酒精生產(chǎn)半成品質(zhì)量以及檢測(cè)方法

1、 半成品質(zhì)量及試驗(yàn)方法一、糖化醪1.技術(shù)要求：項(xiàng) 目指 標(biāo)外觀糖 Bx酸度 ml使用硫酸調(diào)酸時(shí)： 還原糖 g/100ml總 糖 g/100ml 糖 化 率 % 2. 采樣3. 糖化醪冷卻到規(guī)定溫度入發(fā)酵池前，取樣。料管取樣。3.試驗(yàn)方法3.1外觀糖3.1.1儀器婆美計(jì) 012%3.1.2 分析步驟取糖化醪濾液于100ml量筒中，用婆美計(jì)測(cè)量，查糖度溫度校正表，校正為20的糖度。3.2 酸度3.2.1原理糖化醪中的有機(jī)酸，以酚酞為指示劑，采用氫氧化鈉進(jìn)行中和滴定，其反應(yīng)式為：RCOONNaOH RCOONa H2O3.2.2試劑3.2.2.1 1%酚酞指示劑：稱取酚酞1.0克，溶于60 ml 乙

2、醇中，用水稀釋至100ml。3.2.2.2 0.1mol/l氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液。a、配制將氫氧化鈉配成飽合溶液，注入塑料瓶中，封閉放置至溶液清亮，使用前虹吸上清液。量取5ml氫氧化鈉飽和溶液，注入1000ml不含二氧化碳的水中，搖勻。b、標(biāo)定稱取于1051100C烘至恒重的基準(zhǔn)鄰苯二甲酸氫鉀0.6g(稱準(zhǔn)至0.0001g)，溶于50ml不含二氧化碳的水中，加入酚酞指示液2滴，以新制備的氫氧化鈉溶液滴定至溶液呈微紅色為終點(diǎn)。同時(shí)做空白試驗(yàn)。c、計(jì)算氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的摩爾濃度（c）按下式計(jì)算c=m÷(v-v1)×204.2÷1000 式中：c氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的摩爾濃度m

3、ol/l m基準(zhǔn)鄰苯二甲酸氫鉀的質(zhì)量 g v滴定時(shí)消耗氫氧化鈉溶液的體積 ml v1空白試驗(yàn)消耗氫氧化鈉溶液的體積 ml 204.2鄰苯二甲酸氫鉀質(zhì)量 mg3.2.3 分析步驟吸取糖化醪濾液10.0ml于250ml三角瓶中，加中性蒸餾水30ml和1%酚酞指示劑2滴，用0.1mol/l氫氧化鈉滴定至微紅色在30秒內(nèi)不消失為終點(diǎn)。3.2.4 計(jì)算以10ml試樣消耗0.1000mol/l氫氧化鈉溶液毫升數(shù)表示 酸度 = VC÷V1 ×10 ×0.1式中：V氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液體積 ml C氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度 mol/l V1試樣量 ml3.3 還原糖3.3.1 原理還原糖

4、在特定的條件下，能定量地還原斐林氏溶液中的二價(jià)銅為氧化亞銅（Cu2O）紅色沉淀，從而可以算出試樣中的還原糖含量。以次甲基蘭作指示劑，斐林氏溶液中的Cu2+氧化力比次甲基蘭強(qiáng)，當(dāng)溶液中尚有未被還原的Cu2+時(shí)，所滴入的糖液首先使未被還原的Cu2+被還原完畢，糖液才使次甲基本蘭還原為無(wú)色，即為終點(diǎn)。3.3.2 試劑3.3.2.1 斐林氏溶液配制:甲液：稱取硫酸銅（CuSO4·5H2O）69.278克，加水定容至1000ml乙液：稱取酒石酸鉀鈉346g和氫氧化鈉100g，加水溶解后，定容至1000ml3.3.2.2 0.25%葡萄糖溶液稱取于1051100C烘干至恒重（1.52小時(shí)）的無(wú)水

5、葡萄糖2.5000克，加水溶解后，定容至1000ml3.3.2.3 0.5%次甲基蘭指示劑稱取次甲基蘭0.5克，加水溶解，稀釋至100ml3.3.3 試驗(yàn)步驟3.3.3.1 吸取糖化醪濾液10ml，加水定容至250毫升，搖勻，用脫脂棉過(guò)濾備用。3.3.3.2 定糖a、預(yù)備試驗(yàn)吸取斐林氏甲、乙液各2.5毫升，于250毫升三角瓶中，加水20毫升，搖勻，置于有石棉鐵絲網(wǎng)的電爐上，加熱至沸騰，用滴定管逐滴滴入糖液，滴定時(shí)應(yīng)保持沸騰，待試液藍(lán)色即將消失時(shí)，滴入0.5%次甲基蘭2滴，試液復(fù)呈藍(lán)色，搖勻，繼續(xù)滴入糖液至藍(lán)色消失呈現(xiàn)紅色時(shí)為終點(diǎn)，全部滴定應(yīng)在3分鐘內(nèi)完成。b、正式試驗(yàn)吸取斐林氏甲、乙液各2.5

6、毫升，于250毫升三角瓶中，加水20毫升，搖勻，一次加入少于預(yù)備試驗(yàn)消耗糖液約1毫升的糖液，加熱沸騰2分鐘，加入0.5%次甲基蘭2滴，搖勻，繼續(xù)滴入糖液至藍(lán)色消失呈現(xiàn)紅色時(shí)為終點(diǎn)，自沸騰開(kāi)始應(yīng)在3分鐘內(nèi)結(jié)束。3.3.4 計(jì)算還原糖%= VM×250×100÷10×V1 式中：M滴定1毫升斐林氏液相當(dāng)?shù)钠咸烟琴|(zhì)量 g 250試樣定容體積 ml 10稱取試樣質(zhì)量 g V1滴定消耗稀釋試樣的體積 ml V滴定所用斐林氏溶液的體積ml3.4 總糖3.4.1 原理還原糖在特定的條件下，能定量地還原斐林氏溶液中的二價(jià)銅為氧化亞銅（Cu2O）紅色沉淀，從而可以算出試樣

7、中的還原糖含量。3.4.2 試劑3.4.2.1 （1：4） 硫酸溶液量取濃硫酸100毫升，沿玻璃棒慢慢導(dǎo)入400毫升水中，邊加邊攪勻。3.4.2.2 20%氫氧化鈉溶液稱取NaOH20g，加水稀釋至100毫升。3.4.2.3 斐林氏溶液見(jiàn)3.3.2.1條。3.4.2.4 0.5%次甲基蘭指示劑見(jiàn)3.3.2.3條。3.4.3 試驗(yàn)步驟3.4.3.1 稱取糖化醪試樣10ml，加水30毫升，加入濃硫酸7ml，搖勻，塞上帶有1米和玻璃管的橡皮塞，置于帶石棉網(wǎng)的電爐上加熱，至試液沸騰后開(kāi)始計(jì)時(shí)，煮沸5分鐘，立即取出冷卻，用20%氫氧化鈉溶液中和到微酸性（用PH試紙檢查），過(guò)濾于250毫升容量瓶中，用水多

8、次冼滌濾渣，定容至250毫升。3.4.3.2 定糖見(jiàn)3.3.3.2條4.4.4 計(jì)算見(jiàn)3.3.4條3.5 糖化率的計(jì)算 糖化率%= 還原糖÷總糖×1004.精密度計(jì)算數(shù)據(jù)保留一位小數(shù)，報(bào)告其結(jié)果。5.檢驗(yàn)規(guī)則每罐每班次化驗(yàn)兩次，報(bào)告其結(jié)果。二、發(fā)酵醪1.技術(shù)要求：項(xiàng) 目指 標(biāo)酒精含量 %（v/v） 還原糖 %總 糖 % 揮發(fā)酸 ml總 酸 ml 2.采樣用自制鐵筒從發(fā)酵罐中取樣。3.試驗(yàn)方法3.1 酒精份的測(cè)定3.1.1 原理利用酒精沸點(diǎn)較低、易揮發(fā)的特性，通過(guò)加熱蒸餾，將酒精-水混合蒸汽和醪液分離，再將蒸汽冷卻為液體，用酒精計(jì)測(cè)量其餾液的酒精含量。3.1.2 儀器酒精計(jì)0

9、12%3.1.3 試驗(yàn)步驟量取發(fā)酵醪100.0ml，注入500ml三角瓶中，加水100ml，將三角瓶和冷凝器連接好，注意勿使其漏氣，在電爐上加熱蒸餾，餾出液收集于100ml容量瓶或100ml量筒中，待餾出液達(dá)到刻度為止。搖勻，倒入100ml量筒中，以酒精計(jì)與溫度計(jì)同時(shí)測(cè)其酒度和溫度，然后查酒精度和溫度校正表，校正為200C時(shí)的酒度。注：有直接蒸餾法所得餾出液，通常會(huì)有微量醛、酯和揮發(fā)酸等雜質(zhì)，影響酒精讀數(shù)，可在蒸餾前加入1mol/l氫氧化鈉4ml，中和揮發(fā)酸類，以消除影響，但測(cè)定揮發(fā)酸時(shí)需另制蒸餾液。3.2 揮發(fā)酸3.2.1 原理糖化醪中的有機(jī)酸，以酚酞為指示劑，采用氫氧化鈉進(jìn)行中和滴定，其反

10、應(yīng)式為： RCOONNaOH RCOONa H2O3.2.2 試劑3.2.2.1 1%酚酞指示劑稱取酚酞1.0克，溶于60 ml 乙醇中，用水稀釋至100ml。3.2.2.2 0.1mol/l氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液。a、配制將氫氧化鈉配成飽合溶液，注入塑料瓶中，封閉放置至溶液清亮，使用前虹吸上清液。量取5ml氫氧化鈉飽和溶液，注入1000ml不含二氧化碳的水中，搖勻。b、標(biāo)定稱取于1051100C烘至恒重的基準(zhǔn)鄰苯二甲酸氫鉀0.6g(稱準(zhǔn)至0.0001g)，溶于50ml不含二氧化碳的水中，加入酚酞指示液2滴，以新制備的氫氧化鈉溶液滴定至溶液呈微紅色為終點(diǎn)。同時(shí)做空白試驗(yàn)。c、計(jì)算氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的摩

11、爾濃度（c）按下式計(jì)算 c= m÷(v-v1)×204.2×1000式中：c氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的摩爾濃度mol/l m基準(zhǔn)鄰苯二甲酸氫鉀的質(zhì)量 g v滴定時(shí)消耗氫氧化鈉溶液的體積 ml v1空白試驗(yàn)消耗氫氧化鈉溶液的體積 ml 204.2鄰苯二甲酸氫鉀摩爾濃度 mg 3.2.3 試驗(yàn)步驟吸取測(cè)定酒精份的餾液10.00ml，于250ml三角瓶中，加1%酚酞指示劑2滴，用0.1mol/l氫氧化鈉溶液滴定至微紅色在30秒內(nèi)不消失為終點(diǎn)。3.2.4 計(jì)算以10ml試樣消耗0.1mol/l氫氧化鈉溶液毫升數(shù)表示 酸度 = V C÷V1 ×10 ×

12、0.1 式中：V氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度。mol/l C氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液體積。ml V1試樣量。ml3.3 還原糖3.3.1 試劑3.3.1.1 （1：4） 硫酸溶液量取濃硫酸100毫升，沿玻璃棒慢慢導(dǎo)入400毫升水中，邊加邊攪勻。3.3.1.2 20%氫氧化鈉溶液稱取NaOH20克，加水稀釋至100毫升。3.3.1.3 斐林氏溶液見(jiàn)4.3.2.1條。3.3.1.4 0.5%次甲基蘭指示劑見(jiàn)4.3.2.3條。3.3.2 試驗(yàn)步驟3.3.2.1 取發(fā)酵醪液過(guò)濾，備用。3.3.2.2 定糖a、預(yù)備試驗(yàn)吸取斐林氏甲、乙液各2.5毫升，于250毫升三角瓶中，加水20毫升，搖勻，置于有石棉鐵絲網(wǎng)的電爐上，加

13、熱至沸騰，用滴定管逐滴滴入糖液，滴定時(shí)應(yīng)保持沸騰，待試液藍(lán)色即將消失時(shí)，滴入0.5%次甲基蘭2滴，試液復(fù)呈藍(lán)色，搖勻，繼續(xù)滴入糖液至藍(lán)色消失呈現(xiàn)紅色時(shí)為終點(diǎn)，全部滴定應(yīng)在3分鐘內(nèi)完成。b、正式試驗(yàn)吸取斐林氏甲、乙液各2.5毫升，于250毫升三角瓶中，加水20毫升，搖勻，一次加入少于預(yù)備試驗(yàn)消耗糖液約1毫升的糖液，加熱沸騰2分鐘，加入0.5%次甲基蘭2滴，搖勻，繼續(xù)滴入糖液至藍(lán)色消失呈現(xiàn)紅色時(shí)為終點(diǎn)，自沸騰開(kāi)始應(yīng)在3分鐘內(nèi)結(jié)束。3.3.3 計(jì)算 還原糖= MV÷ V1 ×100式中：V斐林氏溶液體積 ml N滴定1ml斐林氏溶液，相當(dāng)?shù)钠咸烟琴|(zhì)量 g V1消耗糖液體積 ml3

14、.4 總糖3.4.1 試劑3.4.1.1（1：4） 硫酸溶液量取濃硫酸100毫升，沿玻璃棒慢慢導(dǎo)入400毫升水中，邊加邊攪勻。3.4.1.2 20%氫氧化鈉溶液稱取NaOH20克，加水稀釋至100毫升。3.4.1.3 斐林氏溶液見(jiàn)4.3.2.1條。3.4.1.4 0.5%次甲基蘭指示劑見(jiàn)4.3.2.3條。3.4.2 試驗(yàn)步驟3.4.2.1 稱取發(fā)酵醪50ml，于250ml三角瓶中，加1：4硫酸50ml，搖勻，塞上帶有1米長(zhǎng)玻璃管的橡膠塞，置有石棉網(wǎng)的電爐上加熱，到試液沸騰開(kāi)始計(jì)時(shí)，煮沸7分鐘，立即取下冷卻，用20%氫氧化鈉溶液中和至微酸性（用PH試紙檢查），過(guò)濾于250ml容量瓶中，用水多次洗

15、滌濾渣，定容至250ml。3.4.3 計(jì)算 總糖%= MV×250 ÷50×V1×100式中：V斐林氏溶液體積 ml N滴定1ml斐林氏溶液相當(dāng)?shù)钠咸烟琴|(zhì)量 g V1滴定消耗糖液體積 ml4.精密度計(jì)算數(shù)據(jù)保留一位小數(shù)，報(bào)告其結(jié)果。5.檢驗(yàn)規(guī)則發(fā)酵醪以發(fā)酵罐為單位，發(fā)酵完畢，在送蒸餾前2小時(shí)，由酒精車間化驗(yàn)室值班化驗(yàn)員按本標(biāo)準(zhǔn)取樣化驗(yàn)。三、酒母1.技術(shù)要求項(xiàng) 目指 標(biāo)酸度 ml細(xì)胞數(shù) 億/ml芽生率 %2.取樣酒母接種前自酒母罐取糖化醪液，化驗(yàn)基礎(chǔ)酸，方法與糖化醪酸度相同。成熟酒母在出罐前攪拌均勻，取樣。取樣器具應(yīng)經(jīng)過(guò)滅菌。3.試驗(yàn)方法3.1 酸度3.1

16、.2試劑3.1.2.1 1%酚酞指示劑：稱取酚酞1.0克，溶于60 ml 乙醇中，用水稀釋至100ml。3.1.2.2 0.1mol氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液。a、配制將氫氧化鈉配成飽合溶液，注入塑料瓶中，封閉放置至溶液清亮，使用前虹吸上清液。量取5ml氫氧化鈉飽和溶液，注入1000ml不含二氧化碳的水中，搖勻。b、標(biāo)定稱取于1051100C烘至恒重的基準(zhǔn)鄰苯二甲酸氫鉀0.6g(稱準(zhǔn)至0.0001g)，溶于50ml不含二氧化碳的水中，加入酚酞指示液2滴，以新制備的氫氧化鈉溶液滴定至溶液呈微紅色為終點(diǎn)。同時(shí)做空白試驗(yàn)。c、計(jì)算氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的摩爾濃度（c）按下式計(jì)算 c= m ÷ (v-v1)

17、×204.2×1000 式中：c氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的摩爾濃度mol/l m基準(zhǔn)鄰苯二甲酸氫鉀的質(zhì)量 g v滴定時(shí)消耗氫氧化鈉溶液的體積 ml v1空白試驗(yàn)消耗氫氧化鈉溶液的體積 ml 204.2鄰苯二甲酸氫鉀摩爾濃度 mg3.1.3 分析步驟吸取糖化醪濾液1.0ml于250ml三角瓶中，加中性蒸餾水30ml和1%酚酞指示劑2滴，用0.1mol/l氫氧化鈉滴定至微紅色在30秒內(nèi)不消失為終點(diǎn)。3.1.4 計(jì)算以10ml試樣消耗0.1mol/l氫氧化鈉溶液毫升數(shù)表示 酸度 =V ÷V1 ×10 ×0.1式中：V氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度。mol/l C氫氧化

18、鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液體積。ml V1試樣量。ml3.2 細(xì)胞數(shù)3.2.1 儀器3.2.1.1 血球計(jì)有兩個(gè)計(jì)數(shù)室，每個(gè)均刻有25個(gè)大方格，每個(gè)大方格又分為16個(gè)小方格，共計(jì)400個(gè)小方格。3.2.1.2 蓋玻片3.2.1.3 顯微鏡 4001500倍3.2.2 試劑0.1%次甲基蘭溶液：稱取次甲基蘭0.1克，加水溶解，并稀釋至100ml 3.2.3 試驗(yàn)方法3.2.3.1 檢片制備取試樣1.0ml，加10%硫酸溶液定容至100ml，充分搖勻，用滴管滴入事先已將蓋玻片蓋好的血球計(jì)的凹槽間，使試液注滿計(jì)數(shù)室，用吸水紙吸出凹槽中多余試液，靜置2分鐘，置顯微鏡下用400450倍鏡頭觀察。3.2.3.2 檢查方法

19、先找出計(jì)數(shù)室，采取對(duì)角的方法，每個(gè)計(jì)數(shù)室檢查五個(gè)大格，共10個(gè)大格160個(gè)小方格，記數(shù)方法，在邊線上的細(xì)胞，數(shù)上不數(shù)下，數(shù)左不數(shù)右。3.2.4 計(jì)算細(xì)胞數(shù)（個(gè)/毫升）=a×4×106×10 式中：a平均每個(gè)小方格的酵母數(shù)，如數(shù)160個(gè)小方格時(shí)，則a= 160 4×106每毫升酒母醪相當(dāng)小格數(shù) 10試液稀釋倍數(shù)3.3 芽生率3.3.1 檢查方法在觀察酵母細(xì)胞個(gè)數(shù)時(shí)，同時(shí)觀察細(xì)胞出芽情況，芽胞小于母細(xì)胞1/2時(shí)，算為出芽細(xì)胞。3.3.2 計(jì)算 出芽率%=出芽細(xì)胞個(gè)數(shù)÷ 酵母細(xì)胞總數(shù) ×1004.精密度計(jì)算數(shù)據(jù)保留一位小數(shù)，報(bào)告其結(jié)果。5.檢驗(yàn)規(guī)則每罐酒母入、出池前由酒精車間化驗(yàn)室值班化驗(yàn)員按本標(biāo)準(zhǔn)取樣化驗(yàn)。四、蒸餾廢液中酒精含量的檢驗(yàn)1.技術(shù)要求蒸餾廢糟液中酒精份含量 0.5%0 脫水塔 0.4%0 2.取樣用一密閉容器，取蒸餾塔底廢糟液連同蒸汽進(jìn)行冷卻，備用。3.試驗(yàn)方法3.1 原理在酸性溶液中，重鉻酸鉀氧化酒精生成乙酸。 2K2Cr2O7+3C2H5OH+8H2SO43CH3COOH-2K2SO4+2Cr2(SO4)3+11H2O廢液中如有酒精存在，則重鉻酸鉀由于酒精氧化而生成的鉻離子而呈綠色，酒精含量越多，綠顏色越深，故