腎臟病電子顯微鏡檢查課件

腎臟病電子顯微鏡檢查Shenzangbingxue1可編輯課件PPT主要內(nèi)容◎電子顯微鏡概述◎腎臟于電鏡下觀察的主要內(nèi)容◎腎小球正常的超微結(jié)構(gòu)及其常見(jiàn)病理改變◎常見(jiàn)幾種原發(fā)性腎小球疾病的電鏡表現(xiàn)◎其他腎小球疾病的特征性電鏡下表現(xiàn)◎

腎臟病電鏡檢查的意義2可編輯課件PPT電子顯微鏡（EM）?

電子顯微鏡是根據(jù)電子光學(xué)原理，用電子束和電子透鏡代替光束和光學(xué)透鏡，使物質(zhì)的細(xì)微結(jié)構(gòu)在非常高的放大倍數(shù)下成像的儀器。?

20世紀(jì)70年代，透射式電子顯微鏡的分辨率約為0.3納米（人眼的分辨本領(lǐng)約為0.2毫米）。?

現(xiàn)在電子顯微鏡最大放大倍率超過(guò)300萬(wàn)倍，而光學(xué)顯微鏡的最大放大倍率約為2000倍。3可編輯課件PPT光學(xué)顯微鏡與電子顯微鏡比較4可編輯課件PPT電鏡技術(shù)應(yīng)用的進(jìn)展√電鏡誕生于30年代初,但直到60年代以前,電鏡在生物醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用主要限于細(xì)胞生物學(xué)、微生物、實(shí)驗(yàn)病理學(xué)等研究領(lǐng)域。60年代初期人們開(kāi)始將電子顯微鏡應(yīng)用于人體病理標(biāo)本,通過(guò)對(duì)這些人體病理標(biāo)本的超微結(jié)構(gòu)分析,進(jìn)一步了解了疾病的病理變化及其發(fā)生機(jī)制,為某些疾病的診斷提供重要的形態(tài)依據(jù)?！屉娮语@微鏡在腎活檢診斷、疑難腫瘤的病理診斷、感染性疾病(病毒性,細(xì)菌性等)、代謝性疾病(貯積性疾病)、細(xì)胞外物質(zhì)沉積性疾病(如淀粉樣變性)、組織細(xì)胞增生癥(郎格罕細(xì)胞增生性疾病)、纖毛不能運(yùn)動(dòng)綜合征等特殊疾病的診斷中公認(rèn)起著重要的作用。5可編輯課件PPT診斷電鏡學(xué)腫瘤診斷病毒診斷腎活檢心肌活檢肝活檢肌肉活檢遺傳性疾病電子顯微鏡在醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究超微結(jié)構(gòu)學(xué)超微病理學(xué)電鏡細(xì)胞活血免疫電鏡定性定量研究交叉學(xué)科（醫(yī)工結(jié)合）研究納米醫(yī)藥新技術(shù)6可編輯課件PPT電鏡的分類(lèi)

1.透射電鏡（超高壓電子顯微鏡、高壓電子顯微鏡、高分辨率電子顯微鏡、普及型電子顯微鏡、簡(jiǎn)易型電子顯微鏡）：電子束透過(guò)樣品（透射電子）直接放大成像→內(nèi)部結(jié)構(gòu)2.掃描電鏡：電子束以?huà)呙栊问睫Z擊在樣品上，產(chǎn)生二次電子等信息，而后再將二次電子等信息收集起來(lái)放大成像?！砻娉⒔Y(jié)構(gòu)3.分析電子顯微鏡：將X射線(xiàn)和顯微分析儀與掃描電鏡或透射電鏡相連，常見(jiàn)的是能譜儀和波譜儀。★免疫電鏡：是免疫組織化學(xué)與透射電鏡相結(jié)合的方法。7可編輯課件PPT透射電子顯微鏡（TEM，TransmissionElectronMicroscope）?TEM是以電子束為照明源，電子束穿透樣品，在穿過(guò)樣品時(shí)電子束被標(biāo)上了樣品的信息，經(jīng)多級(jí)放大后在熒光屏上成像的大型儀器。產(chǎn)生的圖像是平面的，它要求樣品極薄，因此樣品必須備成50-70nm的超薄切片。TEM成像原理→8可編輯課件PPT掃描電子顯微鏡（SEM，ScanningElectronMicroscope）?SEM是利用電子束在樣品表面掃描激發(fā)出來(lái)代表樣品表面特征的信號(hào)成像的。主要用來(lái)作微形貌觀察、顯微成分分析。分辨率可達(dá)到1nm，放大倍數(shù)可達(dá)5×105倍。SEM成像原理→9可編輯課件PPTTEM樣品制備取材固定（戊二醛和鋨酸）脫水浸透、包埋超薄切片染色（枸櫞酸鉛和醋酸鈾）SEM樣品制備取材、固定、干燥和噴金不需要經(jīng)過(guò)超薄切片10可編輯課件PPT腎單位基本結(jié)構(gòu)及功能單位腎單位腎小球腎小管：由單層上皮細(xì)胞組成。毛細(xì)血管叢腎球囊：壁層上皮內(nèi)皮細(xì)胞基底膜臟層上皮細(xì)胞（足細(xì)胞）系膜系膜基質(zhì)系膜細(xì)胞外疏松層致密層內(nèi)疏松層濾過(guò)屏障11可編輯課件PPT腎臟于電鏡下觀察的主要內(nèi)容腎活檢穿刺取材的部位應(yīng)是腎皮質(zhì)，包埋組織塊先做半薄切片光鏡定位，為了避免片面性，每例標(biāo)本電鏡觀察至少2個(gè)以上的腎小球。鏡下觀察的主要內(nèi)容包括：腎小球的大小，球內(nèi)細(xì)胞數(shù)，內(nèi)皮細(xì)胞、系膜細(xì)胞及上皮細(xì)胞（臟層及壁層）的形態(tài)變化，毛細(xì)血管腔的大小，基膜形態(tài)及厚度，系膜基質(zhì)及系膜區(qū)的變化，電子致密物的形態(tài)、大小和沉積物的部位等。12可編輯課件PPT1.內(nèi)皮細(xì)胞：為有窗孔的內(nèi)皮，直徑70~100nm，窗孔總面積約占腎小球總濾過(guò)面積的60%，內(nèi)皮細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)有豐富的微絲和微管。一個(gè)毛細(xì)血管腔通常只見(jiàn)1~2個(gè)內(nèi)皮細(xì)胞。2.基底膜：位于內(nèi)皮細(xì)胞和足細(xì)胞之間，由中間的致密層和兩側(cè)電子密度較低的內(nèi)外疏松層構(gòu)成。正常厚度均勻一致，成人為270~350nm，兒童較薄，約110nm，主要功能是保證毛細(xì)血管壁的完整性和一定的通透性。3.臟層上皮細(xì)胞：貼伏于基底膜外側(cè)，因其胞質(zhì)伸出許多足突，故又稱(chēng)“足細(xì)胞”。為腎小球內(nèi)細(xì)胞中最大的細(xì)胞，核也大，胞質(zhì)內(nèi)具豐富的微絲、微管及中間絲。正常腎小球的超微結(jié)構(gòu)13可編輯課件PPT4.系膜：由系膜細(xì)胞和系膜基質(zhì)組成，位于腎小球毛細(xì)血管袢的中央部分。一個(gè)系膜區(qū)一般有1~2個(gè)系膜細(xì)胞，其外形不規(guī)則，表面多長(zhǎng)短不一的突起，個(gè)別較長(zhǎng)的突起可伸到內(nèi)皮細(xì)胞下，核形不規(guī)則，核內(nèi)異染色質(zhì)較多，胞質(zhì)電子密度亦較高。5.壁層上皮細(xì)胞：在尿極與近曲小管處，上皮細(xì)胞延續(xù)，在血管極返折，與臟層上皮細(xì)胞延續(xù)，多為立方或扁平狀，表面少許短小微絨毛，胞質(zhì)內(nèi)細(xì)胞器較少。14可編輯課件PPT15可編輯課件PPT腎小球基本超微病理改變（一）濾過(guò)膜的超微病理改變1.內(nèi)皮細(xì)胞

內(nèi)皮細(xì)胞增生：每個(gè)毛細(xì)血管壁出現(xiàn)兩個(gè)以上內(nèi)皮細(xì)胞的核則為增生，同時(shí)還可以伴隨有其他超微結(jié)構(gòu)的改變，多見(jiàn)于毛細(xì)血管內(nèi)增生性腎小球腎炎、妊娠期腎病等。

內(nèi)皮性泡沫細(xì)胞：胞質(zhì)內(nèi)含大量脂滴，使細(xì)胞成泡沫狀，光鏡下呈泡沫樣改變。多見(jiàn)于高脂血癥、糖尿病、腎病綜合征。16可編輯課件PPT2.基底膜：有助于腎小球疾病的診斷和分型。a.均質(zhì)性增厚：可見(jiàn)基底膜三層微細(xì)結(jié)構(gòu)消失，代以高電子密度均質(zhì)狀，常伴有基膜皺縮，甚至血管腔閉塞。多見(jiàn)于增生硬化性腎小球腎炎、糖尿病時(shí)，腎小球毛細(xì)血管基膜致密層明顯增厚。b.基底膜雙層化：是由于系膜增生插入的結(jié)果，見(jiàn)于系膜增生性腎炎，而不伴有系膜插入的基膜雙層化則多見(jiàn)于腎移植后，與內(nèi)皮細(xì)胞損傷及內(nèi)皮下沉積物刺激有關(guān)，形態(tài)特點(diǎn)上不如上述者明顯。腎小球基本超微病理改變17可編輯課件PPT18可編輯課件PPTc.沉積物性增厚：又稱(chēng)基底膜外加性增厚，多由于免疫球蛋白、纖維蛋白、淀粉樣物質(zhì)或免疫復(fù)合物等沉積所致，電鏡下可確定沉積部位。腎小球基本超微病理改變沉積物位于上皮下，可形成駝峰、釘突，前者易見(jiàn)于鏈球菌感染后腎炎，后者多見(jiàn)于膜性腎?。怀练e物位于內(nèi)皮下，多見(jiàn)于膜增生性腎炎，局灶性、硬化性腎小球腎炎，系統(tǒng)性紅斑狼瘡；沉積物位于基底膜內(nèi)，多見(jiàn)于膜性腎病晚期和致密沉積物性腎小球腎炎。19可編輯課件PPT20可編輯課件PPT21可編輯課件PPTd.基底膜變?。菏侵富啄p薄到正常的50%以下，多為先天性發(fā)育異常，如良性家族性血尿。腎小球基本超微病理改變22可編輯課件PPTe.基底膜疏松變：是由于基底膜溶解破壞，或者沉積物被吸收，基底膜部位表現(xiàn)為水腫、疏松、透亮、斷裂、缺損等病變，在各型腎炎中均有可能見(jiàn)到。腎小球基本超微病理改變23可編輯課件PPT3.足細(xì)胞足突融合：是足突最常見(jiàn)的改變，電鏡下見(jiàn)足突相互粘連，扁平，裂孔減少，臨床上出現(xiàn)大量蛋白尿，足突融合可見(jiàn)于多種腎小球疾病，還可伴隨有核腫脹、足突微絨毛化或者足突腫脹等。足突胞質(zhì)的變化：足突胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)較多脂滴、吞噬的免疫復(fù)合物，較大空泡形成等，或者足突的胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)細(xì)胞器的異常，例如線(xiàn)粒體腫脹，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)增生，高爾基復(fù)合體腫脹等超微病理變化。腎小球基本超微病理改變24可編輯課件PPT（二）系膜的超微病理變化1.系膜增寬不伴有細(xì)胞增生（硬化）：系膜區(qū)面積超過(guò)腎小球總面積的10%即為系膜增寬，多見(jiàn)于肝病性、糖尿病性腎小球硬化癥，淀粉樣變性腎病，IgA腎病等。腎小球基本超微病理改變25可編輯課件PPT2.系膜增寬伴有細(xì)胞增生：每個(gè)系膜區(qū)含3個(gè)以上系膜細(xì)胞，有時(shí)可見(jiàn)系膜細(xì)胞胞質(zhì)突起插入內(nèi)皮細(xì)胞與基底膜之間，同時(shí)伴有內(nèi)皮下沉積物形成，即雙軌現(xiàn)象。多見(jiàn)于膜增生性腎小球腎炎。腎小球基本超微病理改變26可編輯課件PPT27可編輯課件PPT（三）壁層上皮細(xì)胞的超微病理改變壁層上皮細(xì)胞增生可形成新月體，增生的上皮細(xì)胞間常見(jiàn)纖維蛋白。腎小球基本超微病理改變28可編輯課件PPT常見(jiàn)原發(fā)性腎小球疾病的

主要超微病理改變29可編輯課件PPT1.微小病變性腎病

微小病變性腎病，又稱(chēng)足突病或上皮細(xì)胞病，光鏡下腎小球形態(tài)正?；蛘呷狈γ黠@的病變。電鏡下以腎小球臟層上皮細(xì)胞足突融合為特點(diǎn)，臨床上以單純性腎病綜合征為表現(xiàn)。電鏡下見(jiàn)：基底膜局限性不規(guī)則增厚或改變不明顯；足細(xì)胞腫脹，胞質(zhì)空泡形成，表面微絨毛化，足突廣泛性融合，所以又稱(chēng)足突??；系膜細(xì)胞和基質(zhì)可輕度增生。30可編輯課件PPT31可編輯課件PPT32可編輯課件PPT33可編輯課件PPT2.膜性腎病★病變特點(diǎn)：

光鏡下可見(jiàn)腎小球基底膜彌漫增厚；免疫病理檢查可見(jiàn)IgG和C3沿基底膜細(xì)顆粒狀沉積；電鏡下可見(jiàn)電子致密物在基底膜的不同部位沉積。34可編輯課件PPTⅠ期：腎小球基底膜基本正常，僅見(jiàn)上皮下少量電子致密物沉積。足細(xì)胞足突融合。Ⅱ期：腎小球上皮下多數(shù)排列有序的電子致密物沉積，基底膜在電子致密物之間釘突狀增生。足細(xì)胞足突彌漫融合?！锬ば阅I病依據(jù)電鏡下特點(diǎn)分為五期：35可編輯課件PPTⅢ期：腎小球基底膜內(nèi)多數(shù)電子致密物沉積，電子致密物周?chē)罅炕啄ぴ錾的せ|(zhì)增生。足細(xì)胞足突彌漫融合。Ⅳ期：不同部位沉積的電子致密物溶解吸收，使基底膜呈不規(guī)則的蟲(chóng)蝕狀。部分患者基底膜增厚，系膜基質(zhì)增多，呈硬化狀態(tài)。足細(xì)胞足突融合。Ⅴ期：腎小球形態(tài)基本恢復(fù)正常。36可編輯課件PPT又稱(chēng)急性鏈球菌感染后腎炎，多見(jiàn)于5~10歲發(fā)病，很少累及中老年人。2歲以下也較少（少于50%）?；静∽?yōu)閺浡悦?xì)血管袢和系膜區(qū)細(xì)胞增生腫脹（內(nèi)皮及系膜細(xì)胞）和炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)。增生的細(xì)胞可使毛細(xì)血管腔閉鎖。根據(jù)病程的變遷可略分為滲出期、增生期、增生硬化期及硬化期四個(gè)階段。典型病例見(jiàn)上皮下電子致密物形成駝峰狀。3.毛細(xì)血管內(nèi)增生性腎小球腎炎37可編輯課件PPT電鏡下該病具有與光鏡相應(yīng)的彌漫性系膜增殖性病變，包括系膜細(xì)胞增生、基質(zhì)增多，大部分在系膜區(qū)可以出現(xiàn)散在或者均勻的細(xì)顆粒狀電子致密物，部分在系膜區(qū)可見(jiàn)邊界不清的沉積物、透明帶、小空泡或者紋狀膜結(jié)構(gòu)，上皮細(xì)胞足突腫脹，出現(xiàn)階段性或者彌漫性足突消失、融合；基膜一般正常。4.系膜增生性腎小球腎炎38可編輯課件PPT電鏡下大部分腎小球顯示廣泛足突融合及足突微絨毛化，硬化部位見(jiàn)毛細(xì)血管袢萎陷，內(nèi)皮細(xì)胞減少，基底膜節(jié)段性皺縮、增厚，系膜基質(zhì)增多，電子致密物沉積。5.局灶性、節(jié)段性腎小球硬化39可編輯課件PPT40可編輯課件PPTIgA腎病系免疫學(xué)病理診斷名稱(chēng)。腎活檢免疫學(xué)檢查在腎小球系膜區(qū)有以IgA為主的顆粒樣沉積，臨床上以血尿?yàn)橹饕憩F(xiàn)的腎小球腎炎。電鏡下系膜細(xì)胞增生，系膜基質(zhì)增多并伴有高密度電子質(zhì)密物沉積，是IgA腎病的典型超微病理改變。6.IgA腎病41可編輯課件PPT其他腎小球疾病的

特征性超微病理改變42可編輯課件PPT系統(tǒng)性紅斑狼瘡病變累及腎臟稱(chēng)為狼瘡性腎炎（lupusnephritis，LN）.LN是由于自身抗原和自身抗體相結(jié)合形成免疫復(fù)合物沉積在腎臟，導(dǎo)致腎臟的損傷，是系統(tǒng)性紅斑狼瘡的主要死亡原因之一。狼瘡性腎炎電鏡特點(diǎn)：電子致密物沉積：不同類(lèi)型的LN的電子致密物沉積的數(shù)量和沉積部位有很大差別。Ⅰ型和Ⅱ型LN以系膜區(qū)沉積為主；Ⅲ型和Ⅳ型在系膜區(qū)、內(nèi)皮下、上皮下、基底膜內(nèi)部都有大塊高密度電子致密物沉積；Ⅴ型以上皮下和系膜區(qū)沉積為主；Ⅵ型中沉積物的含量和部位不定，有的闕如。43可編輯課件PPT泛指由于糖尿病導(dǎo)致的腎小球病變，明顯的變化是細(xì)胞外基質(zhì)增生，所以又稱(chēng)糖尿病腎小球硬化癥，是糖尿病導(dǎo)致的腎損傷的病變中最具特色的病變，也是導(dǎo)致終末腎的主要原因。糖尿病腎病電鏡下，主要表現(xiàn)為腎小球毛細(xì)血管基底膜（GBM）均質(zhì)性增厚和系膜基質(zhì)增多。正常GMB厚300~400nm，早期糖尿病腎病的GBM可略顯增厚，進(jìn)展期可10倍于正常GBM，增厚的GBM呈均質(zhì)狀，有時(shí)可見(jiàn)細(xì)顆粒狀和細(xì)纖維狀（直徑5nm）物質(zhì)，無(wú)電子致密物。系膜基質(zhì)增多，甚至呈結(jié)節(jié)團(tuán)塊狀。晚期可見(jiàn)膠原纖維出現(xiàn)，系膜細(xì)胞極少。足細(xì)胞足突廣泛融合。腎小囊玻璃滴狀病變、腎小球毛細(xì)血管袢纖維素樣帽狀病變以及小動(dòng)脈壁的玻璃樣物質(zhì)呈高電子密度沉積物狀，伴有類(lèi)脂性小滴。44可編輯課件PPT糖尿病腎病45可編輯課件PPT這是一種名為Alport’s綜合征的遺傳性腎炎。通常以血尿、進(jìn)行性腎功能減退、神經(jīng)性耳聾及眼病為特點(diǎn)。電鏡檢查：透射電鏡檢查是診斷Alport綜合征的主要和唯一的手段。腎小球基底膜顯示彌漫增厚或薄厚不均，致密層增厚，充以多數(shù)無(wú)特殊排列的細(xì)微的纖維樣結(jié)構(gòu)，使之呈撕裂狀和蛛網(wǎng)狀。上述特殊的變性結(jié)構(gòu)也見(jiàn)于腎小管基底膜。腎小球上皮細(xì)胞足突節(jié)段性融合。早期腎小管、腎間質(zhì)和小動(dòng)脈無(wú)特異性病變。后期腎小管萎縮，腎間質(zhì)纖維化。遺傳性進(jìn)行性腎炎（Alport綜合征）46可編輯課件PPT以持續(xù)性鏡下血尿?yàn)橹饕R床表現(xiàn)，多有家族史。電鏡檢查：是診斷本病的唯一確診方法。透射電鏡下可見(jiàn)腎小球毛細(xì)血管基底膜彌漫性菲薄，是正常GBM的1/2~1/3厚度。偶見(jiàn)薄基底膜斷裂，紅細(xì)胞逸出。內(nèi)皮細(xì)胞和上皮細(xì)胞無(wú)明顯病變。無(wú)電子致密物。腎小管和腎間質(zhì)無(wú)特殊病變。薄基底膜腎病47可編輯課件PPTFabry病腎病，又稱(chēng)彌漫性血管角皮瘤病，是一種遺傳性鞘糖脂類(lèi)代謝異常腎病，表現(xiàn)為大量蛋白尿或腎病綜合征，預(yù)后差，光鏡和免疫病理檢查無(wú)明顯發(fā)現(xiàn)，只有電鏡下可見(jiàn)腎小球上皮細(xì)胞腫脹，大量髓樣小體壅積。Fabry病腎病48可編輯課件PPT是一種代謝異常導(dǎo)致的腎病，老年人好發(fā)，表現(xiàn)為大量蛋白尿或腎病綜合征，預(yù)后差。電鏡下可見(jiàn)腎小球系膜區(qū)和基底膜出現(xiàn)淀粉樣纖維（直徑較細(xì)，為8-12nm，僵硬無(wú)分支，雜亂無(wú)序地排列）。淀粉樣變性腎病49可編輯課件PPT一種是一種代謝異常的腎病，老年人好發(fā)，表現(xiàn)為大量蛋白尿或腎病綜合征，預(yù)后差。電鏡是診斷本病的決定性方法。在病變腎小球基底膜和系膜區(qū)可見(jiàn)較淀粉樣纖維（直徑10nm）粗大的纖維樣物質(zhì)（直徑>20nm），呈無(wú)分支的雜亂排列。纖維樣腎小球病50可編輯課件PPT主要靠電鏡才能診斷的幾種腎小球疾病的超微病理特點(diǎn)：1、微小病變性腎?。鹤阃蝗诤?，濾過(guò)膜增厚。2、早期膜性腎?。夯啄ね馍掀は码娮又旅芪锍练e。3、致密物沉積?。夯啄ぶ袑訋铍娮又旅芪锍练e。4、Alport綜合征：基底膜節(jié)段性變薄及分層。5、Fabry氏病：腎小球臟層上皮細(xì)胞內(nèi)大最髓樣小體。6、甲一臏綜合征：基底