高中生物生物技術(shù)實(shí)踐知識(shí)點(diǎn)填空

1、選修1 生物技術(shù)實(shí)踐 導(dǎo)學(xué)提綱（一）果酒和果醋和制作果酒制作1原理：菌種，屬于核生物，新陳代謝類型，有氧時(shí)，呼吸的反應(yīng)式為：；無氧時(shí)，呼吸的反應(yīng)式為：。2條件：繁殖最適溫度，酒精發(fā)酵一般控制在。3菌種來源：4實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)流程圖挑選葡萄沖洗_果酒 果醋5實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析與評(píng)價(jià)：可通過嗅覺和品嘗初步鑒定，并用_檢驗(yàn)酒精存在。可觀察到的現(xiàn)象為（二）果醋的制作：1原理：菌種：_，屬于_核生物，新陳代謝類型為_醋酸生成反應(yīng)式是_。2條件：最適合溫度為_，需要充足的_。3菌種來源：到_或_購買。4設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)流程及操作步驟：果酒制成以后，在發(fā)酵液中加入_或醋曲，然后將裝置轉(zhuǎn)移至_0C條件下發(fā)酵，適時(shí)向發(fā)酵液中_。如果

2、沒有充氣裝置，可以將瓶蓋打開，在瓶蓋上紗布，以減少空氣中塵土污染。酶8利用微生物發(fā)酵制作果酒，該過程利用的微生物是酵母菌，其代謝類型是異養(yǎng)兼性厭氧型，與生產(chǎn)實(shí)際相關(guān)的反應(yīng)式是C6H12O6 2C2H5OH+2CO2+能量，在不滅菌的情況下，如何使酵母菌成為優(yōu)勢(shì)菌種? 將混合菌置于缺氧，酸性環(huán)境下，利用酵母菌兼性厭氧的特點(diǎn)，而絕大多數(shù)其他微生物都無法適應(yīng)這一環(huán)境受到抑制。酶9酵母菌是自然界中常見的一類真菌(1)從細(xì)胞核的結(jié)構(gòu)看，酵母菌屬于真核生物(2)酵母菌常進(jìn)行出芽生殖，在基因工程中，也常用酵母菌作為轉(zhuǎn)入基因的受體細(xì)胞，是因?yàn)榻湍妇敝晨欤z傳物質(zhì)相對(duì)少。(3)用染料使染色體著色，發(fā)現(xiàn)一酵母菌

3、細(xì)胞核中有17條染色體，該酵母菌是單倍體在自然環(huán)境中，酵母菌屬于生態(tài)系統(tǒng)中的分解者成分(4)酵母菌體內(nèi)遺傳物質(zhì)主要在細(xì)胞核上，而醋酸菌的遺傳物質(zhì)主要在擬核上選修1 生物技術(shù)實(shí)踐 導(dǎo)學(xué)提綱（二）腐乳的制作三、學(xué)習(xí)過程（一）腐乳制作的原理1腐乳的發(fā)酵有多種微生物的協(xié)同作用，其中起主要作用的是，它是一種核生物，新陳代謝類型是。2等微生物產(chǎn)生的蛋白酶可以將豆腐中的分解成小分子的和；脂肪酶可以將水解成和。3現(xiàn)代的腐乳生產(chǎn)是在嚴(yán)格的條件下，將優(yōu)良菌種直接接種在豆腐上，這樣可以避免，保證。（二）腐乳制作的實(shí)驗(yàn)流程：讓豆腐長出毛霉密封腌制。（三）實(shí)驗(yàn)材料含水量70%的豆腐，粽葉，盤子，鹽，黃酒，米酒，糖，香辛

4、料等，廣口玻璃瓶，高壓鍋。（四）實(shí)驗(yàn)步驟1將豆腐切實(shí)3cm3cm1cm若干塊2豆腐塊放在鋪有干粽葉的盤內(nèi)，每塊豆腐等距離排放，豆腐上再鋪干凈粽葉，再用保鮮膜包裹。3將平盤放在溫度為的地方，毛霉逐漸生長，大約5d后，豆腐表面叢生直立菌絲。4當(dāng)毛霉生長旺盛，呈淡黃色時(shí)，去除保鮮膜及粽葉，散熱及水分，同時(shí)散去霉味約36h。5豆腐涼透后，將豆腐間的菌絲拉斷，整齊排在容器內(nèi)，準(zhǔn)備腌制。6長滿毛霉的豆腐塊（以下稱毛坯）分層擺放，分層加鹽，并隨層高而增加，在瓶口表面鋪鹽，以防止，約腌制8d。7將黃酒、米酒和糖、香辛料等混合制成鹵湯。鹵湯酒精含量控制在為宜。8廣口玻璃瓶刷洗干凈，用高壓鍋在1000C蒸汽滅菌3

5、0min，將腐乳成坯擺入瓶中，加入鹵湯和輔料后，將瓶口用酒精燈加熱滅菌，用膠條密封，常溫下，六個(gè)月即可以成熟。6經(jīng)過微生物的發(fā)酵，豆腐中的蛋白質(zhì)被分解成小分子的和，脂肪被分解成和，因而更利于消化吸收豆腐變?yōu)楦榈倪^程中，有機(jī)物總量、有機(jī)物種類有何變化？，毛霉與豆腐之間的關(guān)系是。7長滿毛霉的豆腐塊要逐層加鹽，隨層數(shù)的加高加鹽量要，接近瓶口表面的鹽要鋪得厚一些，為什么?。【疑難點(diǎn)撥】1王致和為什么要撒許多鹽，將長毛的豆腐腌起來？鹽在該過程中起什么作用？鹽能防止雜菌污染，避免豆腐腐敗。鹽能抑制多種微生物的生長。2配制鹵湯時(shí)，一般將酒精含量控制在12%左右，過高過低都不行，為什么？酒精含量的高低與腐乳

6、后期發(fā)酵時(shí)間的長短有很大關(guān)系。酒精含量越高，對(duì)蛋白酶的抑制作用也越大，使腐乳成熟期延長；酒精含量過低，蛋白酶的活性高，加快蛋白質(zhì)的水解，雜菌繁殖快，豆腐易腐敗，難以成塊。3.豆腐坯用食鹽腌制，其作用是什么？滲透鹽分，析出水分 給腐乳以必要的咸味防止毛霉繼續(xù)生長和污染的雜菌繁殖 浸提毛霉菌絲上的蛋白酶4.腐乳在釀造后期發(fā)酵中添加多量酒液的目的是什么？防止雜菌污染以防腐與有機(jī)酸結(jié)合形成酯，由于酒中特別是黃酒中含有酵母茼，經(jīng)發(fā)酵可產(chǎn)生醇，并與有機(jī)酸結(jié)合形成酯，賦予腐乳風(fēng)味利于后期發(fā)酵5.鹵湯中香辛料的作用是什么？調(diào)味促進(jìn)發(fā)酵殺菌防腐解釋：（香辛料如花椒、大蒜、茴香中含有花椒酰胺、蒜辣素、茴香醚及茴香

7、醛等，有極強(qiáng)的殺菌力；又有良好的調(diào)味功能；香辛料成分參與發(fā)酵過程，合成復(fù)雜的酯類，使腐乳形成特有色、香、味。）6.你能利用所學(xué)的生物學(xué)知識(shí)，解釋豆腐長白毛是怎么一回事？答：豆腐上生長的白毛是毛霉的白色菌絲。嚴(yán)格地說是直立菌絲，在豆腐中還有匍匐菌絲。7.我們平常吃的豆腐，哪種適合用來做腐乳？答：含水量為70%左右的豆腐適于作腐乳。用含水量過高的豆腐制腐乳，不易成形。8.吃腐乳時(shí)，你會(huì)發(fā)現(xiàn)腐乳外部有一層致密的“皮”。這層“皮”是怎樣形成的呢？它對(duì)人體有害嗎？它的作用是什么？答：“皮”是前期發(fā)酵時(shí)在豆腐表面上生長的菌絲（匍匐菌絲），它能形成腐乳的“體”，使腐乳成形?！捌ぁ睂?duì)人體無害。選修1 生物技術(shù)

8、實(shí)踐 導(dǎo)學(xué)提綱（三）制作泡菜并檢測(cè)亞硝酸鹽含量三、學(xué)習(xí)過程選修1 生物技術(shù)實(shí)踐 導(dǎo)學(xué)提綱（四）果膠酶在果汁生產(chǎn)中的作用（一）基礎(chǔ)知識(shí)（二）實(shí)驗(yàn)操作2探究pH對(duì)果膠酶活性的影響探討加酶洗衣粉的洗滌效果三、學(xué)習(xí)過程（一）基礎(chǔ)知識(shí)（二）實(shí)驗(yàn)操作1探究普通洗衣粉和加酶洗衣粉對(duì)衣物污漬的洗滌效果（1）實(shí)驗(yàn)遵循的原則：實(shí)驗(yàn)變量為洗滌劑，設(shè)計(jì)時(shí)應(yīng)遵循原則、原則，有效地控制其他變量，如水的用量、污染物的量、所用實(shí)驗(yàn)用布的質(zhì)地大小、兩種洗衣粉的用量，攪拌及洗滌時(shí)間。（2）實(shí)驗(yàn)過程取兩只大燒杯并，用量筒分別量500mL蒸餾水放入其中，放入400C的水浴鍋保溫。將制好的污染布和洗衣粉（一組為和，另一組為和）分別放入

9、兩只燒杯中。用玻璃棒同時(shí)充分?jǐn)嚢钑r(shí)間，一段時(shí)間后攪拌可重復(fù)進(jìn)行。過相同的時(shí)間后觀察洗滌效果，探究加酶洗衣粉使用時(shí)的最適溫度。2不同種類的酶洗衣粉對(duì)同一污漬的洗滌效果（1）實(shí)驗(yàn)原理：不同種類的加酶洗衣粉所加的酶不同，而酶具有，所以對(duì)不同污漬的洗滌效果不同。11一般洗衣粉不易清除衣物上的血漬或奶漬，但加酶洗衣粉可以一般加酶洗衣粉袋子上印有以下說明：用法：洗滌前先將衣物浸于加有適量洗衣粉的水內(nèi)數(shù)小時(shí)；溫水效果最佳；切勿用60以上的水注意：切勿用于絲質(zhì)及羊毛衣料；用后徹底清洗雙手請(qǐng)根據(jù)以上資料回答有關(guān)問題：(1)該洗衣粉較易清除衣物上的血漬或奶漬，該洗衣粉加入的是什么酶?說明理由蛋白酶；因酶具有專一性

10、，血漬、奶漬的主要成分是蛋白質(zhì)，蛋白酶可將其分解 (2)為什么洗滌前需先將衣物浸于加有適量洗衣粉的水內(nèi)數(shù)小時(shí)?如何縮短衣物浸泡時(shí)間?是為了使洗衣粉中的蛋白酶充分分解衣物中的蛋白質(zhì)污漬；用溫水浸泡衣物，是因?yàn)槊傅拇呋饔眯枰m宜的溫度 (3)為什么袋上的用法指明切勿在60以上的水中使用該洗衣粉?因?yàn)闇囟冗^高會(huì)使酶失去活性 (4)試解釋為什么此洗衣粉不能用于絲質(zhì)及羊毛衣料因?yàn)榻z質(zhì)及羊毛衣料中含蛋白質(zhì)，這樣會(huì)損壞衣物 (5)試解釋為什么用后須徹底清洗雙手因?yàn)槠つw細(xì)胞中有蛋白質(zhì)，如不清洗耳恭聽雙手，會(huì)使手的皮膚受到腐蝕 課題5 DNA的粗提取與鑒定DNA的粗提取與鑒定一、提取DNA的方法提取生物大分子

11、的基本思路是 。對(duì)于DNA的粗提取而言，就是要利用 、 等在物理和化學(xué)性質(zhì)方面的差異，提取DNA，去除其他成分。1）DNA的溶解性 DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的 中溶解度不同，利用這一特點(diǎn)，選擇適當(dāng)?shù)柠}濃度就能使 充分溶解，而使雜質(zhì)沉淀，或者相反，以達(dá)到分離目的。此外，DNA不溶于 溶液，但是細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)則溶于酒精。利用這一原理，可以將DNA與蛋白質(zhì)進(jìn)一步的分離。2）DNA對(duì)酶、高溫和洗滌劑的耐受性 蛋白酶能水解 ，但是對(duì) 沒有影響。大多數(shù)蛋白質(zhì)不能忍受6080oC的高溫，而DNA在 以上才會(huì)變性。洗滌劑能夠瓦解 ，但對(duì)DNA沒有影響。3）DNA的鑒定 在 條件下，DNA遇 會(huì)被

12、染成 色，因此二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑。二、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)1）實(shí)驗(yàn)材料的選取 凡是含有 的生物材料都可以考慮，但是使用 的生物組織，成功的可能性更大。在下面的生物材料中選取適合的實(shí)驗(yàn)材料：魚卵、豬肝、菜花（花椰菜）、香蕉、雞血、哺乳動(dòng)物的紅細(xì)胞、獼猴桃、洋蔥、豌豆、菠菜、在液體培養(yǎng)基的大腸桿菌2）破碎細(xì)胞，獲取含DNA的濾液 動(dòng)物細(xì)胞的破碎比較容易，以雞血細(xì)胞為例，在雞血細(xì)胞液中加入一定量的 ，同時(shí)用 攪拌，過濾后收集濾液即可。如果實(shí)驗(yàn)材料是植物細(xì)胞，需要先用 溶解細(xì)胞膜。例如，提取洋蔥的DNA時(shí)，在切碎的洋蔥中加入一定的 和 ，進(jìn)行充分的攪拌和研磨，過濾后收集研磨液。3）去除濾液中的雜質(zhì) 4

13、）DNA的析出與鑒定 將處理后的溶液過濾，加入與濾液體積 、冷卻的 ，靜置 ，溶液中會(huì)出現(xiàn) ，這就是粗提取的DNA。用玻璃棒 攪拌，卷起絲狀物，并用濾紙吸取上面的水分。取兩支20ml的試管，各加入物質(zhì)的量濃度為 的NaCl溶液5ml，將絲狀物放入其中一支試管中，用玻璃棒攪拌，使絲狀物溶解。然后，向兩支試管中各加入4ml的 ?；旌暇鶆蚝螅瑢⒃嚬苤糜?中加熱5min，待試管冷卻后，比較兩支試管溶液顏色的變化，看看溶解有DNA的溶液是否變 。三、操作提示以血液為實(shí)驗(yàn)材料時(shí)，每100ml血液中需要加入3g ，防止 。加入洗滌劑后，動(dòng)作要 、 ，否則容易產(chǎn)生大量的泡沫，不利于后續(xù)步驟地操作。加入酒精和用

14、玻璃棒攪拌時(shí)，動(dòng)作要 ，以免 ，導(dǎo)致DNA分子不能形成絮狀沉淀。二苯胺試劑要 ，否則會(huì)影響鑒定的效果。四、結(jié)果分析與評(píng)價(jià)【疑難點(diǎn)撥】1為什么加入蒸餾水能使雞血細(xì)胞破裂？答：蒸餾水對(duì)于雞血細(xì)胞來說是一種低滲液體，水分可以大量進(jìn)入血細(xì)胞內(nèi)，使血細(xì)胞脹裂，再加上攪拌的機(jī)械作用，就加速了雞血細(xì)胞的破裂(細(xì)胞膜和核膜的破裂)，從而釋放出DNA。2加入洗滌劑和食鹽的作用分別是什么？答：洗滌劑是一些離子去污劑，能溶解細(xì)胞膜，有利于DNA的釋放；食鹽的主要成分是NaCl，有利于DNA的溶解。3如果研磨不充分，會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生怎樣的影響？答：研磨不充分會(huì)使細(xì)胞核內(nèi)的DNA釋放不完全，提取的DNA量變少，影響實(shí)驗(yàn)

15、結(jié)果，導(dǎo)致看不到絲狀沉淀物、用二苯胺鑒定不顯示藍(lán)色等。4此步驟獲得的濾液中可能含有哪些細(xì)胞成分？答：可能含有核蛋白、多糖和RNA等雜質(zhì)。5為什么反復(fù)地溶解與析出DNA，能夠去除雜質(zhì)？答：用高鹽濃度的溶液溶解DNA，能除去在高鹽中不能溶解的雜質(zhì)；用低鹽濃度使DNA析出，能除去溶解在低鹽溶液中的雜質(zhì)。因此，通過反復(fù)溶解與析出DNA，就能夠除去與DNA溶解度不同的多種雜質(zhì)。6方案二與方案三的原理有什么不同？答：方案二是利用蛋白酶分解雜質(zhì)蛋白，從而使提取的DNA與蛋白質(zhì)分開；方案三利用的是DNA和蛋白質(zhì)對(duì)高溫耐受性的不同，從而使蛋白質(zhì)變性，與DNA分離。DNA的溶解度與NaCl溶液濃度的關(guān)系：當(dāng)NaC

16、l溶液濃度低于0.14mol/L時(shí)，隨濃度的升高，DNA的溶解度降低；當(dāng)NaCl溶液濃度高于0.14mol/L時(shí)，隨濃度升高，DNA的溶解度升高。制備雞血細(xì)胞液時(shí)，要在新鮮的雞血中加入檸檬酸鈉的原因制備雞血細(xì)胞液時(shí)，要在新鮮的雞血中加入抗凝劑檸檬酸鈉，防止血液凝固。其原理是檸檬酸鈉能與血漿中Ca2+發(fā)生反應(yīng)，生成檸檬酸鈣絡(luò)合物，血漿中游離的Ca2+大大減少，血液便不會(huì)凝固，因?yàn)殡u血紅細(xì)胞，白細(xì)胞都有細(xì)胞核，DNA主要存在于細(xì)胞核中，所以在離心或靜置沉淀后，要棄出上層清液血漿。9提取DNA的第一步是材料的選取，其目的是一定要選取DNA含量較高的生物材料，否則會(huì)由于實(shí)驗(yàn)過程中或多或少的損失而造成檢

17、測(cè)的困難；第二步是DNA的釋放和溶解，這一步是實(shí)驗(yàn)成功與否的關(guān)鍵，要盡可能使細(xì)胞內(nèi)的DNA全部溶解；第三步是DNA的純化，即根據(jù)DNA的溶解特性、對(duì)酶及高溫的耐受性的不同等特性，最大限度地將DNA與雜質(zhì)分開；最后一步是對(duì)DNA進(jìn)行鑒定，這是對(duì)整個(gè)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果的檢測(cè)。10在DNA的析出的步驟中用到玻璃棒攪拌時(shí)，注意動(dòng)作要輕緩，以免加劇DNA分子的斷裂，導(dǎo)致DNA分子不能形成絮狀沉淀。11盛放雞血細(xì)胞液的容器，最好是塑料容器。雞血細(xì)胞破碎以后釋放出的DNA，容易被玻璃容器吸附，由于細(xì)胞內(nèi)DNA的含量本來就比較少，再被玻璃容器吸附去一部分，提取到的DNA就會(huì)更少。因此，實(shí)驗(yàn)過程中最好使用塑料的燒杯和試

18、管，這樣可以減少提取過程的DNA的損失。血紅蛋白的提取和分離基礎(chǔ)知識(shí)1凝膠色譜法凝膠色譜法也稱做 ，是根據(jù) 分離蛋白質(zhì)的有效方法。凝膠實(shí)際上是一些由 構(gòu)成的多孔球體，在小球體內(nèi)部有許多貫穿的通道，相對(duì)分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)分子通過凝膠時(shí)速度不同，相對(duì)分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì) 進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，路程 ，移動(dòng)速度 ；而相對(duì)分子質(zhì)量 的蛋白質(zhì)無法進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，只能在 移動(dòng)，路程 ，移動(dòng)速度 。相對(duì)分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)分子因此得以分離。2緩沖溶液緩沖溶液的作用是 。緩沖溶液通常由 溶解于水中配制而成的。生物體內(nèi)進(jìn)行的各種生物化學(xué)反應(yīng)都是在一定的pH下進(jìn)行的，例如：血漿的pH是 ，要在實(shí)驗(yàn)條件下準(zhǔn)確模

19、擬生物體內(nèi)的過程，必須保持體外的pH與體內(nèi)的基本一致。3電泳電泳是指 。許多重要的生物大分子，如多肽、核酸等都具有可解離的基團(tuán)，在一定的pH下，這些基團(tuán)會(huì)帶上 。在電場(chǎng)的作用下，這些帶電分子會(huì)向著與其所帶電荷 的電極移動(dòng)。電泳利用了待分離樣品中各分子 以及分子本身的 、 的不同，使帶電分子產(chǎn)生不同的 ，從而實(shí)現(xiàn)樣品中各種分子的分離。兩種常用的電泳方法是 和 ，在測(cè)定蛋白質(zhì)分子量時(shí)通常使用 。蛋白質(zhì)在聚丙烯酰胺凝膠中的遷移率取決于 以及 等因素。4蛋白質(zhì)的提取和分離蛋白質(zhì)的提取和分離一般分為四步： 、 、 和 。5樣品處理血液由 和 組成，其中紅細(xì)胞最多。紅細(xì)胞具有 的特點(diǎn)。紅細(xì)胞中有一種非常重

20、要的蛋白質(zhì) ，其作用是 ，血紅蛋白有 個(gè)肽鏈組成，包括 ，其中每條肽鏈環(huán)繞一個(gè) ，磁基團(tuán)可攜帶 。血紅蛋白因含有 呈現(xiàn)紅色。紅細(xì)胞的洗滌 洗滌紅細(xì)胞的目的是 ，采集的血樣要及時(shí)采用 分離紅細(xì)胞，然后用膠頭吸管吸出上層透明的 ，將下層暗紅色的 倒入燒杯，再加入 ，緩慢攪拌 ，低速短時(shí)間離心，如此重復(fù)洗滌三次，直至 ，表明紅細(xì)胞已洗滌干凈。血紅蛋白的釋放 在 和 作用下，紅細(xì)胞破裂釋放出血紅蛋白。分離血紅蛋白溶液 將攪拌好的混合溶液離心后，試管中的溶液分為4層。第一層為無色透明的 ，第2層為白色薄層固體，是 ，第3層是紅色透明液體，這是 ，第4層是其他雜質(zhì)的暗紅色沉淀物。將試管中的液體用濾紙過濾，

21、除去之溶性沉淀層，于分液漏斗中靜置片刻后，分出下層的紅色透明液體。透析 取1mL的血紅蛋白溶液裝入 中，將透析袋放入盛有300mL的物質(zhì)的量的濃度為20mmol/L的 中，透析12h。透析可以去除樣品中 的雜質(zhì)，或用于更換樣品的 。6凝膠色譜操作第一步要制作 ，第二步要 ，因?yàn)?，所以裝柱前需要根據(jù)色譜柱的內(nèi)體積計(jì)算所需要的凝膠量。在裝填凝膠柱時(shí)，不得有 存在。因?yàn)闅馀輹?huì) ，降低分離效果。第三步是 。疑難點(diǎn)撥1凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)的原理凝膠色譜法也稱為分配色譜法，它是根據(jù)分子量的大小分離蛋白質(zhì)的方法之一。所用的凝膠實(shí)際上是一些微小的多孔球體，這些小球體大多數(shù)是由多糖類化合物構(gòu)成，小球體內(nèi)部有許

22、多貫穿的通道，當(dāng)一個(gè)含有各種分子的樣品溶液緩慢流經(jīng)時(shí)，各分子在色譜柱內(nèi)進(jìn)行兩種不同的運(yùn)動(dòng)，即垂直向下的運(yùn)動(dòng)和無規(guī)則的擴(kuò)散運(yùn)動(dòng)，相對(duì)分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)分子不能進(jìn)入凝膠顆粒內(nèi)部，只能分布在顆粒之間，通過的路程較短，移動(dòng)速度較快；相對(duì)分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)分子比較容易進(jìn)入凝膠內(nèi)的通道，通過的路程較長，移動(dòng)速度較慢。因此，樣品中相對(duì)分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)先流出，相對(duì)分子質(zhì)量中等的分子后流出，相對(duì)分子質(zhì)量最小的分子最后流出，這種現(xiàn)象又叫分子篩現(xiàn)象。此外，凝膠本身具有三維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，相對(duì)分子質(zhì)量大的分子通過這種網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)上的空襲時(shí)阻力大，而相對(duì)分子質(zhì)量小的分子通過時(shí)阻力小，因此不同分子量的蛋白質(zhì)分子可以獲得分離

23、。2與其他真核細(xì)胞相比，紅細(xì)胞的特點(diǎn)及這一特點(diǎn)對(duì)進(jìn)行蛋白質(zhì)的分離的意義哺乳動(dòng)物及人的成熟的紅細(xì)胞是雙面凹圓餅狀，沒有細(xì)胞核和細(xì)胞器。其含有的血紅蛋白是有色蛋白，因此在凝膠色譜分離時(shí)可以通過觀察顏色來判斷什么時(shí)候應(yīng)該收集脫液。這使血紅蛋白的分離過程非常直觀，大大簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)操作。3電泳的作用及其原理電泳是指帶電粒子在電場(chǎng)的作用下發(fā)生遷移的過程。許多重要的生物大分子，如氨基酸、多肽、蛋白質(zhì)、核苷酸、核酸等都具有可解離基團(tuán)，它們?cè)谀硞€(gè)特定的pH下會(huì)帶上正電或負(fù)電；在電場(chǎng)的作用下，這些帶電分子會(huì)向著與其所帶電荷相反的電極方向移動(dòng)。電泳技術(shù)就是在電場(chǎng)的作用下，利用待分離樣品中各種分子帶電性質(zhì)以及分子本身大

24、小、形狀等性質(zhì)的差異，使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速度，從而達(dá)到對(duì)樣品進(jìn)行分離、鑒定或提純的目的。4.你能從凝膠色譜的分離原理分析為什么凝膠的裝填要緊密、均勻嗎？答：凝膠實(shí)際上是一些微小的多孔球體，小球體內(nèi)部有許多貫穿的通道。相對(duì)分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)分子不能進(jìn)入凝膠顆粒內(nèi)部，只能分布在顆粒之間，通過的路程較短，移動(dòng)速度較快；相對(duì)分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)分子比較容易進(jìn)入凝膠內(nèi)的通道，通過的路程較長，移動(dòng)速度較慢。因此，樣品中相對(duì)分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)先流出，相對(duì)分子質(zhì)量中等的分子后流出，相對(duì)分子質(zhì)量最小的分子最后流出，從而使各種相對(duì)分子質(zhì)量不同的分子得以分離。如果凝膠裝填得不夠緊密、均勻，就會(huì)在色譜柱內(nèi)形

25、成無效的空隙，使本該進(jìn)入凝膠內(nèi)部的樣品分子從這些空隙中通過，攪亂洗脫液的流動(dòng)次序，影響分離的效果。菊花組織培養(yǎng)要點(diǎn)1植物組織培養(yǎng)的理論基礎(chǔ)當(dāng)植物細(xì)胞脫離了原來所在植物體的器官或組織而處于離體狀態(tài)時(shí)，在一定的營養(yǎng)物質(zhì)、激素和其他外界條件的作用下，就可能表現(xiàn)出全能性，發(fā)育成完整的植株（即細(xì)胞全能性）。要點(diǎn)2植物組織培養(yǎng)的基本過程（1）基本過程離體的植物組織、器官或細(xì)胞離體的植物組織、器官或細(xì)胞組織培養(yǎng)脫分化愈傷組織組織培養(yǎng)再分化試管苗人為使用植物激素控制（2）基本概念細(xì)胞分化：植物的個(gè)體發(fā)育過程中，細(xì)胞在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和生理功能上都會(huì)出現(xiàn)穩(wěn)定性的差異，形成這些差異的過程叫做細(xì)胞分化。愈傷組織：離體的植

26、物組織或細(xì)胞，培養(yǎng)一段時(shí)間后，會(huì)通過細(xì)胞有絲分裂，形成愈傷組織。愈傷組織的細(xì)胞排列疏松而無規(guī)則，是一種高度液泡化的呈無定形狀態(tài)的薄壁細(xì)胞。脫分化（去分化）：由高度分化的植物組織或細(xì)胞產(chǎn)生愈傷組織的過程，稱為植物細(xì)胞的脫分化，或者叫做去分化。再分化：脫分化產(chǎn)生的愈傷組織繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)，又可以重新分化成根或芽等器官，這個(gè)過程叫做再分化。（3）植物體細(xì)胞發(fā)育成完整植株（表現(xiàn)出全能性）的條件。脫離原來所在植物體（離體）、營養(yǎng)供給、激素控制、無菌條件、適宜的溫度、PH和光照等。要點(diǎn)3影響植物組織培養(yǎng)的因素（1）材料因素的影響不同的植物組織，培養(yǎng)的難易程度差別很大，容易進(jìn)行無性繁殖的植物也容易進(jìn)行組織培養(yǎng)。

27、同一種植物材料，材料的年齡、保存時(shí)間的長短也有影響。幼齡、保存時(shí)間短的植物材料容易培養(yǎng)成功。菊花的組織培養(yǎng)，一般選擇未開花植株的莖上部新萌生的側(cè)芽。（2）營養(yǎng)因素的影響需要配置適宜的培養(yǎng)基，常用的一種培養(yǎng)基是 MS培養(yǎng)基，其主要成分包括：大量元素，如N、P、K、Ca、Mg、S；微量元素，如B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co；有機(jī)物，如甘氨酸、煙酸、肌醇、維生素，以及蔗糖等。（3）激素的影響在配置好的MS培養(yǎng)基中，常常需要添加植物激素。植物激素中生長素和細(xì)胞分裂素是啟動(dòng)細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵性激素。植物激素的濃度、使用的先后順序以及用量的比例等，都會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。按照不同的順序使

28、用這兩類激素，會(huì)得到不同的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。使用順序?qū)嶒?yàn)結(jié)果先使用生長素，后使用細(xì)胞分裂素有利于細(xì)胞分裂，但細(xì)胞不分化先使用細(xì)胞分裂素，后使用生長素細(xì)胞既分裂又分化同時(shí)使用分化率提高當(dāng)同時(shí)使用這兩類激素時(shí)，兩者用量的比例影響植物細(xì)胞的發(fā)育方向。生長素用量比細(xì)胞分裂素用量植物細(xì)胞的發(fā)育方向比值高時(shí)有利于根的分化、抑制芽的形成比值低時(shí)有利于芽的分化、抑制根的形成比值適中時(shí)促進(jìn)愈傷組織的生長（4）pH、溫度、光照等條件的影響不同的植物對(duì)各種條件的要求往往不同。進(jìn)行菊花的組織培養(yǎng)，一般將pH控制在5.8左右，溫度控制在1822，并且每日用日光燈照射12h。要點(diǎn)4植物組織培養(yǎng)技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)植物組織培養(yǎng)技術(shù)可以實(shí)現(xiàn)優(yōu)

29、良品種的快速繁殖，保持遺傳性狀的一致；可以實(shí)現(xiàn)花卉的連續(xù)生產(chǎn)，不受開花季節(jié)的限制。課題2 月季的花藥培養(yǎng)【導(dǎo)學(xué)誘思】被子植物的花粉發(fā)育被子植物花粉的發(fā)育要經(jīng)歷 、 和 等階段。花粉是由花粉母細(xì)胞經(jīng)過 而形成的，因此花粉是 。產(chǎn)生花粉植物的兩種途徑花藥中的花粉花藥中的花粉花藥中的花粉花藥中的花粉 叢芽叢芽 誘導(dǎo)生根移栽脫分化脫分化 思考：（1）花藥培養(yǎng)產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑的差別主要取決于什么？（2）什么是體細(xì)胞胚？（3）單倍體性細(xì)胞產(chǎn)生的花粉胚，也可發(fā)育成為單倍體植株，這和植物的體細(xì)胞克隆有區(qū)別嗎？影響花藥培養(yǎng)的因素誘導(dǎo)花粉植株能否成功及誘導(dǎo)成功率的高低，受多種因素影響，其中 與 是主要的影響

30、因素； 也是提高誘導(dǎo)成功率的重要因素；另外親本植株的生長條件、 以及 等對(duì)誘導(dǎo)成功率都有一定影響。思考：（1）為什么選擇合適的花粉發(fā)育期是誘導(dǎo)花藥培養(yǎng)成功率的重要因素？（2）為什么花藥的培養(yǎng)要選擇完全未開放的花蕾？實(shí)驗(yàn)操作材料的選取 選擇花藥時(shí)，一般要通過 來確定其中的花粉是否處于適宜的發(fā)育期。確定花粉發(fā)育時(shí)期的方法有 和 。（2）材料的消毒 ：材料消毒過程中用的0.1%的氯化汞溶液,實(shí)驗(yàn)完畢應(yīng)如何處理?（3）接種和培養(yǎng)：剝離花藥時(shí)，應(yīng)注意哪些問題？花藥培養(yǎng)過程中應(yīng)注意哪些問題？【疑難點(diǎn)撥】1為什么花瓣松動(dòng)會(huì)給材料的消毒帶來困難？花瓣松動(dòng)后，微生物就可能侵入到花藥，給材料的消毒帶來困難。2植物

31、組織培養(yǎng)技術(shù)與花藥培養(yǎng)技術(shù)有何區(qū)別？相同之處：培養(yǎng)基的配制方法、無菌技術(shù)及接種操作等基本相同。不同之處：花藥培養(yǎng)的選材非常重要，需事先摸索時(shí)期適宜的花蕾；花藥裂開后釋放出的愈傷組織或胚狀體也要及時(shí)更換培養(yǎng)基；花北培養(yǎng)對(duì)培養(yǎng)基配方的要求更為嚴(yán)格。這些都使花藥的培養(yǎng)難度加大。生物技術(shù)在食品加工及其他方面的應(yīng)用（10新課標(biāo)）37【生物選修模塊1：生物技術(shù)實(shí)踐】(15分)下列是與芳香油提取相關(guān)的問題，請(qǐng)回答：（1）玫瑰精油適合用水蒸氣蒸餾法提取，其理由是玫瑰精油具有 的性質(zhì)。蒸餾時(shí)收集的蒸餾液 (是、不是)純的玫瑰精油，原因是 。（2）當(dāng)蒸餾瓶中的水和原料量一定時(shí)，蒸餾過程中，影響精油提取量的主要因素

32、有蒸餾時(shí)間和 。當(dāng)原料量等其他條件一定時(shí)，提取量隨蒸餾時(shí)間的變化趨勢(shì)是 。（3）如果蒸餾過程中不進(jìn)行冷卻，則精油提取量會(huì) ，原因是 。（4）密封不嚴(yán)的瓶裝玫瑰精油保存時(shí)最好存放在溫度 的地方，目的是 。（5）某植物花中精油的相對(duì)含量隨花的不同生長發(fā)育時(shí)期的變化趨勢(shì)如圖所示。提取精油時(shí)采摘花的最合適時(shí)間為 天左右。(6)從薄荷葉中提取薄荷油時(shí) (能、不能)采用從玫瑰花中提取玫瑰精油的方法，理由是 。【答案】易揮發(fā)、難溶于水、化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定；不是；玫瑰精油隨水蒸氣一起蒸餾出來，所得到的是油水混合物；（2）蒸餾溫度 在一定時(shí)間內(nèi)提取量隨蒸餾時(shí)間的延長而增加，一定時(shí)間后提取量不再增加；（3）下降 部分精

33、油會(huì)隨水蒸氣揮發(fā)而流失；（4）較低 減少揮發(fā)；（5）a；（6）能 薄荷油和玫瑰精油的化學(xué)性質(zhì)相似【解析】植物芳香油的提取方法有蒸餾、壓榨和萃取等，具體采用哪種方法要根據(jù)植物原料的特點(diǎn)來決定。而水蒸氣蒸餾法是植物芳香油提取的常用方法，它的原理是利用水蒸氣將揮發(fā)性較強(qiáng)的植物芳香油攜帶出來，形成油水混合物，冷卻后，混合物又會(huì)重新分出油層和水層。玫瑰精油的化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，難溶于水，易溶于有機(jī)溶劑，能隨水蒸氣一同蒸餾，所以次用水蒸氣蒸餾法提取。【評(píng)析】選修I沒有考微生物的培養(yǎng)部分的內(nèi)容，有點(diǎn)意外，也有點(diǎn)情理之中的事情，在與一些老師交流的時(shí)候，很多老師都把重點(diǎn)放在了微生物部分上，而高考就是這樣的讓你抓不住，

34、越是認(rèn)為能考的，就越可能不考。精油的提取是我的老本行，大學(xué)的畢業(yè)論文寫的就是杜香餾液制取和利用，而對(duì)于學(xué)生來說，選修I的內(nèi)容考的可不簡(jiǎn)單。（10新課標(biāo)）38生物選修模塊3：現(xiàn)代生物科技專題(15分)請(qǐng)回答：（1）植物微型繁殖技術(shù)屬于植物組織培養(yǎng)的范疇。該技術(shù)可以保持品種的 ，繁殖種苗的速度 。離體的葉肉細(xì)胞在適宜的條件下培養(yǎng)，最終能夠形成完整的植株，說明該葉肉細(xì)胞具有該植物的全部 。(2)把試管苗轉(zhuǎn)接到新的培養(yǎng)基上時(shí)，需要在超凈工作臺(tái)上進(jìn)行，其原因是避免 的污染。（3）微型繁殖過程中，適宜濃度的生長素單獨(dú)使用可誘導(dǎo)試管苗 ，而與 配比適宜時(shí)可促進(jìn)芽的增殖。若要抑制試管苗的生長，促使愈傷組織產(chǎn)生

35、和生長，需尊使用的生長調(diào)節(jié)劑是 (脫落酸、2，4-D)。（4）將某植物試管苗培養(yǎng)在含不同濃度蔗糖的培養(yǎng)基上一段時(shí)間后，單株鮮重和光合作用強(qiáng)度的變化如圖。據(jù)圖分析，隨著培養(yǎng)基中蔗糖濃度的增加，光合作用強(qiáng)度的變化趨勢(shì)是 ，單株鮮重的變化趨勢(shì)是 。據(jù)圖判斷，培養(yǎng)基中不含蔗糖時(shí)，試管苗光合作用產(chǎn)生的有機(jī)物的量 (能、不能)滿足自身最佳生長的需要。(5)據(jù)圖推測(cè)，若要在誘導(dǎo)試管苗生根的過程中提高其光合作用能力，應(yīng) (降低，增加)培養(yǎng)基中蔗糖濃度，以便提高試管苗的自養(yǎng)能力。【答案】遺傳性、快、遺傳信息；（2）微生物；（3）下生根、細(xì)胞分裂素、2,4-D；（4）逐漸減小 先增加后下降、不能；（5）降低【解析

36、】植物組織培養(yǎng)技術(shù)是利用植物細(xì)胞全能性的原理進(jìn)行的，是植物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)。在操作過程應(yīng)注意無菌操作，避免雜菌污染，因?yàn)榕囵B(yǎng)過程中使用的培養(yǎng)基營養(yǎng)物質(zhì)豐富，適宜濃度的生長素可以誘導(dǎo)試管苗生根，而如果要促進(jìn)愈傷組織形成芽，則需要與細(xì)胞分裂素配比，促進(jìn)愈傷組織產(chǎn)生和生長，應(yīng)使用2,4-D?！驹u(píng)析】本題考查了組織培養(yǎng)的技術(shù)。需要學(xué)生對(duì)選修的內(nèi)容有一定的了解和和熟悉。（10北京卷）1.在家庭中用鮮葡萄制作果酒時(shí)，正確的操作是讓發(fā)酵裝置接受光照 給發(fā)酵裝置適時(shí)排氣向發(fā)酵裝置通入空氣 酵母菌裝置放在45處答案B【考點(diǎn)直擊】本題考查果酒制作的知識(shí)。此考點(diǎn)在高考中出現(xiàn)的次數(shù)較少?！疽c(diǎn)透析】在無氧條件下，酵母菌

37、能進(jìn)行酒精發(fā)酵，發(fā)酵裝置不需要接受光照，發(fā)酵時(shí)也不能通入空氣，一般將發(fā)酵溫度控制在1825。（2010山東高考理綜）34. 【生物生物技術(shù)實(shí)踐】生物柴油是一種可再生的清潔能源，其應(yīng)用在一定程度上能夠減緩人類對(duì)化石燃料的消耗，科學(xué)家發(fā)現(xiàn)，在微生物M產(chǎn)生的脂肪酶作用下，植物油與甲醇反應(yīng)能夠合成生物柴油（如下圖）。用于生產(chǎn)生物柴油的植物油不易發(fā)揮，宜選用_、_方法從油料作物中提取。（2）篩選產(chǎn)脂肪酶的微生物M時(shí)，選擇培養(yǎng)基中的添加的植物油為微生物生長提供_，培養(yǎng)基滅菌采用的最適方法是_法。（3）測(cè)定培養(yǎng)液中微生物數(shù)量，可選用_法直接計(jì)數(shù)；從微生物M分離提取的脂肪酶通常需要檢測(cè)_，以確定其應(yīng)用價(jià)值；為降低生物柴油生產(chǎn)技術(shù)，可利用_技術(shù)使脂肪酶能夠重復(fù)使用。（4）若需克隆脂肪酶基因，可應(yīng)用耐熱DNA聚合酶催化的_技術(shù)。【答案】（1） 壓榨；萃取（注：兩空順序無先后） （2）碳源 高壓蒸汽滅菌 （3）