血清葡萄糖測定

1、血清葡萄櫓測定1 .實驗原理在己糖激酶（HK）催化下，葡萄糖和ATP發(fā)生磷 酸化反應(yīng)，生成葡萄糖-6-磷酸（G6P）與ADPo前者 在葡萄糖-6-磷酸脫氫酶（G6PD）催化下脫氫，生成 6-磷酸葡萄糖酸（6PG）,同時使NADP還原成NADPH。 NADPH的生成速率與葡萄糖濃度呈正比。NADPH在波長 340nm有吸收峰，可監(jiān)測吸光度升高速率，計算血清 中葡萄糖濃度。2 .標(biāo)本：2. 1病人準(zhǔn)備：12小時禁食。2.2類型：血清或血漿（EDTA,肝素或氟化鈉），標(biāo)本 最好不要溶血。迅速分離血清或血漿，減少紅細(xì)胞糖 酵解時葡萄糖的損失。隨機(jī)收集尿樣。3.標(biāo)本存放：血清、血漿應(yīng)在血液采集1小時內(nèi)，

2、 盡早分離。加入糖分解抑制劑（NaF, KF）后的穩(wěn)定性： 1525保存可穩(wěn)定1天，48保存可穩(wěn)定7天。血 清中的葡萄糖，無溶血，無細(xì)菌污染，沒有添加的防 腐劑，在25c下可穩(wěn)定8個小時，在4c下可穩(wěn)定72 小時。尿樣應(yīng)保存在28下并盡快進(jìn)行分析。腦脊 髓液如果避免蒸發(fā)可在28c下穩(wěn)定至少5天，5天內(nèi)不檢驗的標(biāo)本應(yīng)在收集后立即儲存在-20C的條件 下。4.標(biāo)本運(yùn)輸：常溫條件下保存運(yùn)輸。標(biāo)本拒收標(biāo)準(zhǔn)：細(xì)菌污染、超時送檢的的標(biāo)本。5 .6 .試驗材料：6. 1歐泰克血糖測定試劑盒, 氏質(zhì)控品I、Ho6. 1. 1試劑組成：磷酸緩沖液，PH7. 6三磷酸腺甘(ATP)醋酸鎂NAD'己糖激酶(

3、HK)羅氏復(fù)合定標(biāo)液，羅100 mmol/L4 mmol/L10 mmol/L3 mmol/L2 25 KU/L2 75 KU/L葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(G6PD)6. 1. 2試劑準(zhǔn)備： 6. 1. 3試劑穩(wěn)定性與貯存：試劑避光保存于225,若無污染，可穩(wěn)定至失效期。試劑有效期為24個月。試劑不可冰凍。開蓋后應(yīng)避免污染。6. 1.4變質(zhì)指示：當(dāng)試劑有濁度時，表明有細(xì)菌污染, 不能繼續(xù)使用。6. 1.5注意事項：避免試劑與皮膚及粘膜接觸。6.2校準(zhǔn)品：參見生化檢驗校準(zhǔn)品和質(zhì)控品.SOP文件6 . 3質(zhì)控品：參見生化檢驗校準(zhǔn)品和質(zhì)控品.SOP文件7 .儀器：日立7060全自動生化分析儀8 .操作

4、步8. 1項目基本參數(shù)：參見7060生化分析儀項目測定參數(shù).SOP文件8 . 2儀器操作步驟：參見7060生化分析儀操作規(guī)程.SOP文件9 .檢驗結(jié)果的判斷與分析10 .質(zhì)量控制：在每一批標(biāo)本中都應(yīng)把非定值血清水平I與H質(zhì)控做為未知標(biāo)本進(jìn)行分析，以2s為質(zhì)控警告限，3s為失控限，繪制質(zhì)控圖，判斷是否在控。 質(zhì)控規(guī)則參見室內(nèi)質(zhì)控操作規(guī)程.SOP文件。11.計算方法:以用羅氏復(fù)合定標(biāo)物校準(zhǔn)儀器后，在病人結(jié)果可報告范圍內(nèi)，儀器直接報告可靠的檢測結(jié) 果，以mmol/L報告o12 .參考值范圍：（mmol/L）血清：3.9 6.1 mmol/L尿液： 24h 尿樣 <2.8mmol/day*腦脊液

5、： 成人：2. 5 4. 5 mmol/L兒童：2. 84. 5 mmol/L13 .臨床意義：檢測血清或血漿中葡萄糖主要用于糖 尿病的診斷和治療監(jiān)視，還可用于檢出新生兒低血糖 癥、排除胰島細(xì)胞癌以及評估各種疾病碳水化合物代 謝狀況。血清葡萄糖水平可能會異常高（高血糖）或 異常低（低血糖）。葡萄糖測量用于診斷和治療碳水化 合物代謝紊亂，包括糖尿病，新生兒低血糖，自發(fā)性 低血糖，郎格罕氏島細(xì)胞癌等。葡糖尿（存在葡萄糖化尿）在健康，懷孕的婦女 中很常見。妊娠葡糖尿的最主要的特征就是每天之間 或一天之中有一個顯著的變化。腦脊髓液（CSF）葡萄糖的測定幫助區(qū)別病毒性腦 膜炎與細(xì)菌性腦膜炎；細(xì)菌性腦膜炎

6、和結(jié)核性腦膜炎 中的葡萄糖值通常很低（不到的40%至50%血清葡萄 糖），病毒性腦膜炎中的葡萄糖值通常是正常的。癌性 腦膜炎（腫瘤細(xì)胞在腦膜中廣泛滲透）也使CSF葡萄 糖值在正常值以下。14 .線性范圍：血清1. 00-38. 9 mmol/L；尿液、腦 脊液 1. 11 36. 08 mmol/Lo14. 2精密度：在日立7060生化儀上用質(zhì)控液來測精 密度。結(jié)果反映了該方法的精密度。當(dāng)儀器維護(hù)，周 圍環(huán)境，干片處理和保存，質(zhì)控液的復(fù)溶以及樣品處 理等方面發(fā)生變化都會影響結(jié)果的重復(fù)性。14. 3方法學(xué)比較：14. 4靈敏度：本試劑的檢測限為L 11 mmol/Lo14. 5特異性：14. 6病人結(jié)果可報告范圍：1.11-38.9 mmol/L15.超出范結(jié)果處理：本法線性上限為38. 9mmol/Lo如果樣品中GLU濃度超出系統(tǒng)的測試線 性范圍，請按下列步驟進(jìn)行稀釋：血清、血漿或尿液 用生理鹽水稀釋，重新測試。將測試結(jié)果乘以稀釋倍 數(shù),就得到原始樣品中GLU的濃度。16.病危報警值的處理：女性及嬰兒的血糖測定值<2. 2mmo/L或者>22. 2mmol/L；男性的血糖測定值<2. 7mmo/L或>