ligustic um chuanxiong Hort.的根莖，始 載于神農(nóng)本草經(jīng)。其性溫，味辛，微苦，具有活血行氣祛風(fēng)止痛之功效。主 治血淤氣滯所致月經(jīng)不調(diào)，痛經(jīng)經(jīng)閉，肝郁氣滯而致血行不暢的胸脅疼痛，頭痛， 風(fēng)寒濕痹，跌打腫痛等疾病。臨床主要用于治療心腦血管、呼吸、泌尿系統(tǒng)及婦 科方面的疾病。所含有效成分為四甲基毗嗪（川芎嗪）和阿魏酸等。此外尚含有 揮發(fā)油、蒿本內(nèi)酯和丁烯苯肽等烷基本肽類(lèi)化合物。味辛性溫。歸肝、膽、心 包經(jīng)。阿魏酸提取及生產(chǎn)工藝較為成熟，現(xiàn)將近年來(lái)川芎嗪藥

2、理作用研究概況及 提取工藝綜述如下。藥理作用含氮化合物中的川芎嗪是川芎根、莖中提取的一種活性生物堿四甲基毗嗪，為川芎中最主要有效成分之一，以下為川芎嗪的藥理作用研究進(jìn)展。1）對(duì)心臟的作用 川芎嗪對(duì)離體豚鼠灌流心臟產(chǎn)生劑量依賴(lài)性抑制心肌收 縮和增加冠脈流量。川芎嗪對(duì)麻醉兔心肌缺血再灌注所致心肌損傷和心肌頓抑有 保護(hù)作用。左保華等亦證實(shí)川芎嗪可有效預(yù)防再灌注大鼠的心律失常。川芍噪有 對(duì)抗腦垂體后葉素（Pit）引發(fā)的急性心肌缺血缺氧的作用。2）對(duì)腦血管的作用 川芎嗪能顯著增加缺血大鼠血漿中NO含量，降低MMS 總量和組織中MDA的含量，降低血比黏度，對(duì)大鼠缺血性再灌注損傷具有保護(hù)作 用。岑得意等用大

3、鼠腦梗塞模型觀(guān)察川芎嗪對(duì)大鼠腦梗塞的作用，結(jié)果顯示川芎 嗪iv可顯著改善大鼠異常神經(jīng)癥狀和抑制ALP活性的下降，顯著抑制ADP致血 小板的聚集。3）對(duì)機(jī)體其他血循環(huán)的作用蔡英年等以雪貂活體左下肺葉灌流實(shí)驗(yàn)表明: 肺動(dòng)脈灌注或靜脈注射川芎嗪，對(duì)肺動(dòng)脈的舒張作用均明顯大于體動(dòng)脈。朱上林發(fā)現(xiàn)川芎嗪可以明顯減少肝缺血再灌注損傷大鼠的血清轉(zhuǎn)氨酶、LDH；減輕肝細(xì) 胞的病理性損傷；明顯降低肝組織LPO、TXB2的升高；維持缺血及再灌注期SOD 活性。4）對(duì)呼吸系統(tǒng)的作用王良興發(fā)現(xiàn)川芎嗪具有擴(kuò)張靜息支氣管及抑制組胺、 乙酰膽堿收縮支氣管的作用。靜脈注射腎上腺素造成大鼠劇烈的致死性肺水腫， 用川芎嗪預(yù)防后，其

4、存活率、生存時(shí)間及肺指數(shù)均明顯改善。5）延緩慢性腎損害的作用川芎嗪能夠顯著增加腎血流量，減輕兔腎熱缺 血模型的腎組織損傷，還能提高膜性腎炎家兔腎組織的SOD活性，減輕腎組織細(xì) 胞的脂質(zhì)過(guò)氧化損傷，降低缺血再灌注損傷腎臟細(xì)胞的凋亡指數(shù)。6）對(duì)血小板聚集、血栓形成和血液粘滯度的影響川芎嗪能延長(zhǎng)體外ADP誘 導(dǎo)的血小板聚集時(shí)間，對(duì)已聚集的血小板有解聚作用，還有提高紅細(xì)胞和血小板 表面電荷，降低血粘度，改善血液流變的作用。阿魏酸能抑制血小板TXA的釋放，2對(duì)其活性有直接的拮抗作用，還能升高血小板內(nèi)cAMP含量，抑制血小板聚集。7）其他作用 川芎嗪對(duì)正常小鼠和荷瘤小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)有明顯的抑制作用。

5、川芎還具有保護(hù)雛雞避免因缺乏維生素E而引起的營(yíng)養(yǎng)性腦病。川芎 對(duì)環(huán)抱素的肝腎毒性引起的胰島。細(xì)胞的毒性均有防護(hù)作用。1提取工藝1）川芎總提物的提取分離取150g川芎飲片,稍粉碎，用95%乙醇于索氏回流提取裝置中回流提取9小時(shí)。溶媒 用量為810倍。提取液用布氏抽濾器抽濾，抽濾液減壓濃縮至十，再加適量水， 加熱使溶解，抽濾，濾液回到已處理好的大孔樹(shù)脂柱（干膏和樹(shù)脂的比例為1: 151: 20）上，控制加樣流速為3秒/滴,慢慢滴加完后，先用水洗，（12秒/滴洗 全還原糖反應(yīng)呈陰性，（1ml水洗脫液加入甲基萘酚0. 5%試液23滴。沿試管壁 緩緩加入0. 5ml濃硫酸,陰性為二界面處出現(xiàn)棕色環(huán)）約用

6、30%乙醇洗脫至無(wú)色, 合并30%乙醇洗脫液減壓回收乙醇,冷卻后用乙醚萃取，醚提取液用1N硫酸溶液萃 取，酸液經(jīng)飽和碳酸鈉溶液堿化至pH910。用氯仿提取，提取液減壓回收氯仿全 十,得到總生物堿。取總生物堿石油醚溶解部分,減壓蒸發(fā)石油醚,得橙黃的膏狀 物,上堿性AL2O3柱,層析分離，石油醚-氯仿（8 : 2）的洗脫部分，減壓濃縮，經(jīng)升 華結(jié)晶得無(wú)色的針狀結(jié)品，即為川芎嗪。2.1）川芎嗪的定性鑒別實(shí)驗(yàn)原理川芎嗪與碘化金必鉀試劑產(chǎn)生色沉淀,與碘化汞鉀試劑產(chǎn)生白色沉 淀。薄層層析法 取無(wú)色針狀結(jié)品，少量溶于氯仿中，點(diǎn)在中性氧化鋁CMC板上， 以石油醚氯仿（1： 1）展開(kāi)17cm,用改良碘化金必鉀試

7、劑顯色，斑點(diǎn)呈橘黃色。2.2）川芎嗪的定量測(cè)定非水滴定法取150g川芎的提取物，定容于100ml冰醋酸溶液中，取10ml加0. 5%結(jié)晶紫指示液1滴，用0.01ml/ l的高氯酸滴定液滴定至溶液呈蘭綠色,耗用高 氯酸滴定液2. 4ml,空白試驗(yàn)耗用高氯酸滴定液0. 45ml,故川芎嗪占生藥含量為 0. 018%。紫外分光光度法1）回收率的測(cè)定精密稱(chēng)取2份重量相同的樣品，在其中一個(gè)加入20 Ml 鹽酸4 -甲基毗嗪標(biāo)準(zhǔn)溶液,分別加入0. 5%的鹽酸少量于70C加熱20分鐘，放冷 后，定容于10ml容量瓶中搖勻后，用離心機(jī)離心5分鐘，取2ml作為樣品加入盛有 5ml緩沖液的分液漏斗中，再各加1%漠

8、甲酸綠3ml,分別用20ml氯仿一次萃取，振搖 后，靜置1小時(shí),取下層液，放入10甘盛有無(wú)水Na2SO4的刻度試管中振搖，靜置半小 時(shí)，取上層液，用754G分光光度計(jì)測(cè)吸收度。結(jié)果見(jiàn)表1。2結(jié)果2）含量測(cè)定取150g川芎飲片提取物定容于50ml容量瓶中，取3個(gè)5ml作 為樣品分別加0. 5%的鹽酸少量，于70C加熱20分鐘,放冷后定容于10ml容量瓶中, 搖勻后用離心機(jī)離心5分鐘，取2ml作為樣品按照上述方法處理后測(cè)定。結(jié)果見(jiàn)表2。表1回收實(shí)驗(yàn)結(jié)果加入W準(zhǔn)品一崖（mg）0. 040 0. 040 0. 0400. 040 0. 040測(cè)得標(biāo)準(zhǔn)品最（ing）0. 039 0. 039 0. 04

9、20. 03S 0. 040回收率97. 5% 97. 5% 105%95, 0% 100%表2含量測(cè)定結(jié)果123吸收度Q 0870. 0890. 086川菖嗪濃度（mol 1）5. 47 X104 5, 74 X104 5. 20 X104經(jīng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明川芎嗪在生藥中含量為0. 018%。討論因川芎嗪極易升華，所以在提取回流過(guò)程中，一定要注意溫度不要太高，尤其是在 回收干燥過(guò)程中，盡量控制在60 左右。大孔樹(shù)脂:本實(shí)驗(yàn)中采用的是D101大孔樹(shù) 脂結(jié)構(gòu)為2 -甲基苯乙烯，比表面積400m2 /g，孔徑100。以乙醇濕法裝柱,繼續(xù)用 乙醇在柱上流動(dòng)清洗，不時(shí)檢查流出的乙醇，全與水混合不呈白色混濁

10、為止（取 1ml乙醇加5ml水）。然后以大量蒸餾水洗去乙醇。否則將大大影響大孔樹(shù)脂吸附 力。關(guān)于酸性染料比色法:一種生物堿不是與所有的酸性染料都能形成有色絡(luò)合物。 文獻(xiàn)報(bào)道：甲橙、曙紅，百里酸蘭3個(gè)不能與川芎嗪形成有色絡(luò)合物。而漠甲酸綠 和漠麝甲草酸蘭與川芎生物堿能生成有色絡(luò)合物。由于漠甲草酚蘭的pH值為7, 故不宜采用，以漠甲酸綠為最佳，增加染料的濃度可以提高測(cè)定的靈敏度，但濃度過(guò)高，在以有機(jī)相振蕩提取絡(luò)合物時(shí)，易于形成難以破壞的乳化層。此外天津中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院采用正交實(shí)驗(yàn)對(duì)川芎最佳提取工藝進(jìn)行考察，以H PLC1條件為Kromac il C18 （ 150mm 4. 6mm,5Lm）色譜柱

11、為分析柱，以甲醇-1% 醋酸水溶液（25B 75）為流動(dòng)相，流速1. 0m l# m in- 1,檢測(cè)波長(zhǎng)280 nm,柱 溫為室溫2作為優(yōu)化分析手段。結(jié)果川芎的最佳提取工藝：80%乙醇（含5%乙酸） 12倍量，超聲提取2次，45m in /次。鹽酸川芎嗪在2. 0260. 6 Lg /m l范圍內(nèi) 呈良好的線(xiàn)性關(guān)系，回歸方程為Y= 20 205X - 11 452, r= 1. 00平均回收率為 101. 70, RSD = 2. 79%。結(jié)論該實(shí)驗(yàn)對(duì)川芎藥材中的有效成分川芎嗪的提取效 率高，檢測(cè)快速準(zhǔn)確。在此HPLC條件下川芎嗪和其它成分之間能得到很好的分 離。4.展望川芎為常用中藥，近年來(lái)通過(guò)成分和藥理的研究，為川芎的臨床應(yīng)用提供了理 論依據(jù)，同時(shí)也發(fā)現(xiàn)了一些新的藥理作用。因此，有必要對(duì)其化學(xué)成分及其藥理 進(jìn)行進(jìn)一步的深人研究，以期開(kāi)發(fā)出療效好，副作用小的新型藥物，更好地應(yīng)用 于臨床。但是現(xiàn)階段藥典3 對(duì)川芎的含量測(cè)定及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)沒(méi)有明確標(biāo)準(zhǔn)，川芎 嗪雖然可以進(jìn)行人工合成，但不能進(jìn)行大量生產(chǎn)，因此合理的提取工藝有待繼續(xù) 研究。參考文獻(xiàn):1.川芎化學(xué)